新型含氟细胞钙离子荧光探针Fluo-3F的合成

目的设计并合成新型含氟荧光素类细胞钙离子荧光探针Fluo-3F。方法以5-氟邻硝基苯酚为起始原料,5步反应得到中间体BAPTA-F-CHO,再与4-氯间苯二酚缩合。结果新型含氟荧光素类钙离的结构经核磁共振光谱,红外光谱,质谱,元素分析得到证实。结论合成的新型含氟荧光素类钙离子荧光探针Fluo-3F荧光性能优异,为合成新型钙离子荧光探针提供了新的思路。

植物细胞钙离子检测与成像技术研究进展

钙离子是一种重要的第二信使,参与调节植物多种生理和发育过程。胞内钙离子呈现复杂的时空动态变化,只有实时捕获钙离子在植株整体水平以及亚细胞水平的变化,才能深入理解钙信号的重要功能。过去几十年中,人们在钙离子检测与成像技术方面进行了大量探索,本文总结了近年来植物科学研究中常用的钙离子检测与成像技术,着重介绍了化学荧光探针和基于荧光蛋白钙离子探针的原理、特点、浓度计算方法、在细胞质以及细胞器钙离子检测与成像中的应用等,并总结了化学荧光探针的装载方法。

细胞内钙离子释放在嗅觉信号转导机制中的作用

目的:建立组织块法体外培养嗅觉受体神经元(ORNs)细胞内游离钙离子浓度([Ca2+]i)的实时观察系统,分析嗅觉信号转导体系中几个关键环节的作用。方法:以双激发波长钙离子荧光探针Fura-2 AM孵育培养的ORNs,通过双波长比率法,实时定量观察ORNs的[Ca2+]i。分别以Forskolin和IBMX刺激ORNs,观察[Ca2+]i的改变。分别耗竭细胞内钙库和使用不含钙离子的细胞外液,判断细胞内[Ca2+]i的来源。结果:静息ORNs的[Ca2+]i为(58.5±12.8)nmol/L。Forskolin和IBMX刺激可使ORNs的[Ca2+]i快速升高,且作用可逆。二者所引发的钙信号来自于细胞外钙内流,而非细胞内钙库的释放。结论:本研究成功建立了实时定量观察ORNs细胞内[Ca2+]i的系统,ORNs的[Ca2+]i受第二信使门控钙离子通道的调节。