齐齐哈尔地区汉族人群钠离子通道1A基因DNA甲基化与家族性原发性高血压的关系研究

目的探究齐齐哈尔地区汉族人群钠离子通道1A(SCNN1A)基因DNA甲基化与家族性原发性高血压的关系。方法选取2020年10月—2022年1月在齐齐哈尔市居住≥3代且年龄>18岁的汉族原发性高血压患者180例作为研究对象。根据高血压确诊时间将其分为初诊组(入组时新发高血压)和既往组(入组前已确诊高血压),每组90例。另选取该地区90例无高血压家族史的健康体检者作为对照组。收集并整理各组患者的临床基础资料,采用焦磷酸测序法检测SCNN1A基因DNA甲基化,比较各组患者的SCNN1A基因编码区CpG1~CpG6位点DNA甲基化,以多因素Logistic回归分析家族性原发性高血压的影响因素。结果各组性别、年龄、BMI、吸烟史、饮酒史、LDL、TC及FBG比较,差异无统计学意义(P>0.05)。初诊组和既往组TG、UA高于对照组,HDL低于对照组(P<0.05)。各组SCNN1A基因编码区CpG3、CpG4、CpG5、CpG6位点甲基化比较,差异无统计学意义(P>0.05)。初诊组和既往组SCNN1A基因编码区CpG2位点甲基化低于对照组,既往组CpG1位点甲基化高于对照组(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示:HDL[OR=5.078(95%CI:2.326,11.090)]及CpG2[OR=6.322(95%CI:2.845,13.805)]位点甲基化降低,TG[OR=4.486(95%CI:2.054,9.797)]、UA[OR=5.557(95%CI:2.545,12.134)]及CpG1[OR=5.463(95%CI:2.502,11.930)]位点甲基化升高是家族性原发性高血压的影响因素(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,CpG1、CpG2位点DNA甲基化单一及联合诊断家族性原发性高血压诊断的AUC分别为0.743(95%CI:0.621,0.865)、0.707(95%CI:0.612,0.841)和0.839(95%CI:0.753,0.925)。结论齐齐哈尔地区汉族人群DNA甲基化与家族性原发性高血压关系密切,且SCNN1A基因CpG1位点甲基化存在升高趋势,CpG2位点甲基化存在降低趋势。

Dravet综合征患儿临床表型与神经元钠离子通道α1亚单位基因突变的相关性分析

目的探讨神经元钠离子通道α1亚单位(SCN1A)基因突变阳性的Dravet综合征患儿的临床表型特点,从而了解Dravet综合征患儿的病变程度与SCN1A基因突变的相关性。方法回顾性分析2014年1月至2017年1月在海南省农垦三亚医院小儿门诊就诊的43例Dravet综合征患儿及其家系成员的临床资料和SCN1A基因检测结果,以及患儿的心电图、脑电图及核磁共振检查结果。结果 31例Dravet综合征患儿发现SCN1A基因突变阳性,突变类型包括错义突变,移码突变、大片段缺失。SCN1A^+组患儿发病年龄为(4.32±0.84)月,小于SCN1A^-组(t=2.354;P<0.05)。1岁前月发作频率SCN1A^+组为3.24±1.13,而SCN1A^-组为1.77±0.45(t=2.435;P<0.05)。SCN1A^+组患儿1年内发生癫痫持续状态次数明显高于SCN1A^-组(t=2.311;P<0.05)。SCN1A^+组中19例患儿出现不同程度的智力减退,而SCN1A^-组中3例患儿出现智力减退(P<0.05)。SCN1A^+组中16例患儿EEG出现背景弥漫性慢波活动,21例为多棘慢波。SCN1A^-组中,2例患儿EEG出现背景弥漫性慢波活动,3例为多棘慢波,两组差异有统计学意义(P<0.05)。结论本研究表明,相比于SCN1A^-组,SCN1A^+组Dravet综合征患儿发病年龄小,1月前发病次数及平均每年发生癫痫持续状态次数多,智力减退患儿比例大,以及脑电图出现背景弥漫性慢波活动、多棘慢波等异常活动比例大。

钠离子通道调节蛋白1与肝癌患者3年预后的相关性研究

目的探讨钠离子通道调节蛋白1(SCNM1)与肝癌患者3年预后的相关性。方法回顾性分析我院2014年2月-2016年2月收治的90例肝癌患者的临床资料,取病理组织送检,比较癌组织、癌旁组织的SCNM1表达水平。记录患者的临床特征,分析SCNM1表达水平与临床特征的关系。随访3年,记录患者生存、死亡情况,分析SCNM1表达与预后的关系。结果癌组织中SCNM1表达量为(11.64±3.26),显著高于癌旁组织的(7.49±2.76)(P<0.05)。肿瘤直径≥5 cm患者的SCNM1表达量为(10.93±2.12),显著高于肿瘤直径<5 cm患者的(8.23±2.05)(P<0.05)。Child-Pugh A级患者的SCNM1表达量为(7.13±1.24),显著低于B、C级患者的(10.45±2.08)、(10.81±2.23)(P<0.05)。有肝硬化患者的SCNM1表达量为(10.96±2.46),显著高于无肝硬化患者的(8.04±1.34)(P<0.05)。随访3年提示90例肝癌患者的死亡率为52.22%,生存率为47.78%。死亡患者的SCNM1表达量为(10.75±2.37),显著高于存活患者的(7.93±1.76)(P<0.05)。结论SCNM1在肝癌组织中呈高表达,其表达量与肿瘤直径、肿瘤分期、肝功能分级、肝硬化情况相关,且死亡患者的SCNM1表达量高于生存患者。

钠离子通道β1亚单位基因型在隐源性癫痫患者中的分布特征及其与脑电图的相关性

目的:探讨钠离子通道β1亚单位基因3个位点(T185M,R85H,C121W)的单核苷酸多态性(SNP)与癫痫的相关性及其与脑电图的关系.方法:采用等位基因特异性引物PCR技术检测SCN1B3个位点的SNP分布频率,并用SAS统计软件对所得数据进行统计分析.结果:在难治性癫痫组中,SCN1B基因变异的SNP在3个位点中的分布频率分别为为51.4%,39.0%,32.2%;在非难治性癫痫组中分布频率分别为52.0%,34.6%,34.7%.两组中SCN1B的3个位点变异基因型及变异等位基因分布频率均较健康对照组高(P<0.05).典型癫痫波脑电图组与不典型的异常脑电图组的基因型频率分布比较,差异有统计学意义(P<0.05).结论:SCN1B基因任一位点突变与癫痫易感性均具有相关性,且脑电图呈典型癫痫波,但与癫痫是否发展成为难治性癫痫无关.

12例Dravet综合征患儿的临床特征及基因突变特点

目的 探讨Dravet综合征(DS)患儿的临床特征及基因突变特点。方法 收集12例DS患儿的年龄、性别以及临床资料[出生史、起病时间、确诊时间、癫痫发作诱因及类型、视频脑电图(VEEG)、颅脑影像学检查、抗癫痫药物(ASM)的种类及预后等],取患儿及父母的外周血采用二代测序方法检测突变基因;随访DS患儿10个月~5年,了解用药情况、癫痫发作频率及精神运动发育情况等信息。结果 DS患儿首次发作年龄4~15个月,婴儿期起病9例(75.0%);癫痫发作具有热敏感性10例(83.3%);单一发作类型6例(50.0%),其中全面强直-阵挛发作(GTCS)4例、局灶性发作(FS)2例,2种发作类型6例(50.0%),均为GTCS+FS,其中半侧阵挛发作2例(16.7%);癫痫持续状态(SE)8例(66.7%);12例患儿发育迟缓,其中全面发育迟缓3例(25.0%),运动发育迟缓2例(16.7%),语言发育迟缓7例(58.3%);视频脑电图检查结果显示,背景慢化11例(91.7%),局灶性癫痫样放电9例(75.0%);基因检测结果显示,钠离子通道α1亚单位(SCN1A)变异9例[75.0%,其中De novo有7例(77.8%)],SCN9A、SET含结构域蛋白2(SETD2)及神经元烟碱胆碱能受体α多肽2(CHRNA2)基因突变各1例(8.3%,均来自于父亲);多种ASM药物联合治疗有效率为75.0%。结论 DS患儿起病多见于婴儿期,癫痫发作热敏感性突出,癫痫发作类型多样,常伴有发育迟缓,VEEG可见背景慢化及局灶性放电,SCN1A基因突变最常见,多药联用可控制癫痫发作。

SCNM1在乙肝相关性肝癌中的表达及临床意义

目的:研究钠离子通道调节蛋白1(SCNM1)在乙肝相关性肝癌中的表达情况,并探讨其表达差异与临床病理特征及预后的关系。方法:标本来源于2013年1月～2015年12月在中山大学附属第三医院接收治疗的108例乙肝相关性肝癌患者,所有患者均签署知情同意书,符合医学伦理学规定。结合公共数据库中的肝癌资料,分析SCNM1的m RNA表达水平;应用RT-qPCR检测乙肝相关性肝癌组织及癌旁组织中SCNM1的m RNA表达水平,并分析SCNM1的表达水平与乙肝相关性肝癌临床病理特征的关系;利用Kaplan-Meier plotter分析SCNM1与肝癌患者预后的相关性。结果:TCGA数据库、Human Protein Atlas数据库和Oncomine数据库的分析结果显示,SCNM1在肝癌组织中的表达量明显高于正常肝组织(P <0. 01)。SCNM1主要分布于细胞核中。RT-qPCR检测结果显示,乙肝相关性肝癌组织中SCNM1的m RNA中位表达水平明显高于其配对癌旁组织(t=8. 082,P <0. 01)。乙肝相关性肝癌患者中SCNM1的表达水平与肝硬化、丙氨酸转氨酶和肿瘤大小具有相关性(P <0. 05),而与患者的性别、年龄和肿瘤包膜等临床病理特征无相关,SCNM1高表达的肝癌患者总生存时间较低表的患者达短(HR=1. 53,P=0. 016),SCNM1高表达的乙肝相关性肝癌患者总生存时间更短(HR=2. 41,P=0. 015)。结论:在乙肝相关性肝癌中,SCNM1高表达并且和患者的预后相关。SCNM1在乙肝相关性肝癌的发生中可能起着重要作用。

Nav1.7在福尔马林足底炎性疼痛大鼠模型背根神经节中表达的研究

目的观察电压门控钠离子通道1.7(Nav1.7)在福尔马林足底炎性疼痛大鼠模型背根神经节中的表达。方法 SD大鼠24只,随机分为2组,空白对照组(n=12)及福尔马林模型组(n=12)。空白对照组左后足底注射0.1 mL生理盐水,模型组于左后足底注射5%福尔马林0.1 mL,各组大鼠在指定时间点取出L3-L6节段背根神经节,运用实时荧光定量(RT-PCR)、蛋白质印迹(Western blot)检测Nav1.7在大鼠背根神经节中的表达水平。结果各时相点中模型组大鼠背根神经节Nav1.7 mRNA及蛋白表达显著增加,与空白组比较有显著统计学意义(P<0.01﹚。结论福尔马林致炎性疼痛大鼠模型背根神经节中Nav1.7表达增强,与炎性疼痛相关。

Dravet综合征SCN1A基因新突变及遗传咨询

目的 对2例癫痫伴精神运动发育迟缓的患儿进行遗传学病因分析,旨在为患儿治疗及其家庭遗传咨询、生育指导提供依据。方法 提取2例患儿及其父母外周血基因组DNA并采用全外显子测序技术进行检测,按照美国医学遗传学与基因组学学会(ACMG,2015)标准进行致病性分析,通过Sanger测序验证致病变异。结果 全外显子测序结果发现,2例患儿电压门控性钠离子通道α1亚单位基因(SCN1A)基因存在c.5354T>C(p.I1785T)和c.4380T>A(p.Y1460*)新发de novo杂合突变,分别评估变异为可疑致病、致病突变位点,Sanger测序验证了该突变并确认双方父母相应位点均为野生型。结论 结合临床和基因诊断信息,2例患儿均被诊断为常染色体显性遗传病Dravet综合征,明确患儿的致病原因对于合理治疗方案的制定及其家庭的优生优育、遗传咨询具有重要的意义。

SCN5A、SCN1B基因多态性与心房颤动的关系研究

目的探索SCN5A、SCN1B基因多态性与心房颤动(atrial fibrillation,AF)发生的关系。方法对中国广西人群105例AF患者血样和105例正常对照样本提取基因组DNA进行测序,确定突变位点并进行Sanger测序及验证,分析各位点基因型和等位基因频率,与PubMed数据库公布的千人基因组计划进行种族比较。结果共检测到6个多态性位点,其中SCN5A基因rs1805124 AF组等位基因分布与对照组之间差异有统计学意义,并且与全球、非洲、东亚、欧洲、南亚、美洲地区人群分布频率差异有统计学意义(P<0.05)。结论广西少数民族人群中SCN5A rsrs1805124基因位点存在基因多态性,并与其他种族地区存在基因遗传异质性。

SCNN1B基因表达和PCT与COPD急性加重期细菌感染患者肺动脉高压和肺功能损害的关系

目的 分析阿米洛利敏感钠离子通道蛋白1B(SCNN1B)基因表达和降钙素原(PCT)与慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)细菌感染患者肺动脉高压(PH)和肺功能损害的关系。方法 选择2018年1月-2020年12月湖州市中心医院收治的AECOPD细菌感染患者62例为研究对象,根据是否合并PH分成PH组30例和非PH组32例,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测患者外周血SCNN1B基因相对表达量,免疫化学发光法检测血浆PCT水平;受试者工作特征(ROC)曲线分析SCNN1B和PCT预测AECOPD细菌感染患者发生PH和肺功能损害的价值。结果 AECOPD感染病原菌主要为铜绿假单胞菌(26.32%)、鲍氏不动杆菌(17.11%)和大肠埃希菌(11.84%);PH组患者SCNN1B基因表达水平低于非PH组,PCT水平高于非PH组(P<0.05);有吸烟史、缺氧的PH患者SCNN1B基因表达水平明显降低,PCT水平明显升高(P<0.05);随患者肺功能损害程度加重SCNN1B基因表达水平降低,PCT水平升高(P<0.05);SCNN1B基因表达和PCT水平联合预测患者发生PH和重度、极重度肺功能损伤的曲线下面积(AUC)为0.859和0.896。结论 SCNN1B和PCT水平与AECOPD细菌感染患者PH和肺功能损害严重程度具有相关性。

多个癫痫相关基因多态性与拉莫三嗪治疗儿童癫痫血药浓度的相关性

目的拉莫三嗪是儿童癫痫的一线治疗药物,其血药浓度与临床疗效个体差异较大,药效学和药动学通路多个相关基因突变可能是个体差异大的原因,本研究探讨代谢酶UGT1A4,转运体OCT1与ABCB1,受体SCN1A基因多态性与拉莫三嗪治疗儿童癫痫稳态血药浓度的相关性。方法于2018年1月—2019年6月纳入杭州市第一人民医院单用拉莫三嗪治疗的49例癫痫儿童,采集拉莫三嗪治疗达稳定剂量超过7 d以上患儿的稳态谷浓度血浆,使用高效液相色谱法测定拉莫三嗪血药浓度,直接测序法分析代谢酶UGT1A4(rs2011425)、转运体OCT1(rs628031)、ABCB1(rs1045642与rs1128503)和受体SCN1A(rs3812718)的基因分型。采用Kruskal-Wallis H检验或Mann-Whitney U检验探究不同基因分型与拉莫三嗪(LTG)血药浓度及标准化血药浓度相关性[即LTG血浆药物浓度除以每日每千克体重的服药剂量,CDR,(μg/mL)/(mg/kg)],P<0.05为具有显著相关性。结果转运体OCT1 rs628031与拉莫三嗪CDR具有显著相关性,其中AA+AG携带者CDR值显著高于GG携带者,分别是1.27(1.03,2.20)和0.69(0.57,1.02),P=0.002;但其他基因型与CDR值无显著相关性。结论OCT1 rs628031基因突变可能是拉莫三嗪血药浓度和临床疗效个体差异大的重要因素。