低碳醇在钾A型分子筛上的吸附脱水

低碳醇脱水是低碳醇分离的重要组成部分。本文在实验的基础上，描述了低碳混合醇在钾Ａ型分子筛上脱水的动态吸附特性．为理论研究和工程设计提供必要的依据。

小鼠螺旋神经节神经元的分离和A型钾通道的电生理特性

目的机械分离并酶解小鼠耳蜗螺旋神经节神经元(SGN)细胞,观察其A型钾通道的电生理特性。方法对生后1～6d的小鼠耳蜗螺旋神经节组织进行机械分离并酶解,对SGN进行免疫细胞化学染色鉴定,并利用全细胞膜片钳技术记录和分析A型钾通道电流。结果新生小鼠SGN在机械分离和酶解条件下,可以获得良好的细胞形态。SGN的A型钾通道在-60mV时激活,+40mV时失活,能被细胞外的4-氨基吡啶阻滞。结论成功建立了机械分离并酶解SGN细胞的方法,SGN的A型钾通道具有激活快、失活快的特点。

A型钾通道Kv1.4在致痫大鼠海马区的表达

目的通过检测A型钾通道Kv1.4在戊四唑(PTZ)致痫大鼠海马CA1、CA3及齿状回区的表达变化,探讨A型钾通道与癫痫发病的关系。方法 SD大鼠40只,随机分为对照组、致痫后1h、24h、72h组,每组各10只。腹腔注射PTZ制备大鼠癫痫模型,应用免疫组化及Western Blot技术检测Kv1.4在各时间段海马CA1、CA3及齿状回区的蛋白表达。結果致痫组大鼠海马区Kv1.4蛋白水平在致痫后1h、24h、72h 3个时间段均明显低于正常组(P<0.05);各致痫组之间Kv1.4蛋白水平均无明显差异(P>0.05)。结论 (1)A型钾通道Kv1.4在SD大鼠海马中广泛分布,表达丰富,以轴突处最为明显。(2)大鼠癫痫模型海马区A型钾通道Kv1.4蛋白表达减少,提示Kv1.4的表达下调可能与癫痫的发病相关。

酪胺对小鼠三叉神经节神经元A型钾通道的影响

目的:探讨酪胺对小鼠三叉神经节神经元细胞膜电压依赖性钾通道电流及其兴奋性的影响。方法:急性分离小鼠三叉神经节神经元,采用全细胞膜片钳技术测定不同浓度酪胺(1μM、0.1μM、0.01μM、0.001μM、0.0001μM)对瞬时外向型钾通道(A型钾电流,IA)以及延迟整流型钾通道(IDR)电流的影响,并观察0.1μM的酪胺对电压依赖性钠通道及钙通道的影响。结果:如下浓度的酪胺1μM、0.1μM、0.01μM、0.001μM、0.0001μM对A型钾电流的抑制率分别为(48.21±11.72)%(32.25±2.07)%,(23.84±2.69)%,(16.26±2.72)%及(7.07±2.91)%;0.1μM酪胺对电压依赖性钠通道和延迟整流型钾电流无明显影响,仅对钙电流有轻度的抑制作用,抑制率为(11.34±4.97)%;0.1μM酪胺能增强小鼠三叉神经节神经元的放电频率。结论:酪胺呈浓度依赖性抑制A型钾电流;酪胺通过下调A型钾电流增强三叉神经节神经元的兴奋性,增加TGN(trigeminal ganglion neurons)的伤害性传导,从而降低痛阈,导致疼痛。

A型钾通道Kv4.1在戊四唑致痫大鼠海马区的表达

目的通过检测A型钾通道Kv4.1在戊四唑(PTZ)致痫大鼠海马CA1、CA3及齿状回区的表达变化,探讨A型钾通道在癫痫发病机制中的作用。方法 SD大鼠40只,随机分为正常组、致痫后1 h、24 h、72 h组。腹腔注射PTZ制备大鼠癫痫模型,应用免疫组化及Western Blot技术检测Kv4.1在各时间段海马CA1、CA3及齿状回区的蛋白表达情况。结果致痫组大鼠海马区Kv4.1蛋白表达水平在致痫后1 h、24 h、72 h三个时间段均明显高于正常组(P<0.05);各致痫组之间Kv4.1蛋白表达水平无明显差异(P>0.05)。结论大鼠癫痫模型海马区A型钾通道Kv4.1蛋白表达增多,Kv4.1的表达上调可能在癫痫的发生中起作用。

A型钾通道基因在正常大鼠臂旁外侧核的表达

目的探讨A型钾通道5种亚型即Kv1.4、Kv3.4、Kv4.1、Kv4.2和Kv4.3在正常大鼠臂旁外侧核(lateral parabrachial nucleus,LPB)的表达。方法分别采用RT-PCR和实时荧光定量PCR技术检测分布于成年雄性SD大鼠LPBA型钾通道亚型。结果用RT-PCR技术在所有6只大鼠LPB都检测到了Kv3.4、Kv4.2和Kv4.3 mRNA,但在1只大鼠LPB未检测到Kv1.4 mRNA,2只大鼠LPB未检测到Kv4.1 mRNA;实时荧光定量PCR实验显示,在LPB,Kv1.4、Kv3.4、Kv4.2和Kv4.3 mRNA表达显著高于Kv4.1 mRNA,而Kv3.4、Kv4.2、Kv4.3和Kv1.4 mRNA的表达丰度差异无统计学意义(P>0.05),但在1只大鼠LPB未检测到Kv1.4 mRNA。结论在正常大鼠LPB中有A型钾通道mRNA表达,其主要亚型为Kv3.4、Kv4.2和Kv4.3。

A型钾通道在正常大鼠小脑皮层中的表达

目的探讨5种A型钾通道亚型Kv4.1、Kv4.2、Kv4.3、Kv3.4和Kv1.4在正常大鼠小脑皮层中的表达。方法采用免疫荧光染色技术和实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测健康成年雄性SD大鼠小脑皮层的A型钾通道亚型的分布。结果采用qRT-PCR技术在6只大鼠小脑皮层均检测到了Kv4.1、Kv4.2、Kv4.3、Kv3.4和Kv1.4mRNA表达,其中,Kv4.3mRNA表达丰度最高,其次是Kv4.2和Kv3.4,且Kv4.3、Kv4.2和Kv3.4mRNA表达丰度明显高于Kv1.4和Kv4.1mRNA;免疫荧光染色实验表明,Kv3.4、Kv4.2和Kv4.3蛋白分布于不同的小脑皮层细胞群,Kv3.4表达在小脑普肯野氏细胞,在颗粒细胞未见Kv3.4阳性产物;Kv4.2表达在小脑颗粒细胞,在普肯野氏细胞未见Kv4.2阳性产物;而Kv4.3在小脑普肯野氏细胞和颗粒细胞均有表达。结论正常大鼠小脑皮层中存在A型钾通道表达,其主要亚型为Kv3.4、Kv4.2和Kv4.3,且不同亚型在小脑皮层不同神经细胞群上分布不同。

Ghrelin抑制A型钾通道电流对小鼠黑质多巴胺能神经元兴奋性的影响

目的探讨ghrelin是否通过抑制A型钾通道电流增强正常小鼠黑质多巴胺能神经元的自发放电。方法应用出生15~20d的C57BL/6小鼠制备脑片,脑片全细胞膜片钳技术观察ghrelin对黑质多巴胺能神经元自发放电频率及A型钾通道电流幅度的影响。结果小鼠黑质脑片灌流100nmol/L ghrelin,多巴胺能神经元自发放电频率明显升高(n=5,t=3.55,P<0.05);应用A型钾通道阻断剂4-AP可以完全阻断ghrelin的细胞兴奋效应。应用100nmol/L ghrelin可以明显抑制A型钾电流的电流幅度(n=5,t=5.67,P<0.01)。结论 Ghrelin能够提高正常小鼠黑质多巴胺能神经元的兴奋性,其机制可能是通过抑制A型钾通道电流实现的。

内源性大麻素2-AG对海人藻酸诱导损伤的大鼠尾状核神经元A型钾通道电流的调制作用

目的:研究内源性大麻素2-花生四烯酰甘油(2-AG)对海人藻酸(KA)损伤的A型钾通道的调制作用及其分子机制。方法:用KA处理原代培养的大鼠尾状核(CN)神经元,建立神经兴奋性毒性细胞模型;通过全细胞膜片钳记录,观察KA介导的兴奋性毒性及2-AG的神经保护作用过程中CN神经元上A型钾通道电学功能的改变。结果:在培养的大鼠尾状核神经元上,膜片钳实验显示KA明显降低CN神经元A型钾通道电流(I_(A))密度并改变通道电学功能:失活曲线斜率(k)和失活后恢复时间常数(τ)均显著增大。细胞孵育液中直接加入内源性大麻素2-AG或单酰甘油脂肪酶抑制剂URB602使2-AG水解减少而间接升高细胞内2-AG水平,均可通过大麻素受体1(CB1R)抑制KA诱导的I_(A)密度降低,有效拮抗KA所致A型钾通道τ值和k值的增大,加快A型钾通道失活后恢复过程。结论:A型钾通道电学特性的改变可能是KA造成CN神经元兴奋性毒性损伤的机制之一。2-AG可通过CB1R途径调节A型钾通道功能,从而起到神经保护作用。

海马CA1区锥体细胞树突分级峰电位的模型分析

脑神经元复杂的树突树结构和电压激活离子通道赋予其复杂的信息整合功能。通过神经元形态的分枝结构模型和电压激活离子通道动力学模型 ,包括远端树突高密度A型K+ 通道 ,对海马CA1区锥体细胞树突的信息整合特性进行了仿真研究。结果表明 ,远端树突峰电位在很大范围内具有分级放大作用 ,在一定的刺激条件下峰电位的发起部位可在树突轴上移动 ,并且轴突反传动作电位幅度在远端树突会发生突然减小。

鸟粪石法处理电解锰氨氮废水试验研究

本试验采用鸟粪石法处理电解锰氨氮废水,试验的最佳条件是:最佳加药顺序依次是Na_2HPO_4·12H_2O、NaOH溶液、MgSO_4·7H_2O,反应系统恒定pH值为10,n(PO_4^(3-))/n(NH_4^+)=1.6、n(Mg^(2+))/n(NH_4^+)=1.6。在最佳反应条件下,氨氮去除率为93.8%。利用钾A型分子筛深度处理鸟粪石法预处理后的废水,去除效率为61.9%,残留的氨氮浓度为23.6mg/L,达到《污水综合排放标准》(GB8978-1996)二级标准相应限值。

4-氨基吡啶对大鼠臂旁外侧核神经元放电活动和温度敏感性的影响

目的探讨A型钾通道是否参与臂旁外侧核(LPB)神经元温度敏感性的形成。方法采用红外可视脑片膜片钳胞外记录技术,观察A型钾通道阻断剂4-氨基吡啶(4-AP)对LPB热敏、中斜率和低斜率温度不敏感神经元放电频率、放电幅度和温敏系数的影响。结果灌流4-AP引起热敏和低斜率温度不敏感神经元的放电频率明显加快(P<0.05);中斜率温度不敏感神经元放电频率无明显变化(P>0.05);4-AP对三类神经元放电幅度均无明显影响(P>0.05);灌流4-AP后,热敏神经元温敏系数有降低趋势;中斜率温度不敏感神经元温敏系数无明显变化(P>0.05);低斜率温度不敏感神经元温敏系数明显增加(P<0.05)。结论 4-AP对LPB不同类型神经元放电活动影响不同,A型钾通道可能参与了LPB神经元温度敏感性的形成。