木犀草素抑制丙酮酸铁氧还蛋白氧化还原酶及其抗艰难梭菌作用研究

目的考察木犀草素对丙酮酸铁氧还蛋白氧化还原酶(PFOR酶)的抑制作用及其抗艰难梭菌活性。方法将艰难梭菌PFOR编码序列克隆至表达载体pET-2a,转染至感受态大肠杆菌,异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(Isopropylβ-D-Thiogalactoside,IPTG)诱导表达后进行粗酶液制备。40μmol·L^(-1)待测化合物与PFOR酶在厌氧25℃条件反应8 h后,测定待测化合物对PFOR酶的抑制率。通过对菌液OD_(600)的考察,测定PFOR酶强抑制剂对艰难梭菌细菌(ATCC BAA 1382和ATCC BAA 1870)的最小抑菌浓度(MIC)。借助分子对接技术考察PFOR-抑制剂间可能的相互作用机制。结果在所测化合物中,黄酮木犀草素对PFOR的抑制活性最强,单点抑制率约为33%,与阳性抑制剂硝唑尼特的抑制率(40%)相当。分子对接发现木犀草素可与PFOR结构域中的Asp428、Val431、Gly429、Asp456、Lys458、Lys459等形成氢键。木犀草素对艰难梭菌的MIC约为32μg·mL^(-1)。结论木犀草素具有较好的抗艰难梭菌活性,PFOR酶可能是其抗菌作用靶点。

Clostridium ljungdahlii乙醛铁氧还蛋白氧化还原酶基因插入失活载体的构建

合成气/富CO废气发酵制乙醇是一项新的乙醇生产技术。该技术能以生物质、有机废物气化产生的合成气(主要成分CO,CO2和H2)或炼钢厂的废气为原料,利用特殊的微生物将其发酵为乙醇,因而在生物质、富CO废气及一些有毒或难降解的有机废物利用上将发挥重要作用。Clostridium ljungdahlii是最早发现也是研究得最多的合成气乙醇发酵菌株,其全基因组序列已报道。乙醛铁氧还蛋白氧化还原酶是Clostridiumljungdahlii乙醇合成过程中催化乙酸/乙醛转化的一个重要的酶。本研究根据Clostridium ljungdahlii乙醛铁氧还蛋白氧化还原酶基因序列设计了Ⅱ型内含子插入识别位点及相关引物,其最适插入位点为基因的有义链第360与361位核苷酸之间,之后采用重叠延伸PCR法扩增了内含子的IBS,EBS1d和EBS2序列,在质粒pMTL007的基础上构建了用于Clostridium ljungdahlii乙醛铁氧还蛋白氧化还原酶基因插入失活的质粒pMTL007-Clj-aor-360s,经酶切和DNA测序验证,再转化含质粒pMCljS的大肠杆菌E.coli XL1-blue,利用氯霉素和奇霉素双抗性筛选获得了经甲基化修饰的目的质粒,可用于下一步电转化Clostridium ljungdahlii以构建Clostridiumljungdahlii乙醛铁氧还蛋白氧化还原酶基因失活的基因工程菌。

circ_UQCRC2靶向miR-532-5p调控缺氧/复氧诱导的心肌H9c2细胞氧化应激和凋亡的机制研究

目的:探讨circRNA泛醇-细胞色素C还原酶核心蛋白2(circ_UQCRC2)靶向miR-532-5p对缺氧/复氧(H/R)诱导的心肌细胞损伤的影响。方法:体外培养H9c2细胞,分为对照组、H/R组、H/R+si-NC组、H/R+si-circ_UQCRC2组、H/R+si-circ_UQCRC2+anti-miR-NC组、H/R+si-circ_UQCRC2+anti-miR-532-5p组。实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应法(qRT-PCR)法检测细胞中circ_UQCRC2和miR-532-5p表达,比色法检测乳酸脱氢酶(LDH)漏出量、丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性,流式细胞术检测凋亡,蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)和Bcl-2相关X(Bax)蛋白表达。双荧光素酶报告基因实验验证circ_UQCRC2和miR-532-5p的调控关系。结果:与对照组比较,H/R组H9c2细胞中circ_UQCRC2表达、MDA含量、LDH漏出量、细胞凋亡率、Bax蛋白表达升高,miR-532-5p表达、SOD活性、Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05)。与H/R+si-NC组比较,H/R+si-circ_UQCRC2组H9c2细胞中circ_UQCRC2表达、LDH漏出量、MDA含量、细胞凋亡率、Bax蛋白表达降低,miR-532-5p表达、SOD活性、Bcl-2蛋白表达升高(P<0.05)。与H/R+si-circ_UQCRC2+anti-miR-NC组比较,H/R+si-circ_UQCRC2+anti-miR-532-5p组H9c2细胞中MDA含量、LDH漏出量、细胞凋亡率、Bax蛋白表达升高,miR-532-5p表达、SOD活性、Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05)。circ_UQCRC2靶向结合并负调控miR-532-5p。结论:下调circ_UQCRC2可抑制H/R诱导的H9c2细胞氧化应激和凋亡,其作用机制可能与靶向负调控miR-532-5p有关。

高等植物铁氧还蛋白-NADP^+氧化还原酶研究进展

高等植物叶绿体定位的铁氧还蛋白-NADP+氧化还原酶(LFNR)负责催化光合线性电子传递的最后一步反应,催化电子由还原态的铁氧还蛋白(Fd)传递给NADP+。LFNR分布在叶绿体的3个不同的组分中,即叶绿体基质中、类囊体膜上和叶绿体内膜上。最近的研究表明,大多数膜定位的LFNR并非光合作用所必需的,叶绿体基质中的LFNR足以维持光合作用的正常进行。叶绿体中的两个蛋白——Tic62和TROL作为LFNR的锚定蛋白,可以与LFNR在类囊体膜上形成高分子量的蛋白复合体。Tic62-LFNR复合体主要负责在夜间保护LFNR的活性,但它不直接在光合作用中起作用。然而,TROL-LFNR复合体对植物的光合作用有一定的影响。本文将概述植物LFNR的最新研究进展。

高等植物铁氧还蛋白的结构与功能

该文介绍了高等植物中铁氧还蛋白(Fd)的结构,铁氧还蛋白与铁氧还蛋白:NADP+氧化还原酶(FNR)的相互作用,氧化还原电势和电子传递活性;阐述了铁氧还蛋白结构与功能的关系。

太白七药珠子参的体外抗氧化活性研究

目的:考察太白七药珠子参的体外抗氧化活性。方法:采用铁还原力,清除二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基和超氧阴离子(·O^(2-))自由基能力,对Cu^(2+)/H_(2)O_(2)损伤牛血清白蛋白(BSA)的保护及对H_(2)O_(2)损伤小鼠巨噬细胞RAW264.7的保护能力的评价方法,对珠子参水提物、珠子参皂苷和珠子参多糖的抗氧化活性进行考察。结果:不同浓度的珠子参水提物、珠子参皂苷和珠子参多糖均有一定的铁还原能力,清除DPPH自由基和·O^(2-)自由基能力,且呈浓度依赖性,其中珠子参皂苷的铁还原力、清除自由基能力均最强;不同浓度的珠子参水提物、珠子参皂苷和珠子参多糖对Cu^(2+)/H_(2)O_(2)诱导的蛋白氧化损伤具有保护作用,且珠子参水提物的保护能力最强;不同浓度(6.25~100μg/mL)珠子参水提物、珠子参皂苷和珠子参多糖对H_(2)O_(2)诱导损伤的RAW264.7细胞具有保护作用,且呈浓度依赖性,其中浓度为100μg/mL的珠子参皂苷保护能力最强。结论:珠子参水提物、珠子参皂苷和珠子参多糖均具有一定的体外抗氧化能力,但它们在不同方面中的抗氧化能力存在一定的差异。

茶树‘黄金芽’叶绿体铁氧还蛋白-NADP+氧化还原酶基因的克隆与表达分析

高等植物叶绿体定位的铁氧还蛋白-NADP+氧化还原酶(LFNR)是一种亲水性黄素蛋白,位于光合电子传递链末端,是将光合作用电子运输与叶绿体氧化还原代谢联系起来的枢纽。为探究LFNR基因与茶树品种‘黄金芽’受光调控黄化之间的关系,本研究分别以‘黄金芽’、‘舒茶早’(CK)1芽2叶为材料克隆CsLFNR基因,获得了相似度为100%的序列,将其命名为CsLFNR1.1(GenBank登录号:MT311318)。经生物信息学分析,其cDNA基因全长1095 bp,编码364个氨基酸,蛋白分子量为40.623 kD,理论等电点为8.86,为碱性蛋白。CsLFNR1.1无跨膜结构和信号肽,含一条叶绿体转运肽,二级结构含23.35%的α-螺旋,5.49%的β-转角,28.85%延伸链和42.31%的无规则卷曲,亚细胞定位于叶绿体。通过blastn、blastp及DNAMAN软件比对分析发现CsLFNR1.1及其翻译氨基酸序列与NCBI‘舒茶早’茶树基因CsLFNR1(XM_028233617.1)和蛋白(XP_028089418.1)序列分别有4个碱基和3个氨基酸的差异,相似性分别达到了99.63%和99.18%,预测的蛋白在理化性质及二级结构上有微小差异,三级结构预测所用模板一致,且拥有相同的保守结构域及活性结构位点。以不同遮荫度‘黄金芽’叶片为材料进行了RT-qPCR实验,结果显示CsLFNR1.1基因表达响应光照强度变化,随着光强增加表达量提高。本研究结果为进一步探究CsLFNR1.1基因在‘黄金芽’新梢叶片光系统受光调控过程中所发挥的作用提供了理论基础和科学依据。

克山病尸检患者心肌组织8-羟基脱氧鸟苷酸和硫氧还蛋白还原酶1及谷胱甘肽过氧化物酶1的表达

目的观察克山病尸检患者心肌组织8-羟基脱氧鸟苷酸（8-OH—dG）、硫氧还蛋白还原酶1（TrxRl）、谷胱甘肽过氧化物酶1（GPxl）的表达，探讨氧化应激反应和硒蛋白水平与克山病发病之间的关系。方法收集8例克山病患者（克山病组，包括4例急型克山病患者、4例慢型克山病患者）和9例非克山病（对照组）心肌尸检样本，采用免疫组化技术检测8-OH—dG、TrxRl和GPxl在心肌组织中的表达。使用Olympus Image—Pro Plus6．0软件对各指标进行定量分析。结果克山病组心肌细胞核8-OH—dG表达阳性率[（68．6±2014）％]显著高于对照组[（2．4±1．5）％，t=8．515，P〈0．05]；而且，急型克山病患者阳性率[（91．74±3．7）％]明显高于慢型克山病患者[（53．2±7．9）％，t=6．409，P〈0．05]。克山病患者心肌组织中抗氧化酶TrxR1和GPxl表达分布与病变灶分布无相关性，且蛋白表达的累积光密度（401340±59865、497590±197082）均低于对照组（2790300±379298、1348400±615840；t值分别为～28．493、-6．016，P均〈0．01）。结论克山病患者心肌组织存在氧化损伤，并且8-OH—dG表达与克山病患者病变程度有关；TrxRl和GPxl可能是与克山病发病关系密切的硒蛋白。

昆布散对甲状腺肿大大鼠甲状腺功能及氧化应激的影响

目的观察昆布散对甲状腺肿大大鼠甲状腺功能、氧化应激及Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1(Keap1)、血红素氧合酶1(HO-1)、磷酸酰胺腺嘌呤二核苷酸醌氧化还原酶-1(NQO-1)蛋白表达的影响。方法将72只大鼠随机分成6组:正常组、模型组、左甲状腺素钠组、昆布散低剂量组、昆布散中剂量组、昆布散高剂量组,除正常组大鼠外,其余各组大鼠连续灌服丙硫氧嘧啶14 d,形成甲状腺肿大模型。各组大鼠灌胃给药28 d后,称量甲状腺湿重,计算甲状腺系数;测定大鼠血清中碘甲状原氨酸(T3)、甲状腺素(T4)、促甲状腺激素(TSH)水平及甲状腺中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平;Western Blot检测大鼠甲状腺Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1、血红素氧合酶1、磷酸酰胺腺嘌呤二核苷酸醌氧化还原酶-1蛋白的表达。结果与模型组比较,昆布散治疗组大鼠的血清碘甲状原氨酸、甲状腺素、甲状腺超氧化物歧化酶及Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1蛋白表达水平显著降低(P<0.05或P<0.01),同时血清促甲状腺激素、甲状腺丙二醛及血红素氧合酶1、磷酸酰胺腺嘌呤二核苷酸醌氧化还原酶-1蛋白表达水平显著升高(P<0.05或P<0.01),其作用与左甲状腺素钠相当。结论昆布散可显著改善甲状腺肿大大鼠甲状腺激素分泌水平,抑制氧化应激损伤,其作用机制可能与调控Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1/血红素氧合酶1/磷酸酰胺腺嘌呤二核苷酸醌氧化还原酶-1通路有关。

模式蓝藻FNR蛋白的生物信息学及进化分析

FNR蛋白是蓝藻光能转换和能量代谢中的核心蛋白质,为了掌握该蛋白的生物信息学信息及其进化关系,选择具有研究和应用价值的7种模式蓝藻来源的FNR蛋白作为材料,以氨基酸序列为基础,采用ProtParam、Sompa、SWISS-MODEL及MEGA11等生物信息学工具对蓝藻FNR蛋白的结构、功能及进化关系进行分析。结果表明:蓝藻FNR蛋白均属于胞内表达的单亚基蛋白,无信号肽,无跨膜结构域。其氨基酸数目在370-440个之间,分子量在45 kD左右,理论等电点在5.5-6.0之间,不稳定性指数在40%左右,蛋白序列中存在保守的FAD及NADPH结合结构域及C末端的RWHVETY保守基序。蛋白的二级结构元件中,α-螺旋和β折叠比例在20%-30%之间,无规卷曲比例较高,普遍在47%左右。FNR蛋白的三级结构具有高度的结构相似性,蛋白质的N端普遍存在一段无序的无规卷曲结构,且暴露于蛋白质核心结构外侧。进化分析表明蓝藻FNR蛋白属于独立的进化分支,与高等植物来源的FNR蛋白的亲缘关系更近。本研究结果有助于深化对FNR蛋白的结构和功能的理解,同时也为FNR蛋白在藻类合成生物学的研究和应用提供参考。

C4ST-1在大肠杆菌中的可溶性表达

软骨素-4-O-硫酸转移酶-1(Chondroitin-4-O-sulfotransferase-1,C4ST-1,EC 2.8.2.5)催化软骨素N-乙酰半乳糖胺(N-Acetylgalactosamine,GalNAc)4号位羟基硫酸化生成硫酸软骨素A(chondroitin sulfate A,CSA)。C4ST-1含3对二硫键,在Escherichia coli细胞质内二硫键难以正确形成,故在E.coli中表达时主要以包涵体形式存在。为提高胞内可溶性蛋白质的表达水平,共表达了催化二硫键从头形成的巯基氧化酶(Erv1p)或/和促进二硫键正确折叠的二硫键异构酶(DsbC)。结果表明共表达DsbC可使C4ST-1融合蛋白的胞内可溶性表达水平显著提高,但C4ST-1和Erv1p共表达对胞内可溶性蛋白质的表达影响相对较小。C4ST-1和Erv1p或C4ST-1和DsbC共表达菌株的酶活分别为原始菌株的1.30和2.33倍,活力达到(12.32±0.76)U/L和(21.99±0.42)U/L。挑取同时共表达C4ST-1、Erv1p和DsbC的菌株进行摇瓶水平和3 L发酵罐放大培养,酶活分别达到(29.12±0.66)U/L和49.97 U/L。本研究为C4ST-1的大规模应用奠定了一定的基础。

甲基-辅酶M还原酶结构、功能及催化机制研究进展

产甲烷古菌是目前发现唯一能产生甲烷气体的微生物,也是自然界中生物甲烷的主要贡献者。甲基-辅酶M还原酶(Methyl-coenzyme M reductase,Mcr)负责产甲烷代谢中最后一步甲烷的生成与甲烷氧化代谢中第一步甲烷的激活反应。该酶的基因高度保守,被广泛应用于古菌的鉴定与系统发育研究。其特殊的辅因子F430及催化碳氢(C-H)键裂解的酶学机制也一直备受关注。近年来,在高分辨率蛋白结构和反应过渡态结构方面的重要突破有效地推动了Mcr结构与功能的研究。特别是最新发现的激活非甲烷烷烃厌氧降解的类甲基-辅酶M还原酶(Mcr-like),引起了众多研究者对该类酶激活惰性烷烃分子机制的浓厚兴趣。因此,文中概述了Mcr结构、功能及催化机制的最新研究进展,包括新发现的Mcr-like的研究情况,并展望了Mcr/Mcr-like酶在烷烃厌氧氧化及温室气体控制方面的未来研究方向。

广东高本底地区人群氧化损伤及抗氧化水平调查

目的 探讨长期连续天然放射性照射对人群氧化损伤及抗氧化水平的影响.方法 选择广东天然放射性高本底辐射地区（HBRA）48名男性居民为研究对象,选择恩平市某镇（CA）相匹配的48名男性居民为对照人群.采集2组人群外周静脉血并分离血浆,采用酶联免疫吸附试验（ELISA）,测定血浆中DNA氧化损伤指标8-羟基脱氧鸟苷（8-OHdG）和抗氧化指标硫氧还蛋白还原酶（TrxR）的表达水平.结果 与对照组相比,高本底地区人群外周血血浆中DNA氧化损伤指标8-OHdG表达水平由（315.39±100.59） ng/ml降低至（272.64±96.85） ng/ml,抗氧化指标TrxR表达水平由（0.467±0.056） ng/ml升高至（0.496±0.044） ng/ml,两组间的差异均有统计学意义（t=2.121、-2.823,P＜0.05）.多元线性回归分析结果显示,在排除年龄、饮酒、喝茶、吸烟、接受医疗照射、生活应激事件等混杂因素的影响后,低剂量电离辐射个人累积剂量对8-OHdG和TrxR表达水平均有影响（t=-2.327、2.367,P＜0.05）.结论 长期接触低剂量电离辐射可降低人群氧化损伤水平,增强机体抗氧化水平.

替吉奥口服联合三维适形放疗治疗三阴性乳腺癌效果观察

目的 观察替吉奥口服联合三维适形放疗对三阴性乳腺癌（TNBC）患者血浆硫氧还蛋白还原酶（TrxR）及血清环氧化酶-2（COX-2）、血管内皮生长因子（VEGF）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）水平的影响,探讨其治疗效果。方法 42例TNBC患者随机分为观察组和对照组各21例,两组均予单纯三维适形放疗,观察组加用替吉奥40~60 mg/m2口服,2次/d,4周1个疗程,两个疗程后观察两组疗效。检测两组治疗前后血浆TrxR及血清COX-2、VEGF、MMP-9。结果 治疗后观察组CR 4例、PR 13例、SD 2例、PD 2例,有效率80.94%,对照组分别为2、11、5、3例及61.92%,观察组有效率高于对照组,P〈0.05。与治疗前比较,治疗后两组血浆TrxR及血清COX-2、VEGF、MMP-9均降低,但观察组较对照组降低更明显（P均〈0.05）。结论 替吉奥口服联合三维适形放疗可通过降低血浆TrxR及血清COX-2、VEGF、MMP-9水平提高TNBC患者的临床疗效。

硒与几种酶的关系

通过对硒与谷胱甘肽过氧化物酶系、磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶系、碘甲腺原氨酸脱碘酶系、硫氧还蛋白还原酶系关系的研究 ,阐述硒对人体健康的影响。

不同体重指数大鼠氧化应激水平及其对肺损伤的作用

目的 观察不同体重指数大鼠血清中氧化应激指标4-羟基壬烯醛（HNE）、硫氧还蛋白（Trx）及其还原酶（TrxR）浓度及活性对大鼠肺损伤的作用和机制.方法 健康雄性SD大鼠45只,体重200~240 g,按随机数字表法分为正常组、消瘦组和肥胖组,每组15只.造模成功后留取血清、肺组织等标本进行实验.测定血清4-HNE、Trx、TrxR的含量及后两者活性.结果 显微镜下观察大鼠肺组织切片,消瘦组和肥胖组平均内衬间隔（MLI）明显增高（均P〈0.01）,且消瘦组大鼠MLI（85±9）明显高于肥胖组（77±6,P〈0.05）.但肥胖组大鼠BALF炎症细胞数明显增高（P〈0.01）.肥胖组4-HNE水平[（25±9）mg/L]显著高于正常组[（15±5）mg/L,P〈0.05）],消瘦组与正常组比较差异无统计学意义（P〉0.05）;消瘦组TrxR水平[（7.7±1.4）μg/ml]显著高于正常组和肥胖组[（6.2±1.3）μg/ml,（4.9±1.4）μg/ml,均P〈0.05）],肥胖组TrxR水平显著低于正常组（P〈0.05）;三组间Trx水平比较差异无统计学意义（P〉0.05）.消瘦组Trx活性[（32.4±8.5）×10-3A·min-1·mg-1]明显高于正常组[（19.5±3.3）×10-3A·min-1·mg-1]和肥胖组[（11.3±7.5）×10-3A·min-1·mg-1,均P〈0.01],肥胖组Trx活性显著低于正常组（P〈0.05）;消瘦组TrxR活性[（17.6±4.6）×10-3 A·min-1·mg-1]显著高于肥胖组[（7.8±2.3）×10-3A·min-1·mg-1,P〈0.01],而二组与正常组比较差异无统计学意义（P〉0.05）.结论 体重指数过高或过低均可使氧化/抗氧化失衡,导致机体的氧化应激反应造成大鼠肺组织损伤.

溃疡性结肠炎患者活动期肠道菌群及粪便炎症标志物检测及其临床意义

目的观察溃疡性结肠炎患者活动期肠道菌群及粪便炎症标志物含量及其临床意义。方法回顾性分析2018年3月至2021年1月在我院治疗的60例溃疡性结肠炎患者的临床资料,按照病情状况分为活动期组(n=39)与缓解期组(n=21),同时选择在我院体检的50名健康者为对照组。比较三组研究对象的肠道需氧菌群(包括酵母菌、肠球菌、葡萄球菌、肠杆菌)、厌氧菌群(包括双歧杆菌、拟杆菌、乳杆菌、真杆菌、消化球菌)以及粪便炎症标志物乳铁蛋白(LF)、钙卫蛋白(FC)、髓过氧化酶(MPO)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的水平。结果活动期组酵母菌、肠球菌、葡萄球菌、肠杆菌数量明显高于缓解期组与对照组,缓解期组酵母菌、肠球菌、肠杆菌数量明显高于对照组(P<0.05);活动期组双歧杆菌、乳杆菌、真杆菌明显低于缓解期组与对照组,拟杆菌、消化球菌明显高于缓解期组与对照组,缓解期组双歧杆菌、乳杆菌、真杆菌明显低于对照组,拟杆菌、消化球菌明显高于对照组(P<0.05);活动期组LF、FC、MPO、MMP-9水平明显高于缓解期组与对照组,缓解期组LF、FC、MPO、MMP-9水平明显高于对照组(P<0.05)。结论溃疡性结肠炎患者肠道菌群失调,粪便中炎症标志物水平明显较高,能够通过肠道菌群变化及粪便内LF、FC、MPO、MMP-9水平评估疾病的活动性。

营养

膳食钙对高脂膳食大鼠骨骼肌解偶联蛋白3基因表达的影响；镁对人体低密度脂蛋白氧化修饰的影响；富硒乳酸菌对肝损伤小鼠红细胞脂质过氧化和免疫功能的影响；大剂量硒降低硒酶基因表达并致大鼠肝组织损伤；不同剂量碘对小鼠大脑和血液中乙酰胆碱的影响；锌对染铅大鼠海马SS和SSmRNA阳性神经元的保护作用；莼菜富集锌的能力及其锌的分布探讨；牛磺酸对链脲佐菌素-糖尿病性白内障干预机制初探；牛磺酸对染铅大鼠体重及学习记忆的影响；牛磺酸对低氧-复氧乳鼠心肌细胞内游离钙浓度的影响；亚甲基四氢叶酸还原酶基因型、饮食习惯与胃癌的易感性；MK-801对成年大鼠弥漫性脑损伤后海马齿状回神经发生的影响。

文心兰RFNR的克隆、亚细胞定位及其与LFNR不同的胁迫响应机制研究

以‘小樱桃’文心兰为材料克隆了铁氧还蛋白氧化还原酶(FNR)两种类型基因RFNR(Root-type Ferredoxin-NADP+oxidoreductase)和LFNR(Leaf-type Ferredoxin-NADP+oxidoreductase)。生物信息学分析表明,RFNR与LFNR都属于FNR-like超家族,具有黄素腺嘌呤二核苷酸(flavinadenine dinucleotide,FAD)和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(nicotinamide adenine dinucleotide,NAD)功能结合域,在进化过程中比较保守;两种类型的FNR在氨基酸组成、蛋白结构和构型方面存在明显差异,RFNR比LFNR有更强的保守性。FNR蛋白亚细胞定位结果表明文心兰FNR蛋白都定位于叶绿体。实时荧光定量PCR分析表明,LFNR和RFNR具有器官表达特异性:LFNR更多地在叶中表达,RFNR更多地在根中表达;在软腐病胁迫下LFNR下调响应,RFNR上调响应;两种类型的FNR在盐胁迫以及高温胁迫处理时上调响应,但RFNR响应较快且强度更大;LFNR和RFNR在水杨酸(salicylicacid,SA)处理时轻微波动,茉莉酸甲酯(methyl jasmonate,MeJA)处理时呈现单峰反应。文心兰两种类型的FNR基因在不同类型的胁迫中显示相似的和有区别的表达特性,表明其具有不同的胁迫响应分子机理。