限制性酶解—钙融合制备高钙豆粉的工艺研究

以传统湿法工艺技术制备豆粉为基础,利用木瓜蛋白酶和风味蛋白酶复合酶对豆乳进行酶解处理并混入Ca CO3以提高豆乳粉的钙融合性。在单因素试验基础上,采用响应面优化分析法对限制性酶解—钙融合制备高钙豆乳粉工艺进行优化,确定最优限制性酶解—钙融合工艺参数为酶解时间1.56 h、酶添加量1.59%、均质压力29.18MPa、均质时间9.55 min,此条件下蛋白质分散指数为80.02%、可溶性钙结合量为1.85 mg/g。

椎弓根固定联合可诱导冻干脱钙骨复合自体骨植骨融合对TLBF的近远期效果分析

目的探讨胸腰段脊柱爆裂性骨折(TLBF)应用椎弓根固定与可诱导冻干脱钙骨颗粒(DBM)复合自体骨植骨融合(ABGF)联合治疗的远近期效果。方法回顾性分析2017年1月-2018年8月长江航运总医院收治的且至少随访1年以上的TLBF 76例患者临床资料,根据治疗方法不同分为观察组与对照组,其中接受椎弓根固定治疗36例为对照组,而加用可诱导冻干DBM复合ABGF联合治疗的40例为观察组。评价术后1个月、6个月、12个月时JOA评分,调查术前、术后6个月、术后12个月时Cobb角、伤椎前缘高度、伤椎中部高度,记录并发症,并比较。结果观察组术后1个月、6个月、12个月时JOA评分明显低于对照组(P<0.05);组间术前Cobb角、伤椎前缘高度、伤椎中部高度对比均无显著差异(P>0.05),术后6个月、12个月时观察组Cobb角更低,而伤椎前缘与中部高度更高,与对照组差异显著(P<0.05);两组并发症率无显著差异(P>0.05)。结论TLBF应用椎弓根固定与DBM复合ABGF联合治疗,相比单纯椎弓根固定治疗,可减少并发症发生,更好地改善JOA评分,以及Cobb角、伤椎高度,值得应用。

分析椎弓根固定联合脱钙骨基质材料复合自体骨植骨融合对胸腰段脊柱爆裂性骨折患者临床疗效及并发症影响

目的探讨椎弓根固定联合脱钙骨基质材料复合自体骨植骨融合治疗胸腰段脊柱爆裂性骨折(thoracolumbar burst fracture,TLBF)的临床疗效及对并发症的影响。方法选取该院自2016年1月—2021年1月期间收治入院并行手术治疗的TLBF患者48例,按照随机数字表法分两组,各24例,对照组予以椎弓根固定治疗,观察组予以椎弓根固定联合脱钙骨基质材料复合自体骨植骨融合治疗。观察效果及并发症。结果观察组术后1、3、6个月JOA评分分别为(22.39±3.09)分、(15.64±2.30)分、(10.35±1.94)分,低于对照组(24.84±3.11)分、(18.37±2.24)分、(13.88±1.76)分,差异有统计学意义(t=2.738、4.166、6.602,P<0.05)。术后6个月随访,观察组伤椎前缘高度(2.64±0.39)cm,伤椎中部高度(2.59±0.21)cm,高于对照组的(2.12±0.21)cm、(2.18±0.19)cm,差异有统计学意义(t=5.751、7.093,P<0.001);两组患者Cobb角均有所改善,且观察组Cobb角为(13.68±3.79)°,低于对照组(16.34±3.06)°,差异有统计学意义(t=2.675,P=0.010)。两组术后并发症总发生率差异无统计学意义(P>0.05)。结论椎弓根固定联合脱钙骨基质材料复合自体骨植骨融合治疗可促进伤椎前缘及中部高度恢复,有效改善术后胸腰椎功能,且术后并发症发生率低。

不同方法制备脂质体^(125)I-IL-8包封率的比较

本文用四种不同的方法制备脂质体 ,同时包裹12 5I -IL - 8。对不同方法制备的脂质体包裹12 5I -IL - 8的包封率进行对比。结果表明 :机械分散法、钙融合法、反相蒸发法制备的脂质体对12 5I -IL - 8的包封率依次增大。而用反相蒸发法和钙融合法联合制备的脂质体对12 5I -IL -

P19胚胎癌细胞体外定向心肌细胞分化模型的构建

目的：如何在体外将胚胎干细胞培育转化为大量的心肌细胞并进行移植,使之成为具有成熟心肌细胞功能？实验采用不同诱导剂对P19胚胎干细胞进行诱导,拟构建体外定向心肌细胞分化模型。方法：实验于2006-09/2007-03在日本东京工业大学生体分子机能工学研究室完成。①材料：P19细胞由日本东北大学加龄医学研究所提供。钙粘素融合蛋白N-cad-Fc由本研究室合成。②实验方法：P19细胞按1×10^7L^-1密度接种进行悬浮培养,分别以终浓度1,5,10,50,100nmol/L视黄酸及0.5%、0.75%、1%、1.25%、1.5%二甲基亚砜各自诱导4d,将形成的细胞聚集体分别接种于预铺有0.1%明胶、2.5mg/LN-cad-Fc、10mg/LN-cad-Fc基质的24孔板中培养10d。③实验评估：观察不同诱导条件及不同基质上的细胞跳动情况,免疫荧光染色检测心肌特异性蛋白TroponinT的表达,RT-PCR法检测心肌细胞标志性基因cardiacactin、gata-4的表达。结果：①P19细胞经1,5,10nmol/L视黄酸或0.5%、0.75%、1%二甲基亚砜诱导后,均出现可自主节律跳动的细胞。P19细胞聚集体悬浮培养至20d,预铺有0.1%明胶、2.5mg/LN-cad-Fc及10mg/LN-cad-Fc基质的培养板上节律跳动细胞团的出现率分别为44.6%、71.3%和70.1%。②药物诱导后,P19细胞心肌特异性蛋白TroponinT呈阳性表达。③与传统预铺有明胶的培养板比较,在预铺有N-cad-Fc的培养板上心肌标志性基因cardiacactin、gata-4的表达均明显升高,但10mg/LN-cad-Fc的表达量略低于2.5mg/LN-cad-Fc。④分别在上述不同基质上单层培养的P19细胞,二甲基亚砜诱导14d后均仍呈上皮样细胞形态,未见跳动细胞出现,RT-PCR检测无心肌标志性基因表达。结论：①使用0.5%～1%二甲基亚砜或1～10nmol/L视黄酸可成功诱导P19细胞心肌分化,心肌特异性蛋白TroponinT的表达早于心肌跳动的出现。②作为一种基质模型来模拟细胞间黏附,2.5mg/LN-cad-Fc是较适宜P19细胞心肌分化的条件。③P19细胞心肌分化有赖于药物诱导和细胞成团的共同作用,细胞间黏附分子对其分化有促进作用。

腺病毒-阴离子脂质体复合物的制备和体外表征

为了制备腺病毒-阴离子脂质体复合物(AL-Ad5),首先利用HEK 293细胞大量扩增了带有绿色荧光蛋白报告基因的重组腺病毒,并以氯化铯两步密度梯度离心法进行纯化,再通过细胞病变效应(CPE)法、壳蛋白免疫法和定量聚合酶链反应(Q-PCR)法分别测定腺病毒滴度。以中心组合设计法优化处方和制备条件,通过钙离子融合法制备目标复合物AL-Ad5,以透射电镜和动态光散射法分别对其外观形态、粒径和zeta电位进行考察;并制备双色荧光标记的复合物,通过激光共聚焦技术观察该复合物被MDCK细胞摄取后的胞内定位,以考察阴离子脂质体对腺病毒的包合情况。结果表明,目标复合物分布均匀,粒径和zeta电位分别为(211±10)nm和(-41.2±2.2)mV。激光共聚焦实验结果表明,红色荧光标记的腺病毒和绿色荧光标记的脂质体在MDCK细胞内的定位一致。由此说明,阴离子脂质体能够较好地包裹腺病毒以形成腺病毒-阴离子脂质体复合物。