甲状旁腺素、维生素D_3对Caco-2细胞钙结合蛋白D9k mRNA表达的影响

目的 探讨甲状旁腺素（PTH）对小肠细胞钙结合蛋白（CaBP）D9k mRNA表达的影响以及探讨PTH是否影响1，25-（OH）2-D3，对Caco-2细胞钙结合蛋白D9k mRNA表达的促进作用。方法 以人结肠癌上皮细胞株caco-2细胞作为小肠细胞体外模型，PTH分三个剂量：10^-8、10^9和10^-12。mol／L分别干预Caco-2细胞5、10、20、40和80min；10^-8mol/L 1，25-（OH）2，-D3，干预Caco-2细胞2、4、8、16和24h，溶剂时照为0．1％乙醇；10^-8mol／L 1，25-（OH）2，-D3，联合以上三剂量PTH干预Caco-2细胞2、4、8、16和24h，溶剂对照亦为0．1％乙醇。运用RT-PCR方法 进行CaBP-D9k mRNA测定，以GAPDH作为内对照。结果 10^-8mol／LPTH作用20rain，10^12mol／L作用10min，CaBP-D9k mRNA表达量高于空白组，其余时间点低于空白组；10^-8mol／L 1，25-（OH）2．D，干预Caco-2细胞2、4、8、16和24h，CaBP．D9kmRNA的表达均高于溶剂对照（0、1％乙醇）；与10^-8mol／L1，25．（OH）2-D3单独作用比较，10^-8mo/L 1，25-（OH）2-D3，联合以上三剂量PTH作用，CaBP-D9k mRNA相对表达量均低于单独作用的表达量。结论 10^-8mol／L、10^-12mol/L PTH可能促进Caco-2细胞CaBP-D9k mRNA瞬时（1～20min）合成增加；10^-8mol／L 1，25-（OH）2，-D3，可明显诱导Caco-2细胞CaBP-D9k mRNA的表达；PTH可能抵消或者抑制1，25-（OH）2，-D3，促进Caco-2细胞CaBP-D9k mRNA表达的作用。

甲氧滴滴涕对小鼠着床期子宫钙结合蛋白D9k基因表达的影响

目的:研究甲氧滴滴涕(MXC)对小鼠着床期子宫钙结合蛋白D9k(Calbindin-D9k)基因表达的影响.方法:将真孕及假孕小鼠于孕1～3 d(发现阴栓为孕0日)每日给予不同剂量的MXC(0,100,250,500 mg/kg)灌胃,对照组(MXC 0mg/kg)只给芝麻油溶剂.采用RT-PCR检测各组孕鼠子宫Calbindin-D9k基因mRNA的表达;免疫组化染色和图像分析技术检测Calbindin-D9k蛋白表达.结果:①孕鼠经MXC染毒3 d后,250,500 mg/kg MXC组孕鼠子宫Calbindin-D9kmRNA的表达量与对照组相比有显著降低(P<0.05),然而,100 mg/kg MXC组Calbindin-D9k mRNA的表达与对照组相比虽有所减低,但无统计学意义(P>0.05);②Calbindin-D9k蛋白在孕5日主要表达在子宫内膜上皮细胞和腺上皮细胞.与mRNA的表达水平一致,250,500 mg/kg MXC组孕鼠子宫Calbindin-D9k蛋白的表达量与对照组相比显著降低(P<0.05),而100 mg/kg MXC组Calbindin-D9k蛋白的表达与对照组相比无明显差异(P>0.05).结论:MXC可以降低小鼠着床期子宫Calbindin-D9k基因的表达,这可能是其干扰胚胎着床的一个毒性机制.

甲状旁腺素和活性维生素D在调节肾脏钙结合蛋白中的协同作用

目的:明确甲状旁腺素(PTH)和1,25-二羟维生素D3[1,25(OH)2D3]在调节肾脏钙结合蛋白中的各自和协同作用。方法:采用免疫组织化学方法观察PTH基因敲除、1α羟化酶基因敲除及双基因敲除对钙结合蛋白D28K和D9K在小鼠肾脏不同部位表达的影响。结果:钙结合蛋白D28K和D9K均定位于肾脏皮质远曲小管及髓质集合管上皮细胞的胞浆内。两种钙结合蛋白在PTH基因敲除小鼠肾脏的表达均明显减少。它们的减少在1α羟化酶基因敲除小鼠更为明显,而以双基因敲除小鼠最为显著。结论:PTH和活性维生素D均能调节钙结合蛋白在肾脏的表达,而且两者具有协同作用。

低饲粮阴阳离子差协同维生素D对黔北麻羊妊娠母羊血浆钙及其调控因子浓度的影响

本文旨在研究低饲粮阴阳离子差(DCAD)条件下添加维生素D对黔北麻羊妊娠母羊血浆钙及其调控因子浓度的影响。将18头健康妊娠母羊随机分为3组,每组6个重复,每个重复1只羊,各组分别饲喂DCAD为212.4(对照)、-145.5(Ⅰ)、-145.5 mmol/kg(Ⅱ)(干物质基础,实测值)的饲粮。其中,对照组饲喂基础饲粮,Ⅰ组在对照组基础上添加45g/d六水合氯化镁,Ⅱ组在Ⅰ组基础上添加2 000IU/d维生素D。预试期10d,正试期30d。结果表明:1)Ⅰ、Ⅱ组尿液pH显著低于对照组(P<0.05)。3组山羊生长性能不受饲粮处理的影响(P>0.05)。2)与对照组相比,Ⅰ(P>0.05)、Ⅱ组(P<0.05)血浆钙浓度均升高;对照组、Ⅰ、Ⅱ组血浆磷、甲状旁腺激素、降钙素浓度没有显著差异(P>0.05),Ⅱ组较Ⅰ组和对照组显著提高了血浆1,25二羟基维生素D3浓度(P<0.05)。3)Ⅱ组血浆维生素D受体、钙结合蛋白D9k浓度显著高于对照组(P<0.05)。在本试验条件下,在低DCAD条件下添加维生素D能更有助于维持动物血液钙恒稳状态。