快速起搏心房对家兔心房NPR-A受体表达及心房钠尿肽含量的影响

[目的]建立家兔快速心房起搏模型,探讨快速心房起搏早期心房NPR-A受体表达水平及血浆中心房钠尿肽(ANP)含量的变化与心房颤动发生的关系.[方法]由右侧颈外静脉穿刺置入电极于右心房,以600次/min的频率诱导心房颤动,利用放射免疫分析技术和免疫组织化学方法观察起搏前、起搏8 h和假手术组血浆中ANP含量和心房NPR-A表达水平.[结果]起搏8 h组血浆中ANP含量与起搏前和假手术组相比明显升高,且心房NPR-A表达水平明显增高.[结论]在快速起搏早期,血浆中ANP含量和心房NPR-A受体表达水平均升高,其主要机制可能是心房颤动早期代偿性和保护性效应.

钠尿肽受体A(NPR-A)在小鼠角膜和晶状体发育过程中的表达

目的检测钠尿肽受体A(natriuretic peptide receptor A,NPR-A)在不同鼠龄小鼠角膜和晶状体内的表达,探讨其在小鼠眼发育过程中的作用。方法选用C57BL/6转基因小鼠,收集从E14到P90小鼠眼球标本120只,采用40 g·L^(-1)多聚甲醛灌注固定后,石蜡包埋切片,采用免疫组织化学方法对NPR-A在角膜和晶状体中的表达进行免疫荧光检测。结果在E16,NPR-A高表达于角膜上皮细胞中,并持续至成年;其在角膜基质层和内皮细胞的表达也始于E16,而在P14之后,NPR-A表达随鼠龄的增加逐渐减弱。此外,NPR-A在P0小鼠晶状体上皮细胞膜内被检测到,并持续高表达至成年。在E16,由晶状体后壁上皮细胞生成的初级纤维开始高表达NPR-A,但随着鼠龄的增长和纤维结构的改变而逐渐减弱,直到P90消失。结论 NPR-A可能参与了角膜和晶状体生长和发育,并且对维持角膜上皮细胞的增生和修复以及晶状体的通透性具有重要作用。

钠尿肽受体及其在心力衰竭中的作用和意义

药物控制心力衰竭(HF)的一个新靶类可能是通过作用于钠尿肽受体(NPR)。本文就NPR的结构、信号转导及其在HF中的作用和意义作一概述。

血管钠肽抑制肺动脉平滑肌细胞增殖及调控钠尿肽B受体表达的研究

目的 :探讨血管钠肽 (VNP)对肺动脉平滑肌细胞 (PASMC)增殖及钠尿肽 B受体 (NPR-B)基因表达的影响。方法 :体外培养大鼠 PASMC,分别用噻唑蓝 (MTT)比色法、总蛋白含量测定、放免分析及打点杂交的方法 ,观察了VNP作用下 PASMC的 MTT吸光值、总蛋白含量、细胞内 c GMP、c AMP浓度和 NPR-B的 m RNA水平。结果 :VNP可以显著抑制血清刺激的 PASMC增殖 ,升高细胞内 c GMP浓度及 NPR-B m RNA水平 ,但对细胞内 c AMP浓度无明显影响。结论 :VNP对 PASMC增殖及 NPR-B基因表达具有调控作用 ,并且可能通过 c

钠尿肽受体A在小鼠视网膜发育过程中的表达

目的检测钠尿肽受体(NPR)在不同年龄小鼠视网膜内的表达,探讨其在视网膜发育过程中的作用。方法收集从受孕16日(E16)到出生90日(P90)小鼠眼球标本共127只,对NPR-A进行免疫荧光检测。结果NPR-A广泛存在于视网膜神经元中,例如,在外核层,NPR-A于P7开始高表达在视锥、视杆细胞内、外突起上,于P14减弱,P30之后持续稳定弱表达;在内核层,从P7开始NPR-A持续弱表达在双极细胞的突起中,而在水平细胞中未见NPR-A表达;在神经节细胞层,NPR-A于E16开始高表达在神经节细胞胞体中,P14明显减弱,而在神经纤维层,即神经节细胞的轴突中,NPR-A从胚胎期至成年持续高表达;在外网状层和内网状层,NPR-A于P14均高表达,但于P30之后逐渐减弱。此外,NPR-A还广泛的存在于Müller细胞的突起中。结论 NPR-A参与了视网膜的发育,可能是小鼠视网膜神经元发育过程中的关键分子,并对Müller细胞的功能活动起着重要的调节作用。

β受体阻滞剂对慢性心力衰竭患者血浆钠尿肽、心功能和心室重构的影响

目的 探讨美多洛尔和卡维地洛对慢性心力衰竭 (CHF)患者心脏神经内分泌、心功能及心室重构的影响。方法 CHF患者 33例 ,分别予常规治疗 (基础组 ,12例 )或加用美多洛尔 (美多洛尔组 ,10例 )、卡维地洛 (卡维地洛组 ,11例 )治疗 3个月。治疗前后用同位素放免法和放免法测定血浆心房钠尿肽、脑钠尿肽 (ANP、BNP)水平 ,心脏彩色多普勒超声诊断仪测量左室结构和心功能 ;观察治疗前后各组钠尿肽水平、心功能、心室重构的变化及组间差异。结果 (1) 3组血浆ANP、BNP水平都显著下降 (P均 <0 0 5或 0 0 1) ;组间下降程度ANP水平无显著差异 (F =0 0 6 ,P >0 0 5 ) ,BNP水平有显著差异 (F =4 97,P <0 0 5 ) ,两 β受体阻滞剂组均明显大于基础组 (P均 <0 0 5 ) ,但两组间无显著差异 (P >0 0 5 )。 (2 )两 β受体阻滞剂组治疗后NYHA心功能分级均改善 (P<0 0 5 ) ,肺动脉收缩压下降 (P均 <0 0 5 ) ,其中治疗前左室射血分数 <35 %者 (8例 ) ,治疗后明显上升 (P <0 0 5 )。 (3) 3组治疗后心脏结构指标无显著变化 (P >0 0 5 )。结论 CHF患者在常规治疗基础上加用 β受体阻滞剂治疗 3个月 ,可显著改善心功能 ,但未观察到对心室重构指标的明显影响及两

血管钠肽对低氧大鼠心脏钠尿肽C受体表达的影响

目的 :探讨低氧对大鼠心脏钠尿肽C受体 (NPR C)表达的调节作用 ,以及血管钠肽 (VNP)对这一过程的影响。方法 :将大鼠随机分为 3组 :对照组、低氧组 (3～ 2 8d)和VNP(2 5～ 75 μg/kgbw) +低氧组 ,采用放射免疫的方法测定大鼠血浆心房钠尿肽 (ANP)的浓度 ,并采用定量PCR的方法分析NPR C的mRNA水平。结果 :低氧 2 8d大鼠血浆ANP浓度显著高于正常大鼠 (P <0 .0 5 ) ,而且每天注射 75 μg/kgbw的VNP使ANP浓度进一步升高 (P <0 .0 1)。低氧 3d对大鼠心脏NPR C的mRNA的量没有显著影响 ;低氧 7d使大鼠心脏NPR C的mRNA的拷贝数显著升高 (P <0 .0 5 ) ;低氧 14d、2 8d使大鼠心脏NPR C的mRNA的拷贝数进一步升高 (P <0 .0 1)。每日注射 2 5μg/kgbw的VNP对低氧诱导的大鼠心脏NPR C表达没有显著影响 ;5 0 μg/kgbw的VNP显著降低低氧大鼠心脏NPR C的表达 (P <0 .0 5 ) ;75 μg/kgbw的VNP进一步降低低氧大鼠心脏NPR C的表达 (P <0 .0 1)。 结论 :VNP可以升高低氧大鼠的血浆ANP水平 ;低氧可以使大鼠心脏NPR C表达增加 ,而且具有时间依赖性 ,而VNP对这一过程有抑制作用 。

C型钠尿肽及其受体在急性肺损伤大鼠肺组织的表达变化及其意义

目的了解C型钠尿肽及其受体NPRB在急性肺损伤大鼠肺组织中的表达变化规律。方法采用LPS注射建立ALI大鼠动物模型。将动物分为生理盐水组(N组),LPS干预1 h组(LPS 1 h组),LPS干预3 h组(LPS 3 h组),LPS干预6 h组(LPS 6 h组),通过RT-PCR检测各组大鼠肺组织CNP及NPRB mRNA的表达情况,以及免疫组化检测各组大鼠NPRB的表达变化,以生理盐水组作为阴性对照。结果正常大鼠肺组织可表达CNP及NPRB,LPS干预后,CNP显著升高,LPS 6 h达到高峰,与对照组比较有显著性差异(P<0.05);相反,NPRB在LPS干预后出现表达降低,与对照组比较有显著性差异(P<0.05)。结论CNP与NPRB的表达变化可能是导致肺损伤加重的重要原因之一。

大鼠钠尿肽B受体cDNA探针克隆载体的构建

目的 :构建大鼠钠尿肽 B受体 c DNA探针克隆载体 ,为研究该受体基因表达奠定基础。方法 :设计钠尿肽 B受体特异的 PCR引物 ,提取大鼠肺组织总 RNA,进行反转录 PCR,扩增目的片段 ,回收目的片段 ,将其克隆入p GEM- T载体 ,酶切鉴定并用双脱氧法测序。结果 :PCR反应产物经琼脂糖凝胶电泳鉴定与所设计引物大小一致 ,克隆入 p GEM- T载体后酶切可切出所需片段 ,测序证实为所设计序列。结论 :构建的 p GEM- T重组质粒为进一步研究该受体基因表达。

M_2型毒蕈碱受体对离体跳动灌流家兔心房钠尿肽分泌的影响

[目的]建立离体跳动灌流心房模型,并探讨激活M2型毒蕈碱受体对离体跳动灌流心房钠尿肽(ANP)分泌的影响.[方法]利用急性剥离的家兔左心房和放射免疫分析方法观察M2型毒蕈碱受体对离体跳动灌流心房动力学及灌流液中ANP分泌的影响.[结果]记录到的离体跳动灌流心房模型心房内压及每搏搏出量与文献报道基本一致;卡巴胆碱明显抑制心房内压和搏出量,显著增加灌流心房ANP的分泌,此效应被M2型毒蕈碱受体抑制剂Methoctramine阻断.[结论]成功建立离体跳动灌流心房模型;M2型毒蕈碱受体的激活增加心房ANP的分泌.

钠尿肽受体A在食管鳞状细胞癌中的表达及对食管癌细胞迁移和侵袭能力的影响

目的探讨钠尿肽受体A(NPRA)在食管鳞状细胞癌中的表达及其对食管癌细胞迁移和侵袭的影响。方法采用免疫组织化学染色法检测119例食管鳞状细胞癌组织和91例癌旁组织中NPRA的表达情况,并分析食管鳞状细胞癌组织中NPRA表达情况与患者临床特征及预后的关系。采用蛋白质印迹法(Western blot)检测食管癌细胞株Eca109、TE-1以及正常食管上皮细胞株Het-1A中NPRA的表达情况,采用短发夹RNA(shRNA)沉默食管癌细胞株Eca109细胞中NPRA基因表达,应用Transwell小室实验分析其对Eca109细胞迁移和侵袭的影响。结果 NPRA在食管鳞状细胞癌组织中的高表达率为69.7%(83/119),明显高于癌旁组织的27.5%(25/91),差异有统计学意义(P﹤0.01)。分化程度为G2~G3级、TNM分期为Ⅱ~Ⅲ期的食管鳞状细胞癌患者食管鳞状细胞癌组织中NPRA的高表达率分别明显高于分化程度为G1级、TNM分期为Ⅰ期的患者,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。NPRA低表达患者的5年生存情况优于NPRA高表达患者,差异有统计学意义(P﹤0.05)。食管癌细胞株Eca109、TE-1中NPRA的表达水平均高于正常食管上皮细胞株Het-1A,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。shRNA沉默食管癌细胞株Eca109中NPRA基因的表达后,肿瘤细胞的迁移和侵袭能力明显降低。结论 NPRA在食管鳞状细胞癌组织中表达水平较高,且其高表达与肿瘤的TNM分期、分化程度以及预后密切相关,同时可以促进食管癌细胞的迁移与侵袭。

动态监测N末端B型钠尿肽前体下应用β受体阻滞剂治疗慢性心力衰竭的临床效果

目的探讨动态监测N末端B型钠尿肽前体(NT-proBNP)下应用β受体阻滞剂治疗慢性心力衰竭的临床效果。方法选取82例慢性心力衰竭患者,随机分为研究组和对照组各41例。两组均给予常规治疗,研究组根据NT-proBNP动态监测水平制定美托洛尔用药方案,对照组根据患者临床表现及影像学检查结果制定美托洛尔用药方案。两组患者均随访1年,比较治疗前及治疗后1年末的心率变异性,以及心血管性死亡率和复发再住院率。结果治疗后,研究组患者的正常RR间期的标准差(SDNN)、相邻5 min RR间期平均值的标准差(SDANN)均较前升高,而对照组的SDNN、SDANN、相邻RR间期差值的均方根、相邻RR间期>50 ms占全部窦性心搏的比例均较前降低且低于研究组(均P<0.05)。研究组心血管性死亡率及复发再住院率均低于对照组(均P<0.05)。结论对慢性心力衰竭患者进行NT-proBNP动态监测能有效指导β受体阻滞剂的合理使用,改善患者的心脏自主神经功能及预后。

钠尿肽C型受体信号通路与心血管疾病

钠尿肽家族（natriuretic peptides,NPs）主要包括心房钠尿肽（atrial natriuretic peptide,ANP）、脑钠尿肽（brain natriuretic peptide,BNP）和C型钠尿肽（Ctypenatriuretic peptide,CNP）3类,新发现的还有曼巴蛇钠尿肽、尿扩张素及在澳大利亚大班蛇毒液中的一类钠尿肽样肽类[1]。钠尿肽激素在心血管、肾脏、内分泌系统中的作用研究比较清楚,

肝郁脾虚型功能性消化不良大鼠海马组织钠尿肽B受体与脑源性神经营养因子关系探讨及逍遥散的干预作用

目的探讨肝郁脾虚型功能性消化不良(FD)大鼠模型海马组织中钠尿肽B受体(NPR-B)与脑源性神经营养因子(BDNF)的蛋白表达的关系及逍遥散的干预作用。方法每天通过慢性不可预知性的轻微刺激建立肝郁脾虚型FD大鼠模型;免疫组化、蛋白质印记、实时聚合酶链反应分析海马组织中NPR-B和BDNF的表达变化。结果 BDNF和NPR-B在大鼠海马组织中均有表达。与正常组相比,肝郁脾虚型FD模型组中NPR-B在基因和蛋白水平的表达升高(n=9;P <0. 01),而BDNF则降低(n=9;P <0. 01)。逍遥散干预明显影响肝郁脾虚型FD大鼠海马组织NPR-B和BDNF的表达水平。与肝郁脾虚模型FD组相比,高剂量和中剂量逍遥散组大鼠的海马组织中呈现较低的NPR-B表达(n=9;P <0. 01),而BDNF则有较高的表达(n=9;P <0. 01)。此外,低剂量逍遥散组大鼠海马组织NPR-B的表达及BDNF的表达与正常对照组中相比没有显著差异(n=9,P> 0. 05)。结论钠尿肽B受体表达与BDNF表达有相关性,且成负相关,进一步推测肝郁脾虚型功能性消化不良大鼠海马中钠尿肽B受体表达上调可能抑制脑源性神经营养因子BDNF的表达,且逍遥散对二者表达有调节作用。

ANP及其受体NPR-A与肿瘤关系的研究进展

近年来心房钠尿肽(atrial natriuretic peptide,ANP)及ANP受体(natriuretic peptide receptor A,NPR-A)在肿瘤研究中广受关注。ANP及其受体NPR-A的研究为肿瘤的治疗提供新思路,NPR-A有望成为肿瘤治疗的药物作用靶点。该文将对ANP及NPR-A在肿瘤发生、发展中的作用作一综述。

IGF-1对新生大鼠高氧脑损伤的钠尿肽受体表达的影响

目的:探讨高氧诱发脑损伤时NPR-A/B的表达及胰岛素样生长因子-1(IGF-1)对脑组织表达的影响。方法:选择生后1天Wistar新生大鼠90只,随机分为3组,每组30只:正常组(A)、高氧模型组(B)、IGF-1治疗组(C);IGF-1治疗组第2天开始腹腔内注射IGF-1,1μg/(kg·d),连续13天。实验开始第3、7、14天,各组处死10只新生大鼠,HE染色观察脑组织海马形态学变化、利用免疫组化和Western blot法测定大脑NPR-A/B表达。结果:高氧组NPR-A表达量升高,与正常组比有显著性差异(P<0.05);IGF-1治疗组与高氧组对比NPR-A表达量减少,有统计学意义(P<0.05)。模型组与正常组NPR-B表达相比,差异无统计学意义(P>0.05);IGF-1治疗组与高氧组对比NPR-B表达,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:新生大鼠脑组织高氧损伤时NPR-A表达量升高,而IGF-1降低NPR-A表达量对高氧脑组织起保护作用。

C型钠尿肽对百草枯致肺纤维化小鼠Toll样受体4表达的影响

目的观察C型钠尿肽(CNP)对百草枯(PQ)诱导的小鼠肺纤维化的保护作用及机制。方法 72只雄性昆明小鼠随机分为对照组(D组)、模型组(PQ组)和治疗组(CNP组),每组24只。分别于给药后7、14、21和28 d处死小鼠,收集肺组织,监测小鼠一般情况,Western blot检测肺组织Toll样受体4(TLR4)表达。结果与D组相比,PQ组7、14、21和28 d TLR4表达明显升高,肺损伤严重,差异有统计学意义(P<0.05);CNP组各指标无明显变化。结论 CNP对PQ诱导的小鼠肺纤维化有保护作用,可能与其抑制TLR4表达有关。

扩张型心肌病心力衰竭患者npr1基因G1023C多态性对重组人B型利钠肽疗效的影响

目的探讨扩张型心肌病(DCM)心力衰竭患者npr1基因(编码A型钠尿肽受体)的G1023C多态性对重组人B型利钠肽(rh BNP)疗效的影响。方法 168例扩张型心肌病心力衰竭患者在常规抗心力衰竭治疗的基础上给予rh BNP治疗。观察治疗前、后的临床特征、心功能状态、心脏彩超及血浆N末端B型利钠肽原(NTpro BNP)水平,并采用聚合酶链反应和DNA测序的方法检测患者npr1的G1023C基因型。结果本研究中检测的GG基因型和GC+CC基因型频率分别为80.4%和19.6%,符合Hardy-Weinberg定律(P>0.05);治疗前GC+CC组患者NT-pro BNP水平显著高于GG组(P<0.05),其他指标两组间比较差异无统计学意义(P>0.05);rh BNP治疗后,比较GG组和GC+CC组临床指标变化的差值发现,GG组的左室射血分数差值(△LVEF)比GC+CC组显著提高(P<0.01),且GG组的△NYAH分级和△NT-pro BNP值比GC+CC组下降明显(均P<0.05),其他指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论 DCM心力衰竭患者npr1基因G1023C多态性与rh BNP疗效可能有关,GG基因型患者比携带突变基因C的患者对rh BNP更为敏感,改善心功能的疗效更加明显。

脑钠肽及其受体在慢性前列腺炎大鼠脊髓背角神经节中的表达

目的:探讨脑钠肽(BNP)及钠肽受体(NPR-A)在慢性非细菌性前列腺炎(CNP)大鼠脊髓背角神经节(DRG)中的表达情况,以及与CNP引起的慢性病理性疼痛的关系。方法:健康清洁级SD大鼠40只,实验分CNP模型组30只及假手术组10只,采用完全弗氏佐剂法对SD大鼠进行CNP模型的建立,前列腺组织HE染色。采用荧光定量PCR法检测BNP、NPR-A、GAPDH在各实验组大鼠L5-S2 DRGs中的表达情况。结果:HE染色发现随着造模时间的延长,炎症程度越剧烈。BNP在造模3、7、10 d组的表达量分别为假手术组的(2.16±0.35)、(1.61±0.21)、(1.32±0.36)倍。NPR-A在造模3、7、10 d组的表达量分别为假手术组的(2.75±0.06)、(2.15±0.15)、(1.04±0.13)倍,其中3 d和7 d与假手术组比较有统计学意义(P<0.05)。10 d组与假手术组无统计学差异。结论:BNP及NPR-A在SD大鼠L5-S2 DRGs中表达,并且在炎症时表达上调。BNP及NPR-A可能参与了CNP引起疼痛的机制。