钠碘同向转运体表达与功能调控的研究进展

钠碘同向转运体(sodium iodine symporter)广泛分布于人体各个器官,是器官转运I-的结构和功能基础。钠碘同向转运体主要表达在细胞的基底侧膜上,为各种生命活动提供所需的I-。目前已知,钠碘同向转运体的调控机制涉及激素、细胞因子、转录因子及信号分子的作用。此外,钠碘同向转运体作为甲状腺癌的重要治疗靶点逐渐受到关注,然而在治疗过程中唾液腺等其他器官吸收放射性碘而产生的并发症也值得重视。本文重点综述了钠碘同向转运体的表达、作用及其调控机制的研究进展,旨在为临床干预钠碘同向转运体异常相关疾病进程提供新思路。

新的甲状腺自身抗原钠/碘同向转运体与甲状腺疾病

甲状腺钠 /碘同向转运体 (NIS)是主要存在于甲状腺细胞的一种糖化膜蛋白 ,它在甲状腺激素合成中起重要作用。目前人NIS(hNIS)与鼠NIS(rNIS)的分子结构及其cDNA序列已经明确 ,并发现NIS异常与许多甲状腺疾病有关 ,近年更发现NIS是一种新的甲状腺自身抗原 ,与自身免疫性甲状腺病的发生密切相关。对NIS研究有着诱人的临床应用前景。

高碘摄入对SD大鼠钠/碘同向转运体蛋白表达影响的免疫组化研究

目的:动态观察长期高碘摄入对SD大鼠甲状腺细胞钠/碘同向转运体(NIS)蛋白表达的影响。方法:SD大鼠分别饲以去离子水及不同碘浓度的碘化钾水,给碘后1 d及1,2,4,8周处死。测定尿碘、组织碘含量,免疫组织化学方法观察甲状腺细胞NIS蛋白表达水平。结果:高碘摄入可引起甲状腺滤泡细胞膜表面NIS蛋白表达的下降。短期较低浓度的高碘摄入对NIS蛋白的表达无明显影响,而较高浓度的碘摄入则引起NIS蛋白表达的明显减少;长期高碘摄入对NIS蛋白表达的抑制作用,可在机体自我调节机制作用下得以部分恢复,但NIS蛋白表达仍处较低水平。结论:高碘摄入可导致甲状腺细胞表面NIS蛋白表达下降,随摄碘浓度的增加抑制作用增强;不同浓度的碘摄入对NIS蛋白表达的抑制作用表达时间不同。

自身免疫性甲状腺疾病钠/碘同向转运体的相关性研究

目的研究不同自身免疫性甲状腺疾病(AITD)钠/碘同向转运体抗体(NISAb)与甲状腺球蛋白抗体(Tg Ab),甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)含量之间的相关性,并观察甲亢患者药物治疗前后NISAb含量的变化。方法选择甲亢(GD)患者,桥本甲状腺功能低下者(HT),健康正常人组(NC)各40例,检测NISAb、Tg Ab、TPOAb含量,比较NISAb含量与Tg Ab、TPOAb含量之间的相关性,并分析20例甲亢患者药物治疗前后NISAb含量的差异。结果 (1)甲亢患者NISAb与Tg Ab、TPOAb含量,相关系数R分别为0.90、0.85,P均<0.05,呈直线相关性,GD患者NISAb与Tg Ab,TPOAb呈正相关,HT患者NISAb与Tg Ab、TPOAb含量,相关系数r分别为-0.64、-0.52,P均<0.05,呈线性负相关性。正常人群NISAb,Tg Ab,TPOAb含量之间,相关性分析,P值分别为0.63、0.22,P均>0.05,无线性相关性。(2)甲亢患者NISAb含量与正常人群对比分析,t检验,P<0.05,NISAb含量高于正常人群。HT患者NISAb含量与正常人群对比分析,t检验,P<0.05,NISAb含量低于正常人群。(3)甲亢患者治疗前后NISAb含量对比分析,t检验,P<0.05差异有统计学意义。结论 (1)GD和HT患者血浆NISAb含量与Tg Ab,TPOAb含量之间具有相关性,GD患者血浆NISAb含量与Tg Ab,TPOAb含量之间呈正相关,HT患者血浆NISAb含量与Tg Ab,TPOAb含量之间呈负相关。(2)GD患者血浆NISAb含量高于健康人群,HT患者NISAb含量低于健康人群。(3)GD患者治疗后NISAb含量明显降低,差异明显。

钠/碘同向转运体在人不同组织学分型胃癌中的表达

目的研究钠/碘同向转运体(sodium-iodide symporter,NIS)在人不同组织学分型胃癌组织中的表达,分析NIS表达与胃癌组织学分型的关系。方法选取于中国医科大学附属第一医院肿瘤外科行手术治疗的180例患者的胃癌组织为研究对象。依据胃癌的组织学分型分为6组,其中乳头状腺癌30例,管状腺癌30例,低分化腺癌30例,黏液腺癌30例,印戒细胞癌30例,未分化癌30例。选取上述180例患者的癌旁组织及30例慢性胃炎患者的胃组织作为对照。采取免疫组织化学SP法对上述组织的石蜡切片进行染色。结果在人胃癌组织、人胃癌旁组织及人慢性胃炎组织中,NIS阳性细胞率分别为10.6%(19/180)、28.3%(51/180)和90%(27/30)。人胃癌组织与人胃癌旁组织相比(P<0.01)、人胃癌组织与人慢性胃炎组织相比(P<0.01)、人胃癌旁组织与人慢性胃炎组织相比(P<0.01),NIS阳性细胞率均具有显著统计学差异。在人乳头状腺癌、管状腺癌、低分化腺癌、黏液腺癌、印戒细胞癌及未分化癌中,NIS阳性细胞率分别为30%(9/30)、10%(3/30)、13.3%(4/30)、6.7%(2/30)、3.3%(1/30)和0(0/30)。人乳头状腺癌与人黏液腺癌相比(P<0.05)、人乳头状腺癌与人印戒细胞癌相比(P<0.01)以及人乳头状腺癌与人未分化癌相比(P<0.01),NIS阳性细胞率均具有统计学差异。在人慢性胃炎组织及人胃癌旁组织中,NIS仅表达于胃黏膜细胞的细胞膜上,而在人胃癌组织中,NIS在癌细胞膜有表达,在细胞质也有较明显的表达。结论在人胃癌组织、癌旁组织、慢性胃炎组织中,NIS阳性细胞率依次增高。在本研究人各种组织学分型的胃癌中,随着胃癌恶性程度的增高,NIS表达呈现出减少的趋势。人胃癌组织NIS在癌细胞的细胞膜和细胞质均有表达,而人慢性胃炎组织和人胃癌旁组织NIS仅在胃黏膜细胞的细胞膜表达。

钠/碘同向转运体基因获取及其克隆与测序

目的 :获取、构建并鉴定携带人钠 /碘同向转运体 (NIS)基因的pGEMTeasy质粒载体。方法 :利用逆转录和聚合酶链反应 (RT-PCR)获取Graves甲亢病人甲状腺NIS基因可编码区片段 ,与pGEMTeasy质粒载体连接、经转化、蓝白斑筛选、酶切鉴定 ,获得pGEMTeasy -NIS重组质粒 ,进行序列测定鉴定。结果 :所构建的pGEMTeasy -NIS重组质粒中NIS与文献报告序列 99%同源性。结论 :成功构建pGEMTeasy -NIS重组质粒。

甲状腺乳头状癌钠碘同向转运体基因启动子区域CpG岛异常甲基化状态检测及其意义

目的 通过检测甲状腺乳头状癌中钠碘同向转运体(NIS)基因的启动子区域甲基化状态及其与各项临床指标之间的关系,探讨NIS基因甲基化在甲状腺乳头状癌发病过程中的地位、作用和相关机制.方法 取2007年5～7月手术切除的甲状腺乳头状癌及正常组织标本各11份,液氮保存.针对NIS-L区域设计新的甲基化特异PCR(MSP)引物,对所有亚硫酸氢钠修饰后的甲状腺癌及对照组织标本DNA进行MSP检测,比较肿瘤和对照甲状腺组织的NIS-L甲基化状态,分析其与有关临床指标之间的相关性.结果 实验发现11例甲状腺癌中NIS-L区域CpG岛甲基化率达81.8%(9/11),与肿瘤直径存在相关性,与年龄、性别、AJCC分期、淋巴结转移情况、多灶性等临床指标无相关性;相应对照组织中NIS-L甲基化率为36.4%(4/11),与所有临床指标无相关性.结论 甲状腺乳头状癌组织中NIS-L区域CpG岛甲基化率异常增高,且与肿瘤直径存在相关性.NIS-L与其它NIS表达调控因素的关系有待进一步研究.

人钠/碘同向转运体基因转染肺癌A549细胞介导放射性碘摄取实验研究

目的:研究重组人钠/碘同向转运体基因(hNIS)腺病毒介导肺癌A549细胞的碘摄取、外流和杀伤情况,为放射性碘治疗肺癌提供理论和实验依据。方法:用重组hNIS腺病毒(AdNIS)感染肺癌A549细胞,检测感染细胞内hNIS蛋白的表达;在体外培养的条件下研究其125I的摄取、外流情况以及131I的杀伤情况。结果:hNIS蛋白在实验组肺癌A549细胞中表达阳性且主要分布于细胞膜上;实验组细胞摄碘能力较对照组高;细胞摄碘后碘外流过程十分迅速;实验组细胞可被131I有效杀伤。结论:应用腺病毒为载体,可以有效的将hNIS基因转染至体外培养的肺癌A549细胞中,并介导肺癌细胞对放射性碘的摄取及选择性杀伤作用。

钠/碘同向转运体在甲状腺癌^(131)I治疗中的应用

钠/碘同向转运体(Na+/I-symporter,NIS)是一种膜蛋白,介导甲状腺滤泡细胞的碘转运,在甲状腺癌的病理生理及131I治疗中起着重要的作用。多数研究表明,甲状腺癌的NISmRNA及蛋白表达水平降低;维甲酸、去甲基化及组蛋白脱乙酰酶抑制剂可刺激失分化甲状腺癌细胞的NIS表达,为甲状腺癌131I的有效治疗进行了有益的探索。NIS基因的克隆和其特性的揭示为甲状腺癌的靶向基因放射治疗提供了可能。

人钠/碘同向转运体基因cDNA的克隆与序列测定

为研究人钠/碘同向转运体(hNIS)的生物学性能和用于肿瘤放射性碘治疗的可能性,运用反转录聚合酶链反应 (RT-PCR)从人甲状腺组织总RNA中扩增出hNIS基因cDNA序列,将其克隆至pUCm-T载体中。序列分析证实克隆 片段与文献报道的hNIS基因cDNA序列完全一致,说明已成功克隆到hNIS基因cDNA。

钠/碘同向转运体与放射性碘治疗

钠 /碘同向转运体 (NIS)是一种调节甲状腺及其他组织碘转运活性的膜蛋白。NIS在甲状腺的病理生理中发挥着关键性作用 ,它实现了甲状腺组织摄取碘并进行甲状腺激素的生物合成 ,实现了甲状腺功能亢进和分化型甲状腺癌的显像诊断和放射性碘治疗。近年来 ,对 NIS的进一步分子学研究表明 。

钠/碘同向转运体

钠 /碘同向转运体是甲状腺滤泡细胞基底细胞膜上的糖蛋白 ,介导甲状腺对碘的主动运输。本文综述钠 /碘同向转运体在基因、蛋白质二级结构、电生理学特征、调控及组织分布等方面的进展 ,及其对甲状腺疾病和放射性碘治疗的意义。

钠/碘同向转运体研究进展

钠 /碘同向转运体 (NIS)是主要表达于甲状腺组织的一种糖化膜蛋白 ,但不同功能状态下的甲状腺组织表达存在差异。NIS在甲状腺细胞摄碘中起重要作用。目前人NIS(hNIS)与鼠NIS(rNIS)的分子结构及基因序列已经明确 ,两者之间存在一定的差异。NIS基因表达受多种因素调控 ,促甲状腺素是主要的上调因素 ,而甲状腺球蛋白是主要的下调因素。由于NIS与许多甲状腺疾病的发生有关 ,所以NIS有着广阔的临床应用前景。

钠/碘同向转运体的研究进展

甲状腺对I-的摄取是甲状腺激素合成的第一步 ,而调节这一过程的重要物质是位于甲状腺滤泡细胞基底膜上的钠 /碘同向转运体 (sodium/iodidesymporter,NIS)。NIS主要存在于甲状腺组织 ,其调节I-摄取要依赖Na+ 的存在 ,摄取过程可被SCN-、ClO4-等一价阴离子所抑制。人和大鼠NIS的基因都已经被克隆 ,对其基因表达调控的研究也逐渐兴起。促甲状腺激素 (TSH)对NIS的基因的表达及I-摄取具有很强的刺激作用。研究人员在一些自身免疫性甲状腺疾病患者的血清中发现了针对NIS的抗体 ,而且 ,认识到NIS的基因突变是先天性甲状腺功能低下的一个重要原因。此外 ,人们利用NIS的基因 。

钠碘同向转运体上游增强子序列的特异性结合蛋白文库的构建及初步筛选

目的:构建酵母单杂交文库,筛选出与钠碘同向转运体上游增强子(NUE)特异性结合的蛋白质分子,进一步研究其与NUE相互作用的分子机制。方法:应用酵母单杂交系统,以NUE为酵母单杂交的"诱饵",对甲状腺癌K1细胞的c DNA文库进行初步筛选,采用DNA测序技术及生物信息学技术对筛选的克隆进行进一步功能分析。结果:对文库中的阳性克隆测序,获得53条可读序列,Blast X比对分析及基因功能注释发现其中11条具有DNA结合功能,包括Rho GTP酶激活蛋白35(ARHGAP35)、锌指蛋白394(ZNF394)、上游刺激因子2(USF2)、SOX9等。结论:应用酵母单杂交技术初步筛选出与甲状腺癌K1细胞NUE相互作用的候选蛋白,并对这些蛋白质进行了初步的功能分析。

碘钠同向转运体在新疆维吾尔族甲状腺乳头状癌中的表达及其临床意义

目的研究钠碘同向转运体(NIS)在新疆维吾尔族甲状腺乳头状癌组织标本及转移淋巴结组织中的表达及其临床意义。方法选取手术切除后经临床病理证实的新疆维吾尔族甲状腺乳头状癌存档标本72例,采用免疫组织化学检测NIS在甲状腺癌组织、癌旁组织以及转移淋巴结组织中的表达,分析NIS在甲状腺癌组织中的分布特点及其与临床病理各参数间的相互关系。结果 (1)甲状腺乳头状癌组织中NIS表达阳性率为80.56%,在癌旁正常甲状腺组织中的NIS阳性表达率为30.56%,差异有统计学意义(P<0.05);(2)Ⅰ、Ⅱ期甲状腺癌组织中NIS表达阳性率为87.88%,Ⅲ、Ⅳ期甲状腺癌组织中NIS表达阳性率为74.36%,随着临床分期的递增,甲状腺癌组织中NIS表达阳性率出现降低趋势,但差异无统计学意义(P>0.05);(3)在有淋巴结转移和无淋巴结转移的甲状腺乳头状癌患者中NIS表达阳性率分别为68.97%和42.86%,差异有统计学意义(P<0.05);(4)在肿瘤直径≤2cm和>2cm的甲状腺乳头状癌组织中NIS表达阳性率分别为93.02%和62.07%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论新疆维吾尔族甲状腺乳头状癌组织中NIS的表达随着临床分期增加而逐渐降低,在有淋巴结转移患者中NIS的表达显著增加,同时随着瘤体体积的增大NIS的表达显著下降。

人钠碘同向转运体(NIS)在肿瘤治疗中的研究进展

钠碘同向转运体(Sodium Iodide Symporter,NIS)是一种内源性细胞膜蛋白质,它可以间接激活甲状腺和少数几个非甲状腺腺体(如有泌乳功能的乳腺)对碘的摄取过程。利用其分子克隆的特征,可以研究其在甲状腺病理和生理中的重要作用。类似的,超过80%的乳腺癌病人体内都表达NIS,阐明其根本机制可能将促使此类疾病在病理生理学和临床治疗方面有重大进展。在将来,可能通过两种方法达到利用131I治疗甲状腺癌及非甲状腺肿瘤的目的:一种是基于重新诱导内源性NIS基因在乳腺癌和甲状腺癌中的表达,利用肿瘤转移和去分化的机制对肿瘤进行治疗;另一种是采用NIS的新型细胞减少性的基因治疗战略。NIS基因具有独一无二的优势,即,它可以同时作为受体和治疗基因在体内发挥作用,因此,利用NIS基因转染技术,有望将131I治疗应用于其他肿瘤,并在治疗的同时对肿瘤进行显像和监视。

人重组pcDNA3人钠/碘同向转运体核表达质粒的构建

目的:获取、构建并鉴定携带人钠/碘同向转运体(hNIS)基因的pcDNA3.0质粒载体。方法:利用逆转录和聚合酶链反应获取Graves甲亢患者甲状腺NIS基因可编码区片段。与pUCm-T质粒载体连接、经转化、蓝白斑筛选、酶切鉴定,序列测定鉴定,获得pUCm-T-重组质粒。pUCm-T-重组质粒亚克隆得到pcDNA3-hNIS重组质粒。结果:所构建的pcDNA3-hNIS重组质粒中的hNIS基因序列与文献报道序列一致。结论:成功构建pcDNA3-hNIS重组质粒。

小鼠原代哺乳期乳腺细胞中TSH对钠碘同向转运体的调节作用

目的:探讨原代哺乳期乳腺细胞中促甲状腺激素(TSH)对钠碘同向转运体(sodium iodide symporter,NIS)的调节作用。方法:在不同浓度TSH 作用下培养小鼠原代哺乳期乳腺细胞,采用实时荧光定量PCR 和Western blot 法检测NIS mRNA和蛋白的表达;Western blot法检测沉默细胞的促甲状腺激素受体(TSHR)后NIS蛋白的表达以及抑制细胞的蛋白激酶A(PKA)后NIS蛋白的表达。结果:小鼠原代哺乳期乳腺细胞TSH高剂量组NIS mRNA表达量最高(P<0.05),NIS蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05);沉默TSHR后各组NIS蛋白表达之间差异无统计学意义(P>0.05);PKA抑制组NIS蛋白表达低于TSH组和空白组(P<0.05)。结论:高浓度TSH对小鼠哺乳期乳腺细胞NIS表达具有一定调节作用;PKA可上调NIS的表达。

人甲状腺钠/碘转运体基因全长的克隆及其重组表达质粒的构建

目的:利用基因工程的方法制备甲状腺钠/碘同向转运体(hNIS)cDNA,为今后的转基因治疗奠定物质基础。方法:采用TRIzol一步法,从甲状腺组织中提取总RNA,再应用RT-PCR扩增出hNIS基因全长,然后采用TOPO克隆技术构建重组表达质粒pcDNA3.1D/FLhNIS,并进行酶切和测序鉴定。结果:成功制备了hNIScDNA并构建了其重组表达质粒。结论:为最终实现131I治疗不摄碘的肿瘤提供了分子生物学基础。