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拟南芥CaM5的不同剪接产物对其蛋白质结合活性的影响
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作者 李树强 余洁雨 +4 位作者 王韫慧 吕天晓 范甜 周玉萍 田长恩 《热带亚热带植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期458-464,共7页
钙离子(Ca^(2+))/钙调素(calmodulin, CaM)信号参与植物生长发育和对外界刺激响应的调节。拟南芥(Arabidopsis thaliana)CaM家族共有7个基因,编码的蛋白质氨基酸序列具有高度保守性。该研究通过酵母双杂交及生物信息学分析等方法,对CaM5... 钙离子(Ca^(2+))/钙调素(calmodulin, CaM)信号参与植物生长发育和对外界刺激响应的调节。拟南芥(Arabidopsis thaliana)CaM家族共有7个基因,编码的蛋白质氨基酸序列具有高度保守性。该研究通过酵母双杂交及生物信息学分析等方法,对CaM5的2个剪接体CaM5.1和CaM5.3进行蛋白结合活性分析。结果表明,拟南芥钙调素结合蛋白(calmodulin-binding protein,CaMBP)IQM3(IQ motif-containing protein 3)能在酵母中与除CaM5.3外的CaM家族的成员结合。生物信息学分析表明,CaM5.3比CaM5.1和其他CaM亚型成员多出1个由35个氨基酸残基组成的C-末端序列(C-terminal domain,CTD),可能影响CaM5.3与IQM3结合。在CaM5.1的C-末端添加CML10的CTD,将重组蛋白与IQM3进行结合,证实CaM5.3的CTD是影响其与IQM3结合的关键序列。因此,拟南芥CaM5的不同剪接方式影响其蛋白结合活性,为研究钙调素及钙调素结合蛋白的结合活性提供参考。 展开更多
关键词 钙调素 剪接方式 IQM3 蛋白结合活性
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一个水稻钙调素结合蛋白基因OsCaMBP的克隆及表达分析 被引量:2
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作者 万佳 况浩池 +5 位作者 谢必武 陈静 张琦 徐永菊 高晓玲 徐正君 《中国水稻科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期243-248,共6页
通过荧光差异显示和RT-PCR技术,克隆到一个新的水稻钙调素结合蛋白基因OsCaMBP。序列分析表明,该基因cDNA序列全长2094bp,编码一个具有569个氨基酸残基的多肽,推测分子量为63.2kD;在OsCaMBP蛋白的N端存在IQ钙调素结合构象,与其... 通过荧光差异显示和RT-PCR技术,克隆到一个新的水稻钙调素结合蛋白基因OsCaMBP。序列分析表明,该基因cDNA序列全长2094bp,编码一个具有569个氨基酸残基的多肽,推测分子量为63.2kD;在OsCaMBP蛋白的N端存在IQ钙调素结合构象,与其他植物中的钙调素结合蛋白的相似性介于38.25%-47.28%。在热激处理15min、30min、1h或2h后,该基因在水稻的叶、根和叶鞘中表达量急剧增加;此外,该基因表达量也受低温调控而增加。 展开更多
关键词 水稻 钙调素结合蛋白 荧光差异显示 基因克隆 表达
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植物钙调素结合蛋白(CaMBPs)的研究概况 被引量:6
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作者 唐军 郭毅 孙大业 《细胞生物学杂志》 CSCD 1995年第3期129-134,共6页
本文简要论述了研究钙调素结合蛋白的意义和方法,着重介绍了植物领城中钙调素结合蛋白的研究状况,其中包括一些依赖于钙调素的酶的研究进展及未知钙调素结合蛋白的研究方向和现状,并在比较动植物钙调素结合蛋白研究工作的基础上,对植物... 本文简要论述了研究钙调素结合蛋白的意义和方法,着重介绍了植物领城中钙调素结合蛋白的研究状况,其中包括一些依赖于钙调素的酶的研究进展及未知钙调素结合蛋白的研究方向和现状,并在比较动植物钙调素结合蛋白研究工作的基础上,对植物钙调素结合蛋白今后的研究谈了些粗浅的设想。 展开更多
关键词 植物 钙调素结合蛋白
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白菜转脂蛋白CaMBP10分子中钙调素结合结构域的鉴定 被引量:2
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作者 金犂天 胖铁良 +2 位作者 李振鹏 谢万钦 李翠凤 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期942-949,共8页
植物转脂蛋白(LTPs)是多基因编码的蛋白家族,广泛分布于高等植物,其确切的生理功能至今仍不清楚.本室从白菜中分离的钙调素结合蛋白-10(CaMBP10)经序列分析被鉴定为植物转脂蛋白家族成员,体外实验证明钙调素(CaM)调节其脂质结合活性.为... 植物转脂蛋白(LTPs)是多基因编码的蛋白家族,广泛分布于高等植物,其确切的生理功能至今仍不清楚.本室从白菜中分离的钙调素结合蛋白-10(CaMBP10)经序列分析被鉴定为植物转脂蛋白家族成员,体外实验证明钙调素(CaM)调节其脂质结合活性.为了深入了解转脂蛋白与CaM的相互作用机制,本文通过删除、缺失和定点突变等分子生物学手段确定了白菜转脂蛋白CaMBP10分子中的钙调素结合结构域.该结构域位于分子C末端64~83位氨基酸残基之间,其中疏水氨基酸的分布具有1-5-8-10的CaM结合模序特征. 展开更多
关键词 植物转脂蛋白 钙调素结合蛋白 钙调素结合结构域 脂质结合活性
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沙田柚钙调素结合蛋白(CaMBP)基因的鉴定与序列分析
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作者 罗琼 谭鸿妮 +2 位作者 黄仕莉 刘华英 秦新民 《自然科学》 2017年第2期203-210,共8页
利用高通量测序对沙田柚自交和异交花柱进行转录组测序,通过差异分析得到了沙田柚钙调素结合蛋白(CaMBP)基因序列。采用生物信息学方法,对其编码的蛋白质从序列特征、理化性质、跨膜结构域、高级结构以及功能域等方面进行了预测和分析... 利用高通量测序对沙田柚自交和异交花柱进行转录组测序,通过差异分析得到了沙田柚钙调素结合蛋白(CaMBP)基因序列。采用生物信息学方法,对其编码的蛋白质从序列特征、理化性质、跨膜结构域、高级结构以及功能域等方面进行了预测和分析。结果表明该基因全长为1616 bp,开放阅读框(ORF)全长为1368 bp,编码455个氨基酸,编码蛋白质的分子量为50.11 KDa,理论等电点为5.33。该蛋白质含有一个与钙调素结合蛋白相同的保守结构域。氨基酸序列比对结果显示,其编码的蛋白质与克莱门柚(Citrus clementina)的钙调结合蛋白相似性较高,相似度约为98%。这些分析结果可为今后深入研究该蛋白的结构特征和功能提供参考。 展开更多
关键词 沙田柚 钙调素结合蛋白基因 序列分析
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CaMBP-10的cDNA克隆和表达及钙调素结合活性分析 被引量:8
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作者 祁倩 饶恩于 +3 位作者 王喆 刘华 凌启阆 李翠凤 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期451-456,共6页
采用RT PCR法 ,从中国大白菜中分离了编码CaMBP 1 0的cDNA克隆 .该cDNA全长 4 96bp ,编码 92个氨基酸 ,3′端含有 2 1 6bp的非编码区和poly A尾 .将此BP 1 0cDNA的成熟蛋白序列导入表达质粒pET1 5b并转化至大肠杆菌E .coliBL2 1 (DE3)co... 采用RT PCR法 ,从中国大白菜中分离了编码CaMBP 1 0的cDNA克隆 .该cDNA全长 4 96bp ,编码 92个氨基酸 ,3′端含有 2 1 6bp的非编码区和poly A尾 .将此BP 1 0cDNA的成熟蛋白序列导入表达质粒pET1 5b并转化至大肠杆菌E .coliBL2 1 (DE3)condonplus RIL进行表达 .以免疫印迹和钙调素结合分析法对重组BP 1 0进行鉴定 ,证明其保持了与天然BP 1 0相同的钙调素结合活性 .氨基酸和核苷酸序列分析结果显示 ,它与植物转脂蛋白高度同源 ,特别是含有 8个保守半胱氨酸 .BP 1 0与转脂蛋白之间具极为相似的理化性质如分子量、等电点、热稳定性等 .据此认为 ,CaMBP 1 0是转脂蛋白家族的新成员 ,Ca2 + 展开更多
关键词 cambp-10 非特异转脂蛋白(nsLTP) 钙调素(CaM) 钙调素结合蛋白(cambp) 结合活性
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钙不依赖性钙调素结合蛋白的研究进展 被引量:17
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作者 韦慧彦 郭振清 崔素娟 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2007年第2期124-131,共8页
钙调素是普遍存在于真核生物细胞中、发挥多种生物学调控作用的信号组分.钙调素不仅在有Ca2+情况下通过与钙依赖性钙调素结合蛋白作用而传递信号,也能在相对无Ca2+条件下直接结合钙不依赖性钙调素结合蛋白而传递信号.综述了无钙离子结... 钙调素是普遍存在于真核生物细胞中、发挥多种生物学调控作用的信号组分.钙调素不仅在有Ca2+情况下通过与钙依赖性钙调素结合蛋白作用而传递信号,也能在相对无Ca2+条件下直接结合钙不依赖性钙调素结合蛋白而传递信号.综述了无钙离子结合钙调素及钙不依赖性钙调素结合蛋白的结构特性、钙不依赖性钙调素结合蛋白的种类及其可能的生物学作用,这将有助于我们深入认识钙调素介导信号途径的特异性、复杂性和多样性. 展开更多
关键词 钙调素 无钙离子结合钙调素 钙不依赖性钙调素结合蛋白 钙调素结合构域
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植物钙调素结合蛋白研究进展 被引量:48
8
作者 毛国红 宋林霞 孙大业 《植物生理与分子生物学学报》 CAS CSCD 2004年第5期481-488,共8页
钙调素(CaM)作为最重要的一类Ca^(2+)传感蛋白可以通过与其下游CaM结合蛋白(CaMBP)作用而调节细胞的生理功能。因此,对CaMBP的研究是揭示CaM作用机制的重要内容,是探明Ca^(2+)-CaM信号转导系统的关键。该文从CaMBP和CaM的结合特性、植物... 钙调素(CaM)作为最重要的一类Ca^(2+)传感蛋白可以通过与其下游CaM结合蛋白(CaMBP)作用而调节细胞的生理功能。因此,对CaMBP的研究是揭示CaM作用机制的重要内容,是探明Ca^(2+)-CaM信号转导系统的关键。该文从CaMBP和CaM的结合特性、植物CaMBP的分布以及植物CaMBP的生物学功能等方面综述了植物CaMBP的研究现状和最新进展。 展开更多
关键词 钙调素 钙调素结合蛋白 钙调素结合结构 生物学功能
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蚯蚓钙调素结合蛋白的研究 被引量:10
9
作者 张燕红 张庭芳 《北京大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 1997年第6期731-735,共5页
以赤子爱胜蚓(EiseniaFoetida)为材料,通过DEAE-FastFlow离子交换层析、CaM-Sepharose亲和层析,分离纯化得到蚯蚓钙调素结合蛋白(CaMBPs)。纯化的CaMBPs对CaM激活的环核... 以赤子爱胜蚓(EiseniaFoetida)为材料,通过DEAE-FastFlow离子交换层析、CaM-Sepharose亲和层析,分离纯化得到蚯蚓钙调素结合蛋白(CaMBPs)。纯化的CaMBPs对CaM激活的环核苷酸磷酸二酯酶活性有抑制作用,而且这种抑制作用可通过加入过量的CaM达到完全恢复。SDS-PAGE显示CaMBPs有3条明显主带,在EGTA存在时表现分子量分别为62,49和30kD。紫外扫描测定含量分别为7.17%,7.31%和51.8%。用生物素-CaM覆盖法检测到3种CaM结合蛋白,与SDS-PAGE结果一致。酶活性测定实验表明在蚯蚓CaMBPs中有Ca2+-ATPase活性,但无NAD激酶活性。 展开更多
关键词 钙调素结合蛋白 蚯蚓 钙调素 cambpS
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钙调素对钙调素结合蛋白-10和玉米非特异性脂转移蛋白与脂质结合活性的影响 被引量:6
10
作者 谢万钦 赵立青 +3 位作者 白文艳 李振鹏 赵玉龙 李翠凤 《植物生理与分子生物学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期679-684,共6页
荧光标记的脂质结合实验表明,钙调素结合蛋白-10(CaMBP-10)具有典型的植物非特异性脂质转移蛋白与脂质结合的特性。进一步实验研究了钙调素(calmodulin,CaM)对CaMBP-10和玉米nsLTP与脂质结合的活性的影响,结果显示无论在有钙和无钙条件... 荧光标记的脂质结合实验表明,钙调素结合蛋白-10(CaMBP-10)具有典型的植物非特异性脂质转移蛋白与脂质结合的特性。进一步实验研究了钙调素(calmodulin,CaM)对CaMBP-10和玉米nsLTP与脂质结合的活性的影响,结果显示无论在有钙和无钙条件下,CaM对两者的影响均有不同之处,W-7和TFP能消除CaM的影响。提示CaM不仅与CaMBP-10和玉米nsLTP特异性相互作用,而且对2种脂转移蛋白可能具有不同的调节机制。 展开更多
关键词 钙调素 脂转移蛋白 钙调素结合蛋白-10 脂质结合活性
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玉米非特异性脂转移蛋白的cDNA克隆和表达及表达产物的钙调素结合活性分析 被引量:6
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作者 白文艳 赵立青 +3 位作者 李振鹏 谢万钦 赵玉龙 李翠凤 《植物生理与分子生物学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期570-576,共7页
用RT-PCR法克隆了成熟的玉米非特异性脂转移蛋白的cDNA,将它连接到表达质粒上并转化至大肠杆菌中表达。以钙调素凝胶覆盖法和钙调素亲和层析下拉实验对表达产物进行分析,证明它具有结合钙调素的活性,并且这种结合不依赖于Ca2+,与前期研... 用RT-PCR法克隆了成熟的玉米非特异性脂转移蛋白的cDNA,将它连接到表达质粒上并转化至大肠杆菌中表达。以钙调素凝胶覆盖法和钙调素亲和层析下拉实验对表达产物进行分析,证明它具有结合钙调素的活性,并且这种结合不依赖于Ca2+,与前期研究中钙调素结合蛋白-10和拟南芥非特异性脂转移蛋白1的结合特性相同。采用基因删除和缺失突变的方法研究玉米非特异性脂转移蛋白与钙调素结合的结构域,结果表明钙调素结合于47~60位氨基酸,预测的蛋白质二级结构为碱性双亲α-螺旋结构。 展开更多
关键词 非特异性脂转移蛋白 钙调素 钙调素结合蛋白-10 钙调素结合结构域
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拟南芥钙调素结合蛋白AtIQD26的分离鉴定 被引量:6
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作者 韦慧彦 郭振清 +3 位作者 王振杰 李朝炜 王志娟 崔素娟 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2008年第6期703-711,共9页
钙调素结合蛋白的研究有助于探明钙调素介导的信号转导途径.以拟南芥钙调素亚型2(ACaM2)为钓饵,重组共转化法构建并筛选了酵母双杂交文库.复筛后得到一个阳性克隆.序列测定及分析表明,分离的阳性克隆中包含一个编码钙调素结合蛋白AtIQD2... 钙调素结合蛋白的研究有助于探明钙调素介导的信号转导途径.以拟南芥钙调素亚型2(ACaM2)为钓饵,重组共转化法构建并筛选了酵母双杂交文库.复筛后得到一个阳性克隆.序列测定及分析表明,分离的阳性克隆中包含一个编码钙调素结合蛋白AtIQD26的cDNA片段.凝胶覆盖实验进一步表明,AtIQD26在1mmol/LCa2+或1mmol/LEGTA条件下都能与钙调素结合,说明其存在不依赖于Ca2+的CaM结合特性.GUS染色分析表明,AtIQD26具有普遍的组织表达特性,尤其是在新生的组织中表达量较大;融合荧光蛋白定位显示,AtIQD26在细胞核与质膜附近有分布.AtIQD26与钙调素空间分布的相似性,预示着它们在植物生长发育过程中可能共同发挥作用. 展开更多
关键词 钙调素结合蛋白 酵母双杂交 拟南芥 凝胶覆盖分析 组织表达 亚细胞定位
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一种钙调素结合蛋白对小麦质膜H^+-ATP酶活性的调节 被引量:8
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作者 刘华 凌启阆 +1 位作者 向左云 尚克进 《植物生理学报(0257-4829)》 CAS CSCD 1998年第1期91-94,共4页
CaM BP-10 (BP-10) is anovel endogenous calmodalin (CaM )-binding Protein tha was observed in andisolated from Plant. In our prelidrimpstudies it has been shown tha BP-10specifically inhibits adrin (IAA)-in-duced coleo... CaM BP-10 (BP-10) is anovel endogenous calmodalin (CaM )-binding Protein tha was observed in andisolated from Plant. In our prelidrimpstudies it has been shown tha BP-10specifically inhibits adrin (IAA)-in-duced coleoptile elongallon and pbonsecrehon. In oIder to inveshgatewhether BP10 inhibitS Picton secrehonand cell elongaion thidgh inhibitingthc achvity of Plasrna mernbare (PM)H+ -ATPase, the effect of BP-10 on theachvity of wheat coleoptile PM H+ -AT-Pase has been studied. It was observedtha neither IAA nor BP-10 had any effect on the achvity of PM H+ -ATPaSein vitro. In vho, however, the activity0f Al-treated PM H+-ATPaSe washigher than tha of the control, and BP-10 peilicanx iwhbital atinduedachvity by 87- 8% (rig. 1) - In addi-hon, the inhibitory effect cotild be re-versed by IAA after BPIO was removedfrom the mediurn, and it could also beovercome bV the addihon of CaM.Therefore, it appears that BP-10 in-hibits cell responses to andn by affect-ing the achvity of PM H+ -ATPase andthereby inhibiting Proton secrehon. As aresult, cell elongaon is inhibited. AndCaM is also involved in this pmeess- 展开更多
关键词 钙调素 结合蛋白 生长素 小麦 ATP酶 质膜
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白芷培养细胞外钙调素结合蛋白的胶体金电镜定位研究 被引量:5
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作者 宋春凤 李向印 +1 位作者 白娟 孙大业 《实验生物学报》 CSCD 1997年第3期313-321,共9页
利用胶体金标记技术制备了具有生物活性的植物CaM-BSA-gold探针,并用此探针建立了白芷愈伤组织培养细胞胞外钙调素结合蛋白(CaMBPs)的透射电镜标记方法。标记结果显示,在1mmol/L Ca^(2+)存在下,用EGTA洗涤过的白芷愈伤组织培养细胞壁表... 利用胶体金标记技术制备了具有生物活性的植物CaM-BSA-gold探针,并用此探针建立了白芷愈伤组织培养细胞胞外钙调素结合蛋白(CaMBPs)的透射电镜标记方法。标记结果显示,在1mmol/L Ca^(2+)存在下,用EGTA洗涤过的白芷愈伤组织培养细胞壁表面有金颗粒分布,而分别在含有EGTA、TFP、过量未标记的CaM、CaM抗体存在的情况下,用金标CaM探针进行标记.以及用金标羊抗兔抗体替代金标CaM探针进行标记的各对照组,细胞壁表面金颗粒则消失,说明白芷愈伤组织培养细胞壁表面存在着CaM结合位点或CaMBPs。 展开更多
关键词 白芷 细胞培养 钙调素 结合蛋白 胶体金电镜定位
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拟南芥钙调素结合蛋白基因启动子的克隆及表达 被引量:2
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作者 万东莉 李瑞丽 +4 位作者 邹博 高阳 万永青 王瑞刚 李国婧 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期17-22,共6页
采用PCR技术从拟南芥中克隆了SCBP60g基因的启动子,并与GUS报告基因融合构建重组表达载体,转化野生型拟南芥,对获得的转基因株系进行GUS组织染色,从基因调控水平上探讨其在功能方面的差异。结果显示:SCBP60g基因的启动子能指导GUS报告... 采用PCR技术从拟南芥中克隆了SCBP60g基因的启动子,并与GUS报告基因融合构建重组表达载体,转化野生型拟南芥,对获得的转基因株系进行GUS组织染色,从基因调控水平上探讨其在功能方面的差异。结果显示:SCBP60g基因的启动子能指导GUS报告基因在拟南芥的根、茎、叶和花中表达,并且在这些部位的维管束表达较强。这种表达方式与LCBP60g基因的启动子指导的GUS基因组织化学染色有差异,表明这个启动子的表达调控具有一定的特异性。 展开更多
关键词 拟南芥 启动子 钙调素结合蛋白 CBP60g GUS报告基因
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植物钙调素及其结合蛋白的结构生物学进展 被引量:11
16
作者 左娜 陈洁 吕莹果 《粮食与油脂》 北大核心 2016年第9期1-5,共5页
钙调素(CaM)作为植物中一种重要的钙受体蛋白,与Ca^(2+)结合调节细胞内一些靶蛋白(Ca MBPs)的活性,是细胞内Ca^(2+)信号传导途径中的主要信号转导分子,介导调控由Ca^(2+)引起的一系列生理生化反应。研究游离态CaM、结合了钙离子的Ca M... 钙调素(CaM)作为植物中一种重要的钙受体蛋白,与Ca^(2+)结合调节细胞内一些靶蛋白(Ca MBPs)的活性,是细胞内Ca^(2+)信号传导途径中的主要信号转导分子,介导调控由Ca^(2+)引起的一系列生理生化反应。研究游离态CaM、结合了钙离子的Ca M以及靶蛋白肽–CaM复合体的结构有助于我们了解CaM介导Ca^(2+)信号传导途径的作用机理。综述了植物CaM的结构和性质,以及其与靶蛋白相互作用的研究进展。 展开更多
关键词 钙调素 钙调素结合蛋白 复合物结构
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烟草幼苗两种钙调素结合蛋白激酶的活性调节及基因表达 被引量:3
17
作者 华玮 李荣俊 +1 位作者 梁述平 吕应堂 《植物生理与分子生物学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期305-310,共6页
在体外条件下,烟草两种钙调素结合蛋白激酶(NtCBK1与NtCBK2)自磷酸化活性的最适pH分别是7.5和8;Mg2+离子浓度对两种激酶自磷酸化活性影响比Na+离子大。Northern杂交结果显示:两基因在花和叶中都有大量表达,但在根和茎中NtCBK1的表达量... 在体外条件下,烟草两种钙调素结合蛋白激酶(NtCBK1与NtCBK2)自磷酸化活性的最适pH分别是7.5和8;Mg2+离子浓度对两种激酶自磷酸化活性影响比Na+离子大。Northern杂交结果显示:两基因在花和叶中都有大量表达,但在根和茎中NtCBK1的表达量明显多于NtCBK2;高盐处理会引起NtCBK1基因表达量升高,而高温、低温和干旱处理对该基因表达没有影响,说明NtCBK1参与植物体内盐诱导的信号转导。 展开更多
关键词 钙调素结合蛋白激酶 自磷酸化 基因表达 NORTHERN杂交
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淋巴细胞中钙调素结合蛋白的研究 被引量:1
18
作者 吴光玉 赵升皓 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1990年第5期266-268,共3页
应用^(125)I—钙调素(CAM)覆盖(Overlay)技术,从家兔阑尾(B细胞)、肠系膜淋巴结(T、B细胞)和脾脏(T、B细胞)淋巴细胞胞浆中分别检测到19、20和16种钙调素结合蛋白(CaMBP),其中均含有80、78、70、63、50、41、36、22、17和13.5KD CaMBP,... 应用^(125)I—钙调素(CAM)覆盖(Overlay)技术,从家兔阑尾(B细胞)、肠系膜淋巴结(T、B细胞)和脾脏(T、B细胞)淋巴细胞胞浆中分别检测到19、20和16种钙调素结合蛋白(CaMBP),其中均含有80、78、70、63、50、41、36、22、17和13.5KD CaMBP,以17KD和13.5KD CaMBP含量最为丰富,且与CaM结合呈部分钙依赖性。 展开更多
关键词 淋巴细胞 钙调素 结合蛋白
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白芷悬浮培养细胞外21KD钙调素结合蛋白的鉴定及纯化 被引量:1
19
作者 唐军 孙大业 《河北师范大学学报(自然科学版)》 CAS 1994年第2期121-122,共2页
利用生物素-CaM凝胶覆盖技术,在白芷悬浮培养细胞外检测一个分子量为21KD的钙调素结合蛋白(CaMbp),并用SephadexG-100凝胶过滤柱,CM-Sepharose阳离子交换柱层析将其纯化。
关键词 钙调素 结合蛋白 凝胶覆盖 纯化
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白芷细胞外钙调素结合蛋白(ECBP21)免疫组化及金标定位分析 被引量:1
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作者 丁存宝 毛国红 孙大业 《实验生物学报》 CSCD 北大核心 2004年第1期22-28,共7页
ECBP21是我们从白芷悬浮培养细胞外纯化及cDNA克隆的一种钙调素结合蛋白(CaMBP),亦是植物中首次报道的细胞外CaMBP。本实验以大肠杆菌表达的重组ECBP21蛋白为抗原,制备了高效价特异性抗体;随后,利用免疫组化及金标定位技术,研究了ECBP2... ECBP21是我们从白芷悬浮培养细胞外纯化及cDNA克隆的一种钙调素结合蛋白(CaMBP),亦是植物中首次报道的细胞外CaMBP。本实验以大肠杆菌表达的重组ECBP21蛋白为抗原,制备了高效价特异性抗体;随后,利用免疫组化及金标定位技术,研究了ECBP21蛋白组织特异性分布及亚细胞定位。免疫组化结果表明:ECBP21在白芷各组织中均有分布,但在叶、花、花序轴中较多,而在根中较少,并且ECBP21在细胞中多分布于细胞壁区域;免疫胶体金电镜定位结果显示:在白芷花序轴细胞中金颗粒主要分布在细胞壁,表明ECBP21蛋白主要定位于细胞壁区域,从而首次为细胞外CaMBP(ECBP21)的胞外存在提供了直观证据,并为进一步研究其在植物生长发育中的功能提供了初步信息。 展开更多
关键词 白芷 细胞外钙调素结合蛋白 ECBP21 细胞壁 花序轴细胞 免疫组织化学
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