心肌细胞钙离子荧光强度数据的数值处理方法比较

为比较多种用于减少非周期生理信号序列中的随机误差的线性叠加法 ,分析心房肌细胞的钙离子荧光强度满足的分布函数 ,提取特征参数 (斜率和时间常数 ) ,对 6个豚鼠心房肌细胞 ,建立 3种不同浓度的CGRP组和空白对照组 ,用共聚焦显微镜记录下 2 4组心房肌细胞的钙离子荧光强度数据 ;对这些数据进行校准、叠加、非线性拟合和提取特征参数。叠加方法包括等权平均叠加、主分量叠加、奇异值分解和最大似然叠加。选择Gamma分布函数作为拟合函数 ,使用最小二乘法进行拟合 ,并从Gamma函数计算特征参数。结果 :①给出 4种叠加方法的加权系数 ,4种线性叠加法的加权系数比较接近 ,特别是主分量法、奇异值分解法和最大似然法的加权系数几乎一样。对于主分量法 ,6个细胞的加权系数分别是 0 .1 6 2、0 .1 71、0 .1 6 7、0 .1 6 2、0 .1 70和 0 .1 6 8。②叠加后的荧光强度特征更加明显。③给出特征参数 (斜率和时间常数 )。用主分量叠加法得到的 3种不同浓度水平的CGRP组和空白对照组的斜率分别是1 2 77、1 32 6、2 0 39和 81 8,时间常数分别是 0 .33、0 .2 9、0 .1 9和 0 .2 7。结果提示 :对于只具有一个主要成分的实验数据 ,推荐使用主分量叠加法。这种方法比较简单 ,用它可以得到很好的叠加结果 。

水相大豆分离蛋白对油包水乳液稳定性的影响

以富含多不饱和脂肪酸的核桃油为油相,于水相添加大豆分离蛋白（SPI）,采用超高压微射流均质机制备油包水（W/O）乳液,乳液于45 ℃避光保存,每隔1 d测定乳液的平均粒径及粒径分布等物理特性,同时检测乳液初级及其次级氧化产物—脂质氢过氧化物与己醛,探究SPI对W/O乳液稳定性影响。结果表明,SPI应用于W/O乳液,乳液水滴粒径降低,乳液物理稳定性增大,SPI同时具有抗氧化活性。0.1%～0.4% SPI,蛋白质浓度的增大对乳液物理稳定性无显著性影响；SPI浓度增大（0.1%～0.2%）延长了脂质氢过氧化物与己醛形成延迟期,而浓度进一步增大（0.4%）乳液脂质氧化稳定性影响不显著。乳液水相pH对SPI抗氧化活性有显著影响,水相pH7.0,SPI抗氧化活性高于水相pH3.0。研究同时表明,水相钙离子强度0～200 mM CaCl2,钙离子引入提高了乳液物理稳定性；乳液水相钙离子强度较低时（≤10 mMCaCl2）,离子强度的增大降低了SPI抗氧化活性,较高离子强度（100～200 mM CaCl2）加速了乳液脂质氧化。

参麦注射液改善急性心肌梗死大鼠心功能与左室重构的机制初探

目的:观察了参脉注射液对心肌梗死后心功能和心室重构的影响,及其对心肌细胞凋亡的影响. 方法:(1)结扎大鼠左冠状动脉前降支建立大鼠心肌梗死心室重构模型,随机分为心肌梗死后1、2周模型组,②参麦注射液治疗1、2周治疗组,另设两假手术组.多导生理记录仪测量:左室收缩压(LVSP)、左室舒张末压(LVEDP)、左室内压最大上升速率(+dp/dtmax)和下降速率(-dp/dtmax)以反映左室收缩与舒张功能.测定心脏心脏总重量、左室截面直径,并计算心室重量指数;HE染色、Masson染色、透射电镜观察心结构改变.(2)乳鼠心肌细胞原代培养,AngⅡ诱导凋亡模型.利用荧光染色观察凋亡形态变化;流式细胞仪检测细胞凋亡、心肌细胞线粒体膜电位;激光共聚焦显微镜检测钙离子荧光强度,免疫组化染色检测Bcl-2/Bax、Caspase-3蛋白的表达.

三七总皂苷对AngⅡ诱导心肌细胞凋亡的影响

目的:研究三七总皂苷对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导培养心肌细胞凋亡的影响。方法:原代培养乳鼠心肌细胞,通过MTT法观察三七总皂苷对培养心肌细胞活力的影响;AO荧光染色观察细胞核形态改变,流式细胞术检测细胞凋亡,Fluo3荧光探针标记测定钙离子荧光强度。结果:AngⅡ(10-7mol·L-1)孵育48h后心肌细胞凋亡明显多于对照组;三七总皂苷(25,50,100mg·L-1)组心肌细胞活力显著高于AngⅡ组;三七总皂苷(50mg·L-1)组AngⅡ诱导的心肌细胞凋亡率明显低于AngⅡ组;三七总皂苷(50mg·L-1)组心肌细胞内钙超载明显轻于AngⅡ组。结论:三七总皂苷对AngⅡ诱导的细胞凋亡具有明显的抑制作用,其机制可能与抑制心肌细胞内钙超载有关。

鱼藤酮诱发PC12细胞内质网应激的钙机制和超微结构的变化

目的探讨鱼藤酮诱发内质网(endoplasmicreticulum,ER)应激的钙离子机制及其超微结构的变化。方法应用流式细胞仪(flowcytometry,FCM)检测鱼藤酮对体外培养大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤(PC12)细胞株活性氧的影响,应用激光扫描共聚焦显微镜观察细胞内钙离子变化及透射电镜观察超微结构。结果0·1、1·0、2·0和3·0μmol/L浓度鱼藤酮诱导细胞内活性氧的生成,荧光指数(FI)值分别为1·55±0·17、2·16±0·10、1·77±0·20和1·41±0·12,相同浓度鱼藤酮所致细胞内钙离子荧光强度变换值分别为0·6029±0·0685、1·0902±0·1127、0·7479±0·0820和0·5614±0·0870,分别与对照组比较差异有统计学意义(P<0·01)。当鱼藤酮浓度大于1·0μmol/L时,其作用呈剂量依赖性递减。预先用超氧化物歧化酶(SOD)1200U/ml干预24h,可有效减弱1·0μmol/L鱼藤酮引发的细胞内钙离子升高(P<0·01)。电镜观察到滑面内质网大量增生,粗面内质网轻、中度扩张及脱颗粒。结论鱼藤酮可通过活性氧途径耗竭ER腔钙离子,诱发ER应激,并引起其超微结构的相应变化。

桃仁分离蛋白质对油包水乳液物理与氧化稳定性的影响

以富含多不饱和脂肪酸的核桃油为油相,于水相添加桃仁分离蛋白（PKPI）,采用超高压微射流均质机制备油包水（W/O）乳液,乳液于45℃避光保存,每隔1 day测定乳液的平均粒径及粒径分布等物理特性,同时检测乳液初级氧化产物—脂质氢过氧化物与次级氧化产物-己醛,探究PKPI对W/O乳液稳定性影响。结果表明,PKPI应用于W/O乳液,可以降低乳液油滴粒径,提升乳液物理稳定性,PKPI同时具有抗氧化活性;PKPI浓度0.1~0.4%,乳液物理及氧化稳定性随PKPI浓度的增大而增强。水相p H对PKPI抗氧化活性有显著影响,水相p H 7.0,PKPI抗氧化活性高于水相p H 3.0。水相钙离子强度同时影响PKPI乳液的稳定性,100~200 Ca Cl2m M,乳液物理稳定性随离子强度的增大而增强;乳液水相钙离子强度较低时（≤10 m M）,增大离子强度将降低PKPI抗氧化活性,钙离子强度较高时（≥100 m M）,增大离子强度加速乳液脂质氧化。