钠钙交换体1在高血压发病学中的研究进展

钠钙交换体（sodium-calcium exchanger,NCX）是一种存在于细胞膜上的Na＋-Ca2＋转运蛋白,为非耗能的低亲和力高容量双向转运系统,对维持细胞内Ca2＋浓度的稳态十分重要。对NCX的早期研究主要集中于心肌细胞,揭示NCX是导致缺血再灌注损伤的主要效应分子[1]。心肌缺血再灌注时,继发于细胞内酸中毒的胞浆Na＋升高,激活NCX反向转运使Ca2＋内流增加,导致细胞钙超载,

钠钙交换体1参与窦房结细胞起搏活动研究进展

窦房结细胞是窦房结起搏活动的基础,维持着心脏的正常活动。病态窦房结综合征是常见心血管重大疑难疾病之一,由窦房结起搏及(或)传导功能障碍所致,归因于窦房结起搏细胞的自发性动作电位异常,钠钙交换体1在窦房结细胞动作电位的产生和维持过程中具有重要作用,其功能异常,可导致窦房结起搏功能障碍而引发病态窦房结综合征。

人牙髓成牙本质细胞和神经组织中钠钙交换体1型通道蛋白的免疫组化研究

目的 通过免疫组化法观察钠钙交换体1型（Na^＋/Ca^2＋exchanger 1,NCX1）通道蛋白在人牙髓成牙本质细胞（odontoblasts,OD）和神经纤维组织中的表达,为解释牙髓组织的修复和感觉传导功能奠定基础.方法 选取就诊于天津医科大学口腔医院口腔颌面外科18- 25岁患者因阻生或正畸拔除的健康完整的第三磨牙20颗,通过牙本质涎磷蛋白抗体染色与改良Bielschowsky嗜银染色分别定位OD层和神经组织,通过特异性抗体染色分析NCX1通道蛋白在人牙髓组织OD细胞层和神经组织中的表达情况,并用Image Pro Plus软件半定量比较20例离体牙样本冠部和根部上1/3两个部位牙髓OD中NCX1通道蛋白的表达情况.结果 免疫组化结果显示人牙髓OD胞体和神经组织的NCX1通道蛋白均为阳性表达.Image Pro Plus分析显示,NCX1通道蛋白在牙冠部与根部上段OD中的表达（A值分别为0.146±0.021、0.120±0.034）差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 人牙髓组织OD层和神经组织均明显表达NCX1通道蛋白;NCX1在牙冠部和根部上段OD中的表达无明显差异.

钠钙交换体NCX1在急性胰腺炎发生、发展中的作用

目的研究钠钙交换体NCX1在急性胰腺炎发生、发展中的作用。方法分离SD大鼠胰腺腺泡细胞,用雨蛙素诱导体外AP模型,采用qRT-PCR、Western blot检测NCX1、TNF-α、IL-6 mRNA及蛋白的表达变化;再加入NCX1特异性抑制剂KB-R7943预处理腺泡细胞,检测NCX1、TNF-α、IL-6的表达变化。构建SD大鼠AP模型,分为阴性对照组,雨蛙素组及雨蛙素+NCX1抑制剂组,qRT-PCR检测比较各组大鼠胰腺组织中NCX1、TNF-α、IL-6 mRNA的表达变化,采用生化分析仪检测各组血清淀粉酶浓度的变化;各组大鼠胰腺组织经HE染色后观察组织病理学改变。结果从细胞水平证实在急性胰腺炎中NCX1及炎症因子TNF-α、IL-6的mRNA及蛋白表达量较阴性对照组均明显升高(P<0.01),而加入NCX1特异性抑制剂KB-R7943预处理后能明显抑制雨蛙素诱导的炎症反应,NCX1、TNF-α、IL-6的mRNA及蛋白表达量较雨蛙素组均明显下降(P<0.01)。从动物水平证实在AP大鼠中NCX1及炎症因子TNF-α、IL-6的mRNA表达量较阴性对照组明显升高(P<0.01),其血清淀粉酶浓度较阴性对照组也明显升高(P<0.001);但加入NCX1特异性抑制剂KB-R7943后,NCX1、TNF-α、IL-6的mRNA表达量和血清淀粉酶水平较雨蛙素组均有所下降(P<0.01),同时急性胰腺炎的病理改变程度较雨蛙素组亦明显减轻。结论钠钙交换体NCX1介导了急性胰腺炎的发生、发展;提示NCX1可以作为急性胰腺炎治疗的靶标。

七氟烷后处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用及与NCX1的相关性研究

目的研究七氟烷后处理(SevoPoC)对心肌缺血再灌注损伤(MIRI)的保护作用及与钠钙交换体1(NCX1)的相关性。方法取36只SD大鼠,构建离体心脏灌注模型,待血流动力学稳定0.5h后,缺血0.5h复灌1h构建大鼠MIRI模型,随机分为对照组(离体心脏灌注KH液2h)、模型组(离体心脏灌注KH液0.5h,停止灌注0.5h,接着恢复灌注1h)和实验组(复灌即刻用3%的七氟烷持续灌注15min,其他同模型组),三组各12只。比较三组大鼠平衡灌注期(T0)、再灌注0.5h(T1)和再灌注1h(T2)各项心功能指标的变化情况,采用免疫印迹法检测三组大鼠NCX1、兰尼碱受体2(RyR2)及L型钙通道(LTCCs)蛋白的表达水平,并用实时荧光定量PCR法检测大鼠NCX1、RyR2及LTCCsmRNA的相对表达量。结果相比T0,模型组再灌注0.5h(T1)和再灌注1h(T2)左心室舒张末期压力(LVEDP)显著增高(P<0.05),而最大左心室发展压下降速率(-dp/dt)、最大左心室发展压上升速率(+p/dt)、心率与左心室发展压的乘积(RPP)显著下降(P<0.05);相比对照组,模型组T1和T2时LVEDP显著增高(P<0.05),而-dp/dt、+dp/dt和RPP显著下降(P<0.05);相比T0,实验组T1和T2时LVEDP显著增高(P<0.05),T1和T2时LVEDP较对照组明显增高,而较模型组显著下降(P<0.05);实验组T1时-dp/dt较模型组显著增高(P<0.05),T2时-dp/dt较T0显著下降,亦较对照组显著下降(P<0.05);实验组T1和T2时+dp/dt和RPP较模型组显著增高(P<0.05)。三组大鼠RyR2和LTCCs蛋白表达水平的比较,无显著差异(P>0.05);模型组大鼠NCX1蛋白表达水平较对照组明显升高(P<0.05),而实验组大鼠NCX1蛋白表达水平较模型组明显下降(P<0.05)。三组大鼠NCX1、RyR2及LTCCsmRNA相对表达量的比较,无显著差异(P>0.05)。结论SevoPoC可促进MIRI大鼠心功能恢复,其具有保护MIRI的作用,而这一保护作用可能与其具有抑制NCX1表达的作用密切相关。

NCX1在肝癌中的表达、调控Ca^(2+)浓度及其对肝癌细胞增殖和迁移的影响

背景与目的:钠钙交换体亚型1(Na^+-Ca^(2+) exchanger isoform 1,NCX1)可通过对细胞Ca2+平衡的调节参与癌症的发生,但是否参与肝癌的发生、发展及其作用机制的研究鲜见报道。该研究旨在探讨NCX1在肝癌中的表达变化,对人肝癌细胞HepG2增殖、迁移能力的影响及其可能的机制。方法:运用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)和蛋白[质]印迹法(Western blot)检测NCX1 m RNA及蛋白在人正常肝细胞株LO2、肝癌细胞株HepG2、人正常肝组织和原发性肝细胞癌患者癌组织中的表达。采用共聚焦显微镜技术观察NCX1在细胞外无钠溶液刺激活化后,对正常肝细胞LO2及肝癌细胞HepG2中钙离子浓度的调控。采用MTT法、细胞划痕实验检测NCXl特异性的阻断剂KB-R7943对人肝癌细胞HepG2增殖、迁移的影响。结果:在肝癌细胞株HepG2和肝细胞癌组织中,NCX1 m RNA和蛋白质的表达均高于正常肝细胞株LO2和正常肝组织(P<0.05)。共聚焦显微镜实验发现,细胞外无钠溶液可以激活细胞内钙升高,正常肝细胞LO2及肝癌细胞HepG2细胞内钙离子浓度均增高,但肝癌细胞HepG2细胞内钙离子增高的幅值明显高于LO2细胞(P<0.05),NCXl特异性阻断剂KB-R7943可以显著阻断胞外无钠诱导的细胞内钙离子升高(P<0.05)。KB-R7943可以显著抑制肝癌细胞HepG2的增殖及迁移(P<0.05)。结论:原发性肝癌中NCX1的表达量上调,NCX1的活化可以调节细胞内钙变化,抑制NCX1的活性可以进一步抑制肝癌细胞的增殖和迁移。这提示NCX1可能在原发性肝癌的发生、发展中起了重要的作用。

补肾、健脾、活血法对骨质疏松症大鼠骨NCX1表达影响比较研究

目的:观察中医不同治法对骨质疏松症大鼠骨组织NCX1基因和蛋白表达的影响,探讨骨质疏松症的发病机制及中药治疗的作用机理。方法:将132只Wistar大鼠(雌雄各半)随机分为正常、模型、补肾、健脾、活血及骨疏康组。以地塞米松(2.5 mg/kg,2次/周)肌注造模。除正常组及模型组外,各治疗组予以相应的中药治疗。9周后,测定离体股骨骨密度(BMD)及血清骨代谢相关指标,测定骨组织NCX1 m RNA和蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠BMD降低(P<0.01),血清TRAP含量升高(P<0.01),骨NCX1 m RNA和蛋白表达水平均上升(P<0.01)。与模型组比较,补肾组BMD升高(P<0.01),血清TRAP含量下降(P<0.01),骨NCX1 m RNA和蛋白表达水平下调(P<0.01)。结论:补肾中药可能通过下调骨NCX1表达而抑制破骨细胞骨吸收,从而起到治疗骨质疏松症的作用,其作用优于健脾及活血中药。

低强度脉冲超声对大鼠牙本质损伤修复过程中钙离子转运相关蛋白表达的影响

目的:研究低强度脉冲超声(LIPUS)辐照SD大鼠牙本质损伤模型后对成牙本质细胞及牙髓细胞上钙离子转运相关蛋白的影响。方法:40只SD大鼠[(360±13)g]右侧上颌第一磨牙备洞建立牙本质损伤模型,随机对其中20只大鼠备洞牙及剩余20只大鼠左侧上颌第一磨牙予以超声辐照(强度30 mw/cm^2,频率1.5 MHz,频宽200μm,重复率1 kHz),形成备洞组、备洞+LIPUS组、LIPUS组及空白对照组(n=10),超声辐照每日1次,持续20 min,分别在辐照1、3、7、14 d后处死实验动物,应用HE染色观察牙本质-牙髓复合体组织结构及细胞形态变化,免疫组化染色及图像分析检测钙离子转运相关蛋白(Cav 1.2、NCX1)的表达差异。结果:组织形态学分析发现牙本质损伤后LIPUS可协同炎症反应促进第三期牙本质的形成,而LIPUS辐照正常牙未见明显病理改变出现。免疫组化分析发现备洞+LIPUS组在1 d及3 d时较备洞组各蛋白表达明显升高(P<0.05);LIPUS组1 d时Cav1.2表达较空白对照组高(P<0.05),其余时间点两者无差异。结论:LIPUS可能在牙本质损伤早期积极调控钙离子转运相关蛋白,加快第三期牙本质修复进程,其作用机制可能与炎症反应及机械效应相关。

NCX1在消化系统疾病中的研究进展

NCX1是阳离子转运蛋白家族中的一员,具有双向转运Ca^(2+)和Na^+的功能,参与肌细胞的兴奋、神经递质的释放、细胞信号的转导、免疫细胞的活化及细胞凋亡等生理过程。近年来NCX1在消化系统疾病发生发展中的相关研究逐渐受到重视,其不但可参与胃溃疡、胃黏膜损伤的愈合过程,介导胃炎、胃癌、肝细胞癌及急性胰腺炎的发生发展,而且可调节肠道对Ca^(2+)信号的转导。本文就NCX1在消化系统疾病中的研究进展做一综述,以指导临床治疗。

Sp1和NCX1在雨蛙素诱导的急性胰腺炎中的作用

目的观察雨蛙素刺激对胰腺外分泌细胞增殖、自噬的影响,探讨Sp1/NCX1通路在急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)中的作用及其机制。方法雨蛙素刺激胰腺腺泡细胞AR42J,体外诱导急性胰腺炎细胞模型,采用CCK-8检测雨蛙素处理后不同时间(0、24、48、72 h)的细胞增殖情况。Western blot检测自噬的经典标记物LC3Ⅰ和LC3Ⅱ在雨蛙素处理后不同时间(3、6、12、24 h)的表达变化。采用qRT-PCR、Western blot分别检测雨蛙素处理不同时间(1、3、6、12、24 h)Sp1 mRNA及蛋白水平的表达变化。应用免疫组化染色技术观察雨蛙素构建的大鼠AP模型中Sp1的表达情况。Western blot检测Sp1抑制剂Mithramycin A处理AR42J细胞后NCX1蛋白水平变化。结果雨蛙素可抑制AR42J细胞的增殖(P<0.05),并使LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值增加。雨蛙素还可上调AR42J细胞中转录因子Sp1的mRNA和蛋白表达(P<0.05);雨蛙素腹腔注射可导致大鼠胰腺组织中Sp1蛋白表达上调,而在AR42J细胞中抑制Sp1蛋白可抑制钠钙交换体NCX1蛋白的表达。结论 Sp1上调NCX1的表达在雨蛙素诱导的急性胰腺炎中发挥促进作用。

NCX1在吗啡依赖大鼠前额皮质和海马中的表达变化

目的:观察吗啡条件性位置偏好(CPP)大鼠的前额皮质(PFC)和海马(Hip)中钠钙交换体亚型1(NCX1)的变化。方法:40只健康雄性SD大鼠随机分为:对照组(control)和吗啡组(morphine)。吗啡以起始剂量10 mg/kg皮下注射到大鼠颈背部,每日递增,连续注射10 d,第10 d剂量为100 mg/kg。每次注射20 min后,将大鼠放置黑、白箱(morphine)中进行训练。在最后一次训练48 h后,进行CPP实验以确认大鼠吗啡依赖模型建立成功,并且立即将两组大鼠处死后取脑。分离PFC和Hip脑区,通过Western Blot和real time RT-PCR技术分别检测两个脑区中NCX1的蛋白和mRNA的表达水平。结果:CPP结果显示,吗啡依赖大鼠在吗啡伴药箱中停留时间较对照组明显延长(P <0. 05);训练后吗啡组的大鼠在吗啡伴药箱中停留的时间明显长于对照组(P <0. 05)。与对照组相比,依赖组大鼠PFC和Hip中NCX1的m RNA和蛋白表达水平显著升高(P <0. 05)。结论:NCX1在吗啡依赖大鼠PFC和Hip部位表达增加,提示PFC和Hip部位的NCX1可能与吗啡依赖产生机制有关。

微小核苷酸通过调控钠通道在疾病诊疗中的研究现状

钠通道的主要功能是选择性允许Na+跨膜运输,传递和维持细胞的兴奋性。微小核苷酸(miRNA)是一类内源性的非编码小RNA分子,能调节转录后靶基因的表达。本文围绕miRNA在疾病中控制钠通道表达的研究进展作一综述,并讨论了其在临床诊断与治疗相关疾病的发展前景。