S100钙结合蛋白β与α突触核蛋白与帕金森病患者抑郁及运动障碍的关系

目的研究帕金森病(PD)患者血清S100钙结合蛋白β(S100β)及α突触核蛋白(α-syn)水平与患者抑郁及运动障碍的关系。方法选择2022年1月至12月聊城市人民医院收治的PD患者194例,根据汉密尔顿抑郁量表评分分为非抑郁组102例(0~13分)及抑郁组92例(≥14分)。运动障碍采用Hoehn-Yahr(H-Y)分级及统一帕金森病评定量表Ⅲ(UPDRS-Ⅲ)进行评分,用多因素logistic回归分析PD患者抑郁的独立危险因素,用Spearman相关性分析血清S100β及α-syn水平与患者抑郁及运动障碍的关系。结果抑郁组体质量指数低于非抑郁组,H-Y分级、UPDRS-Ⅲ评分、S100β、α-syn均高于非抑郁组,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。多因素logistic回归分析显示,H-Y分级、UPDRS-Ⅲ评分、S100β、α-syn为PD患者抑郁的独立危险因素(P<0.05)。Spearman相关性分析显示,PD患者S100β水平与H-Y分级、UPDRS-Ⅲ评分呈正相关(r=0.698,P=0.005;r=0.637,P=0.011);α-syn水平与H-Y分级、UPDRS-Ⅲ评分呈正相关(r=0.654,P=0.021;r=0.611,P=0.035)。ROC曲线显示,S100β、α-syn诊断PD患者抑郁的截断值分别为486.65μg/L、3894.27 ng/L,曲线下面积分别为0.889(95%CI:0.812~0.923)、0.761(95%CI:0.714~0.828),S100β曲线下面积显著优于α-syn(P<0.05)。结论PD患者血清S100β、α-syn水平与其抑郁发生及运动功能障碍密切相关。

结肠癌病人血清S100钙结合蛋白A12、可溶性晚期糖基化终产物受体水平与肠道菌群失调及化疗效果的关系

目的探讨结肠癌病人血清S100钙结合蛋白A12(S100A12)、可溶性晚期糖基化终产物受体(sRAGE)水平与肠道菌群失调及化疗效果的相关性。方法选择2020年12月至2021年12月黄河水利委员会黄河中心医院收治的116例中、晚期结肠癌病人作为结肠癌组,另选取在该院同期健康体检人员120例作为对照组。采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血清S100A12、sRAGE水平,检测病人肠道菌群,并对病人化疗后进行随访,Pearson法分析结肠癌病人血清S100A12、sRAGE水平与菌群失调相关性,受试者操作特征曲线(ROC曲线)分析化疗前血清S100A12、sRAGE水平对结肠癌化疗效果的诊断价值。结果与对照组比较,结肠癌组病人化疗前血清S100A12、sRAGE水平显著升高(P<0.05)。与化疗前菌群正常组[(265.34±45.78)μg/L、(381.54±36.75)ng/L]比较,菌群失调Ⅰ度组[(301.52±56.95)μg/L、(440.63±48.71)ng/L]、菌群失调Ⅱ度组[(339.29±52.35)μg/L、(432.75±49.20)ng/L]病人血清S100A12、sRAGE水平显著升高(P<0.05);与菌群失调Ⅰ度组比较,菌群失调Ⅱ度组病人血清S100A12、sRAGE水平显著升高(P<0.05)。相关性分析显示,结肠癌病人血清S100A12、sRAGE水平与大肠杆菌、粪肠球菌数量呈正相关(P<0.05),与双歧杆菌、乳酸杆菌数量呈负相关(P<0.05)。与化疗前比较,结肠癌病人化疗后血清S100A12、sRAGE水平显著降低(P<0.05);与化疗缓解组[(272.33±55.36)μg/L、(403.24±40.54)ng/L]比较,化疗无效组[(330.09±42.64)μg/L、(482.85±43.61)ng/L]病人化疗前血清S100A12、sRAGE水平显著较高(P<0.05)。血清S100A12、sRAGE联合诊断结肠癌化疗无效的曲线下面积(AUC)为0.91[95%CI:(0.84,0.96),P<0.001],灵敏度为86.05%,特异度为80.82%。结论结肠癌病人血清S100A12、sRAGE升高,与肠道菌群失调及化疗效果有关,对化疗疗效评估与预后评价有一定指导意义。

颅脑术后继发颅内感染患者脑脊液膜联蛋白A2和S100钙结合蛋白A10表达水平及临床意义

目的探讨颅脑术后继发颅内感染患者脑脊液膜联蛋白A2(Annexin A2)和S100钙结合蛋白A10(S100A10)表达水平及临床意义。方法选取收治的颅脑术后继发颅内感染患者120例为试验组,选取同期颅脑术后未感染的120例患者为对照组。采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测脑脊液中Annexin A2、S100A10水平;采用Pearson相关分析法分析Annexin A2、S100A10与各临床指标的相关性;采用Logistic回归分析法分析颅脑术后继发颅内感染的影响因素;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析Annexin A2、S100A10水平对颅脑术后继发颅内感染的预测价值。结果试验组的糖尿病占比、脑脊液渗漏占比、血乳酸脱氢酶(LDH)、脑脊液中Annexin A2及S100A10水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。颅内感染患者脑脊液中Annexin A2与S100A10、血LDH水平呈正相关,S100A10水平与LDH水平呈正相关(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,糖尿病、脑脊液渗漏、血LDH、脑脊液中Annexin A2和S100A10均是颅脑术后继发颅内感染的独立影响因素(P<0.05)。ROC曲线显示,脑脊液中Annexin A2、S100A10水平单独预测及二者联合预测颅脑术后继发颅内感染的曲线下面积(AUC)分别为0.788、0.768、0.865,其中联合预测AUC大于二者单独预测(P<0.05)。结论颅脑术后继发颅内感染患者脑脊液中Annexin A2、S100A10表达水平升高,是颅脑术后继发颅内感染的独立影响因素,二者联合预测价值较高。

过敏原肌质钙结合蛋白在毕赤酵母中的表达、优化及免疫反应性研究

目的 利用毕赤酵母(Pichia pastoris, P. pastoris)高效表达三疣梭子蟹(Portunustrituberculatus)重要过敏原肌质钙结合蛋白(sarcoplasmic calcium binding protein, SCP),并检验其免疫反应性。方法 根据毕赤酵母的密码子偏好性优化SCP基因并构建重组质粒。将其热激转化至P. pastorisGS115菌株后经遗传霉素(geneticin,G418)筛选获得阳性高拷贝子。最后通过甲醇诱导表达重组SCP并结合免疫印记(western blotting,WB)和间接酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)验证其免疫反应性。结果 在摇瓶水平下,重组SCP在毕赤酵母中最佳的表达条件为:诱导温度为28℃,甲醇添加量为每24h添加1.0%甲醇,诱导pH为6.0,诱导时间为144 h。在此条件下, SCP(纯度为91.6%)的得率为1.5 mg/100 mL菌液,实现了可溶性高效表达。WB和间接ELISA结果表明,重组SCP具有免疫球蛋白G结合能力。结论 毕赤酵母表达系统可以得到纯度较高且免疫反应性良好的重组SCP。本研究可为SCP的理化研究及过敏原标准物质的应用奠定基础,并有望促进特异性甲壳类过敏原检测的发展。

非瓣膜性心房颤动患者血清S100钙结合蛋白A4和正五聚素蛋白3水平与左心耳血栓的关系

目的分析非瓣膜性心房颤动(NVAF)患者血清S100钙结合蛋白A4(S100A4)、正五聚素蛋白3(PTX3)水平与左心耳血栓形成的关系。方法选取2020年3月至2023年3月在我院治疗的老年NVAF患者120例,根据超声心动图筛查有无左心耳血栓形成分为形成组40例和非形成组80例。检测患者血清S100A4、PTX3水平;Spearman相关性分析血清S100A4、PTX3水平与左心耳血栓形成的关系;logistic回归分析影响左心耳血栓形成的因素。结果形成组血清S100A4、PTX3水平高于非形成组(P<0.01)。NVAF患者血清S100A4和PTX3水平与左心耳血栓形成均呈正相关(r=0.497,P=0.000;r=0.555,P=0.000)。心力衰竭、CHA_(2)DS_(2)-VASc评分、B型钠尿肽、尿酸、S100A4、PTX3是NVAF患者左心耳血栓形成的危险因素(P<0.05,P<0.01)。血清S100A4和PTX3联合预测NVAF患者左心耳血栓形成的ROC曲线下面积为0.949(95%CI:0.893~0.981)。结论NVAF患者血清S100A4、PTX3水平升高,与左心耳血栓形成有关,二者血清水平对左心耳血栓形成具有一定预测价值。

肛瘘术后病人血清钙结合蛋白S100A8、促红细胞生成素表达与创面愈合、肛门功能的关系

目的 探究肛瘘术后病人血清钙结合蛋白S100A8(S100A8)、促红细胞生成素(EPO)表达与创面愈合、肛门功能的关系。方法 以2020年5月至2022年3月河北中医学院第二附属医院收治的96例肛瘘病人为研究对象,所有病人均接受肛瘘手术治疗。对比治疗前后病人血清S100A8、EPO水平及肛门失禁Wexner评分,比较不同血清S100A8、EPO水平病人疗效、创面愈合时间、14 d创面愈合率及Wexner评分;Pearson相关性分析血清S100A8、EPO与创面愈合时间、14 d创面愈合率及Wexner评分的相关性;多因素logistic回归分析肛瘘术效果的影响因素。结果 术后,病人血清S100A8较术前明显降低[(65.34±6.21)μg/L比(83.15±8.92)μg/L,P<0.05],EPO水平较术前明显升高[(52.36±5.67)U/L比(33.67±4.86)U/L,P<0.05],Wexner评分较术前明显降低[(9.74±2.22)分比(21.02±5.31)分,P<0.05]。术后血清S100A8低表达者较高表达者疗效更优(P<0.05),EPO高表达者较低表达者疗效更优(P<0.05)。术后血清S100A8高表达者较低表达者创面愈合时间更长(P<0.05),14 d创面愈合率更低(P<0.05),Wexner评分更高(P<0.05),血清S100A8与创面愈合时间呈正相关,与创面愈合率呈负相关,与Wexner评分呈正相关(均P<0.05)。术后血清EPO高表达者较低表达者创面愈合时间更短(P<0.05),14 d创面愈合率更高(P<0.05),Wexner评分更低(P<0.05),血清EPO与创面愈合时间呈负相关,与创面愈合率呈正相关,与Wexner评分呈负相关(均P<0.05)。多因素logistic回归分析显示,S100A8高表达、EPO低表达是影响肛瘘术后效果的危险因素。结论 肛瘘术后病人血清S100A8、EPO与病人创面愈合时间、14 d创面愈合率、Wexner评分显著相关,能够反应病人创面愈合及肛门功能情况。

2型糖尿病周围神经病变患者血清S100钙结合蛋白B、P的表达及临床意义

目的研究2型糖尿病(T2DM)合并周围神经病变(DPN)患者血清S100钙结合蛋白B(S100B)、血清S100钙结合蛋白P(S100P)的表达及临床意义。方法将2019年1月至2021年1月该院收治的152例T2DM患者作为研究对象,根据是否合并DPN分为非DPN组(98例)和DPN组(54例)。比较两组血清S100B、S100P水平,以及一般临床资料及神经传导速度的差异。采用Pearson法进行相关性分析,多因素Logistic回归模型分析影响DPN发生的危险因素,受试者工作特征(ROC)曲线分析S100B、S100P检测对DPN的诊断价值。结果DPN组血清S100B、S100P,以及糖尿病病程、空腹血糖(FPG)、糖化血红蛋白(HbA1c)均高于或长于非DPN组,差异有统计学意义(P<0.05),而正中神经运动(MMCV)和感觉(MSCV)传导速度、尺神经运动(UMCV)和感觉(USCV)传导速度、腓总神经运动(PMCV)和感觉(PSCV)传导速度低于非DPN组,差异有统计学意义(P<0.05)。DPN组患者血清S100B、S100P与FPG、HbA1c水平呈显著正相关(r=0.618~0.737,均P<0.05),与MMCV、UMCV、MSCV、PSCV呈显著负相关(r=-0.657~-0.874,均P<0.05)。糖尿病病程(OR=1.236,P<0.001)、HbA1c(OR=1.300,P<0.001)、S100B(OR=1.370,P<0.001)和S100P(OR=1.361,P<0.001)均是影响T2DM患者DPN发生的独立危险因素,血清S100B、S100P检测对T2DM患者DPN诊断的曲线下面积为0.724、0.728。结论T2DM合并DPN患者血清S100B、S100P水平升高,是影响T2DM患者DPN发生的独立危险因素。

急性ST段抬高型心肌梗死患者血清S100钙结合蛋白A8和S100钙结合蛋白A9水平与血栓负荷的关系

目的探讨急性ST段抬高型心肌梗死(STEMI)患者血清S100钙结合蛋白A8(S100A8)和S100钙结合蛋白A9(S100A9)水平与STEMI患者血栓负荷的关系。方法选取85例STEMI患者为研究对象,均接受经皮冠状动脉介入(PCI)治疗,根据冠状动脉造影及介入治疗术中情况分为高血栓负荷组[心肌梗死溶栓治疗(TIMI)血栓分级4~5级]40例和低血栓负荷组(TIMI血栓分级4级以下)45例。检测血清S100A8、S100A9水平,分析影响STEMI患者高血栓负荷的相关因素,探讨S100A9、S100A8预测STEMI患者高血栓负荷的价值。PCI术后进行3个月随访,记录并发症发生情况。结果高血栓负荷组年龄及男性、有吸烟史、2型糖尿病、右冠状动脉梗死比率、术前Gensini评分、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇水平高于低血栓负荷组,差异有统计学意义(P<0.05)。与低血栓负荷组相比,高血栓负荷组血清S100A9、S100A8水平升高,差异有统计学意义(P<0.05)。术前Gensini评分、低密度脂蛋白胆固醇、S100A9、S100A8是STEMI患者高血栓负荷的危险因素(P<0.05)。S100A9、S100A8、Gensini评分、低密度脂蛋白胆固醇联合预测STEMI患者高血栓负荷的曲线下面积高于上述指标单独预测(Z=4.462、4.817、3.959、4.438,P<0.05)。PCI术后3个月内,共有12例出现并发症(并发症组),包括穿刺部位出血6例、血肿3例、支架内血栓形成2例、急性冠状动脉闭塞1例。将无并发症的72例患者纳入无并发症组。并发症组患者血清S100A9、S100A8水平和高血栓负荷比率高于无并发症组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论STEMI高血栓负荷患者血清S100A9、S100A8水平均增高,并有助于STEMI患者PCI术前动脉血栓负荷状态的评估。

藏药十八味诃子利尿丸对雄性糖尿病大鼠脑组织离子钙结合衔接分子1及突触可塑性相关蛋白的影响

目的探讨藏药十八味诃子利尿丸对雄性糖尿病(Diabetes mellitus,DM)大鼠脑组织中小胶质细胞标记物离子钙结合衔接分子1(Ionized calcium binding adaptor molecule 1,IBA1)及突触可塑性相关蛋白的影响。方法30只雄性SD大鼠适应性喂养72 h后,取10只大鼠为对照组;另取20只制备DM大鼠,以高糖高脂饲料喂养12 w后于尾静脉一次性注射STZ溶液,其中10只为模型组、10只为藏药组(藏药组用十八味诃子利尿丸连续灌胃2 w),实验结束后断头取脑组织。用Western Blot法检测IBA1、IL-6、syn-1、PSD95、HIF-1α,用IHC法检测IBA1、IL-6、HIF-1α。对实验结果进行相关统计学分析。结果与对照组比较,模型组大鼠脑组织中的IBA1、IL-6、HIF-1α蛋白表达升高(P<0.05),syn-1、PSD95蛋白表达降低(P<0.05);与模型组比较,藏药组大鼠脑组织中的IBA1、IL-6、HIF-1α蛋白表达降低(P<0.05),syn-1、PSD95蛋白表达量升高(P<0.05)。结论藏药十八味诃子利尿丸可能通过IBA1靶点降低DM大鼠脑组织中小胶质细胞的活化水平,并改善突触可塑性,从而对DM大鼠脑组织发挥保护作用。

鲢鱼肌原纤维结合型丝氨酸蛋白酶的结构建模、内源抑制剂对接及其钙结合机制

【目的】分析鲢(Hypophthalmichthys molitrix)肌原纤维结合型丝氨酸蛋白酶(Myofibril-bound serine proteinase,MBSP)结构的基础特性。【方法】使用AlphaFold2对鲢MBSP进行结构建模,通过保守性分析、静电势计算、分子对接等手段探讨鲢鱼MBSP的结构特征,并借助分子动力学模拟研究钙结合对其结构的影响。【结果与结论】鲢鱼MBSP的活性酶形式含222个残基,有胰蛋白酶样丝氨酸蛋白酶的典型结构特征,但表面充斥着更多赖氨酸,使其表面“粗糙”且利于离子键形成。62Asn及61Glu是其关键的钙结合位点,钙结合导致的结构变动可传至C端,40His、自溶环、氧阴离子稳定环等关键区域的柔性变化是钙激活机制中的重要部分。葡萄糖-6-磷酸异构酶二聚体上的10Arg及17Lys是参与鲢鱼MBSP底物结合竞争的潜在关键位点。除催化活性口袋外,潜在的变构位点亦是MBSP抑制剂设计的可选出发点。

孤独症谱系障碍患儿血清S100钙结合蛋白B水平变化及其基因多态性观察

目的观察孤独症谱系障碍(ASD)患儿血清S100钙结合蛋白B(S100B)水平变化及S100B基因rs1051169位点多态性,探讨S100B基因多态性与ASD易感性的关系。方法选择78例ASD患儿为ASD组、80例健康体检儿童为对照组,抽取两组外周静脉血,采用ELISA法检测血清S100B,采用聚合酶链反应联合DNA直接测序法检测两组S100B基因rs1051169位点基因型,绘制受试者工作特征曲线(ROC)分析血清S100B水平对ASD的诊断效能。结果与对照组比较,ASD组患儿血清S100B水平高(P<0.001)。S100B诊断ASD的ROC曲线下面积为0.808(95%CI为0.741~0.875),当S100B为0.351 ng/mL时,诊断ASD的特异度为95%、灵敏度为58%。ASD患儿和健康对照儿童S100B基因rs1051169位点基因型及等位基因分布频率差异无统计学意义(P均>0.05)。结论ASD患儿血清S100B水平升高。血清S100B水平诊断ASD的特异度较高。S100B基因rs1051169位点基因多态性可能与ASD的易感性无关。

桥接治疗对急性脑梗死患者神经元特异性烯醇化酶、S100钙结合蛋白B、胶质纤维酸性蛋白的影响

目的探讨桥接治疗对前循环大血管闭塞急性脑梗死患者血清神经损伤相关生化标志物的影响以及临床疗效,为急性脑梗死治疗方式的选择提供参考依据。方法回顾性分析2018年10月—2020年6月前循环大血管闭塞的急性脑梗死患者的病历资料,根据是否采取桥接治疗分为对照组(静脉溶栓组)和观察组(桥接治疗组)。统计两组在治疗后24 h、14 d的治疗有效(NIHSS评分下降≥4分或NIHSS评分0分)率,治疗后30 d、90 d及180 d的良好预后(mRS评分≤2分)率及日常生活能力自理(Barthel指数>60分)率,住院期间脑出血发生率,治疗前以及治疗后3 d、7 d及14 d神经元特异性烯醇化酶(neuron-specific enolase,NSE)、S100钙结合蛋白B(S100 calcium-binding protein B,S100B)及胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)水平。采用基于混合效应的logistic回归模型、线性混合效应模型进行预后指标的统计分析。结果多因素分析结果显示:观察组的治疗有效率是对照组的3.35倍(OR 3.35,95%CI 1.10~10.13,P=0.041);观察组的良好预后率是对照组的4.12倍(OR 4.12,95%CI 1.14~14.82,P=0.035);观察组的日常生活能力自理率与对照组相当(OR 1.47,95%CI 0.28~7.68,P=0.648);观察组与对照组脑出血发生率差异无统计学意义(7.4%vs.8.7%,P=1.000);观察组NSE、S100B、GFAP水平低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.001)。结论对于前循环大血管闭塞的急性脑梗死患者,与单纯静脉溶栓相比,桥接治疗可显著降低患者NSE、S100B及GFAP水平,提高临床疗效。

血清S100钙结合蛋白A9在结直肠癌中的研究进展

结直肠癌是消化系统最常见的恶性肿瘤之一,结直肠癌患者常常发展至中晚期才被发现,导致预后不佳,因此寻找新的肿瘤标志物,提高早期诊断率对改善结直肠癌患者预后十分重要。血清S100钙结合蛋白A9(S100A9)主要表达于骨髓细胞,能够作为一种分泌型炎症因子在炎症反应中发挥重要作用,具有促进肿瘤细胞增殖、侵袭、转移及诱发肿瘤免疫抑制的作用。近年来,S100A9被证实可影响结直肠癌细胞的增殖。现就结直肠癌微环境中S100A9分子对肿瘤发展的影响进行综述,旨在分析其在结直肠癌诊治中的潜在应用价值。

抑制钙结合蛋白S100A4表达缓解小鼠脓毒血症相关肺损伤的研究

目的探讨抑制钙结合蛋白S100A4表达在脓毒血症相关肺损伤中的意义及潜在的调控机制。方法复制脓毒血症模型小鼠,部分加氯硝柳胺Niclosamide预处理,收集肺泡灌洗液和肺组织。BCA蛋白定量法检测小鼠肺泡灌洗液总蛋白浓度;酶联免疫吸附试验检测肺S100A4蛋白含量;苏木精-伊红染色评估小鼠肺部炎症;免疫组织化学检测肺S100A4蛋白和紧密连接蛋白Occludin表达情况,Western blotting检测潜在信号分子的表达。结果与Con组比较,LPS组小鼠肺泡灌洗液总蛋白浓度升高(P<0.05),与Con组比较,肺S100A4水平差异无统计学意义(P>0.05);免疫组织化学染色结果显示,肺支气管上皮细胞高表达S100A4,且LPS组S100A4表达较Con组升高(P<0.05),Occludin表达较Con组降低(P<0.05);Western blotting结果显示,LPS组STAT_(3)和MAPK3表达较Con组升高(P<0.05)。与LPS组比较,Niclosamide预处理可有效降低小鼠肺支气管上皮细胞S100A4表达(P<0.05),一定程度上恢复Occludin表达和下调STAT_(3)、MAPK3表达。结论Niclosamide可能通过STAT_(3)、MAPK3信号下调S100A4和上调Occludin表达,进而缓解脓毒血症相关肺损伤。

维生素A、D对肉鸡血清钙结合蛋白浓度与胫骨和十二指肠组织中钙结合蛋白mRNA表达的影响

本试验主要研究不同的维生素A、D水平及其相互作用对肉鸡血清钙结合蛋白(CaBP)浓度与十二指肠和胫骨组织中CaBP mRNA表达的影响。采用4×4完全随机试验设计,选择8日龄健康AA雄性肉鸡384只按体重一致的原则分为16个日粮组,每组3个重复,每个重复8只鸡,试验期5周。维生素A设4个添加水平分别为1500、3000、15000和45000IU/kg,维生素D设4个添加水平分别为500、1250、2500和5000IU/kg。结果表明:1)随着日粮维生素A添加水平的增加,肉鸡血清CaBP含量、十二指肠和胫骨组织中CaBPmRNA表达量均呈现一次线性降低趋势(P=0.091,P=0.012,P=0.110),其中以45000IU/kg维生素A组最低;2)随着日粮维生素D添加水平的增加,肉鸡血清CaBP含量和十二指肠组织中CaBP mRNA的表达呈现一次线性增加趋势(P=0.310,P=0.140),其中以5000IU/kg维生素D组最高;3)维生素A、D相互作用对肉鸡血清CaBP浓度与十二指肠和胫骨组织中CaBP mRNA的表达均无显著的影响(P>0.05)。试验结果提示,过量维生素A引起肉鸡骨骼代谢异常的机理是过量维生素A抑制了肉鸡组织的CaBP mRNA表达,尤其对十二指肠组织的CaBP mRNA的表达有显著的抑制作用,引起血清CaBP浓度的降低,进而引起钙磷代谢发生紊乱。过量维生素A对肉鸡组织CaBP mRNA表达的抑制作用可能与过量维生素A对维生素D的拮抗作用有关。

钙结合蛋白S100A8和S100A9的异源二聚体体外构建

目的体外构建S100A8和S100A9的异源二聚体(S100A8/S100A9),为其分子生物学功能研究提供依据。方法原核表达载体pET28 a-S100A8和pET28 a-S100A9分别转化感受态细胞BL21,并用异丙基硫化-β-D半-乳糖苷(IPTG)诱导表达蛋白,N i-NTA H is柱纯化蛋白,将等量纯化蛋白在一定钙离子浓度下室温孵育30 m in,通过SDS-PAGE和W estern b lot方法验证异源二聚体的形成。结果质粒pET28 a-S100A8和pET28 a-S100A9在相对分子质量约11 kD和14 kD处出现新生的蛋白条带,可溶性分析发现两个蛋白均可以以可溶的形式存在,纯化后得到了目的蛋白,S100A8和S100A9室温孵育后形成了异源二聚体。结论 S100A8和S100A9蛋白可以在体外形成异源二聚体。

Ca^(2+)和Mg^(2+)对54kD钙结合蛋白荧光强度影响的研究

猪血小板 5 4kD钙结合蛋白 (calciumbindingprotein ,CaBP)是一个等电点为 5 .5的弱酸性蛋白质 ,其N 末端为丙氨酸 (Ala) ,且未经修饰 ,在 2 80nm波长的紫外光激发下 ,该蛋白质具有λmax为 335nm的内源荧光发射光谱 ,Ca2 +、Mg2 +均能减弱其发射荧光的强度 ,但对其λmax没有影响 .通过测定不同Ca2 +浓度下荧光强度的变化 ,可计算出在无Mg2 +存在时 ,该蛋白质的钙结合常数为 3.2× 10 - 8mol/L ,而在Mg2 +饱和条件下 ,钙结合常数为 7.4× 10 - 6 mol/L .乙醇亦不影响该蛋白质荧光的λmax,而对其荧光强度的影响则依赖于是否与钙结合 .未与Ca2 +结合时 ,乙醇浓度的增加导致荧光强度增强 ,与Ca2 +结合后 ,在低浓度乙醇溶液中 ,蛋白荧光强度减小 ,至乙醇浓度大于 16 .6 %后 ,其荧光强度逐渐增强 ,在 35 %乙醇溶液中 5 4kDCaBP对Ca2

可溶性耐药相关钙结合蛋白

可溶性耐药相关钙结合蛋白 (sorcin) ,是一种 2 2ku的胞浆蛋白 ,具有典型的“E Fhand”钙结合位点。sorcin可在多种耐药细胞株中高表达 ,推测可能是通过影响细胞内Ca2 + 浓度而参与耐药表型的维持 ,但sorcin表达的量与耐药程度之间的关系还不明了。在多种正常组织中也发现sorcin的表达 ,在心肌细胞中 ,sorcin通过影响Ca2 + 通道的活性而在兴奋 收缩偶联循环中发挥重要作用。

甲状旁腺素和活性维生素D在调节肾脏钙结合蛋白中的协同作用

目的:明确甲状旁腺素(PTH)和1,25-二羟维生素D3[1,25(OH)2D3]在调节肾脏钙结合蛋白中的各自和协同作用。方法:采用免疫组织化学方法观察PTH基因敲除、1α羟化酶基因敲除及双基因敲除对钙结合蛋白D28K和D9K在小鼠肾脏不同部位表达的影响。结果:钙结合蛋白D28K和D9K均定位于肾脏皮质远曲小管及髓质集合管上皮细胞的胞浆内。两种钙结合蛋白在PTH基因敲除小鼠肾脏的表达均明显减少。它们的减少在1α羟化酶基因敲除小鼠更为明显,而以双基因敲除小鼠最为显著。结论:PTH和活性维生素D均能调节钙结合蛋白在肾脏的表达,而且两者具有协同作用。