钠氢交换体可能是钠-葡萄糖共转运蛋白2抑制剂心力衰竭获益及不良反应的潜在靶点

心力衰竭是多种心血管疾病的终末阶段,是老年人致死致残的重要原因。钠-葡萄糖共转运蛋白2抑制剂(SGLT2i)是一类新型降糖药物。多项临床试验证实SGLT2i可显著降低2型糖尿病患者的心血管事件,尤其是心力衰竭风险,但其心脏保护机制尚不明确。钠氢交换体1是参与致心力衰竭多种信号通路的重要下游分子,参与了心力衰竭的病理生理过程。现总结在SGLT2i治疗心力衰竭过程中钠氢交换体1所发挥的潜在影响及其临床意义。

钠/氢交换抑制剂增强心肌保护液对无心跳猪供心的保护作用

目的探讨对无心跳供体(NHBD)的心脏进行移植的可行性,以及心肌保护液联合钠/氢交换抑制剂HOE-642对这种供心的保护效果。方法将健康雄性家猪24头随机分为实验组(E组,n=6)和对照组(C组,n=6)(每组12头,供、受各6头)。实验组供者采取主动脉快速完全放血法制成NHBD模型,取其心脏,冷浴保存4 h后进行移植。其中,实验组于供心热缺血前5 min静脉给予HOE-642(2 mg/kg)并以含HOE-642的Stanford液(4℃)灌洗和保存供心;供心吻合前经主动脉根部以含HOE-642的保护液(4℃,4∶1氧合血)灌注1次,吻合期间以同样的方法每隔30 min灌注一次;心脏吻合完毕主动脉开放后5 min内静脉给予HOE-642(2 mg/kg)。对照组供者经主动脉适量放血(心脏不停跳),造成热缺血,然后取其心脏,同样冷浴保存4 h后进行移植,但对照组的供心处理不用HOE-642,而是用等量生理盐水。采集供心主动脉根部放血前、心脏移植完毕主动脉开放后1 h(停机)以及主动脉开放后2 h(实验结束)3个时间点的血流动力学指标,测定供心的心肌含水量及心肌酶学指标,观察心肌细胞组织结构变化。结果两组在主动脉开放后均成功脱机。两组各检测点的左心室舒张末压、左心室峰发展压及左心室压力变化速率的差异均无统计学意义(P>0.05);实验组和对照组心肌组织含水量分别为(78.4±5.2)%和(76.3±3.1)%,其差异无统计学意义(P>0.05);两个时间点的心肌酶学指标差异无统计学意义(P>0.05);光镜下见两组的心肌纤维结构清楚,排列紧密,质未见炎性细胞浸润,也未见变性、坏死,电镜下见心肌细胞超微结构完整。结论 NHBD的供心可用于移植,其效果与有心跳者相近;HOE-642可增强心肌保护液对这种供心的保护效果。

钠氢交换抑制剂对兔髂动脉球囊损伤后血管狭窄干预作用研究

目的:建立兔髂动脉球囊损伤模型,观察钠氢交换(NHE)抑制剂(Amiloride)对血管狭窄的干预作用。方法:32只新西兰白兔随机分为干预组(12只)、对照组(10只)及假术组(10只);建立兔髂动脉球囊损伤模型。干预组于术前3d予Amiloride[5mg(kg·d)]、对照组以相同剂量NS腹腔注射,至术后28d取材;取髂动脉行苏木精伊红染色、αactin免疫组化染色、Masson三色染色,观察血管管腔、中膜与内膜面积变化、平滑肌细胞增殖、细胞外基质(ECM)变化情况。结果:兔髂动脉球囊损伤后4周出现明显管腔狭窄,新生内膜生长,平滑肌层增生;干预组、对照组、假术组髂动脉管腔面积各为(0.91±0.23)mm2、(0.68±0.19)mm2、(1.08±0.17)mm2,F=7.631,P<0.01;新生内膜面积各为(0.27±0.15)mm2、(0.67±0.24)mm2、(0.05±0.03)mm2,F=36.974,P<0.01;内膜中膜面积比各为1.21±0.24、1.39±0.26、0.15±0.08,F=7.562,P<0.01;经Amiloride干预后管腔面积明显增大,内膜面积显著下降,内膜中膜面积比下降。干预组与对照组内膜比较,αactin染色阳性面积减小[(4164.15±1788.37)μm2vs.(16328.31±6220.27)μm2,P<0.01];Masson染色绿色面积下降[(8910.62±7041.62)μm2vs(333558.76±7290.17)μm2,P<0.01],提示干预组内膜平滑肌增生及ECM增生均减轻。结论:Amiloride可抑制球囊损伤兔髂动脉所致血管管腔缩小、内膜增生、分泌ECM,减轻血管狭窄,提示其可能在预防经皮冠状动脉内成形术术后血管再狭窄起一定作用。

Na^+/H^+交换体阻滞剂在培养乳鼠心肌细胞/复氧损伤中的保护作用及其机制

目的:探讨在缺氧/复氧损伤中Na+/H+交换体阻滞剂在不同时相用药的心肌细胞保护作用及其机制。方法:应用乳鼠心肌细胞建立心肌缺血-再灌注(I/R)损伤模型,实验分为对照组、缺氧/复氧全程给药组(EIPA-I组)、复氧前给药1组(EIPA-R1组)和复氧前给药2组(EIPA-R2组)进行缺氧/复氧处理,动态检测单个心肌细胞在缺氧/复氧时细胞胞质Ca2+浓度(即[Ca2+]i)的变化及细胞挛缩程度,并观察细胞的存活率。结果:EIPA-I组和EIPA-R2组显著抑制了[Ca2+]i上升及细胞的挛缩,并提高了细胞存活率。结论:在复氧前给予增大剂量的EIPA与缺氧时常规剂量用药同样有效地抑制复氧期Na+/H+的交换,减轻细胞内钙超载,抑制细胞的挛缩,提高心肌细胞的存活率。

Na^+/H^+交换体阻滞剂对糖尿病鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护机制

目的探讨Na+/H+交换体(NHE)阻滞剂抗糖尿病心肌细胞内钙超载和抗细胞挛缩作用。方法利用培养的糖尿病鼠心肌细胞进行缺氧/复氧处理,模拟心肌缺血/再灌注(I/R)损伤,动态监测单个心肌细胞在缺氧/复氧时Ca2+浓度的变化和NHE阻滞剂阿米洛利(EIPA)对其细胞面积和细胞生存的影响。结果动物模型显示EIPA可以减轻再灌注心肌细胞损伤。在复氧前给予以常规剂量EIPA,虽能有效拮抗细胞挛缩,但不能阻止细胞内钙超载,故未能显著提高心肌细胞的存活率。在复氧前给予大剂量的EIPA或在缺氧/复氧全程常规剂量EIPA给药均能有效地抑制缺氧期和复氧期Ca2+浓度的上升,防止糖尿病鼠细胞内钙超载,同时拮抗细胞挛缩,显著提高细胞的存活率。结论在缺氧前或复氧前给予常规剂量或增大剂量的EIPA均能有效地拮抗心肌细胞挛缩,发挥其对心肌细胞的保护作用。

SGLT-2抑制剂对糖尿病心肌病心脏的保护作用及机制

糖尿病心肌病是一种由糖尿病引起的独立于冠心病、高血压和结构性心脏病等明确病因的特异性心肌病。糖脂代谢紊乱可导致心肌细胞氧化应激、钙离子失调、炎症及微循环障碍,进而引起心肌细胞肥大、凋亡以及功能损害,最终导致心脏结构和功能异常而发生心力衰竭。随着糖尿病发病率的逐年升高,糖尿病心肌病已成为糖尿病患者死亡的主要原因。钠-葡萄糖协同转运蛋白-2(SGLT-2)抑制剂是近年来研发的新型降糖药,其在降低血糖的同时能有效保护糖尿病患者的心脏功能。虽然SGLT-2抑制剂可单独作用于心脏,但具体机制目前尚不明确。未来还需更多的研究进一步验证SGLT-2抑制剂在心脏的作用靶点,为糖尿病心肌病的治疗提供更可靠的依据。

补中益气汤含药血清对caco-2细胞SGLT1、P38MAPK通路及NHE3表达影响的研究

目的探讨补中益气汤含药血清对人结肠腺癌细胞(caco-2细胞)钠葡萄糖共转运体蛋白1(SGLT1)、P38MAPK通路及钠-氢交换体3(NHE3)蛋白及基因表达的影响。方法根据血清药理学方法制备补中益气汤含药血清,将caco-2细胞分为正常组、根皮苷组、根皮苷+补中益气汤含药血清组和根皮苷+空白大鼠血清组。检测各组SGLT1蛋白和基因、P38MAPK/Ezrin通路蛋白和NHE3蛋白的表达。结果与根皮苷组比较,根皮苷+补中益气汤含药血清组caco-2细胞SGLT1蛋白表达有所上调(P <0.05),且呈浓度依赖关系;根皮苷+15%补中益气汤含药血清组caco-2细胞SGLT1mRNA,NHE3蛋白及P38MAPK/Ezrin通路磷酸化蛋白表达均有所增加,与根皮苷组比较差异有显著性(P <0.05);根皮苷+补中益气汤含药血清组的SGLT1mRNA及NHE3、P-P38MAPK、P-Ezrin蛋白表达均高于根皮苷+15%空白血清组,差异有统计学意义(P <0.05)。结论补中益气汤含药血清可上调caco-2细胞SGLT1的基因和蛋白表达、增加NHE3蛋白表达,这可能与其促进P38MAPK和Ezrin磷酸化有关。

自发性高血压大鼠发育过程中D_1多巴胺受体对钠-氢交换体3的调节

目的 探讨是否原发性高血压继发于多巴胺受体、G蛋白和Na+ H+ 交换体 3(NHE3)的相互作用障碍。方法 为避免第二信使的影响 ,我们采用无细胞质成分的肾小管细胞膜刷状缘进行实验 ,实验对象为高血压产生前 (2～ 3周龄 )和高血压产生后 (12周龄 )的自发性高血压大鼠 (SHR) ,研究多巴胺受体激活剂对SHR肾小管细胞膜刷状缘的NHE活性的抑制作用和对G蛋白亚基与NHE3结合的影响。结果 正常对照鼠 (WKY鼠 )NHE3活性随年龄增长而增强 ,但SHR肾NHE3活性未随年龄变化而改变。SHR与WKY鼠的D1多巴胺受体表达不受年龄影响。多巴胺D1受体激活剂对WKY肾NHE3活性的抑制能力随年龄增长而增强 ,但对SHR的抑制未随年龄变化。多巴胺D1受体激活剂 (Fenoldopam)增加WKY幼鼠Gsα/NHE3结合量与成年鼠相同 ,但使SHR幼鼠Gsα/NHE3结合量减少。结论 多巴胺D1受体激活剂对SHR中NHE3活性的抑制减少早于高血压的形成 。

钠氢交换体1对糖尿病db／db小鼠心脏钙蛋白酶和糖原合成酶激酶-3β的调节作用

目的 探讨钠氢交换体1（NHE1）抑制剂卡立泊来德（CAR）对2型糖尿病db/db小鼠心脏钙蛋白酶（Calpain）和糖原合成酶激酶3β（GSK-3β）蛋白的调节作用.方法 选取7周龄雄性C57BL/KS db/db小鼠和野生型（WT）小鼠各16只,采用随机数字表法分为4组：对照组（WT）、CAR组（WT＋CAR）、模型组（db/db）和CAR干预组（db/db＋CAR）.10周后行血流动力学检查,测定空腹血糖（FPG）、甘油三酯（TG）和胆固醇（TC）及胰岛素,计算胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）;观察心肌病理改变,测定心肌组织氧化/硝化应激反应;RT-PCR测定心肌组织磷酸烟酰胺腺嘌呤二核苷酸氧化酶p22phox和gp91phox亚基、转化生长因子β1（TGF-β1）、基质金属蛋白酶2（MMP-2）和基质金属蛋白酶9 （MMP-9）的mRNA水平.Western blotting检测心肌组织中钙蛋白酶1和2（Calpain-1和2）、钙调磷酸酶（CaN）、蛋白激酶B（AKT）和糖原合成酶激酶-3β（GSK-3β）蛋白的表达;并测定心肌Calpain和CaN酶的活性.两两比较采用t检验,组间比较采用单因素方差分析.结果（1）与db/db组比较,CAR＋db/db组小鼠FPG、TC、TG和HOMA-IR有下降趋势（t=1.213-2.112,P〉0.05）.（2）与WT组比较,db/db组心肌胶原含量、TGF-β1和MMP-2 mRNA水平明显增加,MMP-9 mRNA水平明显下降（t=3.695-4.905,P〈0.05）,而CAR干预后可逆转上述指标的改变（t=2.491-2.925,P〈0.05）.（3）CAR＋db/db组小鼠±dp/dtmax绝对值增大,LVEDP下降（t=2.865-6.404,P〈0.05）,并且小鼠心肌损伤情况明显改善.（4）与db/db组比较,CAR干预能明显改善db/db小鼠心脏组织中氧化/硝化应激,两组相比较有统计学差异（t=2.519-4.845,P〈0.05）.（5）与db/db组比较,CAR能降低db/db小鼠心肌Calpain、CaN酶活性和蛋白含量（t=2.634-3.253,P〈0.05）,还能上调p-AKT和p-GSK-3β蛋白表达（t=2.827,4.090,P〈0.05）.结论 CAR能改善db/db小鼠心脏损伤,其机制可能与CAR改善高糖高脂和胰岛素抵抗,抗氧化应激能力及调节Calpain和AKT/GSK-3β蛋白有关.

SGLT2抑制剂在心力衰竭治疗中的研究进展

心力衰竭是一种严重影响患者生命健康的疾病,目前临床推荐用药虽然有一定的治疗作用,改善了患者的症状,但死亡率依然较高,因此临床急需寻找新的药物,以改善心力衰竭患者的治疗现状。钠-葡萄糖协同转运蛋白2(SGLT2)抑制剂是一种口服降糖药物,在葡萄糖跨膜重吸收过程中起重要作用。除降糖作用外,SGLT2抑制剂有心脏保护作用,可用于心力衰竭的治疗,其能改善患者的预后,降低住院率和死亡率,提高生活质量,且伴或不伴糖尿病的心力衰竭患者均可获益。

SGLT2抑制剂舒张血管及机制的研究进展

钠葡萄糖协同转运蛋白-2(sodium-glucose co-transporter-2,SGLT2)抑制剂作为一种新型抗糖尿病药物,具有潜在的血管舒张作用。SGLT2抑制剂可能通过抑制SGLT2受体、抑制钠氢交换体、抑制血管平滑肌细胞增殖以及激活钾离子通道来调节血管张力、舒张血管。本文主要综述SGLT2抑制剂对血管的舒张作用及相关机制。

蓝花参对硫酸钠致小鼠腹泻的作用及机制

目的:初步探讨蓝花参对硫酸钠致小鼠腹泻的抑制作用及其机制。方法:采用硫酸钠造成小鼠渗透性腹泻模型。观察小鼠生理状况及第1次排黑便时间;用碳粉推进实验及腹泻指数观察低、中、高剂量(2、6、18 g/kg)蓝花参在小鼠体内胃肠道的作用;HE染色法观察小肠病理变化;PCR观察结肠AQP4、NHE3 mRNA表达变化;采用离体动物实验法观察蓝花参对小鼠离体肠道平滑肌的作用。结果:与模型组比较,蓝花参高、中、低剂量均能改善腹泻小鼠成群蜷缩、嗜睡、毛发竖立情况,显著延缓第1次排黑便时间,降低小鼠腹泻指数及小肠推进率,改善小肠病理形态,上调腹泻小鼠结肠AQP4、NHE3 mRNA表达;并能增强小鼠离体平滑肌的振幅与张力。结论:蓝花参对硫酸钠致小鼠渗透性腹泻有抑制作用,该抑制作用与乙酰胆碱受体无关,其发挥抑制作用的机理可能为增加胃肠道对水、电解质的吸收。

新药治疗功能性便秘的临床研究进展

功能性便秘(FC)是一种病因繁多、病机复杂、以排便障碍为主要症状的消化系统疾病。治疗FC的传统药物有缓泻剂和促胃肠动力类药物,但长期使用易出现大肠黑变病、心血管毒副作用和药物依赖性。目前研究显示胆汁酸调节剂Elobixibat、钠-氢交换体3抑制剂Tenapanor和葡萄糖转运体抑制剂Mizagliflozin等新药在治疗FC的临床研究中取得较好的疗效,且不良反应较少,这些新药的研发或可为临床治疗FC提供更多科学合理的治疗方案。本文就上述几种新药治疗FC的临床研究进展进行综述。

Cariporide对高脂血症引起的兔血管内皮功能损伤的保护作用

目的 :探讨选择性钠氢交换抑制剂cariporide对高胆固醇和高脂肪 (HCHF)饮食所致的兔动脉粥样硬化血管功能损伤的保护作用。方法 :将 2 2只雄性新西兰白兔随机分为 3组 :正常对照组 (n =6 )、HCHF饮食组 (n =8)、cariporide治疗组 (HCHF饮食 +cariporide ,n =8)。在HCHF饲养前和饲养后第 10周分别称重 ,抽血测血清总胆固醇浓度。第 10周后处死动物 ,取胸主动脉检测血管功能。结果 :①高脂血症兔胸主动脉对乙酰胆碱 (ACh)引起的内皮依赖性舒张 (EDR)反应明显降低 ,cariporide能明显保护HCHF血症所损伤的EDR反应。②cariporide对硝普钠所致的非内皮依赖性舒张反应无影响。③cariporide对HCHF饮食时血清总胆固醇浓度的改变无影响。结论 :cariporide对HCHF血症所致血管内皮功能损伤具有保护作用。提示HCHF饮食所致动脉粥样硬化血管功能损伤可能牵涉细胞膜钠氢交换体的活化。

新化合物TG6对心肌缺血/再灌注损伤的影响及机制研究

目的研究TG6对心肌缺血/再灌注损伤的保护作用及机制。方法采用整体大鼠心肌缺血/再灌注(I/R)实验,离体大鼠心脏低灌复灌实验和乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤(H/R)实验等模型,以血清CK、LDH、T-SOD、MDA等为指标,研究TG6对心肌缺血再灌注损伤的保护作用。结果在整体大鼠心肌缺血再灌注损伤实验中,TG6显著减少I/R损伤后心肌梗死面积,减少血清中CK活力和MDA含量,减少LDH活力,增加T-SOD活力;在离体大鼠心脏低灌复灌实验中,TG6显著增加低灌复灌后心肌冠脉流量,减少心肌组织中MDA含量和CK、LDH外漏,提高心肌组织中T-SOD活力;在乳鼠心肌细胞H/R损伤实验中,TG6对正常生长条件下的细胞没有明显影响,提高Na2S2O4制备的心肌细胞H/R模型下细胞的存活率、降低细胞CK的释放率及细胞[Ca2+]i的含量。结论 TG6对心肌I/R损伤有一定的保护作用。