烙铁头蛇属一新种——莽山烙铁头蛇

本文描述在湖南宜章莽山发现的蝰科烙铁头蛇属的一新种。此蛇采到不久,中央电视台于1989年11月曾加以报道。

四个烙铁头蛇毒凝集素样蛋白基因的克隆与序列分析

从烙铁头蛇 (Trimeresurusmucrosquamatus)的毒腺中提取mRNA ,利用RT -PCR进行体外扩增 ,获得凝集素样蛋白基因 ,克隆至PMD18-T载体中 ,筛选出 4种凝集素样蛋白基因 (命名为TML 1、TML 2、TML 3和TML 4 )。由基因序列推导出的氨基酸序列表明 :TML 1,2 ,3,4序列中均有CRD结构。序列同源性比较和Cys位点分析推测 :TML 1和TML 2可能分别是类似于flavocetin A的蛇毒凝集素样蛋白的α亚基和 β亚基 ;TML 3可能类似于GPIb bp的蛇毒凝集素样蛋白的α亚基 ,TML 4则可能是类似于Ⅸ /Ⅹ bp的蛇毒凝集素样蛋白的

烙铁头Trimeresurus Mucrosquamatus蛇毒对血小板的活化作用

烙铁头Trimeresurus Mucrosquamatus蛇毒(TMV)可引起人和多种动物(狗、家兔、豚鼠)血小板的活化,发生聚集。血小板聚集强度与加入TMV的量有关。豚鼠血小板对TMV最为敏感,TMV引起豚鼠、家兔、狗和人的血小板聚集的最低剂量分别为0.6、12.5、2.0、2.0μg/ml。EDTA抑制而肝素不影响TMV对血小板的聚集作用。TMV的血小板聚集反应伴有5羟色胺的释放,引起家兔血小板5羟色胺最大释放(72%)的TMV剂量为100μg/ml。TMV还可以诱导血小板血栓恶烷A_(2)的形成。阿斯匹林能阻断TMV诱导的血栓恶烷A_(2)的生成,但并不抑制TMV引起的血小板聚集反应,提示TMV可能通过不依赖于血栓恶烷A_(2)的途径活化。初步结果表明TMV是研究血小板生理机制的有用工具。

菜花烙铁头肺微血管铸型的扫描电镜观察

用扫描电镜观察了 ABS丁酮溶液灌注的菜花烙铁头肺微血管构筑情况 .结果表明菜花烙铁头肺壁内面有许多网状隔膜、次级隔膜、三级隔膜及肺泡隔将其分隔成大量的囊状室、小室、亚小室及肺泡 ,在网状隔膜、次级隔膜、三级隔膜、肺泡隔及肺泡壁上均有丰富的毛细血管 ,且相互吻合成单层密集网 ;肺泡毛细血管网眼多呈椭圆形、三角形、多边形及不规则形 ,毛细血管直径 7～ 1 1μm,网眼孔径 8～ 2 5μm;在微动脉和终末微动脉血管铸型上 ,显示有明显的环形平滑肌细胞和内皮细胞核压迹 ,微静脉和毛细血管铸型表面光滑 ,但有内皮细胞核的压迹 .

菜花烙铁头核型的初步报道

菜花烙铁头（Ｐｒｏｔｏｂｏｔｈｒｏｐｓｊｅｒｄｏｎｉ）属蝰科（Ｖｉｐｅｒｉｄａｅ）蝮亚科（Ｃｒｏｔａｌｉｎａｅ）原矛头蝮属。本属已知的种均为毒蛇类，且主要分布于中国西部和南部地区以及印度北部。虽然前人（张服基，１９９３）对菜花烙铁头作过形态等方面的研...

烙铁头蛇毒血小板聚集素(TMVA)的生化性质

用DEAE A-50柱层析从湖南烙铁头(Trimeresurus mucrosquamtus)蛇毒中分离出一个能诱导血小板聚集的组分(ⅩⅢ峰),随后经Sephadex G-75,Bio-gel等柱层析纯化,得到湖南烙铁头蛇毒血小板聚集素,简称TMVA。经聚丙烯酰胺凝胶电泳,等电点,分子量,氨基酸组成,N—末端,含糖量以及几种酶活性测定,表明:TMVA是一个由两种不同分子量亚基组成的糖蛋白聚合体,含有1.8%的中性糖,0.5%的唾液酸及3.75%的己糖胺。其等电点为5.2,由562个氨基酸残基组成,N—末端氨基酸残基为门冬氨酸(Asp)分子量为68,000,两种亚基的分子量分别为13,700和12,000,纯化后的TMVA不具有粗毒中的何任酶活性。

黄金梨铁头病成因研究初报

2011—2012年对黄金梨铁头病的发病症状和发病规律进行观察,并对影响铁头病发生的梨园土壤类型、砧木种类、树龄、果实着生部位、叶面肥、果实套袋、激素等因素进行调查研究。认为黄金梨铁头病是果顶细胞发育障碍的生理性病害,其发病程度受综合因素的影响,果实套袋、氮肥过量、砧木不良、树冠郁闭、使用膨果素处理及树体缺硼、钙、硅等中、微量元素等均能加重铁头病的发生,并提出了相应的防治技术措施。

菜花烙铁头蛇毒C-型凝集素基因的克隆与序列分析

从菜花烙铁头蛇 (Trimeresurusjerdonii)的毒腺中提取mRNA ,采用RT PCR技术进行体外扩增 ,将扩增产物克隆到PMD18 T载体中 ,最后筛选出一个编码凝集素的基因 ,命名为TJL。由TJL基因序列推导的氨基酸序列中包含分别由 2 3和 135个氨基酸残基组成的信号肽和成熟肽。氨基酸序列比较分析表明 ,TJL含有半乳糖结合位点和钙离子结合位点 ,与蝰科蛇毒凝集素TSL、PAL、APL和RSL的同源性较高 (87 4 %～90 4 % ) ,与眼镜蛇科蛇毒凝集素BML的同源性较低 (6 1 5 % )。

烙铁头蛇毒中一个具有抗补体活性金属蛋白酶的纯化和性质研究

目的从烙铁头蛇毒中筛选分离抗补体活性蛋白,并对其部分生物学活性开展研究,以了解其在蛇伤中的病理生理作用和潜在的应用价值。方法采用蛋白层析技术分离纯化抗补体活性蛋白,测定其分子量、等电点、抗补体作用、多种蛋白水解酶活性、水肿活性及出血活性。结果从烙铁头蛇毒中分离纯化出一个抗补体活性蛋白TMAC-1,表观分子量约为25ku,等电点为9.0。TMAC-1能够抑制补体经典途径和替代途径的溶血,预孵条件下,其IC50分别为62、29mg·L-1;不预孵条件下,其IC50为263、246mg·L-1。TMAC-1能够裂解C3、C5,但裂解产物不能诱导内皮细胞P-selectin的表达。TMAC-1能依次降解纤维蛋白原的Aα、Bβ、γ链,该活性能被EDTA、1,10-phenanthroline、EGTA完全抑制,不受PMSF、SBTI的抑制。TMAC-1具有水肿活性和微弱的偶氮酪蛋白水解活性,没有精氨酸酯酶水解活性和皮下出血活性。结论 TMAC-1是一个非出血性的金属蛋白酶,它可通过酶切补体特定成分抑制补体激活。

广义烙铁头属三种烙铁头的核型及分类地位初步探讨

报道 3种烙铁头蛇的核型。其中 ,烙铁头 2n =36=16M( 14V +2SV/V) +2 0m ,ZW型性决定 ,Z为V型 ,W为SI/SV型 ,Z明显大于W ;菜花烙铁头 2居群 2n =36=16M ( 14V +2SI) +2 0m ,ZW型性决定 ,Z为V型 ,W为SI型 ,Z明显大于W ;云南竹叶青 2n =36=16M ( 12V/SV +2SV/SI +2SI)+2 0m ,无异型性染色体。对 3种的核型及烙铁头属已知核型进行了比较分析 ,并对云南竹叶青与竹叶青的核型显著差异 ,结合其种的分类学问题进行了讨论 ,归纳已知烙铁头核型基础上 ,结合该类群的属级分类问题进行了讨论 。

一个筛选和评价血小板活化抑制药物的模式——烙铁头蛇毒血小板聚集素(TMVA)

本文报道一个新的筛选和评价血小板活化抑制药物的模式——TMVA。用兔子和人血小板实验结果表明,目前国内外临床治疗冠心病的抗血小板活化药物,凡能抑制TMVA诱导的血小板聚集的药物,均能对原有的血小板活化途径的ADP,花生四烯酸(AA)或胶原等多种诱导剂引起血小板聚集起抑制作用,因此该模型是目前筛选和评价血小板活化抑制药物较理想的模式。

莽山烙铁头蛇粗毒双向凝胶电泳分析

采用固相pH梯度等电点聚焦-SDS双向聚丙烯酰胺凝胶电泳对莽山烙铁头粗毒进行了分析,通过银染法显色,电脑软件识别出约40个蛋白质点.其中分子量超过130 kD的蛋白质点很少,分子量90 kD^10 kD的区域均有蛋白质点分布,分子量34 kD区域的蛋白质点较为密集,且它们的含量明显较高.从蛋白质点的等电点分布范围分析,偏于碱性端的蛋白质明显多于酸性端的蛋白质,且分布在中性偏碱(pH 7~8)的区域.质谱数据的数据库搜寻结果表明:莽山烙铁头蛇毒中含有类凝血酶组分、纤溶酶组分、血小板聚集蛋白、抗血小板聚集蛋白和平滑肌钙离子通道阻断剂等组分.

湖南烙铁头蛇毒蛋白组分的双向电泳分析

烙铁头蛇是世界上剧毒的蛇种之一,其所携带的毒素能够导致严重的机体损伤。应用蛋白质双向电泳技术,对湖南烙铁头蛇蛇毒蛋白的蛋白质组分进行分析。通过等电聚焦和SDS-PAGE凝胶电泳分析获得完整的烙铁头蛇毒全蛋白质的图谱,经胶体考马斯亮蓝染色后,应用PDQuest软件对蛋白表达谱进行分析。通过等电聚焦和SDS-PAGE凝胶电泳有83个蛋白质组分被检测出来。其中大约90.00%的蛋白质的相对分子质量(Mr)分布在15～45 kDa之间,大约72.29%的蛋白质等电点(pI)在4.0～7.0之间。通过对烙铁头蛇毒的蛋白组学研究,获得其蛇毒蛋白质组分的表征特点,为后续进一步研究各组分的身份和潜在功能奠定基础,既可以提出新的治疗方案又可以为新的药理应用提供宝贵资源。

莽山烙铁头蛇毒液蛋白质组学研究(英文)

目的收集一条中国特有品种莽山烙铁头蛇的新鲜毒液,对其蛇毒蛋白作生化分析。方法先以电泳胶片法分析比较莽山烙铁头蛇毒与中国大陆及台湾、日本琉球各地其它品种的烙铁头蛇和各地其他品种的烙铁头蛇的粗蛇毒,在凝胶电泳中展现之异同。然后利用高效液相色谱法(HPLC)将莽山烙铁头蛇毒中的磷脂酶分离,再以质谱仪等鉴定,并与以往相同方法分析莽山烙铁头蛇所得到的磷脂酶分析结果比较。结果我们的研究证实了莽山烙铁头蛇毒含唯一主要的磷脂酶,其含量大约占蛇毒总重量的58%,与中国其他烙铁头蛇品种及日本琉球烙铁头蛇的蛇毒某些碱性磷脂酶之氨基酸序列及蛋白结构特别相似。此碱性磷脂酶主要毒性是水肿、局部炎症及肌肉坏死。结论莽山烙铁头蛇咬伤的临床表现为抗凝与出血,局部炎症坏死等特点,亦可由其蛇毒成分得到印证与解释。

海南再次发现越南烙铁头Ovophis tonkinensis

2008年4月28日,于海南吊罗山采集到烙铁头蛇属蛇类一条,经鉴定为越南烙铁头(有鳞目Squamata:蝰科Viperidae),其主要鉴别特征为第2枚上唇鳞小而不入颊窝、尾下鳞单枚未分化、腹鳞数目较少.

莽山烙铁头蛇粗毒的生物学活性

分析了莽山烙铁头蛇粗毒对小鼠的半致死量,并采用膜片钳全细胞记录技术,研究了莽山烙铁头蛇粗毒对大鼠背根神经节神经元河豚毒素不敏感(TTX-R)钠通道、河豚毒素敏感(TTX-S)钠通道、低电压激活(LVA)电压依赖性钙离子通道和高电压激活(HVA)钙离子通道的作用。结果表明:粗毒对小鼠的半致死量为4.2 mg/kg,粗毒对钠通道和钙离子通道作用存在明显差异,10、100、1000 mg/L的莽山烙铁头蛇毒素对河豚毒素不敏感(TTX-R)钠电流有抑制作用,而100mg/L的莽山烙铁头蛇毒素对河豚毒敏感型(TTX-S)钠电流无明显影响;100、1000mg/L的莽山烙铁头蛇毒素对HVA型钙离子通道有抑制作用;1000mg/L的莽山烙铁头蛇毒素对LVA型钙离子通道电流峰值有抑制作用.

针刺拔罐配合贴敷如意金黄散治疗烙铁头蛇伤肢体肿胀疗效观察

目的观察针刺拔罐配合贴敷如意金黄散对烙铁头蛇伤伤肢肿胀的临床疗效。方法将我院收治的烙铁头蛇伤患者200例随机分为观察组和对照组各100例。在常规治疗基础上,观察组采用针刺拔罐后贴敷如意金黄散治疗;对照组予土黄连液纱布外敷局部伤口,再予如意金黄散外敷肿胀处。比较两组治疗后伤肢肿胀消退情况。结果治疗5天后,观察组患者伤肢肿胀消退总有效率100%,与对照组比较差异有显著性(P<0.05)。结论针刺拔罐后配合贴敷如意金黄散疗法对烙铁头蛇伤伤肢肿胀具有明显的消退作用,是一种简单、便捷、安全、有效的方法。

烙铁头蛇毒对体外血凝及纤溶的影响

行体外血凝及纤溶观察结果表明：①烙铁头蛇毒能明显延长凝血活酶时间（ＰＴＴ）、凝血酶原时间（ＰＴ）及蝰蛇毒磷脂时间（ＲＶＶＣＴ），显示出较强的抗凝活性；②对人纤维蛋白原及纤维蛋白有较强的溶解作用，这种作用不完全是单一的活化素样作用。

烙铁头蛇咬伤后迟发性出血的临床分析

目的探讨烙铁头蛇咬伤后迟发性出血的临床特点及治疗方法。方法对我院11例烙铁头蛇咬伤后出现迟发性出血的患者进行回顾性分析,总结其临床特点及治疗方法,并分析其病因。结果迟发性出血通常发生在烙铁头蛇咬伤后的第5～6天,发病率约16.42%;11例患者均出现伤口流血不止、皮下淤斑、牙龈出血及鼻衄,其中1例伴有便血及血尿,同时凝血酶原时间、活化部分凝血活酶时间及凝血酶时间均显著延长。经及时给予抗蛇毒血清、补充血容量等治疗,11例患者均痊愈。结论烙铁头蛇咬伤后迟发性出血并不少见,及早发现、积极处理是治愈的保证。

热毒宁注射液治疗烙铁头蛇咬伤的临床观察

目的观察热毒宁注射液对烙铁头蛇咬伤的治疗效果。方法将265例烙铁头蛇咬伤患者随机分为两组,对照组给予常规治疗,治疗组在常规治疗基础上加用热毒宁注射液20ml静脉点滴,每天1次。观察并记录两组患者肿痛完全消退时间、止痛时间、局部坏死发生情况及治愈情况、住院天数、实验室指标变化。结果治疗组治愈率为91.5%,对照组治愈率为67.4%,差异具有统计学意义(P<0.05);治疗组肿痛完全消退时间、止痛时间、局部坏死发生情况及治愈情况、住院天数、实验室检查指标变化与对照组比较,差异具有显著统计学意义(P<0.05)。结论热毒宁注射液对烙铁头蛇咬伤有显著效果。