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钙离子对钙激活蛋白酶mRNA表达、活性及其对肌肉蛋白降解的影响 被引量:7
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作者 朱燕 徐幸莲 +1 位作者 罗欣 周光宏 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第5期25-28,共4页
本实验分别以牛肉肌束和分化为肌细胞的L6成肌细胞为研究对象,研究钙离子对离体肌束中钙激活蛋白酶活性、蛋白分解以及活体肌肉(肌细胞)中钙激活蛋白酶mRNA水平表达的影响。结果表明500μmol/L以内的钙离子处理肌束,可以提高肌束中μ-... 本实验分别以牛肉肌束和分化为肌细胞的L6成肌细胞为研究对象,研究钙离子对离体肌束中钙激活蛋白酶活性、蛋白分解以及活体肌肉(肌细胞)中钙激活蛋白酶mRNA水平表达的影响。结果表明500μmol/L以内的钙离子处理肌束,可以提高肌束中μ-钙激活蛋白酶的活性,当高于此浓度时,μ-钙激活蛋白酶因发生自动降解而失活。但是钙离子对m-钙激活蛋白酶活性影响不大,只有钙离子浓度达到10mmol/L时才会导致自动降解而失活。钙离子可以加速肌肉中蛋白质的降解,且浓度越高,降解越明显;钙离子处理活体肌细胞,在没有产生明显细胞死亡的情况下,可导致μ-钙激活蛋白酶和m-钙激活蛋白酶mRNA水平表达的增加。由本研究的结果初步推断钙离子不仅可以激活钙激活蛋白酶的酶活性,提高分解肌肉蛋白的能力,在刚刚屠宰的肉(肌肉未死亡)中进行钙离子嫩化也可以导致钙激活蛋白酶表达量的增加。 展开更多
关键词 离子 钙激活蛋白酶 酶活 mRNA 实时定量PCR 蛋白底物酶原分析
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钙激活蛋白酶与蛋白酶体抑制剂诱导细胞凋亡的机制 被引量:4
2
作者 张瑜 常明 +3 位作者 韩威 胡轶虹 王秋艳 胡林森 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期26-28,共3页
目的探讨蛋白酶体抑制剂诱导PC12细胞凋亡的作用通路,为深入研究泛素-蛋白酶体系统(UPS)功能障碍诱发细胞凋亡发病机制提供新线索。方法建立PSI诱导的PC12细胞模型,在48h提取蛋白,应用荧光差异凝胶电泳(DIGE)系统获得差异蛋白点,运用基... 目的探讨蛋白酶体抑制剂诱导PC12细胞凋亡的作用通路,为深入研究泛素-蛋白酶体系统(UPS)功能障碍诱发细胞凋亡发病机制提供新线索。方法建立PSI诱导的PC12细胞模型,在48h提取蛋白,应用荧光差异凝胶电泳(DIGE)系统获得差异蛋白点,运用基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱仪(MALDI-TOFProMS)鉴定出差异蛋白。结果实验组与对照组比较,在48h看到细胞凋亡(细胞核呈固缩状或碎裂状),凋亡率达14.86%。实验组钙激活蛋白酶(calpain)与对照组比较表达量显著增高,有统计学意义(P<0.05)。结论首次发现在蛋白酶体抑制PC12细胞模型中calpain蛋白表达显著增高。结合GRP78和GRP94表达上调的发现提示内质网应激(ERS)在UPS功能障碍引起细胞凋亡过程中扮演重要角色。 展开更多
关键词 钙激活蛋白酶 内质网应激 泛素-蛋白酶体系统
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猪宰后肌肉中钙激活蛋白酶活性变化的研究 被引量:8
3
作者 马俪珍 王永辉 范三红 《农业工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第2期239-243,共5页
该文研究杂种野猪和本地白猪屠宰后,肌肉中钙激活蛋白酶系的活性变化,同时,对肌肉的全蛋白提取液作SDS-PAGE分析。结果表明:杂种野猪肉的钙激活蛋白酶活性较高,但表现酶活性的自溶率变化在早期较慢;电泳图谱可看到,杂种野猪蛋白降解较慢... 该文研究杂种野猪和本地白猪屠宰后,肌肉中钙激活蛋白酶系的活性变化,同时,对肌肉的全蛋白提取液作SDS-PAGE分析。结果表明:杂种野猪肉的钙激活蛋白酶活性较高,但表现酶活性的自溶率变化在早期较慢;电泳图谱可看到,杂种野猪蛋白降解较慢,在宰后冷藏40h的电泳图可看到小分子物质降解较少。 展开更多
关键词 杂种野猪 钙激活蛋白酶 聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)
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钙激活蛋白酶-10基因相关的SNP等位基因频率和单体型频率在汉族人中的分布及其与胰岛素敏感性的关系 被引量:3
4
作者 黄知敏 修玲玲 翁建平 《中国糖尿病杂志》 CAS CSCD 2004年第3期209-210,共2页
关键词 钙激活蛋白酶-10基因 SNP等位基因频率 单体型频率 汉族 胰岛素敏感性 染色体 基因多态性
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钙激活蛋白酶Ⅰ在风湿性心脏病心房颤动中的作用 被引量:1
5
作者 贾宝成 李莉 +4 位作者 张宝仁 徐志云 郭素华 李白翎 赵峰 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期134-135,共2页
目的:阐明风湿性心脏病中钙激活蛋白酶Ⅰ(Calpain Ⅰ)与心房颤动(AF)关系及Calpain Ⅰ在风湿性心脏病不同类型心房颤动时的变化特点。方法:选择心脏手术患者55 例,共分为4 组,A组(n=12):非风湿性心脏病窦性心律组;B组(n=13):风湿性心脏... 目的:阐明风湿性心脏病中钙激活蛋白酶Ⅰ(Calpain Ⅰ)与心房颤动(AF)关系及Calpain Ⅰ在风湿性心脏病不同类型心房颤动时的变化特点。方法:选择心脏手术患者55 例,共分为4 组,A组(n=12):非风湿性心脏病窦性心律组;B组(n=13):风湿性心脏病窦性心律组;C组(n=14):风湿性心脏病阵发性AF组;D组(n=16):风湿性心脏病持续性AF组。在患者右房侧壁组织蛋白提取液不加钙离子或加钙离子(10-3mol/L)的条件下,采用比色法,对非选择性蛋白酶抑制剂E 64、Calpain Ⅰ抑制剂、Calpain Ⅱ抑制剂、溶酶体抑制剂Lactocystin作用于心房肌组织后的蛋白裂解活性进行检测比较。结果:A组、B组在相同试验条件下蛋白裂解活性未见明显差异;不给予蛋白酶抑制剂时, C组、D组的蛋白裂解活性明显高于B组(P<0.01);给予蛋白酶抑制剂,Calpain Ⅰ抑制剂可抑制4组患者心肌组织蛋白裂解活性,而CalpainⅡ抑制剂则不能充分抑制4组患者心肌组织蛋白裂解活性。结论:风心病心房颤动患者心肌组织蛋白裂解活性是升高的,其活性升高与Calpain Ⅰ的作用有密切关系。 展开更多
关键词 风湿性心脏病 心房颤动 钙激活蛋白酶 蛋白裂解活性
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丙泊酚对缺血-再灌注心肌中钙激活蛋白酶表达及细胞凋亡的影响 被引量:3
6
作者 董振明 任建军 《临床麻醉学杂志》 CAS CSCD 2007年第6期485-486,共2页
目的 观察丙泊酚对缺血-再灌注损伤心肌细胞中m型钙激活蛋白酶(m-calpain)的表达和细胞凋亡的影响,探讨丙泊酚减少缺血-再灌注损伤心肌细胞凋亡的机制.方法 4月龄健康雄性新西兰大耳白兔24只,体重2.1~2.3 kg,随机分为三组:假手... 目的 观察丙泊酚对缺血-再灌注损伤心肌细胞中m型钙激活蛋白酶(m-calpain)的表达和细胞凋亡的影响,探讨丙泊酚减少缺血-再灌注损伤心肌细胞凋亡的机制.方法 4月龄健康雄性新西兰大耳白兔24只,体重2.1~2.3 kg,随机分为三组:假手术组(Sham组)、缺血-再灌注组(I-R组)和丙泊酚组(P组),每组8只.实验结束取缺血区心肌标本,免疫组织化学方法(SP法)检测m-calpain的表达,Motic 6.0图像分析系统进行处理,采集平均光密度值(AO值)进行统计分析;Annexin Ⅴ-PI双染色法、TUNEL法测定细胞凋亡.结果 Sham组心肌组织中m-calpain低表达,Annexin Ⅴ-PI双染色法、TUNEL染色检测有少量凋亡细胞;与Sham组比较,P组、I-R组m-calpain表达增加(P<0.05),Annexin Ⅴ-PI双染色检测早期凋亡细胞和TUNEL染色阳性细胞增加(P<0.05);与I-R组比较,P组m-calpain表达下降(P<0.05),Annexin Ⅴ-PI双染色检测早期凋亡心肌细胞减少(P<0.05)、TUNEL阳性细胞减少(P<0.05).结论 丙泊酚可抑制心肌缺血-再灌注损伤时m-calpain的激活,减少缺血-再灌注心肌细胞凋亡. 展开更多
关键词 丙泊酚 心肌缺血-再灌注损伤 细胞凋亡 m型钙激活蛋白酶
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异丙酚对大鼠心肌缺血/再灌注损伤m-钙激活蛋白酶及线粒体膜通透性的影响 被引量:1
7
作者 朱俊超 马虹 王俊科 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期307-308,311,共3页
目的观察异丙酚对大鼠在体缺血/再灌注损伤心肌m-钙激活蛋白酶(m-calpain)激活和线粒体膜通透性转运的影响,探讨异丙酚对心肌缺血/再灌注损伤的保护机制。方法选用健康SD雄性大鼠24只,随机分为3组(n=8),假手术组(Sham组)、缺血/再灌注组... 目的观察异丙酚对大鼠在体缺血/再灌注损伤心肌m-钙激活蛋白酶(m-calpain)激活和线粒体膜通透性转运的影响,探讨异丙酚对心肌缺血/再灌注损伤的保护机制。方法选用健康SD雄性大鼠24只,随机分为3组(n=8),假手术组(Sham组)、缺血/再灌注组(I/R组)、异丙酚组(P组)。分别在结扎左冠状动脉(LV)前即刻(T1)、缺血30min即刻(T2)及LV松开再灌注120min即刻(T3)3个时间点抽取动脉血2ml检测血浆超氧化物岐化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)和肌钙蛋白I(cTnI)浓度,免疫组织化学SP法检测各组大鼠m-calpain水平。结果与T1时间点相比,T2、T3时间点的血浆SOD活性降低(P<0.05),MDA及cTnI浓度升高(P<0.05);与T2时间点相比,T3时间点的血浆SOD活性降低(P<0.05),MDA及cTnI浓度升高(P<0.05)。在T2时间点,与I/R组相比,P组的血浆SOD活性升高(P<0.05),MDA及cTnI浓度降低(P<0.05);在T3时间点,与I/R组相比,P组的血浆SOD活性升高(P<0.05),MDA及cTnI浓度降低(P<0.05)。与对照组相比,I/R组和P组m-calpain水平均升高,与I/R组相比,P组m-calpain水平降低(P<0.05)。结论异丙酚对缺血/再灌注损伤心肌具有保护作用,通过抑制心肌缺血/再灌注损伤过程中m-calpain的激活而减轻缺血/再灌注损伤时线粒体膜通透性转运是其保护机制之一。 展开更多
关键词 二异丙酚 心肌再灌注损伤 线粒体 m-钙激活蛋白酶
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压力超负荷性心肌肥厚大鼠心肌细胞内钙激活蛋白酶活性分布的研究 被引量:1
8
作者 刘健 何作云 王培勇 《中国循环杂志》 CSCD 北大核心 2001年第6期469-471,共3页
目的:研究大鼠心肌肥厚时,钙激活蛋白酶(Calpain)在心肌细胞胞浆和细胞核的活性分布,并探讨细胞核钙摄取的改变,以进一步阐明心肌肥厚的发生机制。 方法:将100只健康雄性Wistar大鼠(150~200?g)随机分... 目的:研究大鼠心肌肥厚时,钙激活蛋白酶(Calpain)在心肌细胞胞浆和细胞核的活性分布,并探讨细胞核钙摄取的改变,以进一步阐明心肌肥厚的发生机制。 方法:将100只健康雄性Wistar大鼠(150~200?g)随机分为对照组(n=50)和腹主动脉缩窄组(n=50),制备腹主动脉缩窄大鼠心肌肥厚模型、差速离心和密度梯度离心提纯心肌细胞核,荧光法测酶活性,以45Ca2+测定细胞核摄取能力。 结果:与对照组相比,腹主动脉缩窄组大鼠左心室重量指数增加,伴有明显的血流动力学异常,有非常显著性差异(P<0.01=;其心肌细胞核Calpain活性亦增加4078%,有显著性意义(P<0.05=;细胞浆Calpain活性下降2171%,有非常显著性意义(P<0.05=。对照组心肌Calpain在细胞浆的活性显著高于在细胞核的活性,有非常显著性意义(P<0.01),而腹主动脉缩窄组心肌Calpain在细胞核的活性与在细胞浆的活性无显著差异;细胞核45Ca2+摄入量也显著增加(较对照组高28%~97%,P<0.01)。 结论:肥厚心肌Calpain由细胞浆向细胞核转位、细胞核内Calpain活性增加,细胞核钙摄取能力增强。 展开更多
关键词 心肌肥厚 细胞核 钙激活蛋白酶 动物实验 心肌疾病
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钙激活蛋白酶在肉成熟中的作用机理 被引量:8
9
作者 张英君 陈有亮 《肉类工业》 2000年第8期31-36,共6页
与肉成熟有关的内源蛋白酶之一的钙激活蛋白酶类 (Calpains) ,对该酶类的组成成分、存在位置、含量测定、提纯方法、活性测定、不同部位分布特点、宰后含量变化及自我水解的特点进行了详细说明 ,以了解对探索肉的成熟机理具有重要意义... 与肉成熟有关的内源蛋白酶之一的钙激活蛋白酶类 (Calpains) ,对该酶类的组成成分、存在位置、含量测定、提纯方法、活性测定、不同部位分布特点、宰后含量变化及自我水解的特点进行了详细说明 ,以了解对探索肉的成熟机理具有重要意义的钙激活蛋白酶类的作用机理。本文引用Titin、Nebulin、Dystrophin、Desmin、Troponin -T等等蛋白的宰后变化分析以说明钙激活蛋白酶促进肉成熟的作用机理。 展开更多
关键词 钙激活蛋白酶 肉类 成熟机理 嫩化机理 内源蛋白酶
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钙激活蛋白酶系统对细胞凋亡过程的影响概述
10
作者 高士友 潘大彬 《牡丹江医学院学报》 2017年第4期95-98,共4页
钙激活蛋白酶(Calpains)属于一类Ca2+依赖半胱氨酸蛋白水解酶超家族成员,Calpains系统与细胞凋亡关系密切,在细胞凋亡中发挥重要作用。目前研究表明Calpains系统通过调节凋亡信号传导途径参与细胞凋亡,在蛋白、分子、基因水平上调控细... 钙激活蛋白酶(Calpains)属于一类Ca2+依赖半胱氨酸蛋白水解酶超家族成员,Calpains系统与细胞凋亡关系密切,在细胞凋亡中发挥重要作用。目前研究表明Calpains系统通过调节凋亡信号传导途径参与细胞凋亡,在蛋白、分子、基因水平上调控细胞凋亡复杂过程。研究开发Calpains抑制剂对于改善细胞凋亡具有广阔的前景和意义,也为临床上治疗提供理论依据和新的方向。 展开更多
关键词 钙激活蛋白酶 钙激活蛋白酶抑制蛋白 CALPAINS CALPASTATIN 细胞凋亡
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心房纤颤患者心房肌钙激活蛋白酶系统表达变化及意义 被引量:2
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作者 马骁 宋平 +5 位作者 张学义 关宏 赵宏兵 王慧 黄琳 杜平 《实用医药杂志》 2008年第6期641-643,共3页
目的探讨慢性心房纤颤患者心房肌钙激活蛋白酶(calpain)系统表达水平改变及其与心房重构的相关性。方法选取进行人工瓣膜置换术的风湿性心脏病房颤患者28例为研究对象,风湿性心脏病窦性心律患者14例为对照组。两组患者术前均进行经胸超... 目的探讨慢性心房纤颤患者心房肌钙激活蛋白酶(calpain)系统表达水平改变及其与心房重构的相关性。方法选取进行人工瓣膜置换术的风湿性心脏病房颤患者28例为研究对象,风湿性心脏病窦性心律患者14例为对照组。两组患者术前均进行经胸超声心动图检查,于手术时取左心耳心肌标本,采用荧光实时定量PCR和Westernblot技术检测calpain及其抑制剂calpastatin的mRNA和蛋白的表达量。结果房颤组左心房内径和右心房内径均显著大于对照组(P<0.05~0.001),房颤组和对照组心房肌calpainⅠ、calpainⅡmRNA表达无显著性差异(P>0.05),房颤组calpastatin的mRNA表达明显高于对照组(P<0.05);房颤组calpainⅠ、calpainⅡ蛋白表达明显高于对照组(P<0.05),calpastatin蛋白表达明显低于对照组(P<0.05)。calpainⅠ、calpainⅡ蛋白表达水平与左房内径呈显著正相关(r=0.67,r=0.55,P<0.05),calpastatin蛋白表达水平与左房内径呈显著负相关(r=-0.73,P<0.05)。结论房颤所引起calpain系统的蛋白表达改变,使calpain/calpastatin系统相互间作用失衡,造成多种蛋白被降解可能是心房重构的重要机制。 展开更多
关键词 心房颤动 钙激活蛋白酶 结构重构
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西拉普利和缬沙坦与心房颤动犬心房肌钙激活蛋白酶表达及心房结构重构关系的实验研究 被引量:1
12
作者 李悦 李俭强 +9 位作者 李为民 公永太 盛力 邵群 张莉 单鸿波 刘洁 于江波 刘巍 韩薇 《中华心律失常学杂志》 2008年第4期292-297,共6页
目的观察西拉普利和缬沙坦对心房颤动(房颤)犬心房肌钙激活蛋白酶(calpains)mR-NA和蛋白表达及心房结构重构的影响。方法27只犬随机分为假手术组、对照组、西拉普利组和缬沙坦组。对照组、西拉普利组和缬沙坦组犬以400次/min心房... 目的观察西拉普利和缬沙坦对心房颤动(房颤)犬心房肌钙激活蛋白酶(calpains)mR-NA和蛋白表达及心房结构重构的影响。方法27只犬随机分为假手术组、对照组、西拉普利组和缬沙坦组。对照组、西拉普利组和缬沙坦组犬以400次/min心房快速起搏6周,建立房颤犬模型。假手术组犬埋植起搏器后不起搏。测量左心房容积及收缩功能变化,记录房颤诱发及维持情况,检测心房肌calpains mRNA和蛋白表达,观察心房肌病理组织学和超微结构改变。结果西拉普利组和缬沙坦组犬心房肌calpain I mRNA和蛋白表达较假手术组增多(P〈0.05),但较对照组显著减少(P〈0.01)。各组犬心房肌calpain I蛋白表达与肌溶解高度相关(r=0.89,P〈0.01)。各组犬心房肌calpain Ⅱ mRNA和蛋白表达差异无统计学意义。与对照组相比,西拉普利组和缬沙坦组犬心房肌病理组织学和超微结构改变显著减轻,左心房及左心耳容积明显减小,左心房收缩功能显著增强,房颤诱发率和持续时间明显降低。结论房颤犬心房肌calpain I mRNA和蛋白表达显著上调。西拉普利和缬沙坦能明显抑制房颤犬心房肌calpain I表达,防治心房结构重构,减少房颤发生。 展开更多
关键词 心房颤动 钙激活蛋白酶 血管紧张素 结构重构
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钙激活中性蛋白酶抑制剂对E2诱导的乳腺癌细胞增殖效应的影响及其意义 被引量:3
13
作者 王旭东 丁姗姗 +2 位作者 陈腾祥 刘晓红 杨勤 《贵州医药》 CAS 2009年第4期302-304,共3页
目的观察钙激活中性蛋白酶(calcium-activated neutral protease,CANP)抑制剂对雌二醇(estradiol,E2)诱导的乳腺癌细胞增殖效应的影响,为探索乳腺癌治疗新药靶提供理论依据。方法以人乳腺肿瘤细胞系MCF-7为模型细胞,RPM1-1640培养,E2处... 目的观察钙激活中性蛋白酶(calcium-activated neutral protease,CANP)抑制剂对雌二醇(estradiol,E2)诱导的乳腺癌细胞增殖效应的影响,为探索乳腺癌治疗新药靶提供理论依据。方法以人乳腺肿瘤细胞系MCF-7为模型细胞,RPM1-1640培养,E2处理;MTT法分析细胞增殖,观察E2诱导乳腺癌细胞增殖;CANP特异性抑制剂calpeptin(CAL)或E2受体选择性调节剂他莫西芬(Tamoxifen,TAM)预处理模型细胞,观察CAL或TAM对E2诱导的肿瘤细胞增殖效应的影响及其差异。结果(1)E2诱导MCF-7细胞增殖呈时间和剂量依赖性。E2发挥最大作用的浓度为10-8mol/L,最佳作用时间为24h,增殖率达18.6%(P<0.01);(2)TAM能显著抑制E2诱导的细胞增殖,浓度为10-6mol/L时抑制效能最佳,抑制率达28.63%(P<0.01);(3)CAL也可明显抑制E2的细胞增殖效应,在CAL为10-5mol/L时抑制率最高,达26.34%(P<0.01)。比较CAL与TAM的细胞增抑制殖效能未见显著性差异。结论CANP抑制剂能有效抑制E2诱导的乳腺癌细胞增殖活动,因而以CANP作为乳腺癌治疗的候选药靶可能具有潜在的应用前景。 展开更多
关键词 雌激素 乳腺癌细胞 激活中性蛋白酶 细胞增殖
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钙激活中性蛋白酶介导雌激素增强MCF-7乳腺癌细胞的存活力 被引量:2
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作者 刘晓红 王筑婷 +3 位作者 李阳 杨莉 雷霆雯 王旭东 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2013年第7期799-803,共5页
目的探讨雌激素(E2)对MCF-7乳腺癌细胞钙激活中性蛋白酶1(CANP-1)基因表达和CANP蛋白酶活性的影响、以及CANP活性在E2增强细胞存活力中的作用。方法以MCF-7乳腺癌细胞为研究模型、采用RT-PCR法检测mRNA表达、蛋白印迹法观察CANP特异性底... 目的探讨雌激素(E2)对MCF-7乳腺癌细胞钙激活中性蛋白酶1(CANP-1)基因表达和CANP蛋白酶活性的影响、以及CANP活性在E2增强细胞存活力中的作用。方法以MCF-7乳腺癌细胞为研究模型、采用RT-PCR法检测mRNA表达、蛋白印迹法观察CANP特异性底物FAK蛋白剪切、血清饥饿诱导细胞死亡、锥虫蓝染色及细胞计数法检测细胞存活力。结果 E2(10 nmol/L)可明显刺激乳腺癌细胞CANP-1基因表达上调,CANP抑制剂则可显著抑制E2诱导CANP-1基因上调;在无血清培养条件下,E2激活CANP活性及增加细胞存活力(14.3±4.9%,P<0.05),而CANP抑制剂可显著抑制E2诱导CANP激活以及细胞存活力增强(19.2±3.9%,P<0.05)。结论 E2刺激MCF-7乳腺癌细胞CANP-1基因表达上调并增强CANP活性,后者可能参与介导血清饥饿时E2增强MCF-7细胞的存活力。 展开更多
关键词 雌激素 激活中性蛋白酶 基因表达 细胞存活 乳腺癌细胞
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红景天苷对大鼠体外培养海马神经元物理缺氧损伤钙离子含量、钙激活中性蛋白酶及钙通道蛋白表达的影响 被引量:5
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作者 寇天雷 张永亮 《新乡医学院学报》 CAS 2012年第4期260-264,共5页
目的研究红景天苷对大鼠海马神经元物理缺氧损伤的保护作用及机制。方法体外原代培养新生SD大鼠海马神经元并鉴定。以尼莫地平为阳性对照药,通过苏木素-伊红染色、激光共聚焦显微镜技术观察各实验组神经元形态,通过荧光分光光度法检测... 目的研究红景天苷对大鼠海马神经元物理缺氧损伤的保护作用及机制。方法体外原代培养新生SD大鼠海马神经元并鉴定。以尼莫地平为阳性对照药,通过苏木素-伊红染色、激光共聚焦显微镜技术观察各实验组神经元形态,通过荧光分光光度法检测各实验组神经元细胞内游离钙离子浓度([Ca2+]i),实时定量聚合酶链反应检测各实验组钙通道蛋白NMDAR1、Cav1.3 mRNA的表达差异,免疫细胞化学染色法检测各实验组钙激活中性蛋白酶Calpain 1蛋白质的表达差异,分析红景天苷对大鼠海马神经元物理缺氧损伤的保护作用。结果红景天苷各剂量组均可提高缺氧神经元存活率。与模型组比较,红景天苷各剂量组神经元[Ca2+]i显著降低(P<0.01,P<0.01,P<0.05);NMDAR1和Cav1.3 mRNA的表达率均显著降低(P<0.05或P<0.01);Calpain 1阳性细胞百分率均显著降低(P<0.01或P<0.05)。结论红景天苷通过下调物理缺氧神经元L-型钙通道和NMDAR亚基的表达抑制钙超载,对神经元起保护作用。 展开更多
关键词 红景天苷 神经元 缺氧损伤 超载 激活中性蛋白酶
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钙激活中性蛋白酶-2对整合素β4水解的影响 被引量:3
16
作者 胡晓霞 霍建云 +5 位作者 张金娟 潘娅 王晋星一 陈妮 张祥令 陈腾祥 《贵阳医学院学报》 CAS 2015年第1期1-5,共5页
目的:观察乳腺癌细胞系MCF7细胞中,钙激活中性蛋白酶2(calpain-2)对整合素(integrin)β4水解的影响。方法:利用"短发夹"RNA(shRNA)和微小RNA(mirRNA)技术结合的calpain-2基因沉默(gene silencing)慢病毒质粒(GIPZ lentiviral ... 目的:观察乳腺癌细胞系MCF7细胞中,钙激活中性蛋白酶2(calpain-2)对整合素(integrin)β4水解的影响。方法:利用"短发夹"RNA(shRNA)和微小RNA(mirRNA)技术结合的calpain-2基因沉默(gene silencing)慢病毒质粒(GIPZ lentiviral shRNAmir)转染乳腺癌细胞株MCF7,嘌呤霉素筛选稳定沉默calpain-2基因的细胞株,细胞株传4代,用荧光显微镜观察转染效率,用蛋白质印迹(Western blot)实验检测calpain-2基因沉默效率及integrinβ4水解的情况。结果:嘌呤霉素筛选、细胞传4代,荧光显微镜下观察显示转染和筛选后,EGFP表达阳性的MCF7细胞的比例分别达到(95.6±2.6)%(空shRNAmir载体)、(97.1±1.7)%(Calpain-2 shRNAmir1)和(97.7±0.2)%(Calpain-2 shRNAmir 2),差异无统计学意义(P>0.05);Western blot结果显示,基因沉默的MCF7细胞中calpain-2的表达被明显抑制,相对于空shRNAmir载体转染的MCF7细胞,差异有统计学意义(P<0.01),calpain-2的表达下调到21.5%(Calpain-2 shRNAmir 1)和18.8%(Calpain-2 shRNAmir 2),空shRNAmir载体转染的MCF7细胞中calpain-2的表达与未转染的MCF7细胞比较,差异无统计学意义(P>0.05);比较calpain-2基因沉默和空shRNAmir载体转染的MCF7细胞,发现integrinβ4均被水解,水解片段的分子量主要有200 k D、130和95 k D;calpain-2基因沉默后,calpain-2基因沉默MCF7细胞中200 k D的水解片段比空shRNAmir载体转染的MCF7细胞减少(P<0.01)。结论:在乳腺癌细胞MCF7中,calpain-2可能参与integrinβ4的200 k D片段的形成,从而参与调整integrinβ4的构象变化。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 激活中性蛋白酶2 整合素β4 蛋白水解 基因沉默
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钙激活中性蛋白酶-2对肝癌细胞阿霉素耐药性的影响 被引量:1
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作者 徐国强 唐佳艳 +5 位作者 向敏 王艳 洪阳 胡晓霞 王旭东 陈腾祥 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期1108-1111,共4页
目的观察阿霉素作用下,钙激活中性蛋白酶-2(cal-pain-2)在肝癌细胞(HepG2)中的表达及其对细胞存活率的影响,评价其作为抗癌药靶的可能性。方法以倍比稀释的ADM作用于HepG2细胞,用四甲基偶氮唑盐比色(MTT)实验检测阿霉素(Adriamycin,ADM)... 目的观察阿霉素作用下,钙激活中性蛋白酶-2(cal-pain-2)在肝癌细胞(HepG2)中的表达及其对细胞存活率的影响,评价其作为抗癌药靶的可能性。方法以倍比稀释的ADM作用于HepG2细胞,用四甲基偶氮唑盐比色(MTT)实验检测阿霉素(Adriamycin,ADM)72 h的半数致死量(LD50);用蛋白质印迹(Western blot)检测的ADM(LD50)作用下,calpain-2和cyclin E的表达和酶解情况;给予calpain-2抑制剂(calpastatin peptide)干预后,用MTT法观察ADM对HepG2细胞存活率的影响。结果 MTT实验结果显示,ADM对HepG2的LD50为2.5μmol.L-1;Western blot发现,随ADM作用时间的延长,calpain-2的表达水平增高(P<0.01),而且被剪切的程度增加(P<0.05);MTT检测ADM对HepG2的作用发现,calpastatin peptide干预的细胞存活率明显低于对照组(P<0.01),Cyclin E被剪切的程度减轻(P<0.01)。结论肝癌细胞HepG2在ADM作用下发生凋亡的同时,也上调calpain-2的表达水平和活性,并通过其信号通路降低对ADM的敏感性,而针对calpain-2的活性抑制可以提高HepG2对ADM敏感性,提示calpain-2可以作为降低肿瘤化疗耐药性的潜在靶点。 展开更多
关键词 肝癌细胞 激活中性蛋白酶-2 阿霉素 周期蛋白E 化疗 耐药性
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慢性心房颤动患者心房肌钙转运调控蛋白和钙激活中性蛋白酶基因转录表达的变化 被引量:2
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作者 许国军 汤宝鹏 +3 位作者 库热西.玉努斯 伊力哈木江.沙比提 木拉提.阿布提热合曼 程祖亨 《中国心脏起搏与心电生理杂志》 2007年第6期500-503,共4页
目的探讨心房颤动(简称房颤)患者心房肌电和结构重构以及心功能下降的分子生物学机制。方法采集风湿性心脏瓣膜病(简称风心病)窦性心律患者12例(窦律组)和房颤患者16例(房颤组)的右心耳组织,应用半定量逆转录-聚合酶链反应方法,测定心... 目的探讨心房颤动(简称房颤)患者心房肌电和结构重构以及心功能下降的分子生物学机制。方法采集风湿性心脏瓣膜病(简称风心病)窦性心律患者12例(窦律组)和房颤患者16例(房颤组)的右心耳组织,应用半定量逆转录-聚合酶链反应方法,测定心房肌钙转运调控蛋白和钙激活中性蛋白酶(calpain1)的mRNA表达水平。结果与窦律组比较,房颤组L-型电压依赖钙通道a1c亚基(LVDCCa1c)、肌浆网Ca2+-ATP酶、兰尼碱受体的mRNA表达水平显著下调(P均<0.01),三磷酸肌醇受体的mRNA表达水平上调(P<0.05);房颤组心房肌cal-pain1的mRNA表达水平上调(P<0.05),且与LVDCCa1c的mRNA表达呈负相关(r=-0.583,P=0.019)。结论房颤患者心房肌钙转运调控蛋白和calpain1转录水平调控失衡可能是心房肌电和结构重构以及心功能下降的分2子生物学机制之一。 展开更多
关键词 心血管病学 心房颤动 转运调控蛋白 激活中性蛋白酶 基因表达
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甘肃高山细毛羊肉宰后钙激活蛋白酶活性变化的研究
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作者 杨晓丽 余群力 翟丹云 《食品科技》 CAS 北大核心 2011年第4期94-96,共3页
为研究甘肃高山细毛羊宰后钙激活蛋白酶活性的变化,以肃南高山细毛羊为研究对象、当地藏羊为对照,对其钙激活蛋白酶活性进行提取、测定。通过分析和研究,结果表明:在宰后最初钙激活酶活性值均很低,随着宰后时间的延长,细毛羊和藏羊的钙... 为研究甘肃高山细毛羊宰后钙激活蛋白酶活性的变化,以肃南高山细毛羊为研究对象、当地藏羊为对照,对其钙激活蛋白酶活性进行提取、测定。通过分析和研究,结果表明:在宰后最初钙激活酶活性值均很低,随着宰后时间的延长,细毛羊和藏羊的钙激活蛋白酶活性值都随之增大。细毛羊的最大活性值最终达到0.601,藏羊最终达到0.708,说明最终藏羊肉的嫩度要好于甘肃高山细毛羊肉。 展开更多
关键词 甘肃高山细毛羊 钙激活蛋白酶活性 嫩度
原文传递
钙激活中性蛋白酶家族潜在治疗作用的新发现 被引量:4
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作者 乔虹 《国外医学(药学分册)》 2007年第2期135-137,共3页
钙激活中性蛋白酶(卡配因,calpain)家族是一组与钙浓度有关的半胱氨酸蛋白酶类,它参与细胞与钙浓度有关的一些功能,如信号转导、细胞增殖和分化及细胞凋亡。在一些人类疾病中发现了钙激活中性蛋白酶活性的改变。特异性钙激活中性蛋白酶... 钙激活中性蛋白酶(卡配因,calpain)家族是一组与钙浓度有关的半胱氨酸蛋白酶类,它参与细胞与钙浓度有关的一些功能,如信号转导、细胞增殖和分化及细胞凋亡。在一些人类疾病中发现了钙激活中性蛋白酶活性的改变。特异性钙激活中性蛋白酶抑制剂能够治疗神经肌肉及神经退行性疾病。而钙激活中性蛋白酶活化剂可以治疗一些钙激活中性蛋白酶活性降低导致的疾病,如2型糖尿病及代谢综合征。 展开更多
关键词 激活中性蛋白酶 神经变性疾病 2型糖尿病 肿瘤
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