膜片钳研究中的钙耐受大鼠心肌细胞分离方法(英文)

目的 :探讨膜片钳实验中大鼠心肌细胞分离过程中影响细胞活性和钙耐受性的各种影响因素。方法 :采用Langendorff灌流 ,先用台氏液灌流 30s ,再用无钙台氏液灌流 5～ 7min ,其后换含胶原酶Ⅰ 0 .1～ 0 .2g/L的低钙酶液消化约 8～ 30min ,最后用无钙台氏液冲洗心脏 2min ,剪下心肌组织 ,KB液中 37℃剪碎吹打温育 5min后 ,用 2 0 0μm筛网过滤 ,室温静置换液后进行膜片钳实验。 结果 :注意控制水 ,酶 ,温度等各种因素后 ,可得到杆状、横纹清晰、膜良好的耐钙心肌细胞。结论 :大鼠心肌细胞分离过程中各种因素控制好后可以保证一定的细胞成活率及其质量 。

钙耐受大鼠心肌细胞分离方法研究

目的:探讨钙耐受大鼠心肌细胞的快速、高效分离方法。方法:采用自行改进的Langendorff心脏灌流装置,逆行主动脉恒流灌注获得单个耐钙心肌细胞,KB液温育后以全细胞膜片钳方式记录离子流。结果:分离所得70%存活心肌细胞有80%为钙耐受心肌细胞,可记录到典型的瞬时外向钾电流。结论:根据灌注压力变化掌握消化时间,控制好细胞分离过程的各种因素,能够获得大量具有正常电生理特性的钙耐受心肌细胞。

钠钾镁钙葡萄糖注射液补液量与鼻咽癌同步放化疗患者癌因性疲乏、抑郁情绪及耐受性的相关性

目的探讨钠钾镁钙葡萄糖注射液补液量对鼻咽癌同步放化疗患者癌因性疲乏、抑郁情绪及耐受性的影响。方法选择我院2012年6月至2015年8月收治的鼻咽癌患者90例作为研究对象,根据随机数字表将入选患者分为观察组(n=47)与对照组(n=43)。两组鼻咽癌患者均同步每周1次顺铂化疗,共7周,顺铂化疗当日补液量均为2500 m L,其中观察组含钠钾镁钙葡萄糖注射液1000 m L,对照组则为常规5%葡萄糖氯化钠注射液。比较两组患者癌因性疲乏(应用CFS量表评估)、抑郁情绪(用SDS量表评估)、耐受性及生活质量(应用QLQ-C30量表评估)。结果观察组化疗1、3、5、7周时的CFS评分均低于对照组,化疗5周及7周时观察组SDS评分均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组化疗总中断率为4.3%,低于对照组20.9%,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组出院时的功能量表总分与总体健康状况评分均高于对照组,症状量表总分与单项条目总分低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论鼻咽癌同步顺铂化疗进行治疗患者化疗期间补充钠钾镁钙葡萄糖注射液可最大限度改善患者对肿瘤化疗患者癌因性疲乏、抑郁情绪,提高患者耐受性,临床价值显著。

在钙离子敏感性方面与RCH1遗传互作的酿酒酵母基因的筛选

酿酒酵母ScRCH1是白念珠菌CaRCH1的同功基因,作为人体溶质转运蛋白SLC10A7的同源蛋白,两者都是细胞质膜上钙离子内流的抑制因子。为了研究酿酒酵母RCH1与基因组中其他基因之间的遗传互作,利用合成遗传阵列(Synthetic Genetic Array,SGA)方法构建了RCH1分别与其他非必需基因之间的双基因缺失株文库。钙离子表型筛选表明RCH1与17个基因之间存在遗传互作,其中4个基因BUD9、THR1、RAS2和CPR7在钙离子敏感性方面的功能以前没有报道过。这些结果为深入研究Rch1对钙离子稳态的调控提供了参考。