高胰岛素-正葡萄糖钳夹实验评价Roux-en-Y胃旁路术对2型糖尿病患者胰岛素抵抗的改善作用

目的:随着人们生活水平的提高,2型糖尿病患者逐年增加,疾病给社会和患者带来了极大的经济和生活负担。目前已证实减重手术(Roux-en-Y胃旁路手术)能改善糖尿病患者的代谢指标从而使患者获益,但具体机制仍在研究中。本研究旨在运用高胰岛素-正葡萄糖钳夹实验评估腹腔镜Roux-en-Y胃旁路术对改善2型糖尿病患者胰岛素抵抗的作用。方法:通过高胰岛素-正葡萄糖钳夹实验分析40例行腹腔镜Roux-en-Y胃旁路术患者术前及术后6个月的外周葡萄糖利用率(M值),同时比较术后6个月和术前空腹血糖、糖化血红蛋白、三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇水平及体重指数等指标的变化。结果:腹腔镜Roux-en-Y胃旁路术后患者的外周葡萄糖利用率较术前明显升高,空腹血糖、糖化血红蛋白、三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇水平及体重指数等指标较术前下降(均P<0.05)。结论:腹腔镜Roux-en-Y胃旁路术显著改善2型糖尿病患者的胰岛素抵抗,降低血糖、血脂等指标,对2型糖尿病的治疗效果肯定。

大鼠清醒和麻醉状态下胰岛素钳夹实验结果的比较

目的 探讨苯巴比妥麻醉对正常大鼠体内胰岛素作用的影响。 方法 在 9只清醒和 9只麻醉的大鼠身上运用正常血糖胰岛素钳夹技术分别进行正常血糖胰岛素钳夹试验 (胰岛素注入率 6 .0mU/ (kg·min)。两组的体重、空腹血糖及胰岛素水平都是相同的。 结果 在胰岛素钳夹过程中 ,两组的血糖及胰岛素浓度都维持于同一水平。在胰岛素钳夹试验的后 6 0～ 90min的稳定期 ,麻醉组大鼠的葡萄糖清除率明显低于清醒大鼠 [14 .3± 0 .7vs2 5 .1± 2 .9mg/ (kg·min) ,P <0 .0 1],葡萄糖代谢率也显示了同样的结果。 结论 麻醉状态影响了正常大鼠的胰岛素感受性。

黄芪多糖对高脂喂养肥胖大鼠胰岛素敏感性的影响

目的建立肥胖胰岛素抵抗(IR)大鼠模型,观察黄芪多糖(APS)对肥胖大鼠胰岛素抵抗的影响。方法选用健康雄性Sprague-Dawley大鼠50只,随机分为正常对照组(n=10)和肥胖组(n=40)。分别给予普通饲料和高脂饲料喂养。5周后再将肥胖组大鼠随机分为4组:模型对照组、低剂量APS组[200 mg/(kg.d)]、中剂量APS组[400 mg/(kg.d)]和高剂量APS组[800 mg/(kg.d)],每组10只。正常对照组、模型对照组采用生理盐水灌胃,各APS组给予不同剂量APS灌胃2周。采用高胰岛素-正葡萄糖钳夹实验测定葡萄糖输注率(GIR),同时检测血糖、血脂和胰岛素水平。结果①肥胖组大鼠体重较正常对照组体重明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。②与正常对照组比较,模型对照组大鼠血浆甘油三酯、总胆固醇、血糖及胰岛素水平显著增高(P<0.05);与模型对照组比较,低、中剂量APS组相关指标显著改善,差异有统计学意义(P<0.05)。③高胰岛素-正葡萄糖钳夹显示,各肥胖组大鼠GIR较正常对照组显著降低(P<0.05);与模型对照组比较,中剂量APS组可显著提高肥胖大鼠的GIR(P<0.05),低剂量和高剂量APS组GIR也增高,但无统计学意义(P>0.05)。结论①5周的高脂膳食使大鼠体重明显增加,高胰岛素-正葡萄糖钳夹实验证实高脂膳食诱导的SD大鼠IR模型成立;②APS可改善肥胖大鼠胰岛素敏感性,增加IR大鼠GIR。

高脂饮食诱发胰岛素抵抗大鼠模型的建立与评价

目的建立饮食性胰岛素抵抗大鼠模型及评价方法。方法高脂饲料喂养不同年龄和体质量Wistar大鼠,4周后检测血糖、血脂、游离脂肪酸和胰岛素水平并行高胰岛素-正葡萄糖钳夹实验。结果青年高脂组较青年对照组、老年对照组较老年高脂组相比,高脂喂养大鼠体质量虽有所增加,但差异无统计学意义(P均>0.05)。青年高脂组与青年对照组、老年高脂组与老年对照组、老年对照组与青年对照组及老年高脂组与青年高脂组相比,血清总胆固醇、血清甘油三酯及空腹胰岛素升高,空腹血糖升高,葡萄糖输注率下降,有显著性差异(P<0.05或0.01)。结论高脂饲料喂养青年和老年大鼠,均可成功建立胰岛素抵抗大鼠模型,钳夹实验用于胰岛素抵抗大鼠模型的评价更准确、可靠。年龄和体质量因素与胰岛素抵抗有关。

构建伴高血压与胰岛素抵抗的大鼠模型

目的:研究表明,长期食用以脂肪为代表的高热量饮食可导致胰岛素抵抗,而高盐饮食和高血压的发生密切相关。以高脂高盐饮食诱导Wistar大鼠建立伴高血压与胰岛素抵抗大鼠模型。方法:实验于2006-10/2007-03在泰山医学院生命科学研究所完成。①实验分组:选用SPF级雄性Wistar大鼠24只,8周龄,体质量140g左右,随机数字法将大鼠分为对照组和胰岛素抵抗组,每组12只。②实验方法:实验大鼠适应性饲养7d后,对照组继续以普通标准大鼠饲料喂养,胰岛素抵抗组则以高脂饲料取代普通标准大鼠饲料喂养,两组均饮用大鼠专用纯净水,共16周。③实验评估:实验过程中每周测食量、水量和体质量,每4周测1次空腹血糖和尾动脉血压,实验结束前,取血测空腹血浆胰岛素并进行高胰岛素-正常血糖钳夹实验判定胰岛素敏感性。结果:24只大鼠全部进入结果分析。①实验前8周两组大鼠食量差异无显著性意义(P>0.05),8周后胰岛素抵抗组食量较对照组有所下降(P<0.05);实验全程中胰岛素抵抗组饮水量高于对照组(P<0.01);两组大鼠体质量差异无显著性意义(P>0.05)。②喂饲高脂高盐饲料16周后,与对照组相比,胰岛素抵抗组尾动脉血压升高(P<0.01);葡萄糖输注速率降低(P<0.05);胰岛素抵抗组空腹胰岛素浓度高于对照组(P<0.05);两组空腹血糖差异无显著性(P>0.05)。结论:长期高脂高盐饮食可成功诱导出伴高血压胰岛素抵抗大鼠模型。

伴高血压2型糖尿病大鼠模型的建立

目的制备与人类发病过程类似的伴高血压2型糖尿病大鼠模型。方法选择40只SPF级雄性Wistar大鼠随机分为对照组12只和实验组28只,对照组以标准大鼠饲料饲喂,实验组以高脂高盐饲料喂养,两组均饮用大鼠专用去离子水,16w进行正糖钳实验,确定胰岛素抵抗,腹腔注射链脲佐菌素(STZ)造成2型糖尿病。实验过程中每周测食量、水量和体重,每4w测血糖和尾动脉血压,实验16w时取血测空腹血浆胰岛素。结果饲喂高脂高盐饲料16w后,与对照组相比,实验组尾动脉血压明显升高,差异显著(P<0.01);实验组空腹胰岛素浓度明显高于对照组(P<0.01);与对照组相比,实验组葡萄糖输注速率明显降低,两组差异有统计学意义;STZ注射后实验组血糖明显升高,达到了糖尿病的诊断标准。结论高脂高盐饮食配合STZ腹腔注射可成功诱导出伴高血压2型糖尿病大鼠模型。

糖脂平胶囊对胰岛素抵抗大鼠蛋白激酶B表达的影响

目的:研究中药糖脂平胶囊对胰岛素抵抗(IR)模型大鼠肌肉胰岛素信号转导系统基因蛋白激酶B(Akt/PKB)表达的影响。方法:高脂饲料建立IR大鼠模型,以糖脂平胶囊、罗格列酮观察,8周后测定空腹血糖(FBG)、胰岛素(INS)、葡萄糖输注率(GIR)。取骨骼肌进行PCR扩增,观察Akt/PKB表达情况。结果:经钳夹鉴定IR模型建立。模型组FBG较正常组明显升高(P<0.01),与中药组和西药组相比均有统计学意义(P<0.05)。西药组GIR较中药组更为明显(P<0.01,P<0.05)。OD值中药组(93.33%)比西药组(87.42%)高5.91%。结论:中药和西药组均能缓解高胰岛素状态,改善高脂诱导IR大鼠糖代谢。中药组在骨骼肌AKt/PKB传导通路表达方面,较西药组敏感,可增强胰岛素生物效应,并改善IR。

非诺贝特联合替米沙坦对高脂饲养大鼠胰岛素抵抗的影响

目的探讨非诺贝特、替米沙坦及两者联合应用对高脂饲养大鼠胰岛素抵抗(IR)的影响。方法将60只雄性Wistar大鼠随机分为普通饮食组(NC组)12只,高脂饮食组(HF0)48只。6周后,将高脂组随机分为非诺贝特组(F组)、替米沙坦组(T组)、联合组(F+T组)和高脂对照组(HF组),各12只。4周后,高胰岛素正常葡萄糖钳夹技术测定葡萄糖输注率(GIR)评价胰岛素敏感性。结果与NC组比较,HF组的GIR显著降低(P<0.01)。与HF组比较,F组的GIR显著升高(P<0.01);T组的GIR显著升高(P<0.01);F+T组的GIR显著升高(P<0.01)。结论非诺贝特、替米沙坦及联合应用可以明显增加胰岛素敏感性。

以自发性大鼠模型评价胰岛素增敏剂药效时的初步探讨

目的研究自发性Zucker fa/fa(ZF)大鼠评价胰岛素增敏剂药效时需要注意的问题,确定入组标准、检测指标、评价标准。方法20只雄性ZF大鼠按照体质量均一原则分为模型对照组和罗格列酮组(每组10只),10只Zucker fa/?大鼠设为正常对照组。罗格列酮组以胰岛素增敏剂罗格列酮作为阳性药物,6mg/kg灌胃给药;模型对照组和正常对照组给予水。结果罗格列酮能明显降低大鼠的血清胰岛素、甘油三酯及游离脂肪酸水平(P<0.05);高胰岛素-正常血糖钳夹实验结果表明,能明显提高罗格列酮组大鼠的葡萄糖输注率与胰岛素敏感指数(P<0.05)。胰腺病理组织学检查表明罗格列酮能缓解大鼠胰岛细胞的增生肥大。结论以ZF大鼠模型评价胰岛素增敏剂药效时,选用7～8周龄自发性ZF雄性大鼠,以空腹胰岛素水平高于4ng/ml为纳入标准,以甘油三酯、游离脂肪酸及血清胰岛素水平与高胰岛素-正常血糖钳夹实验结果为评价指标,由此方法建立的动物模型可用于评价胰岛素增敏剂的药效作用。

4-苯基丁酸钠缓解大鼠开胸手术后胰岛素抵抗

目的研究骨骼肌内质网应激对大鼠开胸手术后胰岛素抵抗的影响。方法建立大鼠开胸手术模型，采用随机数字表法将24只SD大鼠分为4组（每组6只）：对照组、4．苯基丁酸钠（4-phenyl butyric acid，4-PBA）组、手术组、4-PBA＋手术组。手术次日抽血检测血清游离脂肪酸，行高胰岛素-正常血糖钳夹实验，记录葡萄糖输注速率（glucose infusion rate，GIR）。取比目鱼肌检测内质网应激标志蛋白（重链结合蛋白（binding immunoglobulin protein，BiP）]。结果术后手术组大鼠血清游离脂肪酸、血糖、胰岛素、高胰岛素-正常血糖钳夹实验GIR及BiP的表达显著高于对照组、4-PBA组和4-PBA＋手术组（P〈0．05）。结论内质网应激参与了大鼠开胸手术术后的胰岛素抵抗，内质网应激抑制剂4-PBA可以缓解术后引起的胰岛素抵抗。

替米沙坦与非诺贝特对高脂饮食大鼠血清脂联素水平的影响

目的研究替米沙坦与非诺贝特对高脂饮食大鼠血清脂联素(APN)水平的影响。方法从60只健康雄性Wistar大鼠中随机抽出12只给予普通饲料喂养,其余48只给予高脂饲料喂养。6周后,再将高脂饲料喂养的48只大鼠随机分为4组,每组12只,其中1组继续给予高脂饲料喂养,其余3组在继续给予高脂饲料喂养同时分别给予替米沙坦、非诺贝特和2种药物联合干预。4周后,比较5组大鼠的血清APN水平。结果高脂饮食组大鼠血清APN水平低于普通饮食组;替米沙坦和非诺贝特组均高于高脂饮食组;替米沙坦与非诺贝特联合干预组高于单独用药组。结论替米沙坦与非诺贝特可以改善高脂饮食大鼠血清APN水平,且联合用药效果更明显。

十二指肠-空肠转流手术对2型糖尿病大鼠胰岛素抵抗的改善作用

目的建立十二指肠-空肠转流手术(duodenal-jejunal bypass surgery,DJB)动物模型,观察术后GK大鼠胰岛素抵抗情况的变化,研究DJB手术治疗2型糖尿病的机理。方法雄性Wistar大鼠为空白对照组;雄性GK大鼠分为模型对照组和DJB手术组。分别于手术后3、6和9周每组随机抽取6只动物进行高胰岛素-正葡萄糖钳夹实验;钳夹实验结束后1周,检测肝脏Gc K、G6P以及PEPCK mRNA表达情况以及骨骼肌细胞膜GLUT4含量变化。结果术后3周和6周,DJB手术组动物的葡萄糖输注率(GIR)较模型对照组差异无显著性(P>0.05),肝脏Gc K、G6P以及PEPCK mRNA表达量较模型对照组差异无显著性(P>0.05);术后9周,DJB手术组动物的葡萄糖输注率(GIR)显著高于模型对照组(P<0.05),肝脏Gc K表达量DJB手术组显著高于模型对照组(P<0.05),而G6P以及PEPCK mRNA表达量显著低于模型对照组(P<0.05);DJB手术后3、6和9周,DJB手术组骨骼肌细胞膜GLUT4的含量较模型对照组差异无显著性(P>0.05)。结论 DJB手术改善血糖的水平是通过改善体内肝脏组织的胰岛素抵抗,通过调节糖代谢酶的表达,进而提高肝脏葡萄糖摄取并抑制肝脏糖异生作用。在实验周期内,DJB手术对于骨骼肌组织的胰岛素抵抗未发现有明显改善,提示DJB手术治疗2型糖尿病的效果与时间有一定关系。

吡格列酮对Zucker fa/fa大鼠模型药效学初步研究

目的探讨吡格列酮对自发性Zucker fa/fa大鼠药效的检测指标及评价标准。方法将45只雄性Zucker fa/fa大鼠按体重均一原则分为正常对照组、模型对照组和吡格列酮组(每组各15只)。吡格列酮组以吡格列酮作为处理因素,8mg.kg-1灌胃给药;正常对照组和模型对照组则给予相应剂量的生理盐水。每天1次,连续3周。给药前及给药期间每周监测1次空腹胰岛素水平;给药前及给药3周后测定总胆固醇、甘油三酯及游离脂肪酸并行正常血糖-高胰岛素钳夹实验。结果吡格列酮能明显降低血清胰岛素、甘油三酯及游离脂肪酸水平(P<0.05);正常血糖-高胰岛素钳夹实验结果表明,能明显提高吡格列酮组大鼠的葡萄糖输注率与胰岛素敏感指数(P<0.05)。结论可将甘油三酯、游离脂肪酸及血清胰岛素水平与高胰岛素-正常血糖钳夹实验结果为评价指标,用于自发性ZF大鼠模型评价吡格列酮的药效作用。

降糖消脂片对胰岛素抵抗大鼠的实验研究

目的:探讨降糖消脂片改善胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)及降脂的作用。方法:采用高脂饲料喂养Wistar大鼠1个月,建立IR大鼠模型。70只大鼠分为模型对照组、阳性药吡格咧酮组5 mg·kg-1、阳性药辛伐他汀组4 mg·kg-1、降糖消脂片剂量分别为生药8,4,2 g·kg-1,10只/组,连续灌胃给药(ig)2个月,同时继续高脂饲料喂养,普通饲料组为正常对照组。分批进行高胰岛素-正葡萄糖钳夹实验(正糖钳实验)。实验结束后,取血测定总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、游离脂肪酸(FFA)等指标。取肝和胰腺称重,计算脏器指数,并作病理切片,观察其形态变化。结果:模型组葡萄糖输注率(GIR)明显低于正常组,显示模型组大鼠存在明显的IR;降糖消脂片高、中剂量组的GIR比模型组明显增加,IR明显改善;降糖消脂片各剂量组TG下降极其明显;高剂量组TC比模型组明显降低、HDL-C明显增高、LDL-C明显降低;降糖消脂片各剂量组SOD明显升高、MDA明显降低;高剂量组肝脏指数与模型组比较有所下降。降糖消脂片各剂量组肝脏、胰腺的病理变化有不同程度的减轻。结论:降糖消脂片具有明显的改善IR及降脂作用。

黄芪多糖对肥胖大鼠胰岛素敏感性的影响

目的探讨黄芪多糖(APS)改善胰岛素敏感性的作用机制。方法以高脂饮食诱导的肥胖大鼠为观察对象,吡格列酮为阳性对照,以胰岛素钳夹实验评价胰岛素敏感性,观察黄芪多糖(APS)对葡萄糖输注率(SSGIR)及血浆代谢指标、抵抗素(resistin)和脂联素(adiponectin,APN)的影响。结果和正常对照组(NC组)比较,高脂对照组(HFC组)、吡格列酮组(Pio组)、黄芪多糖组(APS组)的SSGIR、APN降低,而空腹胰岛素(FINS)、游离脂肪酸(FFA)、抵抗素升高,差异有显著意义(P<0.05);和HFC组比较,Pio组、APS组的SSGIR、APN升高,而FINS、FFA、抵抗素减低,差异有显著意义(P<0.05)。肥胖大鼠FFA、FINS、抵抗素、APN和SSGIR之间进行线性相关分析,上述指标两两之间均存在显著的相关性(P<0.05)。结论高脂饲料诱导的肥胖大鼠体内存在胰岛素抵抗,血浆FFA、抵抗素水平升高而APN水平降低;APS可以改善其胰岛素敏感性,这种作用和降低血浆FFA、抵抗素及升高APN有关。

消膏转浊方对肥胖型非酒精性脂肪肝大鼠胰岛素抵抗的影响

目的观察消膏转浊方对肥胖型非酒精性脂肪肝大鼠胰岛素抵抗的影响。方法将40只Wistar大鼠随机分为5组。正常组以标准饲料喂养;其余组大鼠饲以高脂饲料。8周后,消膏转浊方组以及罗格列酮组改为普通饲料喂养,同时给予药物治疗。饮食控制组改为普通饲料喂养,共12周。于禁食次日进行钳夹实验,并计算葡萄糖输注率(GIR)。实时荧光定量PCR方法检测大鼠肝脏胰岛素受体(InsR)和胰岛素受体底物-2(IRS-2)的基因表达。结果与模型组比较,消膏转浊方组与罗格列酮组均能够显著提高肥胖型非酒精性脂肪肝大鼠的GIR(P<0.01),其InsR mRNA、IRS-2 mRNA的表达均显著高于模型组(P<0.01)。结论消膏转浊方通过增加肝脏组织InsR以及IRS-2的表达来改善胰岛素抵抗状态。

消膏转浊方对肥胖型非酒精性脂肪肝大鼠脂质过氧化反应与胰岛素抵抗的影响

目的:观察消膏转浊方对高脂饲养的肥胖大鼠脂质过氧化反应以及胰岛素抵抗(IR)的影响。方法:将Wistar雄性大鼠随机分为正常组、模型组、消膏转浊组、罗格列酮组及饮食控制组。正常组以标准饲料喂养,其余组的大鼠饲以高脂饲料。8周后,正常组饮食同前;模型组继续高脂喂养;消膏转浊组及罗格列酮组改为普通饲料喂养,同时给予相应的药物干预;饮食控制组改为普通饲料喂养。干预12周后,检测大鼠葡萄糖输注率(GIR),肝匀浆中FFA、MDA、SOD的含量,检测肝细胞色素P4502E1的蛋白表达,以及肝脏CYP2E1、胰岛素受体(InsR)和胰岛素受体底物-2(IRS-2)的基因表达。结果:与模型组比较,消膏转浊组可以显著降低大鼠肝组织匀浆中的FFA、MDA含量(P<0.01),同时提高SOD活性(P<0.01);消膏转浊组与罗格列酮组均能够显著提高肥胖型非酒精性脂肪肝大鼠的GIR(P<0.01);消膏转浊组肝细胞中CYP2E1染色阳性的细胞面积和MOD值、CYP2E1 mRNA的表达均显著低于模型组(P<0.01);同时,消膏转浊组与罗格列酮组InsR mRNAI、RS-2 mRNA的表达均显著高于模型组(P<0.01)。结论:高脂饮食可以引起大鼠肝脏脂质过氧化反应以及胰岛素抵抗状态,消膏转浊方可减少肝脏脂质过氧化反应以保护肝脏;同时消膏转浊方通过增加肝脏组织InsR以及IRS-2的表达来改善胰岛素抵抗状态。

4-苯基丁酸钠缓解大鼠开胸手术后胰岛素抵抗

目的 研究骨骼肌内质网应激对大鼠开胸手术后胰岛素抵抗的影响。 方法 建立大鼠开胸手术模型，采用随机数字表法将24只SD大鼠分为4组（每组6只）：对照组、4-苯基丁酸钠（4-phenyl butyric acid, 4-PBA）组、手术组、4-PBA＋手术组。手术次日抽血检测血清游离脂肪酸，行高胰岛素-正常血糖钳夹实验，记录葡萄糖输注速率（glucose infusion rate, GIR）。取比目鱼肌检测内质网应激标志蛋白［重链结合蛋白（binding immunoglobulin protein, BiP）］。 结果 术后手术组大鼠血清游离脂肪酸、血糖、胰岛素、高胰岛素-正常血糖钳夹实验GIR及BiP的表达显著高于对照组、4-PBA组和4-PBA＋手术组（P〈0.05）。 结论 内质网应激参与了大鼠开胸手术术后的胰岛素抵抗，内质网应激抑制剂4-PBA可以缓解术后引起的胰岛素抵抗。

替米沙坦对胰岛素抵抗大鼠早期炎症因子IL-6及血脂的影响研究

目的采用替米沙坦对胰岛素抵抗大鼠进行干预,观察其对胰岛素抵抗大鼠心肌早期炎症因子IL-6及血脂的影响。方法建立大鼠胰岛素抵抗模型,应用替米沙坦进行干预。生化检测血清胰岛素及血脂水平,免疫组化法检测心肌IL-6水平,所有资料以SPSS13.0统计软件进行分析,连续性计量资料,数据以士s表示,两组间的比较采用t检验。结果葡萄糖输注率:干预组明显高于非干预组而仍明显低于对照组(P<0.05);血脂:非干预组TC、TG、LDL-C更加明显高于对照组,高于干预组,HDL-C则相反(P=0.00 0.05);炎症因子IL-6的表达:试验中在空白对照组心肌中未见表达,干预组与未干预组间相比有显著性差异(P<0.05)而与空白对照组间无统计学差异。结论胰岛素抵抗状态下大鼠心肌IL-6表达增强;ARB除了具有控制血糖及降低血脂的作用,同时能改善胰岛素抵抗状态;ARB可以改善胰岛素抵抗状态的慢性炎症反应。