钠离子/牛磺胆酸共转运蛋白与乙型肝炎病毒感染研究进展

近年来,随着钠离子/牛磺胆酸共转运蛋白被发现为乙肝病毒功能性受体,越来越多的研究围绕钠离子/牛磺胆酸共转运蛋白的生理功能、抗乙肝病毒新药的研发以及其基因多态性与HBV感染的关系等展开,本研究综述了钠离子/牛磺胆酸共转运蛋白与乙型肝炎病毒感染的研究进展.

钠离子牛磺胆酸共转运多肽缺陷病及其对母胎影响的研究进展

钠离子牛磺胆酸共转运多肽(sodium-taurocholate cotransporting polypeptide,NTCP)缺陷病是一种溶质载体家族10成员1(solute carrier family 10 member 1,SLC10A1)双等位基因突变引起的胆汁酸代谢障碍性疾病,分布具有区域和种族差异,其中SLC10A1 c.800C>T(p.Ser267Phe)是我国的高频突变。NTCP缺陷病患儿主要表现为病理性黄疸,少部分有生长、运动和神经系统发育迟缓的表现,成年患者临床症状和体征不明显,生化检查提示血清总胆汁酸水平升高、部分伴有转氨酶和25-羟维生素D3水平降低。NTCP缺陷病性高胆汁酸血症需与乙型肝炎病毒感染、丁型肝炎病毒感染、自身免疫性肝炎及妊娠期肝内胆汁淤积症等鉴别,妊娠合并NTCP缺陷病性高胆汁酸血症对母胎的影响迄今少有相关报道。综述NTCP缺陷病的分子遗传机制、临床表现、实验室检查、诊断、治疗及其对母胎的影响,为该病患者的明确诊断和正确干预提供依据。

功能性受体钠离子牛磺胆酸共转运蛋白-Huh7细胞株的构建及其HBV易感性

目的功能性受体钠离子牛磺胆酸共转运蛋白(NTCP)表达短暂,导致乙型肝炎病毒(HBV)感染肝癌细胞模型的效率低下且不稳定。文中旨在将GV358-NTCP转染Huh7细胞构建NTCP-Huh7细胞,并鉴定其是否具有HBV易感性。方法使用GV358作为慢病毒载体,和NTCP编码基因连接后获得重组质粒GV358-NTCP,构建NTCP基因重组慢病毒,将GV358-NTCP转染Huh7细胞构建NTCP-Huh7细胞。采用HBV感染NTCP-Huh7细胞(NTCP-Huh7组)和Huh7细胞(Huh7组)。将HBV分别与NTCP-Huh7组和Huh7组细胞共孵育18 h,换液后继续培养,并在第2、4、6、8、10、12天做相关检测。检测上清中HBsAg、HBeAg、HBc Ag、HBV DNA以及细胞内HBV ccc DNA含量,确定NTCP-Huh7重组细胞是否具有HBV易感性。结果 Western blot结果表明NTCP-Huh7细胞株可稳定表达NTCP蛋白。其孵育第8天,NTCP-Huh7组HBsAg、HBeAg(0.866±0.040、0.603±0.053)明显高于Huh7组(0.237±0.063、0.209±0.112),且在第8天达到最高峰,第4、6、10天亦明显高于Huh7组(P<0.05)。NTCP-Huh7组第4、6、8、10、12天上清中HBV DNA、HBV ccc DNA明显高于Huh7组(P<0.05)。免疫荧光法显示NTCP-Huh7细胞内检测到核心抗原,Huh7细胞内未检测到。结论构建GV358-NTCP重组质粒转染Huh7后,获得的NTCP-Huh7细胞具有HBV易感性。

新生儿钠牛磺胆酸共转运多肽缺陷病2例报道及文献回顾

钠牛磺胆酸共转运多肽(NTCP)缺陷病是由于溶质转运蛋白家族10成员1(SLC10A1)基因突变引起的一种遗传性胆汁酸代谢病,为一种常染色体隐性遗传病,NTCP缺陷病患者体内血浆中结合胆汁盐进入肝细胞的主要转运体的功能受到影响[1-2]。主要临床表现为高胆汁酸、皮肤瘙痒和脂肪吸收不良,导致全面生长迟缓和脂溶性维生素缺乏等。目前,国内外相关文献报道并不多见,长期预后及临床表现不明确。湖北省天门市第一人民医院收治并确诊为NTCP缺陷病患儿2例,现将其临床资料报道如下,以提高临床医生对该病的认识。

肝组织钠离子牛磺胆酸协同转运蛋白表达与乙肝患者HBVDNA含量及肝组织病理学改变的相关性研究

研究肝组织钠离子牛磺胆酸协同转运蛋白(SLC10A1)、SLC10A2与肝组织HBVDNA含量的相关性,以及NTCP与肝组织病理学改变的相关性,方法:采用免疫组化方法检测乙型肝炎病毒(hepatitis B virus HBV)感染者的肝组织中NTCP(SLC10A1)及SLC10A2的表达及ELISA方法检测血液中SLC10A1、SLC10A2水平,利用荧光定量PCR方法检测HBV感染者肝组织及血清中的HBV DNA含量,结合临床及实验室资料,研究NTCP与肝组织HBV DNA含量的相关性,以及NTCP与肝组织病理学改变的有无关联性。结果:1.89例患者免疫组化检测NTCP(SLC10A1)、SLC10A2表达均为阳性,其中SLC10A1多在细胞膜和细胞浆表达,阳性程度(+,++,+++,++++)不等;SLC10A2多在细胞浆和细胞核表达,P>0.05,无统计学意义。3.将血清学检测NTCP(SLC10A1)、SLC10A2结果与血清HBV DNA含量(以2×105IU/ml、1×107IU/ml为界分组)比较,结果显示血清学检测NTCP(SLC10A1)及SLC10A2有统计学意义。4.肝组织NTCP不同阳性组之间的炎症G进行比较,无统计学意义。肝组织NTCP不同阳性组之间的纤维化程度S进行比较,无统计学意义。结论:NTCP(SLC10A1)在肝组织中的表达与乙肝患者肝组织HBV DNA含量有一定的相关性,血清中含量与血清HBV DNA含量有部分相关性,本研究再次证实NTCP(SLC10A1)不但与胆汁转运相关。血清中SLC10A2含量与血清HBV DNA含量有部分相关性;SLC10A2在肝组织中的表达与肝组织HBV DNA含量无密切相关性,说明SLC10A2不是HBV感染的功能性受体。

钠牛磺胆酸共转运多肽缺陷病的发病机制、临床表现及诊疗进展

钠牛磺胆酸共转运多肽(NTCP)缺陷病是SLC10A1双等位基因突变导致的一种新的遗传性胆汁酸代谢病,在我国可能并不罕见。NTCP缺陷病以儿童期显著而持续性的高胆汁酸血症为主要临床特征,并可能参与新生儿高胆红素血症、婴儿早期胆汁淤积症和妊娠胆汁淤积症的形成。NTCP缺陷病目前缺乏特异性治疗手段,但通常预后良好。SLC10A1基因分析有助于该病患者及时确诊,同时避免不必要的检查和干预。

2例钠牛磺胆酸共转运多肽缺陷病患儿临床分析

钠牛磺胆酸共转运多肽(NTCP)缺陷病是近年来新发现的一种遗传性胆汁酸代谢障碍性疾病,本研究旨在提高对NTCP缺陷病的认识,选取华中科技大学附属湖北省妇幼保健院儿童内分泌遗传代谢科分别以生长发育落后及黄疸就诊的2例患儿,虽临床表现不同,但均发现有顽固性的高胆汁酸血症,并伴有25-羟维生素D下降,行基因分析发现SLC10A1突变,临床确诊为NTCP缺陷病,经积极对症治疗后临床症状缓解,预后较好。该研究提示,对于显著而持续性的高胆汁酸血症的新生儿及儿童患者,需考虑NTCP缺陷病可能。NTCP缺陷病患儿远期可能出现身材矮小等生长发育落后情况,生长激素或可改善NTCP缺陷病患者的终身高。

钠-牛磺胆酸共转运多肽缺陷患儿的肝功能及基因特点

目的探讨钠-牛磺胆酸共转运多肽(NTCP)缺陷病患儿的肝功能及基因特点。方法选取经基因测序确诊的NTCP缺陷病患儿(n=11)及其父母(n_(父)=11,n_(母)=11)为研究对象,收集NTCP缺陷病患儿的年龄、出生史、家族史及新生儿期黄疸等一般临床资料;抽取患儿入院治疗前空腹静脉血,检测血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆红素(TBIL)、直接胆红素(DBIL)、间接胆红素(IBIL)及胆汁酸(TBA);抽取患儿及父母外周血采用高通量测序法进行基因检测,对患儿突变基因与其父母基因进行Sanger验证,并运用Rare Exome Variant Ensemble Learner(REVEL)、Sortig Intolerant from Tolerant(SIFT)、PolyPhen-2、Mutationtation Taster、Genomic Evolutionary Rate Profiling(GERP^(+))综合性预测软件对突变位点进行危害预测;随访患儿1年,检测血清ALT、AST、TBA、TBIL、DBTL及IBIL等肝功能指标。结果11例NTCP缺陷病患儿,男6例(54.5%)、女5例(45.4%),确诊年龄40~221d、平均(99.82±69.63)d,血清ALT、AST、TBA、TBIL、DBIL及IBIL升高分别为8例(72.7%)、8例(72.7%)、11例(100%)、6例(54.5%)、7例(63.6%)及4例(36.4%);所有患儿均为SLC10A1基因(c.800C>T)纯合突变,父母为(c.800C>T)突变携带者,除检测到与疾病表型高度相关的SLC10A1基因突变外,还检测到与临床相关性不明确突变位点134个;治疗后患儿随访肝功能指标,除TBA外,其余指标下降良好,随着访时间延长TBA呈现下降趋势。结论NTCP缺陷病患儿肝功能异常以TBA增高为主要特征;SLC10A1基因突变是直接原因,已发现多个突变位点可致病,目前c.800C>T是热点突变,患者可呈杂合或纯合突变。

钠牛磺胆酸共转运多肽缺陷病临床特征及SLC10A1基因突变分析

目的总结钠牛磺胆酸共转运多肽(NTCP)缺陷病的临床和基因突变特征。方法选取2020年6月—2021年6月于广州市妇女儿童医疗中心经基因检测确诊的10例NTCP缺陷病患儿(年龄<18岁),分析一般资料(性别、年龄、身高、体质量、家族史和既往病史)、临床表现、病情转归、实验室检查(血常规、肝功能、嗜肝病毒、自身免疫性肝炎筛查)及基因突变检测结果。结果10例患儿生长发育均正常,其中男8例,女2例;确诊年龄3~37个月。首次就诊病因包括新生儿黄疸延长(5/10,50%)、转氨酶升高(2/10,20%)、体检(2/10,20%)和肺炎(1/10,10%)。所有患儿确诊时血清TBA水平均明显升高;ALT、AST水平升高2例;TBil水平升高1例,且以DBil水平升高为主(DBil/TBil>50%)。经第二代基因测序,10例患儿均为SLC10A1基因纯合突变:c.800C>T(p.Ser267Phe,chr14∶70245193)。结论尽管NTCP缺乏症往往无明显症状,但部分患儿早期可表现为婴儿胆汁淤积症,对于显著而持续的高胆汁酸血症,且血清总TBA水平与其他肝功能指标的变化趋势不一致时,应考虑NTCP缺陷病可能。

钠牛磺胆酸共转运多肽在肝胆疾病中的研究进展

钠牛磺胆酸共转运多肽(NTCP)既是胆汁酸吸收入肝的重要转运体,又是HBV、HDV的功能性受体;其结构、功能、基因特点、表达调控机制等已得到广泛研究;且NTCP与慢性病毒性肝炎、非酒精性脂肪性肝病、肝纤维化、原发性胆汁性胆管炎、肝细胞癌相关,本文系统阐述了NTCP在各种肝胆疾病中的作用,为相关疾病的诊断及治疗提供新方向。

血清胆汁酸谱分析协助钠离子-牛磺胆酸共转运多肽缺陷病诊断和鉴别诊断

目的以钠离子-牛磺胆酸共转运多肽(NTCP)缺陷病为核心,探讨血清胆汁酸谱分析在协助该病诊断及其鉴别诊断中的价值。方法收集整理并分析2015年4月初至2021年12月底暨南大学附属第一医院儿科诊治的66例胆汁淤积性肝病(CLDs)患者的临床资料,包括NTCP缺陷病患者32例(成人16例,儿童16例)、希特林缺陷导致的新生儿肝内胆汁淤积症(NICCD)16例、Alagille综合征8例,胆道闭锁10例。同时设立成人和小儿健康对照组(各15例)。通过超高效液相色谱-串联质谱技术对研究对象血清胆汁酸成分进行定性定量分析,利用统计学SPSS 19.0及GraphPad Prism 5.0软件对数据进行作图和比较。用t检验、Wilcoxon秩和检验、Kruskal-Wallis H检验等统计学方法,比较NTCP缺陷病与相应健康对照组以及NTCP缺陷病与其他CLDs患儿的临床及胆汁酸谱之间的差异。结果与健康对照相比,NTCP缺陷病患者总结合型胆汁酸、总初级胆汁酸、总次级胆汁酸,以及甘氨胆酸、牛磺胆酸和甘氨鹅脱氧胆酸等水平均升高(P<0.05);与NTCP缺陷病成人患者相比,NTCP缺陷病患儿血清总结合型胆汁酸和总初级胆汁酸水平均明显升高(P<0.05);NTCP缺陷病患儿血清牛磺鹅脱氧胆酸、甘氨猪胆酸、牛磺猪胆酸和牛磺α鼠胆酸水平明显升高,但甘氨脱氧胆酸、甘氨石胆酸、石胆酸等胆汁酸降低(P<0.05);NTCP缺陷病患儿血清中石胆酸、脱氧胆酸和猪脱氧胆酸等次级胆汁酸水平明显高于NICCD、Alagille综合征和胆道闭锁等其他CLDs组(P<0.05);总初级胆汁酸/总次级胆汁酸、总结合型胆汁酸/总未结合型胆汁酸,以及牛磺胆酸、血清牛磺鹅脱氧胆酸和甘氨鹅脱氧胆酸等指标可有效鉴别NTCP缺陷病和其他非NTCP缺陷病CLDs患儿。结论证实血清胆汁酸谱分析对于协助NTCP缺陷病的诊断和鉴别诊断具有重要参考价值,深化了对NTCP缺陷病等CLDs患者血清胆汁酸谱变化特征的科学认识,为深入理解其发病机制提供了代谢组学依据,同时为后续深入研究提供了线索和思路。

新生儿钠牛磺胆酸共转运多肽缺陷病合并先天性甲状腺功能减退症1例

钠牛磺胆酸共转运多肽(sodium taurocholate cotransporting polypeptide,NTCP)缺陷病是由于SLC10A1基因变异引起的一种遗传性胆汁酸代谢病。本文报道1例新生儿期起病的NTCP缺陷病合并先天性甲状腺功能减退症的患儿,提高临床医生的认识。

钠离子-牛磺胆酸共转运蛋白低表达对炎症活跃慢性乙型肝炎患者抗病毒治疗应答的影响

目的探究增殖肝细胞膜上的钠离子-牛磺胆酸共转运蛋白(sodium taurocholate cotransporting polypeptide,NTCP)表达下调与慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)患者抗病毒治疗应答的关系。方法纳入2011年1月至2015年3月入住北京市解放军总医院第五医学中心的68例乙型肝炎e抗原(hepatitis B e antigen,HBeAg)阳性的CHB患者,收集患者基本信息和实验室检查结果;以基线(抗病毒治疗前)的炎症活动度(G)为依据将患者分为≤G2组及>G2组,每组选取12例患者的肝脏穿刺组织标本,进行NTCP和Ki67的免疫荧光染色,计算Ki67阳性细胞比例,并对NTCP的染色进行评分。收集2014年3月至2017年3月入住解放军总医院第五医学中心有乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染并诊断为肝脏局灶性结节增生(focal nodular hyperplasia,FNH)的5例患者的结节切除组织及其配对的肝脏非FNH组织,免疫组织化学染色检测各组织标本中Ki67、NTCP和乙型肝炎表面抗原(hepatitis B surface antigen,HBsAg)的表达,并计算染色阳性细胞比例或对染色强度进行评分。统计学分析采用Mann-Whitney U检验、χ2检验和Spearman相关性分析。结果肝脏FNH组织中Ki67阳性细胞比例[6.75%(6.20%,8.16%)]高于配对的肝脏非FNH组织[0.75%(0.66%,1.20%)],而对应的NTCP及HBsAg的免疫组织化学染色评分分别为3.00(1.00,3.00)和2.00(1.00,2.00),分别低于配对的肝脏非FNH组织[分别为8.00(8.00,9.00)和8.00(6.00,8.00)],差异均有统计学意义(Z=-2.611、-2.424、-2.635,P=0.009、0.015、0.008)。>G2组患者37例,≤G2组患者31例。抗病毒治疗6个月后,>G2组患者血清HBV DNA、HBeAg的下降幅度分别为(0.71±0.14)lg IU/mL和(0.92±0.13)lg IU/mL,分别大于≤G2组的(0.54±0.30)lg IU/mL和(0.49±0.65)lg IU/mL,差异均有统计学意义(Z=-3.048、-2.666,P=0.002、0.008)。>G2组肝组织中Ki67阳性细胞比例[4.34%(1.84%,8.77%)]高于≤G2组[0.34%(0,0.80%)],而NTCP的免疫组织化学染色评分[1.00(0,3.25)]低于≤G2组[6.00(4.00,8.00)],差异均有统计学意义(Z=-3.640、-3.012,P<0.01,P=0.003)。Spearman相关性分析显示,NTCP免疫组织化学染色评分与Ki67阳性细胞比例呈负相关(r=-0.512,P=0.01)。结论炎症活动度更高的CHB患者往往伴有更为活跃的肝细胞增殖和更低的细胞膜NTCP表达,不利于HBV再感染。这可能有利于这部分患者获得更好的抗病毒治疗效果。

发现乙型肝炎病毒受体——肝细胞的钠离子一牛磺胆酸共转运蛋白

乙型肝炎（乙肝）病毒（HBV）属于嗜肝DNA病毒科正肝病毒属。HBV基因组为不完整的双链DNA，约3．2kb；其包膜蛋白包括S、M及L蛋白，均为多次跨膜蛋白。S、M、L蛋白具有相同的C端，即为相同氨基酸序列的S区，但N端不同[1]。丁型肝炎病毒（HDV）是HBV的卫星RNA病毒，具有HBV的3种包膜蛋白，只有在与HBV共存时才能够包装为感染性颗粒及增殖。在研究HBV侵人细胞机制研究方面，HDV可以作为HBV的替代[2]。全球目前有近3亿人感染HBV，并有约1500万人同时感染了HDV。

人外周血单个核细胞与肝细胞Na^+-牛磺胆酸共转运蛋白(NTCP)基因的表达

目的检测人外周血单个核细胞(PBMC)与肝细胞Na+-牛磺胆酸共转运蛋白(NTCP)基因的表达情况,探讨HBV感染PBMC的可能途径,研究乙型肝炎病毒(HBV)感染PBMC机制。方法用淋巴细胞分离液分离人外周血单个核细胞,用TRIzol提取人外周血单个核细胞与肝细胞总RNA,经逆转录合成cDNA。设计合成一对针对NTCPmRNA的特异性引物,对人外周血单个核细胞及肝细胞的cDNA进行PCR扩增,扩增产物用1.5%琼脂糖凝胶电泳鉴定,以检测NTCP基因在两种细胞的表达情况。结果 RT-PCR电泳显示,用NTCP基因特异性引物对肝细胞cDNA扩增,扩增产物大小在200~300bp之间,与NTCP基因理论值(246bp)相符,即肝细胞NTCP基因表达阳性;人外周血单个核细胞的cDNA扩增后进行电泳鉴定,未出现特异性条带,即NTCP基因表达阴性。结论人外周血单个核细胞不表达NTCP基因,提示其表面的HBV受体可能并非NTCP,或HBV循非受体途径进入PBMC,关于HBV感染PBMC的具体机制尚需进一步研究。

第10个溶质转运蛋白家族(SLC10)的细胞功能

溶质转运蛋白(solute carrier,SLC)是细胞内最大的一类转运蛋白,目前被分为55个家族,包括至少362个成员。这里介绍了第10个溶质转运蛋白家族(SLC10)各成员的鉴定、表达和功能方面的研究进展,并对该家族成员顶端钠依赖性胆汁酸转运蛋白(apical sodium-dependent bileacid transporter,ASBT)和Na^+/牛磺胆酸共转运多肽(Na^+/taurocholate cotransporting polypeptide,NTCP)的底物特异性及其抑制剂在药物开发方面的研究做了简要介绍。对SLC10的功能研究可以为治疗高胆固醇血症新药的开发提供理论指导,也可以为人类一些与SLC10突变相关的其他疾病的诊断和治疗开辟新的途径。

钠离子-牛磺胆酸钠共转运多肽是人类乙肝和丁肝病毒的功能性受体

乙型肝炎病毒（HBV）及其卫星病毒丁型肝炎病毒（HDV）感染以及由此导致的疾病是一个非常重要的公共卫生问题。这两种病毒由病毒的包膜蛋白所介导侵入宿主细胞，而这一过程必须通过结合细胞表面受体分子才能实现。然而，宿主细胞表面的乙肝和丁肝病毒受体此前一直未被发现。

钠离子-牛磺胆酸共转运多肽在人骨髓间充质干细胞(BMSCs)中的表达及其对HBV体外感染BMSCs的影响

目的研究体外培养的人骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)中钠离子-牛磺胆酸共转运多肽(sodium taurocholate cotransporting polypeptide,NTCP)的表达情况,探索体外培养的BMSCs能否自然感染乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)及NTCP是否是HBV感染BMSCs的一个功能性受体。方法将HBV阳性血清以不同方法感染BMSCs,检测培养基上清及细胞中HBV DNA、培养基上清中乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)和乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)等感染指标。NTCP-siRNA转染BMSCs后,再次用HBV阳性血清感染BMSCs,检测各感染指标。Western blot法检测各处理组BMSCs中NTCP的表达情况。结果HBV可自然感染体外贴壁培养的人BMSCs,但感染效率很低。当HBV感染悬浮状态下的BMSCs时,感染效率显著升高。BMSCs中存在NTCP的表达,且HBV可显著上调NTCP的表达量,特别是对悬浮状态下的BMSCs。当BMSCs中NTCP的表达被NTCP-siRNA沉默后,HBV对BMSCs的感染效率显著下降。结论体外培养的人BMSCs可被HBV自然感染,且其细胞内表达的NTCP是其感染HBV的一个功能性受体。人BMSCs可作为一种易感、稳定、无需分子修饰的细胞模型,用于研究HBV生命周期的早期阶段以及抗病毒治疗研究。

基于法尼醇X受体通路探讨壮药依山红对胆汁淤积大鼠的影响

目的探讨壮药依山红对α-萘异硫氰酸酯(alpha-naphtyl isothiocyanate,ANIT)诱导胆汁淤积大鼠的影响及其作用机制。方法采用120只SD大鼠,随机分成6组,分别为正常组、模型组、熊去氧胆酸组及壮药依山红高、中、低剂量组,每组20只。除正常组外,余用ANIT灌胃建立胆汁淤积大鼠模型。连续给药15天后,称量计算大鼠肝脾指数;血清生化法检测血清丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,AKP)等转氨酶指标,测定总胆红素(total bilirubin,TBIL)、直接胆红素(direct bilirubin,DBIL)、总胆汁酸(total bile acids,TBA)等胆红素指标;苏木素—伊红(hematoxylin-Eosin,HE)染色法评估肝组织病理学变化,油红O染色评估肝脏脂滴代谢情况;蛋白免疫印迹法及实时荧光定量聚合酶链式反应检测法尼醇X受体(farnesoid X receptor,FXR)、钠牛磺胆酸共转运肽(Na+-taurocholate co-transporting polypeptide,NTCP)、多药耐药相关蛋白2(multidrug resistance-associated protein 2,MRP2)、胆汁盐转运蛋白(bile salt export pump,BSEP)蛋白和mRNA表达水平。结果与正常组比,模型组大鼠肝脾指数、血清转氨酶(ALT、AST、AKP)及胆红素(TBIL、DBIL、TBA)显著升高(P<0.05),肝组织受损。壮药依山红各剂量及熊去氧胆酸显著降低这些指标(P<0.05),改善肝组织学病变,减少脂滴沉积,效果呈剂量依赖性。同时,依山红各剂量组大鼠肝组织中NTCP、MRP2蛋白的表达量均明显升高(P<0.05);高剂量组大鼠肝组织中BSEP蛋白相对表达量显著下降(P<0.05)。与模型组相比,依山红高、中剂量组大鼠肝组织中Fxr、Ntcp、Mrp2 mRNA的相对表达量显著升高(P<0.05);依山红低剂量组大鼠仅Mrp2 mRNA表达量显著升高(P<0.05);依山红各剂量大鼠肝组织中Bsep mRNA表达水平显著下降(P<0.05)。结论壮药依山红可通过调节FXR及其调控的胆汁转运相关蛋白的表达,对ANIT诱导胆汁淤积模型大鼠起到保肝利胆的作用。

PreS1多肽(2-21Aa)介导肝脏靶向脂质体的制备及其靶向性研究

目的以来源于乙肝病毒（hepatitisBvirus，HBV）PreSl抗原2-21Aa多肽（HBVpreS／2—21nyr）为导向的肝细胞靶向长效循环脂质体（10ngcirculatingliposome，LCL），通过体外细胞学实验验证其靶向性。方法固相合成HBVpreS／2—21m多肽，化学偶联Mal—PEG2000-DSPE（马来酰亚胺一聚乙二醇2000一硬脂酰基磷脂酰乙醇胺）生成HBVpreS／2五1q—PEG2000-DSPE；采用乙醇注入法制备脂质体，包裹荧光素钠（fluoresceinsodium，FS）形成HBVpreS／2—21nyt-FS—LCL；激光粒度仪、透射电镜、高效液相色谱检测和观察脂质体的粒径、超微形态及包封率；以稳定表达NTCP的HepG2为细胞模型，分析纳米脂质体靶向性。结果合成的靶向脂质体，呈类圆形，大小均匀，粒径为（94．09±9．2）nm，达到纳米级别；有效包裹荧光素钠，包封率为（89．32±1．02）％；与无靶向修饰脂质体相比，可递送更多的荧光素钠进入细胞内。结论HBVpreS／2—21myt修饰的靶向脂质体，有较高的包封率，为纳米脂质体，能特异性地通过NTCP靶向肝细胞，有望成为一种新型的肝细胞靶向给药系统。