血管紧张素Ⅱ-醛固酮诱导肾性高血压大鼠心肌肥厚发生:钙调神经磷酸酶抑制因子的作用

目的:探讨一肾一夹肾性高血压大鼠模型中,心肌组织中钙调神经磷酸酶(CaN)抑制因子(calcineurin-inhibi-tor,Cain)表达的变化,以及血浆中相关活性因子的变化。方法:将21只健康雄性Wistar大鼠,随机分为3组(n=7),即假手术组、手术组(通过一肾一夹法复制肾性高血压大鼠)及螺内酯组:以螺内酯20 mg/(kg.d)灌胃;实验14 d后,大鼠称质量后抽血处死,分别计算左心室质量(LVW)、全心质量(HW)以及二者与体质量(BW)的比值。采用放射免疫测定法检测血浆醛固酮(Ald)及血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)的含量。以蛋白印迹杂交的方法,测定心肌组织中Cain表达的变化。结果:与假手术组比较,手术组大鼠的LVW/BW及HW/BW比值显著增加(P<0.05)、血浆Ald和AngⅡ的水平、及Cain的表达的显著增加(P<0.01);而与手术组比较,螺内酯组大鼠的LVW/BW比值显著减少(P<0.05)、血浆AngⅡ的水平及Cain的表达均显著减少(P<0.01)。结论:通过一肾一夹手术,诱导机体内源性Ald和AngⅡ增加,导致大鼠心肌肥厚反应的发生。同时,机体内源性Cain表达的增加,以抑制CaN信号通路介导的心肌肥厚反应。螺内酯通过阻断Ald与其受体结合,可以抑制心肌肥厚的发生。

钙调神经磷酸酶抑制因子在肾性高血压大鼠心肌肥厚的信号转导

目的:探讨一肾一夹肾性高血压大鼠模型中,心肌组织钙调神经磷酸酶(CaN)抑制因子(Cain)表达及血浆相关活性因子的变化.方法:健康雄性Wistar大鼠,随机分为3组(n=7),①假手术组;②手术组:通过一肾一夹法复制肾性高血压大鼠;③环孢素A(CsA)组:CsA5 mg/(kg.d)皮下注射;实验14 d后,大鼠称质量后抽血处死,分别计算左心室质量(LVW)及全心质量(HW)与体质量(BW)的比值,通过放免方法测定血浆醛固酮(Ald)及血管紧张素II(AngII)含量,运用蛋白印记杂交的方法,测定心肌组织Cain表达的变化.结果:手术组与假手术组比较,LVW/BW及HW/BW显著增加,血浆Ald和AngⅡ水平明显增加,CaN活性增加,Cain的表达显著增加(P<0.05);而CsA组与手术组比较,LVW/BW及HW/BW下降,血浆AngⅡ和Ald水平显著下降,CaN活性减低,Cain的表达显著减少(P<0.05).结论:一肾一夹手术可以诱导大鼠血浆Ald和AngII水平增加,通过CaN依赖的信号转导通路,诱导心肌肥厚反应的发生.同时,机体内源性Cain的表达的变化,受到CaN信号转导系统调控.

醛固酮调控大鼠心肌钙调神经磷酸酶抑制因子的机制

目的:通过皮下注射醛固酮(A ld),诱导大鼠心肌肥厚反应发生,采用蛋白印记杂交的方法,观察心肌组织钙调神经磷酸酶(CaN)抑制因子(Cain)表达的变化。方法:健康雄性W istar大鼠,随机分为3组(n=7),①正常对照组;②心肌肥厚组:皮下注射A ld 18μg.d-1,连续14 d;③螺内酯组:皮下注射A ld 18μg.d-1,同时给予螺内酯20mg.kg-1.d-1灌胃,亦连续14 d。采用大鼠尾动脉法测量平均动脉压,称重后抽血处死,分别计算左心室质量(LVW)及全心质量(HW)与体质量(BW)的比值。通过放免方法测定血浆A ld含量,运用蛋白印记杂交的方法,测定Cain表达的变化。结果:心肌肥厚组与正常对照组比较,BP显著升高,LVW/BW及HW/BW比值显著增加,血浆A ld增加,CaN活性增加,Cain的表达显著增加;而螺内酯组与心肌肥厚组比较,LVW/BW及HW/BW比值下降,血浆A ld增加,CaN活性减低,Cain的表达显著减少,而BP无明显变化。结论:外源性醛固酮可通过CaN依赖的信号转导通路诱导心肌肥厚反应的发生。同时,机体内源性Cain的表达的变化,受到CaN信号转导系统调控。

新型钙调神经磷酸酶抑制药伏环孢素临床研究进展

伏环孢素是一种口服新型钙调神经磷酸酶抑制药,是环孢素A的衍生物,主要用于治疗自身免疫性疾病,如银屑病、非感染性葡萄膜炎和器官移植后排斥反应。2021年1月,基于两个Ⅱ期和Ⅲ期临床试验的积极结果,FDA批准伏环孢素与标准治疗方案联合用于治疗成人活动性狼疮肾炎。目前,也有研究在探索伏环孢素用于新型冠状病毒感染的肾移植患者。本文对伏环孢素的作用机制、药动学和药效学、用法用量、联合用药和疾病中应用进行归纳总结,为其临床用药提供参考。

钙调磷酸酶抑制剂预防经内镜逆行胰胆管造影术后胰腺炎的研究进展

急性胰腺炎是经内镜逆行胰胆管造影(ERCP)术后最常见的不良事件,尽管使用了多种预防性措施,其仍是临床面临的一个棘手问题。近年来,钙调磷酸酶在胰腺炎发病机制中的作用受到关注,其特异性抑制剂为ERCP术后胰腺炎的预防提供了新的很有前景的方向。本文就近年来钙调磷酸酶及其抑制剂与ERCP术后胰腺炎预防相关的基础和临床研究进展作一综述,以期为后续研究提供更多思路。

钙调磷酸酶抑制剂长期治疗对Ⅴ型狼疮性肾炎患者肾功能的影响

目的:回顾性分析长期使用钙调磷酸酶抑制剂(CNI)对膜性狼疮性肾炎(MLN)患者的临床疗效及对血清肌酐(SCr)的影响。方法:收集2010年1月至2020年1月在国家肾脏疾病临床医学研究中心确诊为MLN的患者。根据CNI使用情况,分为长期治疗组、短期治疗组及未使用CNI组。观察CNI诱导期疗效,并比较三组患者基线临床病理特点及治疗期间SCr变化情况。结果:本研究共纳入456例MLN患者。平均随访78月,累积411例(90.1%)患者获得肾脏缓解,有297例患者使用CNI诱导治疗,缓解率84.2%。长期治疗组患者肾病综合征患者占比(P<0.001)、尿蛋白定量(P<0.001)、估算的肾小球滤过率(eGFR)(P<0.001)及血红蛋白(P=0.033)及总胆固醇(P=0.001)高于其他组,而年龄(P<0.001)、血清白蛋白(P<0.001)及球蛋白(P<0.001)更低;未使用CNI组的肾小球球性硬化比例(P=0.011)及慢性指数(P=0.016)更高,三组患者其他基线特征无统计学差异。至随访末,SCr较基线增高30.4%,三组SCr分别升高22.0%(67.18μmol/L vs 55.69μmol/L)、35.2%(76.02μmol/L vs 56.58μmol/L)和38.9%(92.82μmol/L vs 66.3μmol/L),三组SCr的增长率无统计学差异。结论:CNI诱导治疗MLN临床缓解率高,长期使用对SCr影响小。

钙调神经磷酸酶信号通路相关抑制因子研究进展

钙调神经磷酸酶(calcineurin,CaN)信号通路是介导心肌肥厚的一条重要通路,随着研究的不断深入, 其相关抑制因子的研究也受到了更多关注.综述了Ca2+CaN-NFAT信号通路上、下游及CaN本身的部分抑制因子在抗心肌肥大过程中的作用,这些因子的研究开发对心肌肥厚的治疗具有重要意义.

钙调磷酸酶抑制剂致肾损伤的研究进展

钙调磷酸酶抑制剂(CNI)是一类应用广泛的免疫抑制剂,临床常用的有环孢素A和他克莫司。CNI通过抑制T细胞的活化、诱导T细胞凋亡及抑制多种免疫因子的表达等方式发挥免疫抑制作用,对系统性红斑狼疮、膜性肾病等自身免疫疾病有着显著的治疗效果。同时,CNI也存在致肾损伤的毒副作用。CNI可通过激活肾素-血管紧张素-醛固酮系统、破坏肾脏局部血管活性物质的平衡、促进氧化应激等多种方式对肾小球、肾小血管和肾小管及肾间质产生不同程度的损伤。尿视黄醇结合蛋白等生物标志物可能对早期检测CNI所致的肾损伤具有一定价值。钙离子通道拮抗剂则被认为是减轻CNI所致肾损伤的有效手段。本文旨在为应对CNI所致肾损伤提供理论依据和防治思路,促进临床中合理、安全地使用CNI。

钙调神经磷酸酶介导碱性成纤维细胞生长因子诱导的大鼠心肌细胞肥大

目的 :观察钙调神经磷酸酶 (calcineurin ,CaN)在碱性成纤维细胞生长因子 (basicfibroblastgrowthfactor,bFGF)诱导心肌细胞肥大中的作用。方法 :在原代培养的大鼠心肌细胞上 ,应用双波长荧光光度计检测心肌细胞游离Ca2 +浓度 ;应用对硝基苯磷酸 (p nitrophenylphosphate,PNPP)作底物测定CaN活性 ;根据3H 亮氨酸参入水平评估各种信号通路阻断剂对bFGF刺激的心肌细胞蛋白质合成速率的影响。结果 :bFGF刺激心肌细胞 2 4h后 ,胞内游离Ca2 +浓度较对照组增高 2 72 % (P <0 .0 1) ;同时 ,bFGF刺激的心肌细胞CaN活性较对照组增高 173 %(P <0 .0 1)。bFGF( 6 0 μg·L-1)刺激的心肌细胞3H 亮氨酸参入较对照组增高 10 6 % (P <0 .0 1) ;CsA( 0 .1～ 10 μmol·L-1)可以浓度依赖的方式抑制bFGF刺激的心肌细胞3H 亮氨酸参入。此外H7(PKC抑制剂 )和 5 0 μmol·L-1PD980 59(MAPK抑制剂 )亦可完全阻断bFGF刺激的心肌细胞3H 亮氨酸参入。结论 :Ca2 +/CaN信号通路参与bFGF诱导心肌细胞肥大的信息传递。另外 。

钙调磷酸酶-活化T细胞核因子信号通路抑制剂的研究进展

钙调磷酸酶(Ca N)是人体免疫调节中的关键酶,其最重要的靶标蛋白是活化T细胞核因子(NFATc)。Ca N抑制剂(CNI)如环孢素A和他克莫司的免疫抑制作用的发现克服了器官移植中的免疫排斥难题,使器官移植发生了根本性的改变,迄今这两种药物仍然广泛应用于临床和基础研究,但严重的肾毒性和神经毒性也限制了它们在临床上的使用。因此,查找新的特异性更高、在临床上副作用更小的CNI是一个研究热点。本文从药物-亲和素复合物阻断底物、直接抑制Ca N活性和特异性干扰Ca N-NFATc相互作用三方面对最近几十年来天然的和人工合成的CNI作一综述。

钙调神经磷酸酶抑制剂在性器官部位白癜风中的临床疗效及对TNF-α的影响

目的:观察钙调神经磷酸酶抑制剂在性器官部位白癜风患者的临床效果及对机体TNF-α水平的影响。方法:选取2013年8月至2016年8月医院诊治的性器官部位白癜风患者100例,采用随机数字方法分为对照组(n=50)和观察组(n=50)。对照组采用窄谱中波紫外线照射治疗,观察组联合钙调神经磷酸酶抑制剂治疗,采用平衡法利用r技术其对TNF-α水平进行测定,比较两组临床疗效及对TNF-α水平的影响。结果:两组治疗前皮损面积、色素积分差异无统计学意义(P>0.05);观察组治疗后皮损面积、色素积分、首次复色累及照射剂量、治疗次数少于对照组(P<0.05)。观察组治疗后TNF-α水平,显著低于对照组(P<0.05)。观察组治疗后不良反应发生率为6.0%,显著低于对照组的12.0%(P<0.05)。结论:与窄谱中波紫外线照射治疗相比,性器官部位白癜风患者利用钙调神经磷酸酶抑制剂治疗能降低TNF-α水平,值得推广应用。

钙调神经磷酸酶调节因子RCANs的研究进展

钙调神经磷酸酶(calcineurin,CN)作为机体中的一种丝/苏氨酸磷酸酶,在关键的生物学过程中发挥着重要作用.RCANs(regulators of calcineurin)是CN的一类内源调节因子,其家族成员在细胞中能够通过与CN在结构上的相互结合,起到调节CN活性的作用.而近来研究发现,该调节因子还可参与到CN-NFAT信号通路中发挥功能,从而与CN依赖的生理和病理过程的调控密切相关.因此,有必要对RCAN基因、RCANs蛋白与CN的相互作用以及该家族成员在病理条件下的重要功能作一个较为全面的综述,这些基础研究工作的进展将有助于为寻找新的疾病治疗方法和药物开辟新的途径.

钙调神经磷酸酶的抑制参与大鼠心脏缺血后处理的保护作用

目的:研究缺血后处理(I-postC)对缺血/再灌注(I/R)大鼠心肌钙网蛋白(CRT)及其下游钙调神经磷酸酶(CaN)信号转导途径的影响,探讨I-postC保护I/R心脏的机制。方法:采用Wistar大鼠在体心脏I/R模型,检测血流动力学及血浆乳酸脱氢酶(LDH)和肌酸激酶(CK-MB)含量,以TTC法和TUNEL法分别检测心肌梗死面积和细胞凋亡,发色底物法测定心肌CaN活性,免疫印迹法检测心肌组织CaN和CRT蛋白表达。结果:CaN抑制剂环孢霉素A显著缩小I/R所致的心肌梗死面积(P<0.05),抑制细胞凋亡(P<0.01),但对心功能无明显改善(P>0.05);与I/R组比较,I-postC组心功能改善(P<0.01),心肌梗死范围缩小(P<0.01),LDH和CK-MB漏出减少(P<0.01),细胞凋亡率降低(P<0.01),并显著抑制I/R诱导的心肌组织CaN活性升高(P<0.05)及CaN和CRT表达上调(P<0.05),与缺血预处理组比较差异无显著,但对I/R心肌的保护作用强于单纯环孢霉素A组。结论:I-postC至少部分通过抑制CRT-CaN信号途径,减轻大鼠心肌I/R损伤。

醛固酮上调大鼠组织钙调神经磷酸酶活性及抑制血浆一氧化氮水平

目的 研究醛固酮对大鼠重要脏器心、脑、肾、脾、肺和肝脏中钙调神经磷酸酶(CaN)活性及血浆血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、内皮素(ET-1)和一氧化氮(NO)水平的影响，探讨醛固酮在CaN依赖的信号传导通路中的作用。方法 取21只雄性Wistar大鼠随机分为3组：醛固酮(Ald)组(腹腔内注射Ald 18μg／d 4周)、环孢霉素A(CsA)干预组(以Ald处理同时腹腔内给予CsA 5mg／kg·d注射共4周)及正常对照组。采用放免法测定血浆AngⅡ、Ald和ET-1浓度，采用比色测定NO浓度及大鼠各组织器官CaN活性。结果 Ald组大鼠血浆NO_3^-浓度较对照组明显下降(P＜0.05)，CsA干预后血NO_3^-浓度明显回升(P＜0.05)。各组AngⅡ、ET-1浓度无明显变化。Ald组大鼠心、脾、肾、肺、脑和肝脏中CaN活性较正常对照组分别上升147％、65％、38％、100％、43％和50％(均P＜0.05)，CsA干预显著缓解上述组织器官CaN活性的上升(P＜0.05)。结论 醛固酮能上调大鼠重要组织脏器CaN活性并抑制血浆NO水平，可能在激活CaN依赖的信号传导通路中具有重要作用。

钙调神经磷酸酶-T细胞核因子信号通路在应力诱导成肌细胞凋亡中的作用

目的探讨钙调神经磷酸酶(CaN)-T细胞核因子(NFAT)信号通路在应力介导的成肌细胞凋亡中的作用。方法构建成肌细胞体外培养—力学刺激模型,利用多通道应力加载系统对细胞加载不同时间的周期性张应力,加入CaN的特异性抑制剂环孢素(CsA)作为对比。采用Hoechst 33258染色法和流式细胞术检测成肌细胞凋亡情况,实时聚合酶链式反应检测CaN和NFAT mRNA的表达情况,蛋白质印迹法检测NFAT3的蛋白含量。结果随加力时间的延长,细胞凋亡逐渐增加,CaN亚基CnA、CnB及NFAT3的mRNA表达及NFAT3蛋白含量逐渐升高;加入CsA后,细胞凋亡减少,CnA、NFAT3的mRNA表达及NFAT3的蛋白含量明显减少。结论周期性张应力可以诱导成肌细胞发生凋亡;CaN-NFAT信号通路可能参与了周期性张应力诱导的成肌细胞凋亡。

钙调神经磷酸酶抑制剂对过氧化氢诱导的干细胞凋亡的影响

目的比较钙调神经磷酸酶(CaN)抑制剂FK-506和环孢菌素A(CsA)保护脂肪组织来源干细胞(AT-DSCs)抗凋亡作用及可能机制。方法采用过氧化氢(H2O2)[分浓度0(对照组)、50、100、200、300、400μmol/L H2O26组]体外诱导AT-DSCs凋亡模型,凋亡模型的评价采用磷脂酰丝氨酸结合蛋白-异硫氰酸荧光素(AnnexinV-FITC)/碘化丙啶(PI)双染流式细胞术和线粒体内跨膜电位测定法;观察AT-DSCs凋亡细胞形态;AT-DSCs细胞活性检测采用CCK-8试剂;细胞色素C的表达采用Western blot分析。结果与对照组比较,引起细胞凋亡率最高的是浓度100μmol/L H2O2(15.60%±8.50%vs 4.50%±0.88%;P<0.01);但CaN抑制剂FK-506(质量浓度1mg/mL)(9.8%±1.3%vs17.0%±1.6%,P<0.01)和CsA(质量浓度1mg/mL)(12.2%±1.2%vs 17.0%±1.6%,P<0.01)预处理后细胞凋亡率均明显下降,细胞存活率明显提高(P<0.01)。Western blot结果显示,CaN抑制剂FK-506(质量浓度1 mg/mL)和CsA(质量浓度1 mg/mL)可完全抑制H2O2诱导的细胞色素C释放。结论 CaN抑制剂能保护H2O2诱导的干细胞凋亡。可能机制是CaN抑制剂能抑制细胞凋亡,提高细胞存活率,下调细胞色素C的释放。

替米沙坦抑制钙调神经磷酸酶调控牵张刺激诱导乳鼠心房肌细胞Cav1.2mRNA的表达

目的探究牵张刺激对乳鼠心房肌细胞L型钙离子通道(Ca-L)Cav 1.2 mRNA表达的影响以及替米沙坦(Tel)的调控作用。方法 1 d龄SD乳鼠,分离心房肌细胞,于细胞牵引装置培养24 h分组干预:(1)对照组:不予牵张刺激;(2)牵张组:牵张增加16%硅胶膜面积48 h;(3)Tel组:予Tel 1μmol/L干预1 h,继之牵张48 h;(4)环孢素A(CsA)组:CsA 10μg/mL干预1 h,继之牵张48 h。定量分析牵张组与对照组细胞蛋白/DNA比值,行牵张有效性鉴定。免疫印迹法检测钙调神经磷酸酶A亚基(CaNA)表达;适时荧光定量逆转录PCR检测Cav 1.2 mRNA表达。结果牵张刺激明显增加心房肌细胞蛋白/DNA比值,促CaNA蛋白表达,抑制Cav 1.2 mRNA表达;Tel和CsA干预明显抑制牵张刺激此效应。结论替米沙坦可通过抑制钙调神经磷酸酶进而调控静态牵张刺激诱导的心房肌细胞Cav 1.2 mRNA表达。

环孢霉素A抑制肾性高血压大鼠重要脏器钙调神经磷酸酶活化

目的研究一肾一夹肾性高血压大鼠组织钙调神经磷酸酶(calcineurin,CaN)活性变化及环孢霉素A(CyclosporineA,CsA)的调控作用。方法取20只Wistar大鼠随机分为3组:假手术组(n=6),一肾一夹手术组(n=7)和CsA干预组(n=7)。采用放免法测定血浆血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)、醛固酮(Aldosterone,Ald)和内皮素(endothelin,ET1)浓度,采用比色测定一氧化氮(NO)浓度。以PNPP为底物测定术后4周大鼠各组织器官CaN活性。结果肾性高血压大鼠心脏、脾、肾脏、肺、脑CaN活性较假手术组显著升高(均P<0.05),干预组上述组织器官CaN活性较手术组显著下降(P<0.05)。肾性高血压大鼠组肝脏CaN活性较假手术组显著下降,环孢霉素A干预组肝细胞CaN活性较手术组继续显著下降(P<0.05)。各组大鼠主动脉中CaN活性无明显变化。各组大鼠血浆Ald、AngⅡ、ET1及NO浓度亦无明显变化。结论肾性高血压大鼠心、脑、肾、脾、肺脏组织CaN活性均显著升高,CsA对肾性高血压大鼠上述各组织脏器CaN活性具有广泛的抑制作用。

钙调磷酸酶抑制剂治疗难治性川崎病的应用进展

川崎病(Kawasaki disease,KD)是一种病因不明的急性自限性血管炎,主要发生于5岁以下儿童[1]。KD主要累及中小动脉,最严重的并发症是冠状动脉损害(coronary artery lesions,CAL),目前已成为发达国家儿童获得性心脏病的主要原因[2]。在未治疗的KD患儿中大约有25%可导致冠状动脉瘤,发热10 d内使用静脉注射人免疫球蛋白(IVIG)可将这一风险降至3%[3]。

泛素蛋白酶体抑制剂抑制钙调神经磷酸酶依赖的心肌细胞肥大

目的研究泛素蛋白酶体抑制剂MG262对钙调神经磷酸酶信号通路的影响,探讨其抑制心肌细胞肥大的机制。方法在去甲肾上腺素诱导培养的乳鼠肥大心肌细胞中加入MG262,通过Phalloidin染色观察细胞的形态,RNA Dot Blot检测胚胎蛋白基因表达,Western blot检测细胞中钙调神经磷酸酶蛋白含量,免疫荧光标记观察活化T细胞核因子c4(NFATc4)蛋白在细胞内分布。结果去甲肾上腺素使细胞面积增大近1.1倍,胚胎基因心房利钠因子(ANF)、脑钠肽(BNP)、β肌球蛋白重链(β-MHC)的mRNA表达上调,细胞核内NFATc4蛋白表达水平增加。MG262明显抑制去甲肾上腺素诱导的细胞肥大(P<0.05)和ANP、BNP、β-MHC的mRNA表达上调(P<0.05),细胞面积下降了33%;同时MG262使去甲肾上腺素诱导的细胞钙调神经磷酸酶蛋白表达水平下降,抑制NFATc4核内转位。结论 MG262可能通过抑制钙调神经磷酸酶信号通路,减轻心肌细胞肥大。