缺铁大鼠肠道黏膜铁调节蛋白-2和转铁蛋白受体mRNA的表达

目的 了解缺铁对大鼠肠道黏膜铁调节蛋白 2和转铁蛋白受体 (TfR)mRNA表达的影响。方法 建立大鼠缺铁动物模型。根据血清铁 (SI)、血清铁蛋白 (SF)、Hb结果分隐性、轻度、中度贫血 3个实验组 ,设正常对照组。取各组缺铁大鼠小块十二指肠黏膜组织 ,研磨后常规提取RNA备用。按照 5′端相同 ,3′端互补的原则 ,根据NCBIGeneBank中IRPs 2和TfR蛋白受体的cDNA序列设计引物 ,以 β actin为内参对照 ,做RT PCR。结果 随着缺铁程度加重 ,十二指肠黏膜中IRP2mRNA表达增加。中、轻度贫血组均高于对照组 (P <0 .0 1) ,中度贫血组高于隐性贫血组 (P <0 .0 5 ) ,有显著性差异 ,而相邻两组间比较无差异 (P >0 .0 5 ) ;TfRmRNA表达与IRP2mRNA有相似现象 ,随着缺铁加重表达增加 ,实验组均高于对照组 (P <0 .0 5 ) ,各试验组之间比较均有差异 (P <0 .0 5 )。IRP2mRNA和TfRmRNA具有显著正相关 (r=0 .80 2 P <0 .0 1)。结论 IRP2在转录后水平通过调控TfRmRNA表达影响肠道铁的吸收 。

高脂膳食对小鼠脑内铁调节蛋白-2基因表达的影响

目的探讨高脂膳食对脑老化及脑铁代谢的影响,为合理膳食预防脑老化提供科学依据。方法24只ICR小鼠分4组:脑老化模型组、高脂膳食组、脑老化+高脂膳食组和对照组。连续造模10w后,以RT-PCR法检测各组脑内铁调节蛋白-2(IRP-2)表达水平。结果脑老化组和高脂膳食组小鼠IRP-2表达水平均低于对照组且差异显著(P<0.05);高脂膳食组与脑老化模型组、脑老化+高脂膳食组间IRP-2表达无显著差异(P>0.05)。结论高脂膳食可降低小鼠脑内IRP-2表达,这可能是高脂膳食诱发脑老化及神经退行性变的机制之一。

运动对脑老化小鼠铁调节蛋白-2基因表达影响

目的以铁调节蛋白-2(iron regulatory protein-2,IRP-2)基因表达观测点探讨运动抗脑老化的机制。方法将40只雄性ICR小鼠按体重随机分为4组:对照组、脑老化组、运动组、脑老化+运动组。脑老化及运动干预的实验造模期为10周。造模期结束后,以Morris水迷宫试验检测小鼠的学习记忆能力,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测小鼠大脑IRP-2基因表达水平。结果脑老化组小鼠脑IRP-2基因表达水平(0.738±0.221)显著低于对照组(3.938±2.357)(P<0.05);脑老化+运动组小鼠脑IRP-2基因表达水平(2.938±0.468)显著高于脑老化组(P<0.05);与对照组之间差异无统计学意义;运动组IRP-2基因表达水平(2.595±0.822)与对照组之间差异无统计学意义。结论脑老化小鼠IRP-2基因表达水平降低,运动可以防止脑老化小鼠的IRP-2基因表达下调。运动具有抗脑老化的效应。

缺铁大鼠肠道黏膜irp2 mRNA及fn mRNA的表达及相互关系

本研究旨在探讨缺铁对大鼠肠道黏膜铁调节蛋白-2(iron regulatory protein 2,IRP2)和铁蛋白(ferritin,FN)表达的影响。建立大鼠缺铁动物模型,实验根据血清铁(sI)、血清铁蛋白(sFn)、Hb结果为分隐性、轻度和中度贫血3个实验组,并设正常对照组。采用氰化高铁法测定血红蛋白,采用火焰法测定sI,用放射免疫分析法测定sFn,以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法测定不同缺铁状态下irp2mRNA及fn mRNA的表达。结果表明:①随着缺铁程度的加重,sI和sFn量减少,除隐性缺血组sI量外,实验组的sI和sFn量与对照组的差异非常显著(p<0.01)。②随着缺铁程度加重,十二指肠黏膜中irp2mRNA表达增加,在中、轻度缺铁组均高于对照组(p<0.01);在中度缺铁组高于隐性缺铁组(p<0.05),有显著性差异,而轻度和中度组间比较无差异(p>0.05);③随缺铁程度的加重,十二指肠黏膜中fn mRNA的表达逐渐降低,对照组的fn mRNA表达程度最高,中度缺铁组fn mRNA表达程度最低,各实验组与对照组相比均有差异(p<0.05),实验组各组之间两两比较各组也有差异(p<0.05);④中度缺铁组irp2mRNA和fn mRNA的表达呈显著负相关(r=-0.662,p<0.05)。结论:irp2在转录后水平通过调控fn mRNA的表达影响肠道铁的吸收,是体内铁代谢的重要调节者。

铁调节蛋白质-2对肺癌铁代谢调节作用的实验研究

目的 探讨铁调节蛋白质-2（IRP2）在肺癌铁代谢中的调节作用.方法 培养肺腺癌A549细胞随机分成脂质体组（含脂质体20 mg/L）、对照寡核苷酸组和反义寡核苷酸组3组,每组设10个平行样.通过脂质体介导转染,以脂质体组和对照寡核苷酸组为对照.利用逆转录-PCR、Western印迹检测转铁蛋白、转铁蛋白受体、铁蛋白等铁代谢相关基因mRNA及蛋白的表达.结果 转染48 h后,转铁蛋白mRNA在3组之间表达差异无统计学意义（F=2.18,P=0.078）;反义寡核苷酸组转铁蛋白受体mRNA表达显著低于脂质体组和对照寡核苷酸组（均P〈0.05）;反义寡核苷酸组铁蛋白mRNA（0.56±0.06）表达高于脂质体组（0.36±0.05）和对照寡核苷酸组（0.39±0.03）（均P〈0.05）.转染48 h后,反义寡核苷酸组IRP2蛋白表达明显低于脂质体组和对照寡核苷酸组（P〈0.05）;转铁蛋白在3组之间表达差异无统计学意义（F=2.668,P=0.088）;反义寡核苷酸组转铁蛋白受体蛋白表达低于脂质体组和对照寡核苷酸组（P〈0.05）;反义寡核苷酸组铁蛋白表达高于脂质体组和对照寡核苷酸组（P〈0.05）.结论 IRP2可能通过蛋白量的改变来影响肺腺癌A549细胞转铁蛋白受体和铁蛋白的表达,调节铁代谢.

饮食热能限制对小鼠学习记忆及脑内IRP-2和CREB基因表达的影响

目的以脑内铁调节蛋白-2(iron regulated protein-2,IRP-2)和c AMP反应元件结合蛋白(c AMP response element binding protein,CREB)基因表达为观测点,探讨饮食热能限制(caloric restriction,CR)对小鼠学习记忆能力的影响。方法雄性小鼠40只随机均分为正常对照组(normal control group,NC group)、CR组、脑老化组(brain aging group,BA group)、CR+BA组,每组10只,Morris水迷宫试验测定学习空间记忆能力,以逆转录聚合酶链反应法(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测小鼠大脑IRP-2及CREB基因的表达水平。结果与NC组相比,BA组逃避潜伏期(escape latency,EL)显著增高(P<0.05);CR+BA组的EL显著低于BA组(P<0.05),而与NC组无显著差异(P>0.05);CR组与NC组的EL相比无明显差异(P>0.05)。BA组IRP-2、CREB表达水平显著低于NC组(P<0.05);CR组IRP-2、CREB表达水平与NC组相比无明显差异(P>0.05);CR+BA组IRP-2、CREB表达水平显著高于BA组(P<0.05),与CR组及NC组相比无明显差异(P>0.05)。结论 CR可以上调BA组小鼠脑内IRP-2及CREB基因表达,提示CR能够通过影响上述两种基因的表达而增强BA组小鼠的学习记忆能力。NC小鼠给予CR后,其脑内IRP-2及CREB基因的表达无明显变化。