肺泡灌洗液白介素-6、白介素-36α及S100钙结合蛋白A9水平在继发性肺结核进展加重患者中的表达水平及评估价值

目的分析支气管肺泡灌洗液中白介素-6(IL-6)、白介素-36α(IL-36α)、S100钙结合蛋白A9(S100A9)在继发性肺结核进展加重患者中的表达水平及其临床评估价值。方法选择2020年1月至2022年12月首都医科大学附属北京胸科医院收治的继发性肺结核患者65例,根据病情严重程度分为重症组(34例)与轻症组(31例),收集两组患者外周支气管肺泡灌洗液,应用酶联免疫吸附法检测IL-6、IL-36α、S100A9水平并进行比较。应用ROC曲线下面积评价IL-6、IL-36α、S100A9对继发性肺结核进展加重的评估价值。结果重症组患者支气管肺泡灌洗液IL-6、IL-36α、S100A9水平均高于轻症组,差异有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线分析显示,IL-6、IL-36α、S100A9评估继发性肺结核进展加重的AUC分别为0.707(95%CI 0.580~0.835)、0.676(95%CI 0.542~0.811)、0.740(95%CI 0.617~0.863)。结论肺泡灌洗液IL-6、IL-36α、S100A9在继发性肺结核进展加重期患者中的表达水平升高,IL-6与S100A9对于临床评估继发性肺结核进展加重具有一定价值。

抑郁症180例血清S100钙结合蛋白A8和S100钙结合蛋白A9表达与抑郁程度的相关性分析

目的探讨抑郁症病人血清S100钙结合蛋白A(S100A)8、S100A9表达水平,以及二者与抑郁程度的相关性。方法选取中国人民解放军空军第九八六医院2019年1月至2022年10月收治的180例抑郁症病人作为研究组,另外选取174例同期体检健康的志愿者作为对照组,采用酶联免疫吸附测定检测血清S100A8、S100A9水平,采用汉密尔顿抑郁量表(HAMD-17)评估抑郁症病人的抑郁程度,其中7~17分判定为轻度抑郁病人(78例)、18~24分为中度抑郁病人(53例)、>24分为重度抑郁病人(49例),采用Spearman法分析血清S100A8和S100A9与病人抑郁程度的相关性。Pearson法分析血清S100A8和S100A9与炎症因子的相关性。logistic回归分析影响病人抑郁程度的因素。结果研究组血清S100A8[(6.57±1.74)μg/L]、S100A9[(7.36±2.07)μg/L]以及炎症因子白细胞介素(IL)-6[(15.37±3.56)ng/L]、IL-1β[(9.57±2.89)ng/L]、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)[(24.24±5.28)ng/L]水平显著高于对照组[(3.98±1.18)μg/L、(4.14±1.25)μg/L、(12.98±3.86)ng/L、(6.98±1.45)ng/L、(18.45±4.19)ng/L],差异有统计学意义(P<0.05);研究组病人抑郁症家族史、体力活动时间与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05);血清S100A8和S100A9水平在轻、中、重度抑郁病人中依次升高,差异有统计学意义(P<0.05);经Spearman法分析发现,血清S100A8和S100A9及IL-6、IL-1β、TNF-α均与病人抑郁程度呈正相关(r=0.54、0.44、0.41、0.44、0.51,P<0.05);经Pearson法分析,血清S100A8水平分别与IL-6、IL-1β、TNF-α呈正相关(r=0.35、0.41、0.45,P<0.05),血清S100A9水平分别与IL-6、IL-1β、TNF-α呈正相关(r=0.37、0.38、0.44,P<0.05)。logistic回归分析,结果显示S100A8、S100A9、IL-6、IL-1β、TNF-α是抑郁症病人抑郁程度的影响因素(P<0.05)。结论S100A8、S100A9在抑郁症病人血清中表达上调,与病人的抑郁程度密切相关。

急性ST段抬高型心肌梗死患者血清S100钙结合蛋白A8和S100钙结合蛋白A9水平与血栓负荷的关系

目的探讨急性ST段抬高型心肌梗死(STEMI)患者血清S100钙结合蛋白A8(S100A8)和S100钙结合蛋白A9(S100A9)水平与STEMI患者血栓负荷的关系。方法选取85例STEMI患者为研究对象,均接受经皮冠状动脉介入(PCI)治疗,根据冠状动脉造影及介入治疗术中情况分为高血栓负荷组[心肌梗死溶栓治疗(TIMI)血栓分级4~5级]40例和低血栓负荷组(TIMI血栓分级4级以下)45例。检测血清S100A8、S100A9水平,分析影响STEMI患者高血栓负荷的相关因素,探讨S100A9、S100A8预测STEMI患者高血栓负荷的价值。PCI术后进行3个月随访,记录并发症发生情况。结果高血栓负荷组年龄及男性、有吸烟史、2型糖尿病、右冠状动脉梗死比率、术前Gensini评分、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇水平高于低血栓负荷组,差异有统计学意义(P<0.05)。与低血栓负荷组相比,高血栓负荷组血清S100A9、S100A8水平升高,差异有统计学意义(P<0.05)。术前Gensini评分、低密度脂蛋白胆固醇、S100A9、S100A8是STEMI患者高血栓负荷的危险因素(P<0.05)。S100A9、S100A8、Gensini评分、低密度脂蛋白胆固醇联合预测STEMI患者高血栓负荷的曲线下面积高于上述指标单独预测(Z=4.462、4.817、3.959、4.438,P<0.05)。PCI术后3个月内,共有12例出现并发症(并发症组),包括穿刺部位出血6例、血肿3例、支架内血栓形成2例、急性冠状动脉闭塞1例。将无并发症的72例患者纳入无并发症组。并发症组患者血清S100A9、S100A8水平和高血栓负荷比率高于无并发症组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论STEMI高血栓负荷患者血清S100A9、S100A8水平均增高,并有助于STEMI患者PCI术前动脉血栓负荷状态的评估。

血清S100钙结合蛋白A9在结直肠癌中的研究进展

结直肠癌是消化系统最常见的恶性肿瘤之一,结直肠癌患者常常发展至中晚期才被发现,导致预后不佳,因此寻找新的肿瘤标志物,提高早期诊断率对改善结直肠癌患者预后十分重要。血清S100钙结合蛋白A9(S100A9)主要表达于骨髓细胞,能够作为一种分泌型炎症因子在炎症反应中发挥重要作用,具有促进肿瘤细胞增殖、侵袭、转移及诱发肿瘤免疫抑制的作用。近年来,S100A9被证实可影响结直肠癌细胞的增殖。现就结直肠癌微环境中S100A9分子对肿瘤发展的影响进行综述,旨在分析其在结直肠癌诊治中的潜在应用价值。

动态监测血浆S100钙结合蛋白A9对重症继发性肺结核患者疗效与预后的判断价值

目的探讨动态监测血浆S100钙结合蛋白A9(S100 calcium-binding protein A9,S100A9)对重症继发性肺结核患者的疗效判断和预后指导意义。方法选择2018年1月至2018年12月首都医科大学附属北京胸科医院收治的重症继发性肺结核患者121例,根据治疗前血浆S100A9水平分组,S100A9>21.70μg/L的44例患者纳入高S100A9组,S100A9≤21.70μg/L的77例患者纳入低S100A9组。比较两组患者入院第1天、治疗30d、治疗180d的临床资料。根据治疗180d时患者的转归,将病情好转者纳入好转组,病情未好转者纳入未好转组,比较两组患者S100A9水平差异。结果治疗30d及180d,低S100A9组患者的痰菌阴转率及好转比例均较高于高S100A9组,死亡比例均低于高S100A9组,差异有显著性(P<0.001)。治疗30d,低S100A9组患者空洞闭合率高于高S100A9组,差异有显著性(P=0.046)。入院后,未好转组第1天S100A9水平明显高于好转组,差异有显著性(P<0.001),而治疗30d及180d时两组S100A9水平比较差异无显著性(P>0.05)。结论血浆S100A9水平对重症继发性肺结核患者具有良好的疗效判断和预后指导价值。

钙结合蛋白S100A8和S100A9的异源二聚体体外构建

目的体外构建S100A8和S100A9的异源二聚体(S100A8/S100A9),为其分子生物学功能研究提供依据。方法原核表达载体pET28 a-S100A8和pET28 a-S100A9分别转化感受态细胞BL21,并用异丙基硫化-β-D半-乳糖苷(IPTG)诱导表达蛋白,N i-NTA H is柱纯化蛋白,将等量纯化蛋白在一定钙离子浓度下室温孵育30 m in,通过SDS-PAGE和W estern b lot方法验证异源二聚体的形成。结果质粒pET28 a-S100A8和pET28 a-S100A9在相对分子质量约11 kD和14 kD处出现新生的蛋白条带,可溶性分析发现两个蛋白均可以以可溶的形式存在,纯化后得到了目的蛋白,S100A8和S100A9室温孵育后形成了异源二聚体。结论 S100A8和S100A9蛋白可以在体外形成异源二聚体。

钙结合蛋白S100A8/A9对宫颈癌细胞系CasKi细胞F-肌动蛋白的影响

目的探讨钙结合蛋白S100A8/A9复合物对人宫颈癌上皮细胞癌细胞系CasKi细胞骨架及表面超微结构的影响。方法应用20μg/ml S100A8/A9复合物作用于CasKi细胞,对细胞骨架F-肌动蛋白进行染色,应用快速共聚焦荧光显微镜观察细胞骨架的改变。在生理条件下,应用原子力显微镜(atomic force microscopy,AFM)对活体细胞进行高分辨成像,观察细胞表面超微结构及应力纤维。结果S100A8/A9复合物作用24 h后宫颈癌细胞系CasKi细胞的F-肌动蛋白排列出现紊乱,主要分布于细胞的周边,细胞中央F-肌动蛋白含量明显减少。CasKi细胞经过20μg/ml S100A8/A9蛋白复合物处理前细胞核部位F-肌动蛋白光密度为92.42±5.16,经过S100A8/A9 72 h处理后,F-肌动蛋白的光密度降为57.67±3.70,两者相比较差异具有显著的统计学意义(t=5.268,P=0.000)。AFM成像显示S100A8/A9复合物作用后细胞边缘卷曲,高度增加,伪足减少,细胞膜下应力纤维结构遭到破坏。结论S100A8/A9蛋白复合物可以对宫颈癌细胞系CasKi细胞表面的超微结构及应力纤维产生影响,并且这种影响主要是通过肌动蛋白的重新分布实现的。

苦精对哮喘小鼠气道中钙结合蛋白S100A9及气道黏液分泌的影响

目的研究发现在人体肺部存在苦味受体,目前关于苦味受体激动剂与气道黏液分泌的研究报道较少。探讨肺部苦味受体激动剂苯甲地钠铵(苦精)对哮喘小鼠气道中钙结合蛋白S100A9水平和气道中黏液分泌的影响。方法将健康清洁型雄性BALB/c小鼠按随机数字表分成5组:正常对照组,慢性哮喘组,苦精干预1、2、3周组,每组8只。除正常对照组外,其余组小鼠于第1天和第15天分别腹腔注射0.2 m L氢氧化铝混悬液[含100μg OVA,1 mg Al(OH)3)]致敏。苦精干预1、2、3周组小鼠分别从第10、9、8周起在激发的基础上吸入800μg苦精1、2、3周。ELISA法及免疫组化法检测肺泡灌洗液(BALF)上清、肺组织中S100A9蛋白水平,糖原PAS染色及实时定量PCR显示气道杯状细胞数量、黏液性物质及黏蛋白MUC5AC的含量。结果与正常对照组BALF上清中S100A9水平[(6.19±0.61)ng/m L]比较,慢性哮喘组以及苦精干预1、2周组[(11.89±0.77)、(10.69±0.79)、(9.49±0.99)ng/m L]明显升高(P<0.05);苦精干预1、2、3周组较慢性哮喘组降低(P<0.05)。与正常对照组比较,免疫组化染色显示慢性哮喘组气道上皮细胞中S100A9高表达,苦精干预1、2、3周后,气道上皮细胞中S100A9表达随苦精干预时间增加而减少。糖原PAS染色显示,与正常对照组比较,慢性哮喘组气道上皮杯状细胞增生,黏液过度分泌(P<0.01)。与慢性哮喘组比较,苦精干预1、2、3周组杯状细胞数量、黏液分泌量随苦精干预时间的增加而减少。与正常对照组比较,慢性哮喘组以及苦精干预1、2周组肺组织中黏蛋白MUC5AC mRNA表达增高,差异有统计学意义(P<0.05),与慢性哮喘组比较,苦精干预后,MUC5AC的mRNA表达降低,并随苦精干预时间的增加而降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论苦精下调小鼠杯状细胞的黏液分泌可能与上皮细胞钙结合蛋白S100A9有关。

血清S100A8、S100A9水平与小儿难治性肺炎支原体肺炎病情严重程度及预后的关系

目的探讨血清S100钙结合蛋白A8(S100A8)、S100钙结合蛋白A9(S100A9)水平与小儿难治性肺炎支原体肺炎(RMPP)病情严重程度及预后的关系。方法选取70例RMPP患儿为RMPP组、80例普通肺炎支原体肺炎患儿为GMPP组、50例健康体检儿童为对照组。根据病情严重程度将RMPP患儿分为轻症组(n=36)、重症组(n=34),根据预后将RMPP患儿分为预后良好组(n=43)和预后不良组(n=27)。用酶联免疫吸附实验检测血清S100A8、S100A9并比较各组二者水平变化。分析S100A8、S100A9水平与RMPP患儿病情严重程度的关系;Logistic回归分析RMPP患儿预后不良的危险因素;绘制受试者工作特征曲线,用曲线下面积评价血清S100A8、S100A9水平对RMPP患儿预后的预测效能。结果RMPP组血清S100A8、S100A9水平均高于GMPP组和对照组(P均<0.05),GMPP组血清S100A8、S100A9水平均高于对照组(P均<0.05)。治疗前及治疗后7 d,重症组血清S100A8、S100A9水平均高于轻症组(P均<0.05);且两组治疗后7 d血清S100A8、S100A9水平均低于本组治疗前(P均<0.05)。治疗前及治疗后7 d,预后不良组血清S100A8、S100A9水平均高于预后良好组(P均<0.05)。预后良好组治疗后7 d血清S100A8、S100A9水平低于治疗前(P均<0.05);但预后不良组治疗后7 d的血清S100A8、S100A9水平与治疗前比较差异无统计学意义(P均>0.05)。S100A8、S100A9水平升高是RMPP患儿预后不良的危险因素(P均<0.05)。S100A8、S100A9及二者联合预测RMPP患儿预后不良的曲线下面积分别为0.944、0.907、0.968。结论血清S100A8、S100A9水平升高与小儿RMPP病情严重程度及预后相关。

老年特发性间质性肺炎病人血清S100A9及sCD163表达水平及临床意义

目的研究老年特发性间质性肺炎(IIP)病人血清S100钙结合蛋白A9(S100A9)、分泌型CD163(sCD163)表达水平及其临床意义。方法选取自2019年5月至2022年5月于本院诊治的96例老年IIP病人,根据IIP病情分为急性加重期组(n=62)和稳定期组(n=34)。根据急性加重期组病人随访3个月生存情况,分为生存亚组(n=40)和死亡亚组(n=22)。以同期体检的60例健康人为对照组。采用ELISA法检测血清S100A9、sCD163水平。采用多因素Logistic回归分析急性加重期IIP病人死亡的影响因素,采用ROC曲线分析血清S100A9、sCD163对急性加重期IIP病人死亡的预测价值。结果急性加重期组血清S100A9、sCD163水平明显高于稳定期组和对照组,差异具有统计学意义(均P<0.01)。急性加重期老年IIP病人血清S100A9、sCD163水平均与红细胞沉降率、肺部高分辨率计算机断层扫描成像(HRCT)评分呈正相关(均P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,HRCT评分、S100A9、sCD163是急性加重期老年IIP病人死亡的独立影响因素。ROC曲线分析显示,HRCT评分、血清S100A9、sCD163联合检测预测急性加重期老年IIP病人死亡的AUC为0.907,大于上述单一指标(AUC=0.850,0.809,0.792),差异具有统计学意义(Z=5.183,4.349,5.127,均P<0.05)。结论老年IIP病人血清S100A9和sCD163联合检测对急性加重期老年IIP病人死亡具有较高的预测价值。

CAL、S100A8、S100A9对新生儿败血症早期诊断及病情判断的临床价值

目的 探讨血清钙卫蛋白(CAL)、钙结合蛋白A8(S100A8)、钙结合蛋白A9(S100A9)对新生儿败血症早期诊断及病情判断的临床价值。方法 选取2020年2月至2023年2月期间于本院就诊的118例新生儿败血症患儿作为研究对象,根据病情严重程度将其分为轻症组(n=76)和重症组(n=42),另选取同期健康新生儿64例作为对照组。采用酶联免疫吸附法测定各组血清CAL、S100A8和S100A9水平;比较轻、重症新生儿败血症患儿临床资料;Spearman法分析血清CAL、S100A8和S100A9水平与SNAP-Ⅱ评分之间的相关性;多因素Logistic回归分析重症新生儿败血症发生的影响因素;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清CAL、S100A8和S100A9水平对早期新生儿败血症及病情严重程度的诊断价值。结果 对照组、轻症组、重症组患儿血清CAL、S100A8和S100A9水平递增(F=54.894、64.181、67.572,P<0.05);血清CAL、S100A8和S100A9水平联合诊断新生儿败血症的曲线下面积(AUC)为0.956,敏感度为86.44%;与轻症组相比,重症组患儿SNAP-Ⅱ评分、PCT、CRP水平更高,胎龄更低(t=23.398、6.239、7.783、4.457,P<0.05);血清CAL、S100A8和S100A9水平与SNAP-Ⅱ评分均呈正相关(rs=0.441、0.419、0.452,P<0.001);CAL、S100A8和S100A9为重症新生儿败血症发生的危险因素(OR=2.176、1.654、1.812,P<0.05);血清CAL、S100A8和S100A9水平联合诊断重症新生儿败血症的AUC为0.961,敏感度为95.24%。结论 血清CAL、S100A8和S100A9水平对新生儿败血症早期诊断及病情判断具有较高的临床价值。

血清APRIL、SOCS5、S100A9水平与过敏性紫癜患儿西咪替丁疗效的关系

目的分析血清APRIL、SOCS5、S100A9水平与过敏性紫癜患儿西咪替丁疗效的关系。方法将2021年5月至2023年7月我院收治的过敏性紫癜患儿106例作为观察组,同期选择健康患儿100例,作为对照组。检测患儿血清APRIL、SOCS5、S100A9水平。观察组在入院后使用西咪替丁治疗,分析治疗前后血清APRIL、SOCS5、S100A9水平变化,并根据治疗效果分为有效组(n=67)和无效组(n=39)。比较两组患儿血清APRIL、SOCS5、S100A9水平,分析三者与过敏性紫癜患儿西咪替丁疗效的相关性,利用ROC曲线分析三者与过敏性紫癜患儿西咪替丁治疗效果的预测价值。结果与对照组比,观察组治疗前APRIL、SOCS5、S100A9水平较高(P<0.05);观察组患儿治疗后,APRIL、SOCS5、S100A9水平均降低(均P<0.05)。对比有效组和无效组一般资料发现,关节痛、皮疹反复发作、腹痛、HDL、PLT、FIB具有统计学意义(P<0.05)。与有效组相比,无效组血清APRIL、SOCS5、S100A9水平更高(P<0.05)。利用Pearson分析得出,血清APRIL、SOCS5、S100A9水平与过敏性紫癜患儿西咪替丁疗效呈正相关(P<0.05)。Logistic回归分析显示,关节痛、腹痛、皮疹反复发作、FIB、HDL、PLT、APRIL、SOCS5、S100A9是影响过敏性紫癜患儿西咪替丁疗效的危险因素(OR>1)。通过ROC曲线分析显示,血清APRIL、SOCS5、S100A9联合诊断的敏感度高于单项诊断(P<0.05)。结论APRIL、SOCS5、S100A9水平在过敏性紫癜患儿体内呈高表达趋势,其变化与患儿使用西咪替丁治疗的效果相关。APRIL、SOCS5、S100A9水平可以预测患儿的治疗效果,改善患儿预后。

食管上皮发育过程中S100A9、PRXⅥ蛋白表达特征及其与形态变化的关系

目的：探讨钙结合蛋白S100A9和抗氧化蛋白PRXⅥ在不同胎龄胎儿食管上皮中的表达特征及与食管上皮细胞增生和分化的关系。方法：采用免疫组化ABC法结合常规光镜观察检测S100A9、PRXⅥ蛋白在胎儿食管中的表达特征。结果：S100A9在不同胎龄胎儿食管上皮中总阳性率为66%（21/32）,胚胎发育中后期S100A9阳性率明显高于胚胎早期,PRXⅥ总阳性率为72%（23/32）,5-6月胎龄的食管上皮中PRXⅥ阳性率明显高于其它胎龄。结论：胎儿食管上皮中S100A9、PRXⅥ蛋白的表达与胎龄密切相关,提示S100A9、PRXⅥ蛋白的表达可以反映胎儿食管上皮细胞的增生和分化程度。

急性期抑郁症患者外周血S100A8、S100A9、Treg细胞水平与抗抑郁药疗效的关联性

目的 探究急性期抑郁症患者外周血S100钙结合蛋白A8(S100 calcium binding protein A8,S100A8)、S100钙结合蛋白A9(S100 calcium binding protein A9,S100A9)Treg细胞水平与抗抑郁药疗效的关联性。方法 选取2019年7月-2020年7月芜湖市第四人民医院精神科收治的51例抑郁症患者为研究组,选取同期34例体检健康志愿者为对照组。对患者进行12周抗抑郁治疗,采用17项汉密尔顿抑郁量表(HAMD-17)对患者病情严重程度进行评估,根据HAMD-17评分将研究组分为应答组与无应答组,检测两组患者外周血S100A8、S100A9的表达水平与Treg细胞比例,ROC曲线分析用于确定治疗前后S100A8、S100A9、Treg细胞水平对抑郁症治疗效果的评估价值。Logistic分析影响治疗效果的因素。结果 与对照组比较,研究组S100A8、S100A9水平、Treg细胞比例显著升高(P均<0.05)。经过12周抗抑郁治疗,30例患者有应答,21例患者无应答。与无应答组比较,应答组治疗前、后S100A8、S100A9水平、Treg细胞比例及治疗后HAMD-17评分显著降低(P均<0.05)。ROC曲线分析结果显示,S100A8、S100A9水平、Treg细胞水平降低率对于抑郁的治疗效果具有一定评估价值,三者联合的评估效能高于各指标单独评估(P均<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,治疗前后S100A8、S100A9、Treg细胞变化率是影响抑郁症患者治疗效果的独立影响因素(P均<0.05)。结论 血清S100A8、S100A9水平、Treg细胞比例与急性抑郁症患者抗抑郁治疗效果相关,可作为临床治疗效果的评估指标。

S100A9激活NF-кB促进小胶质细胞TLR7表达和炎症因子释放

目的:S100钙结合蛋白A9(S100A9)激活核因子κB(NF-κB)促进小胶质细胞toll样受体7(TLR7)的表达和炎症因子释放的作用及其机制研究。方法:CCK-8实验检测BV2小胶质细胞的增殖率;转录组测序并结合GO分析、KEGG富集分析和STRING数据库对差异基因(DEGs)进行比对并从差异表达基因中筛选出目标基因;Real time RT-PCR验证TLR7的表达;免疫荧光染色检测CD68、CD206的表达;Western Blot检测CD68、CD206、TLR7、p65、p-p65的表达;ELISA检测白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达。结果:中等浓度的S100A9对小胶质细胞无增殖抑制效应;实验组CD68蛋白的表达水平较对照组明显增加,而CD206蛋白的表达水平明显下降,提示S100A9促进BV2小胶质细胞向促炎型激活;Toll样受体4(TLR4)的抑制剂TAK-242明显抑制S100A9刺激BV2小胶质细胞后TNF-α和IL-6的表达水平;TLR4/NF-κB通路激活促进TLR7蛋白表达。结论:中等浓度的S100A9可以促进小胶质细胞向促炎型极化,通过激活TLR4/NF-κB通路促进TLR7表达和包括TNF-α和IL-6在内的多种炎症因子的释放,S100A9具有明显的促炎作用。

D-半乳糖诱导的衰老大鼠心脏S100A8/A9及相关炎症通路基因表达的研究

目的:探讨D-半乳糖(D-Gal)诱导的衰老大鼠模型心脏差异基因表达的变化,并对其中S100钙结合蛋白A8/A9(S100A8/A9)及其下游p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)/核因子κB(NF-κB)通路关键因子进行验证。方法:(1)将8~10周龄SD大鼠随机分为正常对照(control)组和D-Gal组,每组6只。D-Gal组大鼠每天颈背部皮下注射D-Gal(150 mg/kg),control组大鼠注射相同体积的生理盐水。Morris水迷宫检测学习记忆能力;测定血清超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和丙二醛(MDA)水平;超声心动图测定心功能变化;进行心脏HE、Masson、衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)和二氢乙啶染色,并用透射电镜观察线粒体超微结构。转录组测序分析大鼠心脏基因表达差异,qRT-PCR和Western blot检测大鼠心肌组织衰老标志基因、S100A8/A9、p38 MAPK和NF-κB通路相关因子的mRNA和蛋白表达。(2)利用D-Gal(10 g/L)诱导建立H9C2心肌细胞衰老模型,并用S100A8/A9抑制剂帕奎莫德(paquinimod)干预,检测衰老相关指标和S100A8/A9下游炎症通路相关因子的mRNA和蛋白表达。结果:与control组相比,D-Gal组大鼠出现学习记忆能力障碍,血清SOD和CAT水平显著降低(P<0.01);D-Gal组大鼠射血分数和短轴缩短分数显著降低(P<0.01),心肌细胞排列紊乱,纤维断裂和炎性细胞浸润,纤维化面积、SA-β-Gal和活性氧含量均显著增加,线粒体结构发生变化,且细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂1A(CDKN1A)、CDKN2A和P53的mRNA表达较control组也显著上调(P<0.01);转录组测序分析显示,S100A8和S100A9的mRNA和蛋白水平在衰老大鼠心脏中显著上调,同时p38 MAPK和NF-κB磷酸化蛋白水平及白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6和肿瘤坏死因子α等炎症因子的mRNA表达水平也显著升高(P<0.05或P<0.01)。D-Gal持续刺激可诱导H9C2细胞衰老,伴随S100A8/A9的表达增高,而paquinimod可显著减少D-Gal诱导的心肌细胞SA-β-Gal阳性率和衰老标志基因表达,并抑制p38 MAPK和NF-κB磷酸化活化及下游炎症因子表达(P<0.05或P<0.01)。结论:S100A8和S100A9通过诱导p38 MAPK/NF-κB炎症通路激活,促进心肌细胞炎症,从而参与D-Gal诱导的大鼠心脏衰老过程。

重症肺炎支原体肺炎患儿血清IL-17A、S100A8、S100A9表达及在预后判断中的意义

目的探讨血清白细胞介素(IL)-17A、钙结合蛋白S100A8及S100A9在重症肺炎支原体肺炎(SMPP)患儿中的表达及在预后判断中的意义。方法选取2019年3月至2021年3月该院诊治的116例SMPP患儿为SMPP组。根据小儿危重病例评分将SMPP患儿分为非危重组(43例),危重组(40例),极危重组(33例)。根据入院治疗28 d的预后情况将SMPP患儿分为预后良好组(82例)和预后不良组(34例)。以同期该院的60例体检健康儿童为对照组。检测各组血清IL-17A、S100A8、S100A9、降钙素原(PCT)、C反应蛋白(CRP)、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平,采用Pearson相关分析血清IL-17A、S100A8、S100A9水平与PCT、CRP、IL-6、TNF-α的相关性,采用多因素Logistic回归分析影响SMPP患儿预后不良的因素,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析各指标对SMPP患儿预后不良的预测价值。结果SMPP组血清IL-17A、S100A8、S100A9、PCT、CRP、IL-6、TNF-α水平明显高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。SMPP患儿血清IL-17A、S100A8、S100A9水平与PCT、CRP、IL-6、TNF-α均呈正相关(P<0.05)。极危重组血清IL-17A、S100A8、S100A9水平高于危重组及非危重组,差异均有统计学意义(P<0.05)。血清IL-17A、S100A8、S100A9水平升高是影响SMPP患儿预后不良的独立危险因素。血清IL-17A、S100A8、S100A9联合预测SMPP患儿预后不良的曲线下面积(AUC)为0.895,高于血清IL-17A、S100A8、S100A9单独检测的AUC(0.833、0.764、0.810),差异均有统计学意义(Z=3.780、6.723、5.012,P<0.05)。3项指标联合检测的灵敏度和特异度分别为0.891、0.755。结论SMPP患儿血清IL-17A、S100A8、S100A9水平升高,与SMPP病情严重程度有关,3项指标联合检测对评估SMPP预后不良具有较高的预测价值。

养心生脉颗粒对气虚血瘀型缺血性心力衰竭患者心功能及血清S100钙结合蛋白A8/A9复合物、核因子-κB、晚期糖基化终末产物受体、高迁移率族蛋白1的影响

目的探讨养心生脉颗粒治疗气虚血瘀型缺血性心力衰竭(ischemic heart failure,IHF)的临床效果,及对心功能、血清S100钙结合蛋白A8/A9复合物(serum S100 calcium-binding protein A8/A9 complex,S100A8/A9)、核因子(nuclear factor,NF)-κB、晚期糖基化终末产物受体(receptor of advanced glycation endproducts,RAGE)及高迁移率族蛋白(highmobility group protein,HMG)B1水平的影响。方法选择我院心内科自2017年3月至2019年3月收治的102例IHF患者作为研究对象,分为对照组(常规西医治疗)及观察组(常规西医治疗+养心生脉颗粒),每组51例,疗程均为3个月。观察两组临床疗效及用药安全性,比较中医证候评分、6 min步行试验(6 minute walking test,6MWT)、明尼苏达州心功能不全生命质量量表(Minnesota living with heart failure questionnaire,MLHF-Q)评分、心排血量(cardiac output,CO)、左室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF)、左室收缩末期内径(left ventricular end-systolic diameter,LVESD)、左室舒张末期内径(left ventricular end-diastolic diameter,LVEDD)、心率变异性(heart rate variability,HRV)参数、血浆脑钠肽(brain natriuretic peptide,BNP)、血清S100A8/A9、NF-κB、RAGE及HMGB1水平。结果观察组总有效率高于对照组(94.12%vs 80.39%,P<0.05)。观察组中医证候积分、MLHF-Q评分低于对照组,6MWT高于对照组(P<0.05)。观察组LVEF、CO及HRV参数高于对照组,LVESD、LVEDD及血浆BNP水平低于对照组(P<0.05)。观察组血清S100A8/A9、NF-κB、RAGE、HMGB1水平低于对照组(P<0.05)。两组不良反应发生率差异无统计学意义(7.84%vs 9.80%,P>0.05)。结论养心生脉颗粒对气虚血瘀型IHF疗效显著,能有效改善临床症状、心功能及生活质量,可在一定程度上延缓心室重构进程,改善血清S100A8/A9、NF-κB、RAGE及HMGB1水平。

肾消康对糖尿病肾病大鼠肾组织基因S100A9表达的影响

目的观察中药复方肾消康对糖尿病肾病(DN)大鼠的防治作用及对肾脏基因表达的影响,探讨糖尿病肾病的发病机制,揭示中药复方肾消康防治DN的作用机理,筛选药效作用靶点,为临床推广应用提供科学依据。方法实验采用链脲佐菌素(STZ)加高热量饮食建立糖尿病大鼠肾脏损伤模型。运用放免、生化、光镜、电镜及美国Affymetrix公司的基因表达谱芯片、RT-PCR等先进检测手段和方法,观察了多项指标,尤其是通过聚类分析寻找和DN有重要相关性的基因,并进一步采用实时荧光定量RT-PCR法做验证实验研究。结果 S100钙结合蛋白A9(S100A9),在糖尿病大鼠肾脏表达上调,肾消康治疗组表达下调。结论应用Affymetrix Rat2302.0基因表达谱芯片检测糖尿病大鼠肾脏基因的表达,S100A9是筛选出的肾脏差异表达基因和药效靶点之一,并对该基因做荧光定量RT-PCR测序分析,这在国内外尚属首次。基因功能分析表明,在糖尿病状态下,S100A9表达上调,与糖尿病肾脏损伤有重要相关性,而经肾消康治疗后大鼠肾脏组织中S100A9表达下调,可见肾消康对S100A9基因表达具有良性调节作用,其作用机制还有待于进一步研究。

血清S100A4、S100A9、P-selectin在心力衰竭患者中的表达及与预后的相关性

目的 探讨血清钙结合蛋白A4(S100A4)、血清钙结合蛋白A9(S100A9)、P-选择素(P-selectin)在心力衰竭(简称心衰)患者中的表达情况及其与预后的相关性。方法 选择2017年9月至2021年2月西安市儿童医院心内科收治的心衰患者92例作为心衰组,同期选择在该院体检中心经询问病史及检查证实的除外心衰的体检者92例作为对照组。检测两组血清S100A4、S100A9、P-selectin表达水平,随访心衰患者预后情况,并分析S100A4、S100A9、P-selectin水平与预后的相关性。采用受试者工作特征(ROC)曲线及各指标对预后不良的预测价值,采用Cox比例风险回归模型分析心衰患者预后的影响因素。结果 心衰组血清S100A4、S100A9水平低于对照组,血清P-selectin水平高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。随访6个月,心衰组患者预后不良10例,发生率为10.9%。Spearman分析显示,预后不良与S100A4、S100A9、P-selectin水平存在相关性(P<0.001)。S100A4、S100A9、P-selectin及三者联合预测心衰预后不良的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.686、0.697、0.672和0.718。Cox比例风险回归模型分析显示,S100A4、S100A9、P-selectin均为心衰患者预后的影响因素(P<0.05)。结论 心衰患者多伴随有血清S100A4、S100A9的高表达与P-selectin的低表达,与心衰患者的预后存在相关性,可有效预测患者预后情况。