裸鼠模型的人钠/碘转运体基因转染人大细胞肺癌介导放射性核素显像

目的在动物体内实验观察人钠/碘转运体(hNIS)基因转染人大细胞肺癌介导放射性核素显像是否可行。方法①利用重组质粒以脂质体转染法将hNIS基因转染入人大细胞肺癌H460细胞系中,获得稳定表达hNIS的细胞株(hNIS-H460)。②用hNIS-H460细胞株建立大细胞肺癌荷瘤裸鼠模型,进行放射性核素99mTcO4-显像和131I显像。结果①体外实验表明hNIS-H460细胞株可以摄取碘。②裸鼠大细胞肺癌(hNIS-H460)移植瘤的99mTcO4-和131I显像结果较清晰。结论转染后的hNIS-H460细胞具有一定的摄碘能力。裸鼠大细胞肺癌(hNIS-H460)移植瘤可以进行99mTcO4-和131I显像;99mTcO4-显像的质量优于131I显像。

甲状腺乳头状癌组织中钠碘转运体基因启动子甲基化的研究

用甲基化特异性PCR检测34例甲状腺乳头状癌及癌旁组织中钠碘转运体(NIS)基因启动子的甲基化。结果显示癌组织中NIS基因启动子甲基化显著高于癌旁组织(P<0.05),淋巴结转移组中NIS基因启动子的甲基化显著高于无淋巴结转移组(P<0.05),提示NIS基因启动子异常甲基化是甲状腺乳头状癌发展过程中常见的分子事件,可能影响了甲状腺乳头状癌细胞的摄碘功能。

人钠/碘同向转运体基因cDNA的克隆与序列测定

为研究人钠/碘同向转运体(hNIS)的生物学性能和用于肿瘤放射性碘治疗的可能性,运用反转录聚合酶链反应 (RT-PCR)从人甲状腺组织总RNA中扩增出hNIS基因cDNA序列,将其克隆至pUCm-T载体中。序列分析证实克隆 片段与文献报道的hNIS基因cDNA序列完全一致,说明已成功克隆到hNIS基因cDNA。

BRD4通过SHH信号通路诱导甲状腺癌细胞增殖、侵袭与迁移

背景与目的:甲状腺癌是目前发病率最高的内分泌系统恶性肿瘤之一,目前的综合治疗手段虽然效果较好,但是部分患者在随后的治疗中会出现继发性摄碘率下降,131I治疗效果差,从而导致复发及远处转移。近年来的研究发现,溴样结构域蛋白4(double bromodomain-containing protein 4,BRD4)可促进多种恶性肿瘤的进展,因此本研究旨在探究BRD4在甲状腺乳头状癌(papillary thyroid cancer,PTC)细胞中的作用,寻找治疗甲状腺癌的特异性靶点。方法:应用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)检测PTC组织和癌周组织中BRD4的表达差异,应用si BRD4干扰基因转染PTC细胞株TPC-1,应用蛋白[质]印迹法(Western blot)检验沉默效果,通过MTT实验、平板克隆实验、Transwell小室侵袭与迁移实验检验沉默BRD4前后PTC细胞株TPC-1活力、增殖、迁移及侵袭等生物学行为的变化。进一步应用Western blot及RTFQ-PCR检测钠碘转运体(sodium iodide symporter,NIS)基因及蛋白的表达变化,以及SHH信号通路下游基因SHH、GLI1表达变化情况。结果:BRD4在PTC组织中表达明显增高(P<0.05);在体外实验中BRD4沉默后PTC细胞株TPC-1的细胞活力、增殖、迁移与侵袭能力下降。此外,BRD4沉默后NIS基因及蛋白表达增高,SHH信号通路下游基因SHH、GLI1表达降低(P<0.05)。结论:BRD4通过上调SHH信号通路相关基因促进PTC细胞的侵袭与迁移,沉默BRD4可以促进NIS的表达,BRD4有望成为治疗甲状腺癌的新靶点。