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钙不依赖性钙调素结合蛋白的研究进展 被引量:17
1
作者 韦慧彦 郭振清 崔素娟 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2007年第2期124-131,共8页
钙调素是普遍存在于真核生物细胞中、发挥多种生物学调控作用的信号组分.钙调素不仅在有Ca2+情况下通过与钙依赖性钙调素结合蛋白作用而传递信号,也能在相对无Ca2+条件下直接结合钙不依赖性钙调素结合蛋白而传递信号.综述了无钙离子结... 钙调素是普遍存在于真核生物细胞中、发挥多种生物学调控作用的信号组分.钙调素不仅在有Ca2+情况下通过与钙依赖性钙调素结合蛋白作用而传递信号,也能在相对无Ca2+条件下直接结合钙不依赖性钙调素结合蛋白而传递信号.综述了无钙离子结合钙调素及钙不依赖性钙调素结合蛋白的结构特性、钙不依赖性钙调素结合蛋白的种类及其可能的生物学作用,这将有助于我们深入认识钙调素介导信号途径的特异性、复杂性和多样性. 展开更多
关键词 钙调素 无钙离子结合钙调素 钙不依赖性钙调素结合蛋白 钙调素结合构域
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植物钙调素结合蛋白研究进展 被引量:48
2
作者 毛国红 宋林霞 孙大业 《植物生理与分子生物学学报》 CAS CSCD 2004年第5期481-488,共8页
钙调素(CaM)作为最重要的一类Ca^(2+)传感蛋白可以通过与其下游CaM结合蛋白(CaMBP)作用而调节细胞的生理功能。因此,对CaMBP的研究是揭示CaM作用机制的重要内容,是探明Ca^(2+)-CaM信号转导系统的关键。该文从CaMBP和CaM的结合特性、植物... 钙调素(CaM)作为最重要的一类Ca^(2+)传感蛋白可以通过与其下游CaM结合蛋白(CaMBP)作用而调节细胞的生理功能。因此,对CaMBP的研究是揭示CaM作用机制的重要内容,是探明Ca^(2+)-CaM信号转导系统的关键。该文从CaMBP和CaM的结合特性、植物CaMBP的分布以及植物CaMBP的生物学功能等方面综述了植物CaMBP的研究现状和最新进展。 展开更多
关键词 钙调素 钙调素结合蛋白 钙调素结合结构 生物学功能
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玉米非特异性脂转移蛋白的cDNA克隆和表达及表达产物的钙调素结合活性分析 被引量:6
3
作者 白文艳 赵立青 +3 位作者 李振鹏 谢万钦 赵玉龙 李翠凤 《植物生理与分子生物学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期570-576,共7页
用RT-PCR法克隆了成熟的玉米非特异性脂转移蛋白的cDNA,将它连接到表达质粒上并转化至大肠杆菌中表达。以钙调素凝胶覆盖法和钙调素亲和层析下拉实验对表达产物进行分析,证明它具有结合钙调素的活性,并且这种结合不依赖于Ca2+,与前期研... 用RT-PCR法克隆了成熟的玉米非特异性脂转移蛋白的cDNA,将它连接到表达质粒上并转化至大肠杆菌中表达。以钙调素凝胶覆盖法和钙调素亲和层析下拉实验对表达产物进行分析,证明它具有结合钙调素的活性,并且这种结合不依赖于Ca2+,与前期研究中钙调素结合蛋白-10和拟南芥非特异性脂转移蛋白1的结合特性相同。采用基因删除和缺失突变的方法研究玉米非特异性脂转移蛋白与钙调素结合的结构域,结果表明钙调素结合于47~60位氨基酸,预测的蛋白质二级结构为碱性双亲α-螺旋结构。 展开更多
关键词 非特异性脂转移蛋白 钙调素 钙调素结合蛋白-10 钙调素结合结构域
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甘蔗类钙调素ScCML13与SCMV运动蛋白P3N-PIPO的互作研究
4
作者 玉泉馨 杨宗桃 +7 位作者 张海 程光远 焦文迪 曾康 罗廷绪 黄国强 王璐 徐景升 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期1855-1866,共12页
类钙调素(Calmodulin-like,CML)是植物特有的钙信号感受器蛋白之一,参与植物生长发育和响应外界环境信号转导。甘蔗(Saccharum spp.hybrid)中CML应答甘蔗花叶病毒(Sugarcane mosaic virus,SCMV)侵染尚未见报道。本研究从甘蔗热带种Badil... 类钙调素(Calmodulin-like,CML)是植物特有的钙信号感受器蛋白之一,参与植物生长发育和响应外界环境信号转导。甘蔗(Saccharum spp.hybrid)中CML应答甘蔗花叶病毒(Sugarcane mosaic virus,SCMV)侵染尚未见报道。本研究从甘蔗热带种Badila(S.officinarum)中克隆了一个CML基因,命名为ScCML13。该基因开放读码框(open reading frame,ORF)长度为519 bp,编码172 aa。生物信息学分析表明,ScCML13属于稳定的亲水脂溶蛋白,无跨膜结构域,有4个结合Ca2+的EF-hand结构域;系统进化树分析表明,该蛋白在单子叶和双子叶植物中及单子叶C3和C_(4)植物中具有明显分化;酵母双杂交(yeast two-hybrid,Y2H)和双分子荧光互补(bimolecular fluorescence complementation,BiFC)试验表明,ScCML13与SCMV的运动蛋白P3N-PIPO互作。亚细胞定位试验表明ScCML13定位于内质网和细胞核。共定位试验发现ScCML13会干扰SCMV-P3N-PIPO的质膜(plasma membrane)或胞间连丝(plasmodesmata)定位。实时荧光定量PCR(Real Time Quantitative PCR,RT-qPCR)分析发现,ScCML13基因主要在甘蔗叶片中表达,在节间和根中的相对表达量低;ScCML13基因在感染SCMV后2 h显著上调,随后下调至与对照组相比的水平,而在感染后期上调。 展开更多
关键词 钙调素 甘蔗花叶病毒 P3N-PIPO 蛋白互作
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植物细胞外钙调素的稀土发光探针研究 被引量:12
5
作者 刘德龙 孙大业 +3 位作者 杨燕生 张洪杰 王淑彬 龚孟濂 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2000年第6期860-864,共5页
从植物中提纯了细胞外钙调素 ( Ca M) ,并利用 NAD激酶激活作用及拮抗剂的抑制作用进行了 Ca M特性试验 .利用稀土 ( Tb3+ )发光探针测得胞外 Ca M具有 4个金属离子结合位点 .敏化 Tb3+ 激发光谱结果证明其含有 1个 Tyr残基 .胞外 Ca M(... 从植物中提纯了细胞外钙调素 ( Ca M) ,并利用 NAD激酶激活作用及拮抗剂的抑制作用进行了 Ca M特性试验 .利用稀土 ( Tb3+ )发光探针测得胞外 Ca M具有 4个金属离子结合位点 .敏化 Tb3+ 激发光谱结果证明其含有 1个 Tyr残基 .胞外 Ca M( Tyr)能够向 Tb3+传能并使 Tb3+特征发光增强 .根据 Forster能量传递理论测得胞外 Ca M中 Tyr→ , 位之间距离分别为 1 .1 0 4和 1 .0 56nm,它们均小于牛脑 Ca M的相应值 .此外 ,利用敏化 Tb3+ 荧光光谱研究了 Ca M拮抗剂 W7或抗体与胞外 Ca M的相互作用 ,表明 W7或抗体优先与胞外 Ca M的 , 位半分子结合 ,使胞外 Ca M构象发生变化并导致 Tb3+ 发光强度下降 .实验表明 ,稀土发光方法不仅能获得 Ca M的结构信息 ,还可用于研究与 Ca 展开更多
关键词 细胞外钙调素 稀土发光探针 钙调素拮抗剂 植物
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CaMBP-10的cDNA克隆和表达及钙调素结合活性分析 被引量:8
6
作者 祁倩 饶恩于 +3 位作者 王喆 刘华 凌启阆 李翠凤 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期451-456,共6页
采用RT PCR法 ,从中国大白菜中分离了编码CaMBP 1 0的cDNA克隆 .该cDNA全长 4 96bp ,编码 92个氨基酸 ,3′端含有 2 1 6bp的非编码区和poly A尾 .将此BP 1 0cDNA的成熟蛋白序列导入表达质粒pET1 5b并转化至大肠杆菌E .coliBL2 1 (DE3)co... 采用RT PCR法 ,从中国大白菜中分离了编码CaMBP 1 0的cDNA克隆 .该cDNA全长 4 96bp ,编码 92个氨基酸 ,3′端含有 2 1 6bp的非编码区和poly A尾 .将此BP 1 0cDNA的成熟蛋白序列导入表达质粒pET1 5b并转化至大肠杆菌E .coliBL2 1 (DE3)condonplus RIL进行表达 .以免疫印迹和钙调素结合分析法对重组BP 1 0进行鉴定 ,证明其保持了与天然BP 1 0相同的钙调素结合活性 .氨基酸和核苷酸序列分析结果显示 ,它与植物转脂蛋白高度同源 ,特别是含有 8个保守半胱氨酸 .BP 1 0与转脂蛋白之间具极为相似的理化性质如分子量、等电点、热稳定性等 .据此认为 ,CaMBP 1 0是转脂蛋白家族的新成员 ,Ca2 + 展开更多
关键词 CAMBP-10 非特异转脂蛋白(nsLTP) 钙调素(CaM) 钙调素结合蛋白(CaMBP) 结合活性
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牡荆素调节环磷酸腺苷激活的交换蛋白1/钙/钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ信号对大鼠心肌梗死后心肌肥大与纤维化的作用
7
作者 赵天昊 袁慧 +3 位作者 麻祖青 陶星宇 张宇 董六一 《心脑血管病防治》 2024年第2期10-15,共6页
目的探讨牡荆素调控环磷酸腺苷激活的交换蛋白1(Epac1)/钙/钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)信号通路抑制大鼠心肌梗死(MI)后心肌细胞肥大与纤维化的作用。方法24只SD大鼠随机分为:假手术组、MI组、牡荆素组。大鼠进行心脏左前降支结扎建... 目的探讨牡荆素调控环磷酸腺苷激活的交换蛋白1(Epac1)/钙/钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)信号通路抑制大鼠心肌梗死(MI)后心肌细胞肥大与纤维化的作用。方法24只SD大鼠随机分为:假手术组、MI组、牡荆素组。大鼠进行心脏左前降支结扎建立MI模型,假手术组只穿线不结扎。检测大鼠心功能变化;苏木精-伊红(HE)染色观察心脏病理学变化,天狼星红染色观察心脏纤维化,电镜观察心肌线粒体损伤情况;Western Blot检测Epac1、CaMKⅡ等蛋白变化。结果(1)大鼠MI 4周后,与假手术组比较MI组大鼠左心室短轴缩短率(LVFS)和左心室射血分数(LVEF)均降低(P<0.01),左心室收缩末期内径(LVIDs)、左心室舒张末期内径(LVIDd)和舒张末期左心室后壁厚度(LVPWd)、收缩末期左心室后壁厚度(LVPWs)增加(P<0.01),牡荆素组大鼠心脏LVIDs、LVIDd、LVPWs和LVPWd较MI组降低,LVFS和LVEF均升高,差异有统计学意义(P<0.05);(2)牡荆素可降低大鼠心脏重量指数(P<0.01),并减小MI组大鼠心肌细胞横截面积,同时减轻大鼠左心室壁心肌纤维化程度(P<0.01),牡荆素组大鼠心肌胞浆内线粒体肿胀较MI组减轻,线粒体形态较完整,空泡形成较少;(3)Western Blot结果显示牡荆素抑制大鼠MI后Epac1激活(P<0.01),抑制其下游CaMKⅡ激活与细胞外调节激酶的磷酸化(P<0.01),同时可抑制B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)相关X蛋白(Bax)上调(P<0.05),上调Bcl-2(P<0.01),抑制凋亡蛋白裂解半胱天冬酶3(Cleaved-Caspase 3)的活化(P<0.05)。结论牡荆素可通过抑制Epac1/CaMKⅡ通路,改善大鼠MI后心脏功能,抑制心肌肥大和纤维化。 展开更多
关键词 牡荆素 心肌缺血 凋亡 环磷酸腺苷激活的交换蛋白1 钙/钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ
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稀土发光探针研究植物钙调素及其与拮抗剂的相互作用 被引量:6
8
作者 刘德龙 孙大业 +3 位作者 杨燕生 王淑彬 张宏杰 龚孟濂 《中国稀土学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第4期354-358,共5页
从花椰菜(Brasicaoleraceavar,botrytisL.)中提取、纯化植物钙调素(CaM),并通过激活辅酶I激酶及N(6氮基)5氯萘磺胺(W7)拮抗实验对其进行鉴定。通过内源荧光及三价铽发光确定了... 从花椰菜(Brasicaoleraceavar,botrytisL.)中提取、纯化植物钙调素(CaM),并通过激活辅酶I激酶及N(6氮基)5氯萘磺胺(W7)拮抗实验对其进行鉴定。通过内源荧光及三价铽发光确定了花椰菜钙调素中含有一个酪氨酸(Tyr)及4个金属结合位点,利用Frster型能量传递理论测量了Tyr→Ⅲ,Ⅳ位点之间距离分别为123nm及118nm,进一步通过Eu3+、Tb3+发光的结果说明植物钙调素与拮抗剂W7结合过程中,钙调素的构象发生了变化,但其金属配位环境基本无变化。 展开更多
关键词 稀土 发光探针 钙调素 拮抗剂 植物钙调素 CAM
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花椰菜胞外钙调素的性质及促进植物生长作用 被引量:6
9
作者 刘德龙 杨燕生 孙大业 《中山大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 1997年第3期126-127,共2页
花椰菜胞外钙调素的性质及促进植物生长作用刘德龙杨燕生孙大业(中山大学化学系,广州510275)(河北师范大学生物系)关键词花椰菜,胞外钙调素,花粉萌发,花粉管伸长分类号Q942.6钙调素(CaM)是普遍存在于真核细... 花椰菜胞外钙调素的性质及促进植物生长作用刘德龙杨燕生孙大业(中山大学化学系,广州510275)(河北师范大学生物系)关键词花椰菜,胞外钙调素,花粉萌发,花粉管伸长分类号Q942.6钙调素(CaM)是普遍存在于真核细胞中的一种重要的多功能胞内钙受体,... 展开更多
关键词 花椰菜 胞外钙调素 生长调节作用 钙调素
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和厚朴酚对钙调素拮抗作用的研究 被引量:19
10
作者 刘飞 黄树模 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 1993年第1期48-51,共4页
采用钙调素(CaM)依赖性环核苷酸磷酸二酯酶及丹磺酰标记CaM,研究和厚朴酚对CaM的作用.发现和厚朴酚能抑制CaM刺激环核苷酸磷酸二酯酶的活性,随着CaM浓度的增加,IC_(50)也相应增加。在Ca^(2+)存在下.和厚朴酚能降低丹磺酰标记的CaM的荧... 采用钙调素(CaM)依赖性环核苷酸磷酸二酯酶及丹磺酰标记CaM,研究和厚朴酚对CaM的作用.发现和厚朴酚能抑制CaM刺激环核苷酸磷酸二酯酶的活性,随着CaM浓度的增加,IC_(50)也相应增加。在Ca^(2+)存在下.和厚朴酚能降低丹磺酰标记的CaM的荧光强度,使其荧光发射光谱峰位红移。实验结果提示,和厚朴酚在Ca^(2+)存在下,能与CaM结合.从而拮抗其对靶酶——磷酸二酯酶的激活。另外,和厚朴酚对CaM依赖性磷酸二酯酶基础活性具有刺激作用。 展开更多
关键词 和厚朴酚 钙调素 钙调素拮抗剂
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钙调素对钙调素结合蛋白-10和玉米非特异性脂转移蛋白与脂质结合活性的影响 被引量:6
11
作者 谢万钦 赵立青 +3 位作者 白文艳 李振鹏 赵玉龙 李翠凤 《植物生理与分子生物学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期679-684,共6页
荧光标记的脂质结合实验表明,钙调素结合蛋白-10(CaMBP-10)具有典型的植物非特异性脂质转移蛋白与脂质结合的特性。进一步实验研究了钙调素(calmodulin,CaM)对CaMBP-10和玉米nsLTP与脂质结合的活性的影响,结果显示无论在有钙和无钙条件... 荧光标记的脂质结合实验表明,钙调素结合蛋白-10(CaMBP-10)具有典型的植物非特异性脂质转移蛋白与脂质结合的特性。进一步实验研究了钙调素(calmodulin,CaM)对CaMBP-10和玉米nsLTP与脂质结合的活性的影响,结果显示无论在有钙和无钙条件下,CaM对两者的影响均有不同之处,W-7和TFP能消除CaM的影响。提示CaM不仅与CaMBP-10和玉米nsLTP特异性相互作用,而且对2种脂转移蛋白可能具有不同的调节机制。 展开更多
关键词 钙调素 脂转移蛋白 钙调素结合蛋白-10 脂质结合活性
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钙调素的分子识别研究进展 被引量:9
12
作者 赵慧斌 李晓军 武建国 《医学研究生学报》 CAS 2003年第11期846-849,共4页
钙调素 (CaM ) ,作为细胞内Ca2 + 信号传导途径中的主要信号转导分子 ,普遍存在于真核细胞中 ,介导调控由Ca2 + 引起的一系列生理生化反应 ,参与并调节细胞的增生、分化、运动等基本代谢过程。对CaM的结构及分子识别机制的研究 ,有助于... 钙调素 (CaM ) ,作为细胞内Ca2 + 信号传导途径中的主要信号转导分子 ,普遍存在于真核细胞中 ,介导调控由Ca2 + 引起的一系列生理生化反应 ,参与并调节细胞的增生、分化、运动等基本代谢过程。对CaM的结构及分子识别机制的研究 ,有助于更好地理解细胞信号传导、蛋白质相互作用的分子机制 ,对新药开发和临床治疗具有重要的指导意义。本文作者就近几年来有关CaM结构及分子识别机制的研究现状作一概述。 展开更多
关键词 钙调素 分子识别 钙调素结合蛋白 基序
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蚯蚓钙调素结合蛋白的研究 被引量:10
13
作者 张燕红 张庭芳 《北京大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 1997年第6期731-735,共5页
以赤子爱胜蚓(EiseniaFoetida)为材料,通过DEAE-FastFlow离子交换层析、CaM-Sepharose亲和层析,分离纯化得到蚯蚓钙调素结合蛋白(CaMBPs)。纯化的CaMBPs对CaM激活的环核... 以赤子爱胜蚓(EiseniaFoetida)为材料,通过DEAE-FastFlow离子交换层析、CaM-Sepharose亲和层析,分离纯化得到蚯蚓钙调素结合蛋白(CaMBPs)。纯化的CaMBPs对CaM激活的环核苷酸磷酸二酯酶活性有抑制作用,而且这种抑制作用可通过加入过量的CaM达到完全恢复。SDS-PAGE显示CaMBPs有3条明显主带,在EGTA存在时表现分子量分别为62,49和30kD。紫外扫描测定含量分别为7.17%,7.31%和51.8%。用生物素-CaM覆盖法检测到3种CaM结合蛋白,与SDS-PAGE结果一致。酶活性测定实验表明在蚯蚓CaMBPs中有Ca2+-ATPase活性,但无NAD激酶活性。 展开更多
关键词 钙调素结合蛋白 蚯蚓 钙调素 CaMBPS
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转CaM基因工程菌的培养及重组钙调素的提纯 被引量:10
14
作者 白娟 刘洪涛 孙大业 《河北师范大学学报(自然科学版)》 CAS 1998年第3期389-391,共3页
研究了转植物CaM基因的大肠杆菌的培养以及从该工程菌中分离纯化CaM的方法,观察到在含氨节青霉素及执菌素的LB液体培养基中,在35℃培养至在600nm的光吸收为0.5~0.7后,收集菌体破碎,并经苯基琼脂糖疏水层析柱亲和层析,可得到高... 研究了转植物CaM基因的大肠杆菌的培养以及从该工程菌中分离纯化CaM的方法,观察到在含氨节青霉素及执菌素的LB液体培养基中,在35℃培养至在600nm的光吸收为0.5~0.7后,收集菌体破碎,并经苯基琼脂糖疏水层析柱亲和层析,可得到高纯度的CaM,其最高得率为每升菌液得到20mg的CaM. 展开更多
关键词 钙调素 纯化 重组钙调素 转基因工程菌 大肠杆菌
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钙调素拮抗剂──双苄基异喹啉类化合物结构与活性关系的研究 被引量:9
15
作者 陈少林 胡卓逸 +2 位作者 郝志奇 蔡惠明 黄文龙 《生物化学杂志》 CSCD 1990年第5期413-416,共4页
双苄基异喹啉类化合物拮抗钙调素(CaM),抑制CaM激活的环核苷酸磷酸二酯酶(PDE),研究表明:蝙蝠葛碱和小檗胺分子中12位羟墓被芳香基团酯化或醚化时,芳香基团的电子云分布状态变化能增加或降低分子的拮抗活性;取代基中的次甲基数增加可以... 双苄基异喹啉类化合物拮抗钙调素(CaM),抑制CaM激活的环核苷酸磷酸二酯酶(PDE),研究表明:蝙蝠葛碱和小檗胺分子中12位羟墓被芳香基团酯化或醚化时,芳香基团的电子云分布状态变化能增加或降低分子的拮抗活性;取代基中的次甲基数增加可以增强分子的拮抗活性。分子非极性端引入含氮基团,化合物的拮抗活性较低。测试的化合物中,E_6D_(12)和D_(14)的拮抗CaM活性较强,IC_(50)分别为0.58μmol/L0.58μmol/L和0.53μmol/L。实验结果表明,分子的拮抗活性与分子非极性端的疏水性、电子云分布状态以及分子空间结构等多种结构性质相关。 展开更多
关键词 钙调素 钙调素拮抗剂 双苄基异喹啉
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植物钙调素及其结合蛋白的结构生物学进展 被引量:11
16
作者 左娜 陈洁 吕莹果 《粮食与油脂》 北大核心 2016年第9期1-5,共5页
钙调素(CaM)作为植物中一种重要的钙受体蛋白,与Ca^(2+)结合调节细胞内一些靶蛋白(Ca MBPs)的活性,是细胞内Ca^(2+)信号传导途径中的主要信号转导分子,介导调控由Ca^(2+)引起的一系列生理生化反应。研究游离态CaM、结合了钙离子的Ca M... 钙调素(CaM)作为植物中一种重要的钙受体蛋白,与Ca^(2+)结合调节细胞内一些靶蛋白(Ca MBPs)的活性,是细胞内Ca^(2+)信号传导途径中的主要信号转导分子,介导调控由Ca^(2+)引起的一系列生理生化反应。研究游离态CaM、结合了钙离子的Ca M以及靶蛋白肽–CaM复合体的结构有助于我们了解CaM介导Ca^(2+)信号传导途径的作用机理。综述了植物CaM的结构和性质,以及其与靶蛋白相互作用的研究进展。 展开更多
关键词 钙调素 钙调素结合蛋白 复合物结构
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植物及动物钙调素抗体免疫反应特性的比较研究 被引量:9
17
作者 李家旭 孙大业 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 1992年第4期257-263,共7页
用酶联免疫吸附测定和胶体金免疫电镜定位技术对三种钙调素抗体与植物和动物钙调素的免疫反应特性进行了比较研究。结果表明,在与小麦钙调素的相对亲和力中,抗小麦钙调素抗体大于抗 DNP 修饰猪脑钙调素抗体,抗牛脑钙调素抗体则很弱。抗... 用酶联免疫吸附测定和胶体金免疫电镜定位技术对三种钙调素抗体与植物和动物钙调素的免疫反应特性进行了比较研究。结果表明,在与小麦钙调素的相对亲和力中,抗小麦钙调素抗体大于抗 DNP 修饰猪脑钙调素抗体,抗牛脑钙调素抗体则很弱。抗小麦钙调素抗体与小麦钙调素的 K_D(解离常数)值为2.50×10^(-9)mol/L;抗 DNP 修饰猪脑钙调素抗体与小麦钙调素的 K_D 值为2.82×10^(-8)mol/L,而它与牛脑钙调素的 K_D 值为1.90×10^(-)mol/L。定位玉米根尖细胞钙调素,抗小麦钙调素抗体比抗 DNP 修饰猪脑钙调素抗体有更高的标记密度.定量小麦钙调素,抗小麦钙调素抗体比抗 DNP 修饰猪脑钙调素抗体有较高的检测灵敏度。 展开更多
关键词 免疫反应 钙调素抗体 钙调素
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基体辅助激光解吸电离飞行时间质谱法测定钙调素的分子量 被引量:1
18
作者 刘德龙 朱智华 +2 位作者 赵善楷 孙大业 杨燕生 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 1997年第12期1966-1968,共3页
The molecular weight of bovine brain CaM, intracellular CaM and extracellularCaM of cauliflower have been determined for the first time by Matrix-Assisted Larer Desorp tion Ionization Time of Flight Mass Spectrometry(... The molecular weight of bovine brain CaM, intracellular CaM and extracellularCaM of cauliflower have been determined for the first time by Matrix-Assisted Larer Desorp tion Ionization Time of Flight Mass Spectrometry(MALDI-TOF-MS). The molecular weightof bovine brain CaM, 16 699. 9 Da determined by MALDI-TOF-MS, is closely ideatical with16 700 Da, calculated from its primary sequence, showing the high accuracy of MALDITOF-MS and the conf1rmation of previously determined sequence. Furthermore, the molecular weight of intracellular CaM and extracellular CaM determined by MAlDI-TOF-MS, 17025 Da and 15 582 Da, are in agreement with 17 500 Da and 15 000 Da determined by SDSPAGE-This agreement shows the high accuracy of MALDI-TOF-MS. In addition, themolecular weight of CaMs with this technique can be determined rapidly(less than 10 min)and sensitively. 展开更多
关键词 激光质谱 钙调素 胞外钙调素 分子量测定
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钙调素及其依赖性激酶对即早基因c-fos表达的影响 被引量:7
19
作者 羊明智 吴叶 +2 位作者 章亚东 候树勋 贾连顺 《南华大学学报(医学版)》 2007年第4期529-532,共4页
目的探讨钙调素及其依赖性激酶对脊髓灰质c-fos基因表达的影响。方法用原位杂交方法分别观察高钙环境下离体培养脊髓组织在应用钙调素及其依赖性激酶拮抗剂(三氟啦嗪及KN-62)环境下30 min至12 h不同时间点c-fos基因的表达变化。结果高... 目的探讨钙调素及其依赖性激酶对脊髓灰质c-fos基因表达的影响。方法用原位杂交方法分别观察高钙环境下离体培养脊髓组织在应用钙调素及其依赖性激酶拮抗剂(三氟啦嗪及KN-62)环境下30 min至12 h不同时间点c-fos基因的表达变化。结果高钙浓度组信号明显较对照组、三氟啦嗪组及KN-62组强。高钙浓度组c-fos mRNA杂交信号在4-6 h时间点达高峰。三氟啦嗪组及KN-62组杂交信号在6 h时间点较对照组增高,但比高钙离子浓度组弱。结论钙离子介导c-fos表达可能是与钙调素形成复合物激活CAM-PK实现的。 展开更多
关键词 钙调素 钙调素蛋白激酶 离体脊髓组织培养 c—fos
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拟南芥钙调素定点突变基因分离及其在钙不依赖钙调素结合蛋白检测中的应用(英文)
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作者 高丽 王振杰 崔素娟 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2009年第7期890-896,共7页
动植物系统研究表明,钙调素不仅在结合钙离子时调节多种靶酶或靶蛋白的活性,而且没有钙离子结合时,还可以通过结合钙不依赖的钙调素结合蛋白,发挥多种生物学作用.然而,目前却没有体内分析钙调素与钙不依赖钙调素结合蛋白相互作用的方法... 动植物系统研究表明,钙调素不仅在结合钙离子时调节多种靶酶或靶蛋白的活性,而且没有钙离子结合时,还可以通过结合钙不依赖的钙调素结合蛋白,发挥多种生物学作用.然而,目前却没有体内分析钙调素与钙不依赖钙调素结合蛋白相互作用的方法.首先,采用定点突变的方式,得到了拟南芥钙调素亚型2的多个突变基因mCaM2,随后,大肠杆菌重组表达突变蛋白的电泳迁移率及45Ca2+覆盖分析表明,得到了编码失去钙结合能力的钙调素的突变基因mCaM21234,mCaM21234突变钙调素中所有4个钙结合EF-hand结构域中的关键氨基酸谷氨酸均突变为谷氨酰胺.在酵母双杂交体系中,作为诱饵蛋白的突变钙调素mCaM21234与我们前期体外方法报道的钙不依赖性钙调素结合蛋白AtIQD26存在相互作用.这将为钙不依赖性钙调素结合蛋白提供有用的体内研究工具,有利于我们全面认识钙-钙调素-钙调素结合蛋白信号途径. 展开更多
关键词 定点突变 拟南芥 钙调素 钙不依赖 钙调素结合蛋白
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