白菜转脂蛋白CaMBP10分子中钙调素结合结构域的鉴定

植物转脂蛋白(LTPs)是多基因编码的蛋白家族,广泛分布于高等植物,其确切的生理功能至今仍不清楚.本室从白菜中分离的钙调素结合蛋白-10(CaMBP10)经序列分析被鉴定为植物转脂蛋白家族成员,体外实验证明钙调素(CaM)调节其脂质结合活性.为了深入了解转脂蛋白与CaM的相互作用机制,本文通过删除、缺失和定点突变等分子生物学手段确定了白菜转脂蛋白CaMBP10分子中的钙调素结合结构域.该结构域位于分子C末端64～83位氨基酸残基之间,其中疏水氨基酸的分布具有1-5-8-10的CaM结合模序特征.

植物钙调素结合蛋白研究进展

钙调素(CaM)作为最重要的一类Ca^(2+)传感蛋白可以通过与其下游CaM结合蛋白(CaMBP)作用而调节细胞的生理功能。因此,对CaMBP的研究是揭示CaM作用机制的重要内容,是探明Ca^(2+)-CaM信号转导系统的关键。该文从CaMBP和CaM的结合特性、植物CaMBP的分布以及植物CaMBP的生物学功能等方面综述了植物CaMBP的研究现状和最新进展。

玉米非特异性脂转移蛋白的cDNA克隆和表达及表达产物的钙调素结合活性分析

用RT-PCR法克隆了成熟的玉米非特异性脂转移蛋白的cDNA,将它连接到表达质粒上并转化至大肠杆菌中表达。以钙调素凝胶覆盖法和钙调素亲和层析下拉实验对表达产物进行分析,证明它具有结合钙调素的活性,并且这种结合不依赖于Ca2+,与前期研究中钙调素结合蛋白-10和拟南芥非特异性脂转移蛋白1的结合特性相同。采用基因删除和缺失突变的方法研究玉米非特异性脂转移蛋白与钙调素结合的结构域,结果表明钙调素结合于47～60位氨基酸,预测的蛋白质二级结构为碱性双亲α-螺旋结构。