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小麦钙调素新亚型TaCaM5的克隆及表达分析 被引量:7
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作者 刘新颖 王晓杰 +7 位作者 薛杰 夏宁 邓麟 蔡高磊 汤春蕾 魏国荣 黄丽丽 康振生 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期953-960,共8页
利用RT-PCR技术,从条锈菌诱导的小麦叶片中分离出一个编码CaM基因的cDNA序列,经氨基酸序列分析确定其为一个新的小麦CaM亚型,暂被命名为TaCaM5。TaCaM5包含一个完整450bp的开放阅读框,编码149个氨基酸;编码的蛋白不含跨膜区、无信号肽... 利用RT-PCR技术,从条锈菌诱导的小麦叶片中分离出一个编码CaM基因的cDNA序列,经氨基酸序列分析确定其为一个新的小麦CaM亚型,暂被命名为TaCaM5。TaCaM5包含一个完整450bp的开放阅读框,编码149个氨基酸;编码的蛋白不含跨膜区、无信号肽、定位在胞内,具有4个EF-hand保守结构域。在目前已知的CaM基因中,TaCaM5与玉米CaM基因的亲缘关系最近,相似性高达97%。该基因在根、茎、叶等组织中均有不同程度的表达;并且受条锈菌诱导表达,在非亲和组合与亲和组合中,分别在接种后6h和24h表达量最高。外源植物激素脱落酸、茉莉酸甲酯和乙烯诱导TaCaM5上调表达,水杨酸诱导其下调表达。TaCaM5在机械伤害、干旱和低温条件下表达量上升,在高盐环境下表达量降低。表明TaCaM5可能通过茉莉酸和乙烯等信号途径参与小麦对条锈菌的防御反应,同时参与机械伤害、低温和干旱环境下的Ca2+-CaM信号转导途径。 展开更多
关键词 小麦条锈病 钙调素亚型 非生物胁迫 实时荧光定量RT-PCR
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转SCaM-GFP融合基因烟草中钙调素分泌特性的研究 被引量:4
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作者 周华林 马力耕 +2 位作者 刘曼 毛国红 孙大业 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 2001年第12期1300-1302,共3页
The binary vectors which respectively contain chimeric genes (SCaM1-GFP, SCaM4-GFP) were constructed and used to transform tobacco (Nicotiana tabacumL.), pGTV-GFP was used as control. The plasmolyzed cells of transgen... The binary vectors which respectively contain chimeric genes (SCaM1-GFP, SCaM4-GFP) were constructed and used to transform tobacco (Nicotiana tabacumL.), pGTV-GFP was used as control. The plasmolyzed cells of transgenic callus treated with CBW were investigated under the laser scanning confocal microscope. Green fluorescence was found in the cell wall of transgenic SCaM1-GFP callus. However there was no green fluorescence in the cell wall of SCaM4-GFP or GFP transgenic callus. These results indicate that SCaM1 can be secreted into the apoplast of plant cells, while SCaM4 does not exist in the apoplast of plant cells. 展开更多
关键词 大豆钙调素亚型 绿色荧光蛋白 分泌 SCaM-GFP 融合基因 转基因烟草
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CaMKⅡδ在有氧运动调控高血压心肌细胞凋亡中的作用 被引量:1
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作者 张浴尘 石丽君 吴迎 《中国康复医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第7期872-881,共10页
目的:探讨Ⅱ型钙/钙调素依赖性蛋白激酶δ亚型(calcium/calmodulin-dependent protein kinaseⅡδ,Ca MKⅡδ)在有氧运动调控自发性高血压大鼠心肌细胞凋亡中的作用。方法:雄性12周龄自发性高血压大鼠和Wistar-Kyoto大鼠,随机分为正常... 目的:探讨Ⅱ型钙/钙调素依赖性蛋白激酶δ亚型(calcium/calmodulin-dependent protein kinaseⅡδ,Ca MKⅡδ)在有氧运动调控自发性高血压大鼠心肌细胞凋亡中的作用。方法:雄性12周龄自发性高血压大鼠和Wistar-Kyoto大鼠,随机分为正常安静组(WKY-SED)、正常有氧运动组(WKY-EX)、高血压安静组(SHR-SED)、高血压有氧运动组(SHR-EX)。经12周中等强度跑台运动(坡度0°,20m/min,60min/d,5d/w)后,测定大鼠尾动脉血压;Millar压力-容积系统测定在体心功能;Masson染色分析心肌胶原容积分数(CVF%);caspase 3活性检测与TUNEL染色观察心肌细胞凋亡;Western Blot检测Ca MKⅡδ、ox-Ca MKⅡδ、IκBα、NF-κB P65、HSP70、Bax、Bcl-2的蛋白表达。结果:12周有氧运动后,SHR-EX组较SHR-SED组心率、血压显著降低(P<0.05),心功能左室压力最大上升速率(+dp/dtmax)、射血分数(EF)与收缩末期压力-容积关系曲线(ESPVR)斜率(Ees)显著升高(P<0.05),心室压力最大下降速率(-dp/dtmax)的绝对值与每搏输出量(SV)显著升高(P<0.01),收缩末期压力(ESP)、舒张末期压力(EDP)与有效动脉弹性(Ea)显著下降(P<0.01),等容舒张常数(Tau)显著降低(P<0.05)。Masson染色结果显示SHR-EX组心肌组织纤维化减少,CVF%显著降低(P<0.01)。WKY-EX组较WKY-SED组caspase 3显著下降(P<0.05)。SHR-EX组较SHR-SED组caspase 3显著降低(P<0.05),TUNEL阳性颗粒数量显著降低(P<0.01)。Western Blot结果显示WKY-EX组较WKY-SED组NF-κB P65与Bax的蛋白表达、Bax/Bcl-2比值显著下降(P<0.05),IκBα与HSP70蛋白表达显著升高(P<0.01),Bcl-2蛋白表达显著上升(P<0.05);SHR-EX组较SHR-SED组ox-Ca MKⅡδ、NF-κB P65与Bax蛋白表达显著降低(P<0.05),Bax/Bcl-2比值显著降低(P<0.01),IκBα与Bcl-2蛋白表达显著上升(P<0.05),HSP70蛋白表达显著升高(P<0.01)。结论:有氧运动通过下调SHR心肌ox-Ca MKⅡδ抑制心肌细胞凋亡,同时激活抗凋亡相关信号通路改善心功能,可能是运动诱导高血压心脏重塑的机制之一。 展开更多
关键词 有氧运动 钙/钙调素依赖性蛋白激酶δ亚型 高血压 心肌细胞 凋亡
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