缰核神经细胞表达的电压门控性离子通道的特性

目的 :探讨缰核神经细胞离子通道的特性。方法 :采用膜片钳技术的全细胞记录方法 ,通过急性分离的大鼠乳鼠缰核神经元观察缰核神经细胞离子通道的特性。结果 :实验在电压钳位 1 0 m V阶跃去极化的条件下分别引导出内向钠电流和两种外向钾电流。结论 :内侧缰核记录的 K+通道以快速瞬时 K+通道为主 ,外侧缰核以延迟 K+通道为主 ,该结果与内、外侧缰核的组织结构和功能上的差异有关。

白细胞介素1β颜面部镇痛效应的分子途径

目的:观察白细胞介素1β对河豚毒素敏感性钠电流的影响,拟从离子通道水平探讨白细胞介素1β调节颜面部痛的分子机制。方法:于2004-12/2005-11以2月龄左右的昆明种小鼠为实验对象,取双侧三叉神经节,将经分离得到三叉神经节细胞悬液经200目筛网过滤至直径35mm的培养皿内,待细胞贴壁后更换外液两次,应用EPC鄄9双通道膜片钳放大器行全细胞膜片钳记录。先经DAD给药系统向细胞喷射细胞外液5s,记录正常钠电流,再经DAD给药系统(ALA,USA)向细胞喷射实验用药,并记录给药后的钠通道电流。用细胞外液洗去残余药物,待钠电流恢复正常水平后,再向细胞喷射另一实验药物,进行下一个记录。两次记录之间的时间间隔不短于3min。药物效应观察完毕后,向细胞外喷射1μmol/L河豚毒素,根据被河豚毒素阻断程度判断所记录的钠电流类型。实验在室温22～25℃范围内进行。结果:①共稳定记录了81个三叉神经节细胞,其中在25.93%(21/81)的三叉神经节细胞上所记录的钠电流可被河豚毒素完全阻断,9.9%(9/81)的三叉神经节细胞上所记录的钠电流不能被河豚毒素阻断,大多数三叉神经节细胞(61.73%,50/81)上所记录的钠电流可部分被河豚毒素所阻断。②人重组白细胞介素1β显著抑制三叉神经节细胞河豚毒素敏感性INa,使INa的电流密度由给药前的(-86.92±8.08)PA/PF减为给药后的(-35.35±2.90)PA/PF(P<0.05);联合使用人重组白细胞介素1β及白细胞介素1ra也显著降低给药前INa的电流密度眼(-79.27±7.85),(-37.14±4.05)PA/PF,P<0.05演。③与给药前相比,人重组白细胞介素1β使河豚毒素敏感性INaⅠ～Ⅴ曲线显著上升,并使钠电流的最大激活电压向去极化方向偏移约10mV。④人重组白细胞介素1β使河豚毒素敏感性钠通道稳态激活曲线向去极化方向偏移熏V1/2给药前后去极化偏移差异有显著性意义眼(-40.03±2.75),(-35.35±3.47)mV,P<0.05演。⑤人重组白细胞介素1β不影响河豚毒素敏感性钠通道恢复时间常数,给药前后差异无显著性意义眼(4.55±0.58),(5.29±1.84)ms,P>0.05演。结论:白细胞介素1β直接作用于三叉神经节细胞河豚毒素敏感性钠通道,抑制其离子电流,可部分解释白细胞介素1β的颜面部镇痛作用。