脂多糖对大鼠离体肺泡Ⅱ型上皮细胞存活率及钠-钾-ATPase的影响

目的观察脂多糖对大鼠离体肺泡Ⅱ型上皮(AT-Ⅱ)细胞存活率及钠-钾-ATPase(Na-K-ATPase)活性的影响。方法AT-Ⅱ细胞分离、纯化、培养24 h后平均分为三组。Ⅰ组在培养液中加入10μg/ml脂多糖(LPS);Ⅱ组在培养液中加入100μg/ml LPS。Ⅲ组(正常对照组)加入等容积生理盐水。分别测定给予处置48、h后AT-Ⅱ细胞Na-K-ATPase的活性、培养液中乳酸脱氢酶(LDH)水平及培养24 h后的细胞存活率。结果体外培养的AT-Ⅱ细胞经LPS(10、100μg/ml)作用4 h后Na-K-ATPase活性与Ⅲ组相比显著增强,8 h后差别依然存在。培养液中的LDH浓度在经LPS作用4 h及8 h后与Ⅲ组相比差异无显著意义。Ⅰ组24 h细胞存活率明显高于Ⅲ组。而Ⅱ组24 h细胞存活率较Ⅲ组相比差异无显著意义。结论两种浓度LPS对离体AT-Ⅱ细胞Na-K-AT-Pase活性有激活作用,且无细胞毒性作用,而10μg/ml的LPS可以提高AT-Ⅱ细胞的存活率。

按摩增强琥珀酸脱氢酶和钾-钠ATP酶活性促进兔股四头肌的损伤修复

目的研究按摩对骨骼肌损伤修复关键酶琥珀酸脱氢酶(SDH)、钾-钠ATP酶(K+-Na+-ATPase)活性的影响。方法将30只雄性新西兰大白兔分为健康对照组(3只)、自然恢复组(15只)和按摩组(12只)。根据损伤造模后观察时间的不同,自然恢复组分为3个时相点,即自然恢复7 d组(3只)、按摩7 d对照组(自然恢复14 d,6只)和按摩14 d对照组(自然恢复21 d,6只),按摩组分为按摩7、14 d组(各6只)。重物打击法制作兔股四头肌急性损伤模型。HE、超声影像技术检测组织病理变化,酶组化法检测SDH酶、K+-Na+-ATPase活性。结果组织病理检测显示按摩对照组受损肌组织肿胀、萎缩退变,按摩治疗后修复或新生肌纤维明显增多。超声影像研究显示按摩对照组受损肌纤维纹理消失、回波呈弥漫性非均匀增强,按摩组回波呈弥漫均一性增强、边缘清晰。SDH和K+-Na+-ATPase活性研究结果进一步显示:按摩7 d组(0.003 3±0.000 2)vs(0.002 2±0.000 2)和14 d组(0.003 9±0.000 2)vs(0.003 2±0.000 1)较对应的按摩对照组SDH活性明显增加(P<0.01),SDH深染的Ⅰ型肌纤维数量百分比高于对应的按摩对照组[7 d组:(38.6±2.6)%vs(25.1±1.7)%,P<0.01;14 d组:(56.2±4.5)%vs(30.3±2.1)%,P<0.01];ATPase活性分别在按摩7 d组和14 d组比对应的按摩对照组升高约47%和72%(P<0.01)。结论按摩可能通过提高受损肌组织有氧代谢相关酶类活性,促进受损肌组织的修复。

PCPA失眠后大鼠不同时间大脑皮质钠-钾ATP酶和钙-镁ATP酶活性变化及酸枣仁汤的干预作用

目的研究PCPA失眠后大鼠大脑皮质不同时间大脑皮质钠-钾ATP酶和钙-镁ATP酶活性变化及酸枣仁汤的干预作用。方法采用连续3天ip对氯苯丙氨酸(PCPA)350mg·kg-1的方法建立失眠大鼠模型。动物随机分为空白对照组、模型组、5-羟色氨酸(5-HTP)组、酸枣仁汤(SZRD)治疗组、5-HTP+SZRD组、SZRD对照组和正常对照组。SZRD治疗组按15g·kg^(-1)ig 7d。各组分别在实验第4、5、6、8、10天取皮质组织,采用无机磷法同时测定钠-钾三磷酸腺苷酶(Na+/K+-ATPase)和钙-镁三磷酸腺苷酶(Ca^(2+)/Mg^(2+)-ATPase)活性。结果实验第4、5、6、8、10天PCPA失眠模型组Na^+/K^+-ATPase和Ca^(2+)/Mg^(2+)-ATPase活性均明显下降,与空白对照组相比具有显著性差异(P<0.01),实验第8天和第10天SZRD治疗组Na^+/K^+-ATPase活性明显升高,与模型组相比具有显著性差异(P<0.01);实验第8天和第10天SZRD治疗组Ca^(2+)/Mg^(2+)-ATPase的活性明显升高,与模型组相比具有显著性差异(P<0.05)。结论 PCPA所致失眠能导致大鼠皮质组织Na^+/K^+-ATPase和Ca^(2+)/Mg^(2+)-ATPase的活性明显下降,酸枣仁汤能调节PCPA失眠大鼠皮质Na^+/K^+-ATPase和Ca^(2+)/Mg^(2+)-ATPase的活性,这可能是酸枣仁汤治疗失眠症的中枢机制之一。

蒙药德都红花-7味散对慢性肝损伤大鼠肝组织SOD,MDA及肝线粒体钠钾ATP酶活性的影响

目的:观察德都红花-7味散对CCl4所致慢性肝损伤大鼠肝组织SOD,MDA及肝线粒体钠钾ATP酶活性的影响。方法:将wistar雄性大鼠,按体重随机分为空白对照组、模型组、秋水仙碱阳性对照组、德都红花-7味散低、高剂量组,共5组,每组12只大鼠。除空白对照组,其它组均腹腔注射30%CCI4橄榄油溶液2.0 mL/kg,2次/周,连续造模7周。空白对照组和模型组灌胃蒸馏水,秋水仙碱组以0.4 mg/kg,德都红花-7味散低剂、高剂量组分别以0.62 g/k g,1.04 g/kg,按2 mL/100 g,每日分2次,连续灌胃7周。末次给药后48h,10%水合氯醛0.3 mL/kg麻醉,放尽血液。迅速取出肝脏,肝左叶制备肝线粒体,肝组织匀浆,检测肝线粒体Na+-K+-ATP酶活性和肝组织匀浆SOD,MDA含量;肝右叶采用HE、Gomori、Masson方法染色,进行疗效评价。结果与空白对照组比较模型组SOD、Na+-K+-ATP酶活性明显下降,MDA含量升高,秋水仙碱组Na+-K+-ATP酶活性明显下降,有显著性差异P<0.05;与模型组比较秋水仙碱组、德都红花-7味散低、高剂量组肝组织SOD活性明显升高,MDA含量明显降低,德都红花-7味散低、高剂量组肝线粒体Na+-K+-ATP酶活性明显升高,有显著性差异P<0.05。炎症活动度及纤维化程度半定量值与模型组比较德都红花-7味散高、低剂量组炎症活动度及纤维化程度半定量值明显降低,有显著性差异,P<0.05。结论:德都红花-7味散能够明显改善CCI4引起慢性肝损伤组织病理改变,其机理可能与抗脂质过氧化,提高Na+-K+-ATP酶活性,改善肝线粒体钠泵功能有关。

电感耦合等离子体-原子发射光谱法测定苹果浓缩果汁中钾、钠、钙、镁、磷、铁、锌、铜和铅

研究了ICP-AES测定苹果浓缩果汁中K、Na、Ca、Mg、P、Fe、Zn、Cu和Pb的各种条件。样品处理方法简便,避免了待测元素的污染和损失,结果准确。检出限、精密度和准确度均符合质量管理的要求。

钠、钾干预对Dahl盐敏感大鼠肾髓质TGF-β1表达及纤维化的影响

目的观察高盐摄入及补钾对Dahl盐敏感大鼠血压、肾髓质转化生长因子-β1(TGF-β1)及纤维化水平的影响,探讨TGF-β1在盐敏感高血压形成及靶器官损害中的作用。方法 6周龄雄性Dahl盐敏感大鼠(n=24)及SS-13BN大鼠(n=24)各3组,分别给予含4g/kg NaCl(低盐组)、80g/kg NaCl(高盐组)及80g/kg NaCl+80g/kg KCl(高盐补钾组)饮食干预4周。于干预前后测量大鼠尾动脉压。采用RT-PCR和免疫组化法测定肾髓质TGF-β1的表达,并用Masson染色观察肾髓质区的纤维化。结果经4周干预,Dahl盐敏感大鼠高盐组血压较低盐组明显升高[(169.9±2.2)mmHg vs.(147.1±6.1)mmHg,P<0.01],高盐补钾组较高盐组血压明显下降[(123.6±3.8)mmHg vs.(169.9±2.2)mmHg,P<0.01]。SS-13BN大鼠高盐组较低盐组血压升高[(145.6±1.9)mmHg vs.(140.2±3.7)mmHg,P<0.05],高盐补钾组较高盐组血压下降[(125.2±2.8)mmHg vs.(145.6±1.9)mmHg,P<0.01]。Dahl盐敏感大鼠高盐组TGF-β1mRNA及蛋白表达量较低盐组明显升高(0.87±0.02 vs.0.67±0.04,P<0.01;0.136±0.002 vs.0.030±0.002,P<0.01),高盐补钾组TGF-β1mRNA及蛋白表达量较高盐组明显减少(0.55±0.04 vs.0.87±0.02,P<0.01;0.070±0.008 vs.0.136±0.002,P<0.01)。Dahl盐敏感大鼠肾小管区胶原沉积高盐组多于低盐组(0.075±0.002 vs.0.037±0.002,P<0.01),高盐补钾组则较高盐组减少(0.038±0.008 vs.0.075±0.002,P<0.01)。结论高盐可使Dahl盐敏感大鼠血压明显升高,肾髓质区TGF-β1表达明显增加及纤维化。补钾对高盐引起的血压升高及靶器官损害有保护作用。

高盐饮食对更年期焦虑小鼠海马钾离子-氯离子共转运体2、钠-钾-氯离子失转运体1表达的影响

目的研究高盐饮食对更年期焦虑症小鼠钾离子-氯离子共转运体2(KCC2)、钠-钾-氯离子共转运体1(NKCC1)表达的影响。方法将大鼠随机分为空白组、模型组、4%高盐饮食组、8%高盐饮食组。其中4%高盐饮食组、8%高盐饮食组经高盐饮食干预1个月后,HE染色观察脑部结构,免疫组织化学观察KCC2、NKCC1表达情况。结果高盐饮食使更年期焦虑小鼠海马区锥体细胞排列紊乱,神经元数目明显减少,细胞轮廓模糊,出现大量的空泡现象,细胞形态不规则,细胞间隙明显增大;模型组KCC2表达的阳性细胞明显减少,高盐饮食组阳性细胞极少;模型组NKCC1表达阳性细胞明显增多,高盐饮食组阳性细胞增多更明显。结论高盐饮食加重更年期焦虑症的发生可能与KCC2及NKCC1之间的动态平衡被打破有关。

局灶低温治疗大鼠创伤性脑水肿及其对钠-钾-ATP酶的影响

目的 观察局灶低温治疗对大鼠脑创伤后脑水肿、钠 钾 ATP酶的影响。方法 SD大鼠 84只 ,随机分成 3组 :A组 ,假手术对照组 :B组 ,脑外伤模型对照组 :C组 ,2 5°C水局灶低温治疗组。除A组外各组动物均按Feeney方法造成重度脑创伤 ,B组伤后不予治疗 ,C组伤后 30min开始给予局灶低温治疗 ,2 0～ 30min局灶脑温降至 31°C并维持 3h。各组又根据伤后观察时间长短分 1d、3d、5d、7d等四个时段亚组。所有动物分别于伤后l、3、5、7d处死 ,取伤区脑组织测水含量及钠 钾 ATP酶含量。结果 B组与A组比 ,脑组织水含量升高、钠 钾 ATP酶下降 (1、3、5、7d组均P <0 .0 5 )。C组与B组相比 ,C组水含量下降、钠 钾 ATP酶含量升高 (1、3、5、7d组均P <0 .0 5 )。结论 对大鼠脑创伤后脑水肿 ,2 5°C水局灶低温治疗有效 ,维持钠 钾 ATP酶活性可能是其作用机制之一。

ICP-AES测定岩盐中钾、钠、钙和镁的含量

用ICP-AES测定岩盐中钾、钠、钙和镁的含量,操作简便、快速,可同时测定多元素,结果准确。精密度小于2.11%,回收率为97.2%—102.0%,满足规范要求。

山莨菪碱对兔海水淹溺型肺水肿组织钠-钾-ATP酶活性的影响

目的观察山莨菪碱(654-2)对兔海水淹溺型肺水肿组织Na+-K+-ATP酶活性的影响,探讨654-2对海水淹溺型肺水肿的防治作用及可能机制。方法将35只新西兰兔随机分为对照组(5只)、淹溺组(15只)和治疗组(15只)。淹溺组和治疗组根据观察时间段分为30、60、120min组(每组5只),淹溺组采用气管切开插入塑料导管、向气管内灌海水3mL/kg、双肺自主通气的方法进行兔海水淹溺型肺水肿模型复制;治疗组在上述基础上加用654-2静脉注射。于各观察时间点采集肺组织标本,对肺组织匀浆Na+-K+-ATP酶进行测定。结果兔海水淹溺型肺水肿各时间点Na+-K+-ATP酶活性降低,动脉血气显示低氧和酸中毒,治疗组各时间点Na+-K+-ATP酶活性不同程度上升,缺氧和酸中毒改善(P<0.05)。结论654-2对兔海水淹溺型肺水肿的减轻作用可能与其能够上调肺组织Na+-K+-ATP酶活性有关。

星形胶质细胞气压损伤后钠-钾-氯共转运体及促分裂原活化蛋白激酶对AQP4表达的影响

目的探讨大鼠星形胶质细胞气压损伤后,钠-钾-氯共转运体(NKCC)、促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)对水通道蛋白-4(AQP4)表达变化的影响和相关机制。方法原代培养SD大鼠大脑皮质星形胶质细胞。实验分为正常对照组、气压损伤组、布美他尼处理组和p38-MAPK抑制剂(SB203580)处理组。布美他尼和p38-MAPK抑制剂均预处理星形胶质细胞30 min后再进行气压损伤。损伤后3 h观察细胞水肿情况,并对AQP4的表达情况进行Western blot检测。结果光学显微镜下观察到气压损伤后的星形胶质细胞较正常对照组细胞明显肿胀,布美他尼和p38-MAPK抑制剂处理组星形胶质细胞水肿较气压损伤组减轻。Western blot检测发现布美他尼处理组和p38-MAPK抑制剂处理组的AQP4表达均较气压损伤组低(P<0.05)。结论星形胶质细胞气压损伤后,AQP4表达上调受NKCC的影响,以及p38-MAPK信号途径的调节。通过抑制NKCC的活性和p38-MAPK信号途径的激活,可降低气压损伤引起的星形胶质细胞AQP4表达的上调,减轻细胞水肿。

急性心肌梗死病人hs-CRP、TNF-α及血钾、血钠水平对预后的影响

目的探讨急性心肌梗死(AMI)病人高敏C反应蛋白(hs-CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)与及血钾、血钠水平对预后的影响。方法选取108例AMI病人作为AMI组,108名正常健康人作为对照组,来我院诊治的稳定性(SA组)和非稳定性(UA组)心绞痛病人各108例。分析4组病人治疗前和治疗后1 d、2 d血清hs-CRP、TNF-α及血钾、血钠水平,全球急性冠脉事件注册(GRACE)危险评分和心肌梗死溶栓治疗临床试验(TIMI)危险评分。将治疗后30 d内死亡的AMI病人设为死亡亚组,存活者设为存活亚组,比较两组上述hs-CRP、TNF-a、GRACE评分、TIMI评分并分析血清hs-CRP、TNF-α及血钾、血钠水平与评分的相关性。结果随着时间的增加,AMI病人观测指标均有显著变化;AMI病人死亡组TNF-α、hs-CRP、TIMI及GRACE评分均显著高于存活组,而血清血钾、血钠明显低于存活组(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,血清hs-CRP、TNF-α与TIMI及GRACE评分、TIMI评分呈线性正相关;而血钾,血钠与TIMI及GRACE评分呈线性负相关。结论 AMI病人发病初期hs-CRP、TNF-α及血钾、血钠水平能较好地反映病情,并以此准确评估预后。

力竭游泳对大鼠肠组织MDA、Free-SH、ATP含量及Na^+-K^+-ATPase活性的影响

为探讨力竭性运动引起的运动性肠功能紊乱及其氧化应激损伤,将32只SD雄性大鼠随机分为4组:即对照组(C);运动后即刻组(EX);运动后30min组(EX30);运动后60min组(EX60),测定力竭性游泳后不同时相,肠组织匀浆MDA、游离巯基(Free-SH)和ATP含量。结果显示,运动后肠组织MDA含量在运动后30min,60min显著性增加(P<0.01);运动后Free-SH含量在运动后30min(P<0.05)和运动后60min后(P<0.01)显著下降;运动后30min组ATP含量显著下降(P<0.01);运动后60min,Na+-K+-ATPase活性下降。结果提示,力竭运动使肠组织自由基产生增加,自由基使得肠组织中游离巯基氧化,致使ATP含量下降,Na+-K+-ATPase活性下降可能是造成运动性肠功能紊乱的重要因素之一。

白细胞介素-1β对离体大鼠黄体细胞孕酮分泌及钠-钾三磷酸腺苷酶活性的影响

为探讨白细胞介素 -1β(IL -1β)对黄体细胞甾体激素分泌的影响及其与黄体细胞膜钠 -钾三磷酸腺苷酶 (Na+ -K+ ATPase)活性变化的关系 ,本研究以经孕马血清促性腺激素 -人绒毛膜促性腺激素 (PMSG-h CG)处理的未成年雌性 Wistar大鼠为模型 ,制备了黄体细胞悬液。用放射免疫测定 (RIA)和定磷法分别测定了 IL -1β对离体大鼠孵育的黄体细胞孕酮 (P)分泌及黄体细胞膜 Na+ -K+ ATPase活性。结果表明 ,IL-1 β(1 ng/ ml)可显著抑制离体孵育的黄体细胞基础 P及 h CG诱导的 P分泌 ,并可使黄体细胞膜 Na+ -K+ATPase活性明显降低。 IL -1β引起的 P分泌减少和 Na+ -K+ ATPase活性降低之间呈显著正相关。提示 Na+ -K+ ATPase活性降低可能是 IL-1 β抑制

三甲基氯化锡对脉络丛钠-钾-ATP酶活性的影响

目的研究三甲基氯化锡(trimethyltin chloride,TMT)对大鼠脉络丛上皮细胞钠-钾-ATP酶(NKA)活性的影响。方法取SPF级SD雌性大鼠,TMT 10mg/kg腹腔注射染毒,染毒后1、24、36、48、72 h处死,分别测定血钾、脉络丛NKA活性、脑脊液(CSF)电解质和葡萄糖(GLU)浓度,并在光镜下观察脉络丛上皮细胞形态。结果染毒动物出现低血钾,并伴有神经损害症状。染毒动物脉络丛NKA的活性显著下降,与血钾浓度变化一致。染毒24、36 h动物CSF中GLU升高,而染毒48、72 h动物CSF中钾显著下降。光镜下未发现脉络丛上皮细胞形态异常。结论 TMT可抑制脉络丛上皮NKA的活性,引起CSF电解质失衡,这可能是TMT引起中枢神经系统损伤的机制。

肺泡上皮细胞钠-钾ATP酶与海水淹溺型肺水肿

钠-钾ATP酶(Na^+-K^+-ATPase)对于维持胞质渗透压和细胞容积的相对稳定以及细胞内pH的稳定具有重要的生理意义。肺泡上皮具有阻止液体进入肺泡腔内和主动清除肺泡腔内液体的作用,是抵抗肺泡性肺水肿形成的一道重要屏障。这一功能的完成有赖于Ⅱ型肺泡上皮细胞对钠离子的主动转运和分布于Ⅰ型、Ⅱ型肺泡上皮细胞的特殊水通道,而钠离子的主动转运依靠钠-钾ATP酶来完成。海水淹溺型肺水肿(PE-SWD)是以低氧血症及代谢性酸中毒为主要病理生理学特点的临床病症。PE-SWD发生时,Na^+-K^+-ATPase活性的改变直接影响到细胞膜外Na^+、K^+、等离子的浓度和分布,既是造成PE-SWD发生的多种因素所引起的直接恶果,又是促进PE-SWD不断发生的继发性原因。因此认识肺泡上皮细胞钠-钾ATP酶在PE-SWD发病中的作用对于PE-SWD的治疗具有重要意义。本文就钠-钾ATP酶的功能、结构、调节机制及钠-钾ATP酶在PE-SWD发病中的作用作一综述。

大面积烧伤患者早期红细胞变形能力与红细胞膜胆固醇、钠-钾ATP酶的关系

目的 研究大面积烧伤患者早期红细胞变形能力与红细胞膜胆固醇、钠钾 ATP酶的变化。探讨其在大面积烧伤早期中的关系。方法 采用核孔滤膜法测定红细胞变形性 ,使用化学修饰电极测定红细胞膜胆固醇 ,应用定磷法测定红细胞膜钠 -钾 ATP酶。结果 47例大面积烧伤患者早期红细胞变形性低于 60例正常对照组 (P<0 .0 1 ) ,红细胞膜胆固醇、钠 -钾 ATP酶均高于正常对照组 (P<0 .0 1 ) ,且红细胞膜胆固醇、钠钾 ATP酶与红细胞变形性呈负相关 (rcho=- 0 .871 ,r ATPase=- 0 .80 1 )。结论 大面积烧伤早期红细胞变形性明显减低是导致大面积烧伤患者早期的血液粘度和微循环改变的原因之一 ,红细胞膜胆固醇和钠钾 ATP酶则是引起红细胞变形性减低的重要因素。

Kyoto-1保存液保存的移植用肺Ⅱ型肺泡上皮细胞钠-钾泵的研究

目的 临床认为肺水肿已成为肺移植过程中的最大障碍 ,近年来资料表明 :过量肺泡液的吸收与 型肺泡上皮细胞 Na+的跨膜能力有关 ,保存中若能保持肺上皮 Na+- K+- ATPase的活性 ,对成功的肺移植是非常必要的 ,本实验研究0℃、 4℃ Kyoto- 1(New ET- K)保存液保存供体肺脏 , 型肺泡上皮细胞 Na+- K+- ATPase的活性变化 ,为 Kyoto- 1在临床上最大时限地保存供体肺提供基础理论依据。方法 取 Wistar大白鼠 ,随机分为对照组和实验组 ,对照组取新鲜肺脏 ,实验组分别灌注 0℃、 4℃的 Kyoto- 1保存液 ,分别放入 0℃、 4℃冰箱中保存 4h、 2 4h、 48h,进行光、电镜酶组织化学研究 ,使用图像分析系统进行定量测定。结果 4℃、 2 4h实验组钠泵活性可以得到较好的保存 (P>0 .0 5 )。结论 钠泵可以作为检测供肺保存质量的重要指标。

雾化吸入氟化碳对脂多糖性肺损伤大鼠肺内AQP-1及钠钾ATP酶活性的影响

目的观察雾化吸入氟化碳(perfluorocarbon,PFC)对急性肺损伤(acute lung injury,ALI)大鼠肺水肿、肺内水通道蛋白-1(AQP-1)及钠钾ATP酶活性的影响。方法大鼠腹腔注射脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)建立ALI模型并雾化吸入PFC进行干预。在LPS注射后6h观察PFC对ALI大鼠动脉血气、肺损伤评分、肺湿干质量比值、肺泡通透指数及钠钾ATP酶活性等的影响,并采用western-blot观察肺内AQP-1表达的变化。结果LPS性肺损伤以肺水肿为主要表现之一。雾化吸入PFC可以缓解LPS诱导ALI后的低氧血症,降低ALI大鼠的肺损伤评分、肺湿干质量比值、肺泡通透指数,同时增加肺组织钠钾ATP酶活性及AQP-1的表达。结论雾化吸入PFC减轻LPS性肺损伤大鼠肺水肿,上调肺损伤期间钠钾ATP酶活性与AQP-1表达。