三叉神经痛大鼠中钙通道α2δ-1亚单位表达的变化

目的研究大鼠眶下神经结扎后钙通道α2δ-1亚单位(Cavα2δ-1)表达的变化,探讨Cavα2δ-1与三叉神经痛的关系。方法将12只SD大鼠随机分为神经结扎组和假手术对照组,每组6只。用铬肠线轻松结扎神经结扎组大鼠的眶下神经,建立三叉神经的神经病理性疼痛动物模型;假手术对照组仅暴露神经,不结扎。术前1 d,术后第3、6、9、12、15天测定机械刺激反应阈值。术后第15天收集三叉神经节(TG)和三叉神经脊束核尾侧亚核及颈段第一、二脊髓背侧角(Vc/C2)组织,采用Western印迹杂交法测定Cavα2δ-1蛋白浓度。结果神经结扎组大鼠术侧机械刺激反应阈值在术后逐渐降低,与术前比较,术后第9、12、15天机械刺激反应阈值差异有统计学意义(P<0.05)。术后第15天神经结扎组术侧TG和Vc/C2中Cavα2δ-1表达明显上调(P<0.01)。结论 Cavα2δ-1参与了大鼠三叉神经痛的发生发展,为进一步探讨三叉神经痛发病机制提供实验基础。

L型钙通道_α1C亚单位在成年大鼠心脏中的表达

目的研究L型钙通道α1C亚单位在成年大鼠心脏中的空间表达情况。方法制备成年大鼠心脏冰冻切片,结合大体位置和HE染色结果快速辨认出窦房结、房室结和结后延伸。采用免疫荧光和免疫印迹技术检测L型钙通道α1C亚单位在大鼠窦房结、房室结、结后延伸、右房、右室的表达,用共聚焦显微镜观察其表达部位,通过凝胶成像及图像分析系统对实验结果进行分析。结果荧光呈现点状、斑状或不规则的短线状,主要分布于细胞膜及细胞内的膜性结构,其荧光强度由弱到强依次为窦房结、房室结、结后延伸、右心房、右心室,房室结和结后延伸之间无显著性差异(P>0.05),其余两两相比均有显著差异(P<0.05),其中右心房、右心室明显强于窦房结、房室结和结后延伸(P<0.01)。各部位在相对分子质量200000左右可见一特异性蛋白条带。对蛋白条带进行灰度值分析,结果与免疫荧光相一致。结论L型钙通道α1C亚单位在成年大鼠心脏分布广泛,在不同部位表达量不同,在工作肌组织的表达量明显高于传导组织,提示钙电流在心脏不同部位有不同的分子基础。

电压门控钙离子通道α_2δ亚单位在糖尿病性神经痛大鼠脊髓中的表达水平分析

目的:研究糖尿病性神经痛(PDN)大鼠脊髓电压门控钙离子通道α2δ亚单位表达水平的变化。方法:30只雄性SD大鼠中,取8只为对照组,其余22只制作成1型糖尿病模型。用von Frey hairs刺激大鼠足底,观察糖尿病大鼠机械痛阈的变化过程。建模后28d取大鼠脊髓腰膨大部分,采用Real-time PCR和Western Blot方法测定PDN大鼠模型中α2δ亚单位在脊髓中的表达情况。结果:糖尿病大鼠于建模后14d机械痛阈开始下降,21、28d后与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。PDN大鼠脊髓α2δ亚单位mRNA和蛋白水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:PDN大鼠脊髓α2δ亚单位呈高表达,提示α2δ亚单位可能参与了PDN的发病。

吗啡诱导大鼠镇痛耐受和脊髓GIRK1-2表达减少

【目的】观察G蛋白门控内向整流钾离子通道(GIRK)亚单位GIRK1和GIRK2在吗啡耐受大鼠脊髓背角的表达变化并探讨其调控机制。【方法】成年雄性SD大鼠连续7 d鞘内注射吗啡(15μg/d)建立吗啡耐受模型。在每天吗啡注射前30 min,鞘内注射蛋白激酶C-ε(PKCε)选择性抑制剂εV1-2(10μg),观察对吗啡耐受以及脊髓背角GIRK1和GIRK2表达的影响。24只大鼠随机平均分成四组:生理盐水组(saline)、吗啡组(morphine)、吗啡+生理盐水组(morphine+saline)和吗啡+εV1-2组(morphine+εV1-2)。所有大鼠在1 d、3 d、5 d和7 d,药物注射前和吗啡注射后30 min后检测热痛阈值,在第7天行为学测试结束后,免疫荧光检测脊髓背角GIRK1和GIRK2的表达。【结果】荧光双染显示,GIRK1和GIRK2主要分布于大鼠脊髓背角I-Ⅱ板层,且与μ阿片受体(MOR)共染。与生理盐水组相比,连续7 d鞘内注射吗啡导致吗啡镇痛效应显著下降(P<0.001),同时导致脊髓背角GIRK1(22.45±10.58vs.62.83±20.80,P<0.001)和GIRK2(23.67±8.78 vs.50.17±11.05,P=0.001)表达显著降低。荧光双染显示,PKCε与GIRK1和GIRK2在脊髓背角共染。鞘内注射εV1-2可以有效抑制吗啡耐受的形成(P<0.001),且抑制吗啡诱导的GIRK1(54.50±10.37 vs.19.33±9.48,P<0.001)和GIRK2(39.83±6.24 vs.15.83±9.58,P=0.001)表达降低。【结论】脊髓背角GIRK1和GIRK2下调与吗啡耐受密切相关,PKCε是吗啡诱导GIRK1和GIRK2下调的重要原因。

血清α2δ-1、RvD1在急性脑出血患者病情评估和预后预测中的价值

目的探究血清钙通道α2δ-1、消退素D1(RvD1)水平在评估急性脑出血患者的病情和预后中的临床应用价值。方法选取2022年1月—2023年12月湖南中医药大学第一附属医院急诊科收治的急性脑出血患者126例为研究组,根据随访6个月患者预后情况分为预后不良亚组52例和预后良好亚组74例;另选取同期医院健康体检者60例为健康对照组。采用酶联免疫吸附法测定血清α2δ-1、RvD1水平;多因素Logistic回归分析急性脑出血患者预后不良的影响因素;受试者工作特征(ROC)曲线评价血清α2δ-1、RvD1水平对急性脑出血预后不良的预测价值。结果研究组血清α2δ-1水平高于健康对照组,血清RvD1水平低于健康对照组(t=28.379、16.412,P均<0.001);随着病情加重,急性脑出血患者血清α2δ-1水平逐渐上升,血清RvD1水平逐渐降低(F=109.100、54.370,P均<0.001);126例急性脑出血患者6个月预后不良发生率为41.27%(52/126),预后不良亚组患者年龄、发病至入院时间、NIHSS评分、血肿体积、血清α2δ-1大于/高于预后良好亚组(t=3.331、27.914、21.449、6.056、2.301,P均<0.01),血清RvD1水平低于预后良好亚组(t=5.824,P<0.001);多因素Logistic回归结果示,NIHSS评分、血肿体积、α2δ-1升高为急性脑出血患者预后不良的独立危险因素[OR(95%CI)=2.361(1.694~3.101)、2.147(1.514~2.798)、1.665(1.262~2.995)],RvD1升高为独立保护因素[OR(95%CI)=0.389(0.255~0.662)];血清α2δ-1、RvD1水平及二者联合预测急性脑出血患者预后不良的曲线下面积(AUC)分别为0.756、0.780、0.841,二者联合的AUC大于血清α2δ-1、RvD1水平单独预测(Z/P=2.623/0.009、2.127/0.033)。结论血清α2δ-1、RvD1水平可反映急性脑出血患者的病情程度,可作为患者预后不良的辅助预测指标,二者联合对急性脑出血患者的预后评估价值较高。

电压依赖性钙通道α2δ-1亚基在瑞芬太尼诱发切口痛大鼠痛觉过敏中的表达变化

目的：观察背根神经节电压依赖性钙通道α2δ-1蛋白在瑞芬太尼诱发切口痛大鼠术后痛觉过敏中表达的变化。方法：体重180~220 g雄性SD大鼠64只,采用随机数字法分为8组（n=8）：对照组（C组）;瑞芬太尼组（R组）;切口痛组（I组）;瑞芬太尼＋切口痛组（M组）;切口痛＋鞘内注射NS组（E组）;切口痛＋瑞芬太尼＋NS组（F组）;切口痛＋瑞芬太尼＋Cavα2δ-1错义寡聚核苷酸组（G组）;切口痛＋瑞芬太尼＋Cavα2δ-1反义寡聚核苷酸组（H组）。瑞芬太尼颈部皮下输注剂量为80μg/kg（1 ml）,输注时间30 min;切口痛模型为右后足掌切口,深达肌肉层;鞘内分别注射NS、Cavα2δ-1错义寡聚核苷酸、Cavα2δ-1反义寡聚核苷酸。C、R、I和M组为实验1部分,E、F、G和H组为实验2部分。各组大鼠适应环境两天,于手术前48 h、24 h（T-2、T-1）,手术后6 h,24 h,48 h（T0-2）分别使用热辐射刺激仪和von Frey纤维丝进行热刺激缩足潜伏期（PWL）和机械刺激缩足阈值（PWT）测定。实验2大鼠分别于造模后6 h及24 h痛敏测定结束后进行鞘内注射。实验1和实验2痛敏测定完成后,取L4-6节段背根神经节,采用Western blot免疫印迹杂交法测定Cavα2δ-1蛋白的表达。结果：实验1：I组、R组和M组的术后各时段PWL、PWT均较C组降低,且M组较I组进一步降低,差异有统计学意义（P〈0.05）;M组背根神经节Cavα2δ-1蛋白表达水平较其余各组均高,差异有统计学意义（P〈0.05）。实验2：E组、F组、G组和H组的术后各时段PWL、PWT均降低,且F组、G组在T1-2较H组进一步降低,差异有统计学意义（P〈0.05）;H组背根神经节Cavα2δ-1蛋白表达水平较F组、G组降低,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：背根神经节Cavα2δ-1蛋白可能参与瑞芬太尼诱发切口痛大鼠的术后痛觉过敏的形成;鞘内注射Cavα2δ-1-反义寡聚核苷酸能延缓切口痛大鼠的术后痛敏。

电压门控钙通道辅助亚基α2δ-1的结构和分子药理

电压门控钙通道(voltage-gated calcium channel, VGCC)辅助亚基α2δ-1在神经元兴奋传递中起促进作用,是加巴喷丁(gabapentin)和普瑞巴林(pregabalin)的作用靶点。α2δ-1由高度糖基化的α2亚基和δ亚基以4对二硫键相连,包含4个串联的Cache结构域和1个von Willebrand A结构域,但δ亚基的C-末端结构尚未完全解析。α2δ-1的结构和作用机制研究进展主要聚焦于以下3点:(1)α2δ-1的C-末端,传统观点认为含有跨膜基序(motif)。另一个观点认为是GPI锚定,尚缺乏直接的实验证明;(2)α2δ-1对电压门控钙离子通道的影响,包括直接的和非直接的调控对电压门控钙通道的膜上转运和电流的影响,以及α2δ-1的翻译后修饰对钙电流的影响;(3)α2δ-1不依赖于钙通道,而与其他蛋白质存在相互作用,互作效应表现在兴奋性电流增大或促进神经突触发生。在疾病研究方面,本文主要综述α2δ-1在慢性疼痛中的机制研究。α2δ-1参与的生理活动的分子机制复杂,现已突破传统的局限于电压门控钙通道辅助亚基的角色,并将有可能通过α2δ-1建立跨细胞膜的蛋白质-蛋白质相互作用网络的动态膜微区,以进一步评估其生理、病理和药理的相关性。

人类T型钙通道α_(1H)亚单位基因在细胞增殖中的功能研究

将人类T型钙通道α1H 亚单位基因 (CACNA1H)cDNA转染到HEK 2 93(humanembroyonickidney)细胞系得到稳定过量表达的细胞株 ,以此为体外模型来研究T型钙通道在细胞增殖中的直接作用。RT -PCR和标准全细胞膜片钳记录分别从mRNA转录水平和T型钙通道蛋白功能水平验证了α1H 亚单位的过量表达。生长曲线结果表明 ,T型钙通道α1H 亚单位基因的过量表达能显著促进HEK - 2 93细胞增殖 ,将细胞群体倍增时间从对照细胞的 2 2 1± 1.1h缩短到稳定转染细胞的 14 0± 0 .4h ,细胞群体倍增时间缩短了约 8h ;流式细胞分析结果表明 ,在稳定转染细胞处于S期的细胞百分率比对照细胞高 ,相反地处于G1 期的百分率比对照细胞低 ,以上结果证明了过量表达T型钙通道亚单位α1H 基因能促进细胞增殖。Western印迹结果提示 ,T型钙通道α1H 亚单位基因表达产物是通过某种信号途径 ,提高了与细胞周期有关基因 (CDK2、cyclinA和cyclinE)的蛋白质表达水平 ,从而刺激了细胞周期的进程。

氯通道阻断剂对α_1-肾上腺素受体亚型引起的Ca^(2+)内流的影响

目的探讨氯通道阻断剂在α１Ａ、α１Ｂ、α１Ｄ肾上腺素受体（ＡＲ）亚型触发的Ｃａ２＋内流中的作用。方法采用Ｆｕｒａ－２荧光探针双波长测定胞浆游离Ｃａ２＋浓度（［Ｃａ２＋］ｉ）。结果在３种亚型的细胞上，肾上腺素（Ａｄｒ）触发的Ｃａ２＋内流均不受ｎｉｆｅｄｉｐｉｎｅ影响； ＳＫ＆Ｆ９６３６５可部分抑制α１Ａ、α１Ｂ－ＡＲ介导的Ｃａ２＋内流，而对ａ１Ｄ－ＣＨＯ细胞无影响。在ＢＢ－ＣＨＯ细胞上，ｎｉｆｌｕｍｉｃ ａｃｉｄ（ＮＦＡ）和ｆｕｒｏｓｅｍｉｄｅ呈浓度依赖性抑制Ｃａ２＋内流；当Ｃａ２＋内流被ＳＫ＆Ｆ９６３６５最大限度抑制后，ＮＦＡ和ｆｕｒｏｓｅｍｉｄｅ可进一步抑制Ｃｄ２＋内流。α１Ａ－ＡＲ介导的Ｃａ２＋内流可被ｆｕｒｏｓｅｍｉｄｅ抑制，抑制率达 １４％ １５％。 ＮＦＡ可抑制ａ１Ｄ－ＡＲ引起的Ｃａ２＋内流，抑制率为３９％±９％。结论氯通道参与α１Ａ、α１Ｂ及α１Ｄ－ＡＲ引起的经非电压依赖性Ｃａ２＋通道介导的Ｃａ２＋内流，其间存有异同。ＮＦＡ敏感Ｃａ２＋内流及ｆｕｒｏｓｅｍｉｄｅ敏感的Ｃａ２＋内流与ＳＫ＆Ｆ９６３６５敏感的Ｃａ２＋内流存在非同一性。

新生期大鼠反复惊厥后海马区γ-氨基丁酸A受体α1和γ2亚单位表达的改变及其意义

目的 探讨新生期大鼠反复惊厥后海马区γ-氨基丁酸（GABA）A受体（GABAA R） α1和γ2亚单位表达的改变及其意义.方法 72只健康新生大鼠随机分为反复惊厥组（RS组）和对照组（CONT组）,两组又随机分为10日龄、35日龄、70日龄亚组,各亚组12只大鼠.通过三氟乙醚吸入诱导建立新生期大鼠反复惊厥动物模型.采用Western blot法及逆转录-PCR法检测大鼠海马区GABAAR α1和γ2亚单位蛋白及mRNA的表达.结果 与CONT组比较,RS组大鼠10日龄亚组海马区GABAARγ2亚单位蛋白表达明显降低（P ＜0.01）;35日龄亚组和70日龄亚组海马区GABAAR α1和γ2亚单位蛋白表达均明显降低（均P＜0.05）.与CONT组比较,RS组大鼠10日龄亚组、35日龄亚组和70日龄时亚组海马区GABAAR α1和γ2亚单位mRNA表达均明显降低（P ＜0.05～0.01）.结论 新生期大鼠反复惊厥后海马区GABAAR α1和γ2亚单位表达明显降低,这可能在发育期反复惊厥所致的远期GABA介导的抑制功能下降中起重要作用.

T型钙通道α_(1G)亚单位在细胞增殖中的功能研究

利用稳定过表达人类T型钙通道α_(1G)亚单位的HEK-293细胞研究了T型钙通道在细胞增殖中的作用。RT-PCR和标准全细胞膜片钳记录分别从mRNA转录水平和T型钙通道蛋白功能水平验证了α_(1G)单位的过表达的实现。生长曲线表明,T型钙通道α_(1G)亚单位的过表达能显著促进细胞增殖,HEKα_(1G)^+细胞的细胞群体倍增时间(13.7±0.3h)比对照HEK-293细胞的细胞群体倍增时间(22.1±1.1h)缩短了约8h;流式细胞分析结果也与此吻合,在稳定过表达了人类T型钙通道α_(1G)亚单位的细胞处于S期的细胞百分率比对照HEK-293细胞高,相反地处于G_0/G_1期的百分率比对照HEK-293细胞低,以上结果证明过表达T型钙通道α_(1G)亚单位能促进细胞增殖;T型钙通道特异性阻断剂mibefradil抑制HEKα_(1G)^+细胞增殖,IC_(50)为3.5/μmol/L,表明在HEK-293细胞过表达T型钙通道对细胞增殖的促进作用可以被T型钙通道特异性阻断剂mibefradil抑制,这就进一步证明了T型钙通道在促进细胞增殖方面的直接作用。Western杂交结果提示了T型钙通道α_(1G)亚单位的表达是通过某种信号途径提高了与细胞周期有关的蛋白质,cyclin A、cyclin E和CDK2的表达水平,从而刺激了细胞周期的进程。本研究有助于理解细胞增殖的机制并为开发治疗与细胞增殖异常有关疾病的新药提供了理论依据。

T型钙通道α_(1G)亚单位在慢性肾衰竭大鼠左心室心肌中的表达及钙三醇干预的研究

目的 观察慢性肾衰竭 (CRF)大鼠左心室心肌中T型钙通道α1G亚单位的表达与心肌肥厚的关系 ,研究钙三醇对其表达的影响。方法 2 4只雄性清洁级SD大鼠随机分为三组 ,每组 8只 :①CRF组 ;②CRF加钙三醇组 (5 0ng/d灌胃 ) ;③假手术对照组。采用两步法 5 / 6肾大部分切除 (SNx)制备CRF动物模型 ;对照组施行假手术。术后 12周处死大鼠 ,检测各组大鼠心重 /体重比、血清尿素氮 (BUN)、肌酐 (Cr)和甲状旁腺素 (iPTH)水平以及内生肌酐清除率 (Ccr) ,并用逆转录聚合酶链反应 (RT -PCR)两步法观察大鼠左心室心肌中T型钙通道α1G亚单位信使核糖核酸 (mRNA)的表达。结果 与对照组相比 ,术后 12周CRF组血清BUN、SCr、iPTH和心重 /体重比值明显上升 (P <0 .0 1) ,CCr明显降低 (P <0 .0 1) ,且左心室心肌中重新出现α1G亚单位mRNA的表达 (P≤ 0 .0 0 1) ;而钙三醇组 ,除血清iPTH较CRF组明显下降外 (P <0 .0 1) ,其血清BUN、SCr、CCr和心重 /体重比值 ,以及左心室心肌中α1G亚单位mRNA的表达均与CRF组无明显差异 (P >0 .0 5 )。结论 CRF大鼠心肌重量明显增加 ,左心室心肌出现T型钙通道的异常表达 ,提示T型钙通道可能在CRF心肌肥厚中起重要作用 ;但用钙三醇干预后虽iPTH能降低 。

L型钙离子通道α_1亚单位的分子生物学研究进展

钙离子被人们称作生物信使，与其密切相关的钙离子通道的重要性则不言而喻，因此众多的生命科学工作者投入了大量的精力研究钙离子通道，并且已经从细胞水平的研究深入到分子水平。遗憾的是，到目前为止仍没有完全搞清楚它的功能和作用机制，甚至没有形成统一的理论观点。...

TRPC1与BK-α的表达对大鼠糖尿病肾病的影响

目的 探究瞬时受体电位C1(transient receptor potential channel 1,TRPC1)蛋白和大电导钙离子激活钾通道α亚单位(large conductance Ca^(2+)-activated K^(+)channel α subunit,BK-α)蛋白对大鼠糖尿病肾病(diabetic kidney disease,DKD)的影响。方法 将SD大鼠随机分为对照组(n=15)和模型组(n=15)。利用高脂饲料和链脲佐菌素(streptozocin,STZ)构建DKD模型。采用血糖分析仪检测大鼠血糖变化;采用全自动生化分析仪检测大鼠肾功能水平;HE染色检测肾组织的病理变化以确定造模成功。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和蛋白免疫印迹分别检测肾组织TRPC1和BK-α的mRNA和蛋白表达水平;免疫组化检测TRPC1和BK-α的分布和表达情况。结果 模型组大鼠空腹血糖(fasting plasma glucose,FPG)、尿白蛋白排泄率(urinary albumin excretion rates,UAER)、血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)和肌酐(creatinine,Cr)均显著高于对照组(P <0.01);模型组大鼠肾小管内壁细胞出现膨胀现象,部分细胞脱离;可见肾小管发生病变或死亡;此外,在许多肾小管及肾间质区域发现有中性白细胞及其残骸;以上HE染色结果提示,DKD模型复制成功。TRPC1和BK-α在肾小球部位最为丰富,且模型组大鼠肾组织中TRPC1和BK-α的mRNA和蛋白水平都显著高于对照组(P <0.05)。结论 大鼠糖尿病肾病影响TRPC1和BK-α在肾组织中的分布和表达。

类KQT亚科-钾离子电压门控通道成员1基因多态性与赣州市居民2型糖尿病的相关性

目的探讨类KQT亚科-钾离子电压门控通道成员1(KCNQ1)基因单核苷酸多态性与赣州市居民2型糖尿病(T2DM)发病的关系。方法采用巢式病例对照研究方法,选择新发T2DM患者521例(T2DM组)、糖调节正常(NGT)者521例(NGT组)。应用多重PCR技术、MassARRAY iPLEX单碱基延伸技术和基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱(MALDI-TOF)技术,对KCNQ1基因rs2237892、rs151290位点进行基因分型,比较rs2237892、rs151290位点基因型和等位基因在2组中的差异。结果 rs2237892位点存在CC、CT、TT 3种基因型,其在T2DM组的分布频率分别为49.41%、43.48%、7.11%,NGT组的分布频率分别为43.26%、46.48%、10.26%,CC基因型在2组之间的频率分布差异有统计学意义(χ~2=4.502,P=0.034),OR(95%CI)值为1.647(1.036~2.620);等位基因C、T在T2DM组的分布频率分别为71.15%、28.85%,NGT组分别为66.50%、33.50%,等位基因C在2组之间的频率分布差异有统计学意义(χ~2=5.049,P=0.025),OR(95%CI)值为1.242(1.028~1.501)。rs151290位点存在CC、CA、AA 3种基因型,其在T2DM组的分布频率分别为39.09%、49.01%、11.90%,NGT组分别为36.57%、47.27%、16.16%,2组之间各基因型分布频率比较差异均无统计学意义(P>0.05);其等位基因C、A的分布频率在2组之间比较差异亦无统计学意义(P>0.05)。结论 KCNQ1基因rs2237892位点多态性与赣州市居民T2DM的发病相关,而rs151290位点多态性可能与赣州市居民T2DM的发病无关。

BK_(Ca)β_1亚单位调控机制研究及其与离子通道病的关系

BKCa通道广泛存在于多种组织,调控细胞的多种功能,对于细胞功能的实现起着重要的作用。研究发现,BKCa通道的调控机制主要是辅助性的β1亚单位的组织特异性调控。β1亚单位异常所造成的BKCa通道的功能异常会形成多种疾病。本文就β1亚单位的调控机制及其与疾病的关系做如下概述。

妊娠期高血压患者钙电压门控通道亚单位α1c基因与疾病易感性的关系

目的探究妊娠期高血压患者钙电压门控通道亚单位α1c基因(CACNA1C)多态性与疾病易感性的关系。方法选取2020年1月到2022年6月于海口市妇幼保健院建档的375例妊娠期高血压孕妇和303名正常孕妇,分别作为妊娠期高血压组和对照组,收集两组孕妇孕晚期生化指标检测结果,采用聚合酶链反应-限制性酶切片断长度多态性(PCR-RFLP)法检测两组孕妇CACNA1C基因rs2238032、rs10848683、rs2299661位点等位基因,多因素logistic回归分析CACNA1C基因与妊娠期高血压发生的关系。结果两组CACNA1C rs2238032位点基因型构成比差异具有统计学意义(P<0.05),而rs10848683及rs2299661位点基因型构成比差异无统计学意义(P>0.05)。对照组中rs2238032位点不同基因型患者年龄、体重指数、孕周、孕次、24 h平均收缩压、24 h平均舒张压差异无统计学意义(P>0.05)。妊娠期高血压组中rs2238032位点TT型患者体重指数、24 h平均收缩压、24 h平均舒张压高于GT型、GG型患者(P<0.05)。多因素logistic回归分析显示,rs2238032基因型多态性是影响妊娠期高血压发生的相关因素(P<0.05)。结论妊娠期高血压患者CACNA1C基因rs2238032位点TT型突变与血压水平变化有关,且会增加妊娠期高血压易感性。

电针水沟穴对大脑中动脉闭塞大鼠脑缺血后微小RNA-126及靶基因的影响

目的观察电针水沟穴对大脑中动脉闭塞（MCAO）大鼠脑缺血后微小RNA-126（miR-126）及其靶基因磷脂酰肌醇-3-激酶调节亚单位（PIK3R2）mRNA、出芽相关蛋白-1（SPRED1）mRNA表达的影响，从血管新生角度探讨电针治疗脑缺血的可能机制。方法将20只雄性SD大鼠按随机数字表法分为正常组、假手术组、模型组、治疗组，每组5只。参照改良Longa线栓法复制MCAO大鼠模型，假手术组不插入线拴。制模后治疗组于水沟穴（大鼠唇裂鼻尖下1mm中处，向上斜剌1mm）与右耳根部皮肤接G6805—1A型治疗仪进行电针治疗，1mA电流、2Hz，持续留针30min，连续治疗3d；正常组、假手术组、模型组制模后不进行处理。采用Berderson评分评价大鼠神经功能缺损程度；用实时荧光定量聚合酶链反应（qPCR）检测miR-126及PIK3R2、SPRED1的mRNA表达。结果与正常组比较，模型组大鼠有不同程度的神经功能缺损，Berderson评分明显增高（分：11．20±1．64比0，P〈0．01），治疗后Berderson评分较模型组明屁降低（分：7．20±1．48比11．20±1．64，P〈0．01）。模型组miR-126、PIK3R2及SPRED1的mRNA表达均较正常组明显升高[miR-126（2^-△△Cr）：1．13±0．48比0．16±0．12．PIK3R2mRNA（2^-△△Cr）：12．03±6．09比0．42±0．33，SPRED1mRNA（2^-△△Cr）：8．77±3．85比0．21±0．40，均P〈0．01]；治疗组miR-126表达较模型组明显升高（2^-△△Cr：1．93±0．81比1．13±0．48），PIK3R2、SPRED1的mRNA表达较模型组明照明显降低[PIK3R2mRNA（2^-△△Cr）：5．78±3．61比12．03±6．09，SPRED1mRNA（2^-△△Cr）：3．90±3．24比8．77±3．85，P〈0．05或JP〈0．01]。结论电针水沟穴能促大鼠脑缺血后神经功能体征的恢复，其机制可能与其调控miR-126及其靶基因从而促进了脑血管新生有关.

VEGF、COX-2、HIF-1α在子宫内膜癌中的表达及其意义

应用免疫组化SP法检测46例子宫内膜癌、22例子宫内膜不典型增生和19例正常子宫内膜组织中VEGF、COX-2与HIF-1α蛋白的表达情况.结果显示:VEGF、COX-2与HIF-1α在子宫内膜癌中表达升高,且随分级分期的升高而升高,三者在子宫内膜病变发生、发展中起促进作用;在子宫内膜组织中,COX-2和HIF-1α可能分别对VEGF起调控作用,有望成为内膜肿瘤抗血管治疗的有效靶标.

肾性高血压大鼠心房肌L型钙通道α_(1C)亚单位和Na^+-Ca^(2+)交换器mRNA变化的意义

目的 利用“2肾 1夹”型Goldblatt高血压大鼠模型 ,观察在高血压形成过程中心房肌L型钙通道α1C亚单位 (CaL α1C)和Na+ Ca2 + 交换器 (NCX)mRNA的变化 ,在基因水平探讨其潜在的意义。方法 Sprague Dawley大鼠 ,高血压组用U型银夹夹住左肾动脉 ,右肾保留 ;假手术组只分离左肾动脉 ,不夹银夹。套尾法监测尾动脉血压 ,分别于手术后 2、4、6周处死动物 (各 6只 ) ,逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)半定量法分析CaL α1C和NCXmRNA的表达量 (以三磷酸甘油醛脱氢酶 ,即GAPDH为内参照 )。结果 在高血压形成过程中左心耳CaL α1C的mRNA水平在 2、4周时分别是假手术组的2 5、2 4倍 (P <0 0 1) ,6周时接近正常水平 ,右心耳在 6周才明显增多 (是假手术组的 2 5倍 ,P <0 0 1) ;左心耳NCX的mRNA水平在 4、6周分别是假手术组的 1 9、1 4倍 (P <0 0 1) ,而右心耳NCX的mRNA水平在 2、4、6周都明显增高 (分别是假手术组的 1 4、1 5、1 4倍 ,P <0 0 2 )。结论 肾性高血压大鼠在高血压形成过程中 ,心房肌CaL α1C、NCX的mRNA水平均表现为上调 ,左心房比右心房变化明显 ,与以往研究中左心室的变化类似 ,与心房颤动模型的差别较大 ,仍可能是发生房性心律失常的基质。