恶性疟原虫海南株线粒体复合体Ⅱ辅基铁-硫蛋白基因克隆及序列分析

目的 构建恶性疟原虫海南株线粒体复合体Ⅱ琥珀酸 泛醌还原酶辅基铁 硫蛋白 (iron sulfurprotein ,Ip)基因原核表达质粒pET2 8α Ip ,测定Ip基因序列 ,为研究铁 硫蛋白基因功能奠定基础。方法 采用PCR技术从恶性疟原虫海南株基因组DNA中扩增出Ip基因 ,扩增产物经纯化后 ,用BamHI +XhoI双酶切 ,定向克隆入pET2 8α质粒 ,转化大肠杆菌DH5α ,再用BamHI+XhoI酶切及PCR扩增对重组子进行鉴定。用Sanger双脱氧链终止法进行DNA序列测定 ,并进行同源性比较。结果 筛选出编码海南株Ip基因的原核表达质粒pET2 8α Ip ,海南株Ip基因序列与K1、3D7株高度同源。结论 pET2 8α Ip重组质粒的构建 ,为进一步研究铁