金属有机框架Cu@Sc-MOF纳米酶对5'-三磷酸腺苷的比色/荧光检测

通过溶剂热法制备了一种铜/钪金属有机框架(Cu@Sc-MOF)纳米酶,在H2O2存在下,Cu@Sc-MOF可催化氧化3,3’,5,5’-四甲基联苯胺(TMB)得到蓝色氧化产物oxTMB,并在652 nm处产生特征吸收峰。同样,Cu@Sc-MOF也可氧化邻苯二胺(OPD)生成2-氨基吩嗪(DAP),并在570 nm产生特征荧光发射峰(激发波长为390 nm)。由于5’-三磷酸腺苷(ATP)与Cu2+络合,抑制了Cu@Sc-MOF的催化活性,使得652 nm处的吸光度和570 nm处的荧光强度减弱,基于Cu@Sc-MOF的类过氧化物酶活性,构建了一种用于检测ATP的比色/荧光双模式光谱法。比色和荧光分析法的线性范围分别为2.50~40.00μmol/L和1.00~22.50μmol/L,检出限(LOD)分别为0.60和0.27μmol/L。将上述比色/荧光双模式分析法用于肝癌细胞HepG2细胞裂解液中ATP的检测,加标回收率分别为92.0%~101%和93.2%~97.9%,具有良好的应用前景。

白细胞介素-1β对离体大鼠黄体细胞孕酮分泌及钠-钾三磷酸腺苷酶活性的影响

为探讨白细胞介素 -1β(IL -1β)对黄体细胞甾体激素分泌的影响及其与黄体细胞膜钠 -钾三磷酸腺苷酶 (Na+ -K+ ATPase)活性变化的关系 ,本研究以经孕马血清促性腺激素 -人绒毛膜促性腺激素 (PMSG-h CG)处理的未成年雌性 Wistar大鼠为模型 ,制备了黄体细胞悬液。用放射免疫测定 (RIA)和定磷法分别测定了 IL -1β对离体大鼠孵育的黄体细胞孕酮 (P)分泌及黄体细胞膜 Na+ -K+ ATPase活性。结果表明 ,IL-1 β(1 ng/ ml)可显著抑制离体孵育的黄体细胞基础 P及 h CG诱导的 P分泌 ,并可使黄体细胞膜 Na+ -K+ATPase活性明显降低。 IL -1β引起的 P分泌减少和 Na+ -K+ ATPase活性降低之间呈显著正相关。提示 Na+ -K+ ATPase活性降低可能是 IL-1 β抑制

三磷酸腺苷敏感性钾通道开放剂对大鼠脑缺血再灌注后神经元凋亡及天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-8表达的影响

目的 研究三磷酸腺苷敏感性钾通道(KATP)开放剂对大鼠脑缺血再灌注后神经元凋亡和天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶(caspase)-8 表达的影响.方法 200只Wistar雄性大鼠随机分为假手术组、对照组、KATP开放剂预处理组(开放剂组)及KATP开放剂+阻断剂预处理组(阻断剂组).应用线栓法制备大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型,应用原位末端标记法(TUNEL)、免疫组化染色、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测脑缺血再灌注后各组脑组织凋亡细胞数和caspase-8 mRNA及蛋白的表达.结果 (1)缺血再灌注12 h、24 h、48 h、72 h各时间点凋亡细胞数,开放剂组较对照组和阻断剂组显著减少(P＜0.05～0.01),阻断剂组与对照组间各时间点差异无统计学意义.(2)缺血再灌注12 h、24 h、48 h、72 h各时间点caspase-8蛋白表达,开放剂组显著低于对照组和阻断剂组(P＜0.05～0.01),阻断剂组与对照组间各时间点差异无统计学意义.(3)缺血再灌注各时间点caspase-8 mRNA表达,开放剂组均显著低于对照组和阻断剂组(均P＜0.01), 阻断剂组与对照组各时间点相比差异无统计学意义.结论 KATP开放剂能显著减少脑缺血再灌注后神经元凋亡和caspase-8 mRNA及蛋白的表达;KATP开放剂可能通过抑制死亡受体通路发挥脑保护作用.

筋脉通胶囊对糖尿病周围神经病变患者钠—钾—腺苷三磷酸酶活性的影响

为观察筋脉通胶囊对糖尿病周围神经病变患者钠-钾-腺苷三磷酸酶(Na^+-K^+-ATPase)活性的影响,分别设立健康人组(30例)、糖尿病非神经病变组(非DN组,19例)及糠尿病神经病变组(DN组,60例),DN组随机分为治疗组、对照组各30例,观察Na^+-K^+-ATPase、临床症状、血糖、神经传导速度等指标的变化。观察到DN患者Na^+-K^+-ATPase活性较健康人明显下降,服用筋脉通胶囊后,患者的临床症状、血糖、红细胞膜Na^+-K^+-ATPase活性、神经传导速度明显改善,在改善神经传导速度方面较对照组更具优势。初步证明筋脉通胶囊在改善DN患者的临床症状、增加神经传导速度的同时,能提高Na^+-K^+-ATPase活性。

条石鲷鳃的组织发育及鳃上钠钾三磷酸腺苷酶活性的早期变化

为完善条石鲷的早期组织发育过程,探索条石鲷仔鱼早期高死亡率的内在发育机制,实验对鳃器官的早期发育进行观察,结果显示:条石鲷仔鱼在1日龄时出现鳃原基;2日龄,原始鳃弓形成;3日龄,鳃丝原基出现;6日龄,鳃丝两侧的扁平细胞向外突出而形成原始的鳃小叶,假鳃出现;7日龄,鳃小叶基部出现泌氯细胞;8日龄,泌氯细胞开始分泌蛋白样物质;14日龄,鳃的结构分化发育完善。钠钾三磷酸腺苷酶(Na+,K+-ATPase)的相对活性从胚胎分裂期不断增加,直至器官分化期。此后活性逐渐降低,并保持在一个较低的水平,直至9日龄活性才开始上升。而12日龄之后又不断下降,到14日龄降至最低值(0.246±0.126)U/g。此后急剧上升,到18日龄升至最高值(4.731±0.309)U/g。从20日龄起,Na+,K+-ATPase的相对活性保持稳定上升,直至本次实验结束。结果表明,Na+,K+-ATPase活性的变化与鳃组织,尤其是与泌氯细胞的发育密切相关,而且在其活性较低的阶段,条石鲷仔鱼的死亡率较高。

三磷酸腺苷酶家族蛋白-2在骨肉瘤中的表达及临床意义

目的通过实验分析骨肉瘤患者样本中三磷酸腺苷酶家族蛋白-2(ATAD-2)的表达情况以及对临床诊断和治疗的意义。方法收集骨肉瘤样本以及骨肉瘤周围组织的样本,各50例,检测ATAD-2表达情况。结果骨肉瘤样本中的ATAD-2的mRNA的表达量高于骨肉瘤周围组织的样本。结论临床上发现某些组织疑似骨肉瘤且三磷酸腺苷酶家族蛋白-2表达程度较高时,可考虑患骨肉瘤的可能性较大。

甲状腺激素对心肌肌质网钙、镁-三磷酸腺苷酶活性的影响及心得安的干预作用

目的:探讨甲状腺功能亢进症的循环系统变化机制及普洛奈尔对其影响作用。方法:测定肌注L-T4及L-T4加普洛奈尔所致甲状腺功能亢进兔和对照组的心肌肌质网钙、镁-三磷酸腺苷酶活性。结果:L-T4组及L-T4加普洛奈尔组心肌肌质网钙、镁-三磷酸腺苷酶活性明显高于对照组,而且酶活性与血TT3浓度呈显性正相关,L-T4加普洛奈尔组与L-T4组的心肌肌质网钙、镁-三磷酸腺苷酶活性无明显差别。结论:甲状腺激素对心肌肌质网钙、镁-三磷酸腺苷酶活性的激活作用是不依赖于β受体的直接作用。

三磷酸腺苷二钠-氯化镁注射液的安全性试验

目的探讨三磷酸腺苷二钠-氯化镁注射液的安全性。方法根据临床用药方案,进行家兔血管壁刺激试验、溶血试验和豚鼠过敏性试验,观察三磷酸腺苷二钠-氯化镁注射液对注射部位的影响及是否产生溶血和过敏反应。结果溶血和过敏反应均为阴性;血管壁及周围组织结构未见明显刺激性反应,与对照侧比较无显著差异。结论三磷酸腺苷二钠-氯化镁注射液的安全性试验结果提示其符合注射剂要求。

糖尿病大鼠视网膜组织中钠钾离子三磷酸腺苷酶的变化及影响因素

目的:观察糖尿病大鼠视网膜组织中钠钾离子三磷酸腺苷酶(Na+-K+-ATPase)活性的变化,探讨糖尿病视网膜病变发生发展的有关因素。方法:用孔雀绿比色分析法对糖尿病大鼠发病后不同时期视网膜组织中Na+-K+-ATPase活性进行了检测,并与空腹血糖水平、糖基化血红蛋白含量、血脂、视网膜组织中Na+和K+含量及糖尿病病程的关系进行了分析。结果:糖尿病大鼠视网膜组织中Na+-K+-ATPase活性明显下降,K+含量下降,Na+含量增高。Na+-K+-ATPase活性与空腹血糖水平、糖基化血红蛋白含量、视网膜组织中K+和Na+含量及糖尿病病程密切相关。结论:老年糖尿病大鼠视网膜组织中Na+-K+-ATPase活性下降可能是其糖尿病视网膜病变的病理基础之一。

糖尿病大鼠视网膜组织中钠钾三磷酸腺苷酶活性变化的研究

目的 了解糖尿病大鼠视网膜组织中钠钾三磷酸腺苷酶活性变化 ,探索影响糖尿病视网膜病变发生发展的有关因素。方法 应用孔雀绿比色分析法对糖尿病大鼠发病后不同时期内视网膜组织中钠钾三磷酸腺苷酶活性进行了检测 ,并与空腹血糖、糖基化血红蛋白、视网膜组织中钠钾离子含量及病程进行了分析。结果 糖尿病大鼠视网膜组织中钠钾三磷酸腺苷酶活性明显下降 ,钾离子含量下降 ,钠离子含量增加。钠钾三磷酸腺苷酶活性变化与空腹血糖、糖基化血红蛋白、视网膜组织中钠钾离子含量及病程密切相关。结论 糖尿病大鼠视网膜组织中钠钾三磷酸腺酶活性下降可能是糖尿病视网膜病变的病理基础之一。

丹参酮Ⅱ_A磺酸钠对海水浸泡人肺泡上皮细胞钠钾三磷酸腺苷酶的影响

目的探讨丹参酮ⅡA磺酸钠(STS)对海水浸泡人肺泡上皮A549细胞钠钾三磷酸腺苷酶(NKA)的影响,并研究细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路在其中的作用。方法将A549细胞随机分为正常组(NG组)、STS组(STS组)、海水组(SW组)、海水+STS组(SW+STS组)、海水+STS+ERK抑制剂组(SW+STS+U0126组)。分别以海水、STS及U0126按各组要求浸泡A549细胞,通过Western blotting法检测各组NKAα1,NKAβ1,ERK1/2蛋白的表达,水解比色法检测NKA活性。结果 SW组的NKA表达及活性均较NG组明显下降,SW+STS组的NKA活性、NKAα1及NDKβ1蛋白丰度较SW组明显增高,而SW+STS+U0126组NKA活性及表达均较SW+STS组明显下降。结论STS可抑制海水浸泡A549细胞后导致的NKA活性、NKAα1及NKAβ1蛋白表达的下降,而ERK信号通路在其中发挥了一定的作用。

PI3K-Akt-eNOS信号通路在三磷酸腺苷后处理减轻兔心肌缺血再灌注损伤中的作用

目的:探讨磷酯酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B/内皮型一氧化氮合酶(PI3K-Akt-eNOS)信号通路在三磷酸腺苷(ATP)后处理减轻兔心肌缺血再灌注损伤中的作用。方法:建立兔心肌缺血再灌注模型,随机将动物分为4组:即缺血再灌注组(对照组)、ATP后处理组、磷酯酰肌醇-3激酶抑制剂(Wortmannin)+ATP后处理组(Wortmannin+ATP组)、线粒体ATP依赖性钾通道抑制剂5-羟葵酸(5-HD)+ATP后处理组(5-HD+ATP组)。再灌注结束后,苏木素伊红染色法观察心肌病理组织变化、TUNEL法检测心肌细胞凋亡指数,免疫组化方法检测心肌Bcl-2、Bax蛋白表达、Bcl-2/Bax比值及磷酸化eNOS(p-eNOS)蛋白表达。结果 :ATP后处理组心肌细胞核变小及细胞间质水肿程度较对照组明显减轻,Wortmannin+ATP组和5-HD+ATP组心肌细胞核大小及细胞间质水肿程度与对照组相似;ATP后处理组与对照组比较,心肌细胞凋亡指数明显减低,抗凋亡因子Bcl-2表达及Bcl-2/Bax比值升高,差异均有统计学意义(P<0.01);Wortmannin+ATP组和5-HD+ATP组心肌细胞凋亡指数、Bcl-2/Bax比值与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);p-eNOS蛋白阳性表达ATP后处理组较对照组和Wortmannin+ATP组显著增高,差异有统计学意义(P<0.01),与5-HD+ATP组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 :ATP后处理可能通过激活PI3K-Akt-eNOS信号通路最终作用于线粒体ATP依赖性钾通道,减少细胞凋亡,减轻兔缺血再灌注损伤。

肝X受体激动剂对人THP-1细胞三磷酸腺苷结合盒转运体A1和肝X受体α、β亚型表达的影响

目的 研究肝X受体激动剂3β- 羟基- 5α,6α- 环氧胆烷酸甲酯和进口肝X受体激动剂激动剂T 0 90 1317对THP 1细胞三磷酸腺苷结合盒转运体A1、肝X受体激动剂α和肝X受体激动剂β亚型mRNA表达的影响。方法 应用逆转录—聚合酶链反应检测- 3β- 羟基- 5α,6α- 环氧胆烷酸甲酯和T 0 90 1317作用前后THP 1细胞源性巨噬细胞三磷酸腺苷结合盒转运体A1、肝X受体激动剂α和肝X受体激动剂β的mRNA表达,免疫组织化学检测三磷酸腺苷结合盒转运体A1蛋白水平的表达。结果 3β- 羟基- 5α,6α- 环氧胆烷酸甲酯和T 0 90 1317均能显著上调THP 1细胞中三磷酸腺苷结合盒转运体A1和肝X受体激动剂α的mRNA表达(P <0 .0 1) ,并呈时间和剂量依赖性;在对肝X受体激动剂β表达的影响方面,低浓度的T 0 90 1317能明显上调肝X受体激动剂β的表达,而3β- 羟基- 5α,6α-环氧胆烷酸甲酯只有在较高浓度时(10 μmol/L)才表现出上调肝X受体激动剂β表达的作用(P <0 .0 5 )。结论 3β羟基- 5α,6α-环氧胆烷酸甲酯以激动肝X受体激动剂α为主,并与T 0 90 1317一样,可上调THP 1细胞中三磷酸腺苷结合盒转运体A1和肝X受体激动剂α的表达。

三磷酸腺苷酶家族蛋白3A、缺氧诱导因子-1在结直肠癌中的表达及与患者临床特征的关系

目的探讨三磷酸腺苷酶家族蛋白3A(ATAD3A)、缺氧诱导因子-1(HIF-1)在结直肠癌中的表达及与患者临床特征的关系。方法选取118例结直肠癌患者及100例结直肠良性病变患者,取其结直肠癌组织和良性病变组织,免疫组化法检测ATAD3A、HIF-1的表达情况,比较不同临床特征结直肠癌患者结直肠癌组织中ATAD3A、HIF-1的表达情况。相关性分析采用Pearson相关分析。结果结直肠癌组织中ATAD3A、HIF-1阳性表达率均明显高于良性病变组织,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。肿瘤直径≥5 cm、有淋巴结转移、分化程度为中低分化结直肠癌患者结直肠癌组织中ATAD3A、HIF-1的阳性表达率分别高于肿瘤直径﹤5 cm、无淋巴结转移、分化程度为高分化的患者,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。Pearson相关分析结果显示,ATAD3A的表达与HIF-1的表达呈正相关(r=0.412,P﹤0.05)。结论ATAD3A、HIF-1在结直肠癌组织中高表达,肿瘤直径≥5 cm、有淋巴结转移、分化程度为中低分化结直肠癌患者结直肠癌组织中ATAD3A、HIF-1的阳性表达率较高,可作为结直肠癌患者潜在的治疗靶点。

多腺苷二磷酸核糖聚合酶-1及乳腺癌易感基因-1在三阴性乳腺癌中的表达与意义探究

目的探讨三阴性乳腺癌(TNBC)中多腺苷二磷酸核糖聚合酶-1(PARP-1)、乳腺癌易感基因-1(BRCA-1)表达及临床意义,为相关诊断治疗提供参考。方法选取2017年1月至2021年12月单县中心医院收治的80例乳腺癌患者为研究对象进行回顾性分析,根据是否为TNBC分为观察组(TNBC)和对照组(非TNBC),每组40例。两组患者均检测BRCA-1、PARP-1表达情况,检测方法为免疫组化法。比较两组患者检测结果,并分析观察组患者BRCA-1、PARP-1表达水平与临床参数的关系。结果观察组患者BRCA-1基因表达水平低于对照组,而PARP-1表达水平高于对照组(P<0.05);观察组患者BRCA-1表达水平与年龄、淋巴结转移、TNM分期有关(P<0.05),而PARP-1表达水平与淋巴结转移、TNM分期有关(P<0.05)。结论BRCA-1、PARP-1参与乳腺癌的发生及发展,TNBC患者BRCA-1表达水平低于非TNBC患者,PARP-1表达水平高于非TNBC患者,且均与淋巴结转移、TNM分期有关,临床可重点加强对淋巴结转移、TNM分期的关注。

三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2在肺癌A549和SPC-A-1细胞株中的表达及其意义

目的探讨三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2（ABCG2）在肺癌细胞株A549和SPC—A-1中的表达及其意义。方法应用半定量逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）检测两种肺癌细胞株中该基因的表达，应用流式细胞仪检测该蛋白的表达。结果ABCG2基因与蛋白在肺腺癌细胞株A549和SPC—A-1中均有表达，且A549的表达高于SPC—A-1。结论ABCG2可能参与肺癌耐药，可能也与肺癌的发生、发展有密切相关。

大建中汤对脾阳虚腹痛大鼠大脑皮质三磷酸腺苷含量和三磷酸腺苷酶活性的影响

目的:通过观察大建中汤对脾阳虚腹痛大鼠皮质ATP含量以及钠钾ATP酶和钙镁ATP酶活性的影响,探讨大建中汤对脾阳虚腹痛大鼠的镇痛机制。方法:将大鼠随机分为正常对照组,模型对照组,大建中汤大、小剂量组。用饮食失调、劳倦过度加苦寒泻下的方法,建立脾阳虚腹痛大鼠模型后分别给予相应治疗。取大脑皮质处理后,采用高效液相色谱法测定各组大鼠皮质ATP含量的变化;采用无机磷法测定钠钾-三磷酸腺苷酶和钙镁-三磷酸腺苷酶活性。结果:与正常对照组相比,脾阳虚腹痛模型组大鼠大脑皮质ATP含量明显升高,钠钾ATP酶和钙镁ATP酶活性显著降低;与模型组相比,大建中汤能显著减少脾阳虚腹痛大鼠大脑皮质ATP含量,增加钠钾ATP酶和钙镁ATP酶活性。结论:脾阳虚腹痛症能使大脑皮质ATP含量升高,钠钾ATP酶和钙镁ATP酶活性降低,大建中汤能下调脾阳虚症动物大脑皮质ATP及上调钠钾ATP酶和钙镁ATP酶活性,这可能是其治疗脾阳虚腹痛的作用机制之一。

大鼠心房肌细胞三磷酸腺苷敏感钾通道的牵张敏感性

目的研究成年大鼠心房肌细胞三磷酸腺苷敏感钾通道(KATP)的牵张敏感性。方法应用单通道膜片钳技术在开放细胞贴附模式下记录大鼠心房肌细胞上KATP通道的电活动,并研究KATP通道对机械刺激的反应。结果根据通道的激活方式、药理学特性、I-V曲线、反转电位及整流特性,确定所记录的通道为KATP通道。进一步研究表明该通道的开放概率对负压刺激呈现强度依赖性。结论大鼠心房肌细胞上的KATP通道对牵张刺激敏感。

145例三磷酸腺苷不良反应/事件报告分析

目的:分析三磷酸腺苷不良反应发生的一般规律和特点,为临床用药提供警示。方法:采用回顾性研究方法,对2012年1月~2014年12月期间湖北省药品不良反应监测中心数据库收集的三磷酸腺苷的145例不良反应报告进行统计和分析。结果:三磷酸腺苷引起的不良反应未见性别差异,且在各年龄段均有分布;所致ADR/ADE主要累及心血管系统损害(22.12%)和呼吸系统损害(21.66%)等,严重不良反应表现为心悸、胸闷、呼吸困难和严重缺氧;部分病例存在溶媒不当、滴速过快等相关问题。结论:应加强不良反应的监测,完善该药说明书,规范临床用药,以减少ADR/ADE的发生。