常用消毒剂对临床分离耐碳青霉烯铜绿假单胞茵的杀灭效果研究

目的观察常用消毒剂对临床分离耐碳青霉烯铜绿假单胞茵的杀灭效果。方法使用营养内汤稀释法进行过氧化氢、戊二醛、84消毒液、碘伏、75％乙醇对耐碳青霉烯铜绿假单胞茵最小抑茵浓度（MIC）的测定；使用MIC加中和剂法对多耐药铜绿假单胞茵进行最小杀菌浓度（MBC）的测定。结果48株临床分离的耐碳青霉烯铜绿假单胞茵中发现了对过氧化氢（17株）、戊二醛（O株）、84消毒液（18株）、碘伏（28株）、75％乙醇（20株）抗性大于标准茵株（比较MIC）的茵株，耐碳青霉烯铜绿假单胞茵对不同消毒剂的抗性情况不同。未发现在常规使用的消毒剂浓度下不能杀灭的茵株。结论耐碳青霉烯铜绿假单胞茼对常用消毒剂的抗性存在超过标准菌株的情况，由其引起的医院感染后果较严重，应引起足够的重视。研究中所选择的5种常用消毒剂在常规推荐使用浓度下均可杀灭试验菌株，提示正确使用消毒剂可以达到预防医院感染的目的。

应用正交实验研究铜绿假单胞菌原生质体制备与再生

通过对铜绿假单胞菌原生质体制备与再生进行正交实验,探讨各因子对铜绿假单胞菌原生质体制备与再生影响水平,得到铜绿假单胞菌原生质体制备与再生的最优条件:酶解时间 0. 5h,酶浓度 2mg/L,菌龄为 15h 此时原生质体形成率为 80. 5%,再生率为 20. 6%

201株铜绿假单胞菌药敏分析

目的探讨铜绿假单胞菌医院感染现状及对抗菌药物耐药情况进行调查,为临床合理应用抗菌药物提供依据。方法采用VITEK32及GNS120药敏卡完成细菌的鉴定及药敏试验。结果共分离鉴定铜绿假单胞菌201株,该菌对抗菌药物耐药率在21.4%～100.0%之间,对GNS120药敏卡提供的14种抗菌药物均耐药的多重耐药菌株有8株占3.98%。亚胺培南、哌拉西林/他唑巴坦敏感率最高,分别为78.6%,73.6%。结论铜绿假单胞菌已成为医院感染的主要致病菌,在抗菌药物治疗过程中极易变异而形成多重耐药,临床应谨慎选择抗菌药物。

老年下呼吸道感染患者铜绿假单胞菌临床检测与耐药性分析

目的分析老年下呼吸道感染患者铜绿假单胞菌耐药性。方法选择我院2009年6月至2010年12月送检的老年下呼吸道感染住院患者痰标本112份,分离培养出112株铜绿假单胞菌菌株,并进行体外药敏试验。结果铜绿假单胞菌对多种抗生素耐药,特别是对氨苄西林/舒巴坦、庆大霉素、哌拉西林、妥布霉素、环丙沙星耐药率均超过40%;对亚胺培南、氨曲南敏感性较好,耐药率分别为12.5%,16.96%。31株β-内酰胺酶阳性菌药敏检测结果显示,β-内酰胺酶阳性菌对哌拉西林、氨苄西林/舒巴坦、庆大霉素、环丙沙星、妥布霉素100%耐药,对哌拉西林/他唑巴坦、头孢吡肟、阿米卡星耐药性高达70%以上,对亚胺培南、氨曲南敏感性较好,耐药性分别为19.35%与16.13%。结论亚胺培南与氨曲南对铜绿假单胞菌有较强的抑制作用,可作为老年下呼吸道感染铜绿假单胞菌治疗的首选药物。

氧化电位酸性水对铜绿假单胞菌杀灭及L型诱导效果的实验观察

目的:观察氧化电位酸化水(Electroyzed Oxidizing Water,EOW)对铜绿假单胞菌的杀灭效果及L型抗性诱导情况。方法:采用EOW原液及稀释液对铜绿假单胞菌的悬液杀灭实验、血清干扰实验及L型诱导效果实验。结果:定量悬液杀菌试验EOW不同浓度杀灭率差异有显著性(P<0.01),不同作用时间杀灭率差异无显著性(P>0.05)。不同小牛血清量的EOW对铜绿假单胞菌的杀灭率差异有显著性(P<0.01),不同作用时间杀灭率差异也有显著性(P<0.01)。不同浓度的EOW在不同时间对L型诱导效果均没有出现。结论:铜绿假单胞菌对不同浓度EOW不存在细胞壁抗性诱导。EOW对铜绿假单胞菌杀菌效果以原液最好,有机物的干扰十分明显,应加大EOW的用量和延长时间加以控制消除。

铜绿假单胞菌外毒素A原核表达载体的构建及表达

目的对铜绿假单胞菌外毒素A(PEA)全基因进行基因克隆,构建原核表达质粒并进行表达。方法从铜绿假单胞菌中提取基因组DNA,设计PCR引物扩增出带信号肽的PEA目的基因,经HindⅢ和EcoRⅠ消化后,与PET-32a载体进行连接重组。用限制性内切酶消化、PCR及DNA测序等方法鉴定构建成功后,IPTG诱导目的基因表达。结果SDS-PAGE电泳结果显示,在分子量78kD处有一条明显的新生蛋白带。表达的融合蛋白量约占细菌总蛋白的35%。结论PET-32a-PEA原核表达质粒的成功构建及表达,为进一步研究有效的基因工程疫苗和免疫导向治疗的基因重组毒素奠定了基础。

聚维酮碘诱导与杀灭铜绿假单胞菌L型的实验观察

[目的]了解聚维酮碘诱导与杀灭铜绿假单胞菌L型的效果。[方法]用悬液法进行L型菌诱导与杀灭试验。[结果]以含500mg/L有效碘的聚维酮碘作用1min～5min、1000mg/L有效碘的聚维酮碘作用1min可诱导铜绿假单胞菌形成L型;对原菌株与L型的最小抑菌浓度分别为62.500mg/L与125.000mg/L。[结论]消毒应用的聚维酮碘剂量应高于用铜绿假单胞菌原菌株测得的杀灭合格的剂量。

4种中药对铜绿假单胞菌的抑菌作用

目的通过黄芩等4种中药对铜绿假单胞菌的抑菌效果检测，探讨传统中药及给药途径对常见院内感染的重要条件致病菌抑菌作用的开发。方法采用中药抗菌试验试管法测定药物的最低抑菌浓度。结果黄芩、连翘、黄连、金银花对铜绿假单胞菌有不同程度的体外抑菌作用，MIC均值与铜绿假单胞菌标准菌株ATCC27853的MIC相近；其中黄连的抑菌作用最强；而且泰能耐药与泰能敏感的菌株抑菌作用差异无统计学意义（P〉0．05）。结论以4种传统中药对院内感染的重要条件致病菌铜绿假单胞菌不同抑菌作用的研究，提示可以通过选择适当的给药途径，发挥传统中药的抗茵作用。

严重烫伤后补体对外源性铜绿假单胞菌感染的影响

目的 探讨严重烫烧伤后血清补体趋化活性的动态变化及其对外源性铜绿假单胞菌感染的影响。方法 采用小鼠 30 %TBSAⅢ度烫伤模型 ,分为正常对照给菌组、单纯烫伤给菌组和去补体烫伤给菌组。检测血清补体趋化活性的动态变化 ,取肝、肺组织及心内血细菌培养 ,肝、肺组织进行细菌定量培养。结果 烫伤后血清补体的趋化活性在伤后 30min迅速升高 ,6h达到高峰 ;单纯烫伤给菌组肝、肺组织及心内血培养阳性率分别为 6 7%、4 8%、6 8% ,去补体烫伤给菌组分别为4 4 %、30 %、5 1% ;去补体烫伤给菌组肝、肺组织在伤后 12h的细菌量明显减少 ,与单纯烫伤给菌组比较相差显著 (P <0 0 5 )。结论 去补体后烫伤可减轻铜绿假单胞菌感染 ,提示过量的补体碎片可诱发外源性病菌感染。

中草药对铜绿假单胞菌耐药性的影响

目的:探索中草药的使用对铜绿假单胞菌耐药性的影响,探讨预防及延缓耐药菌产生的方法。对象和方法:以2004年1月1日—2005年12月31日本院细菌室培养分离出的129株铜绿假单胞菌本次研究对象。对患者病历做回顾性调查。用SPSS10.0进行统计学分析,χ2检验比较各组间率的差异。结果:中草药的使用是铜绿假单胞菌耐CAZ、CIP的共同影响因素,而对耐IPM无影响。结论:对症中草药大量使用可以降低铜绿假单胞菌的耐药性。

34株铜绿假单胞菌的药敏分析

目的:研究铜绿假单胞菌的耐药性,指导临床合理用药。方法:按照全国临床检验操作规程对临床标本中分离的34株铜绿假单胞菌进行鉴定,并采用WHO推荐的K-B纸片扩散法进行药物敏感试验。结果:铜绿假单胞菌对环丙沙星、先锋必、庆大霉素、妥布霉素敏感率较高,对氯霉素、红霉素、青霉素、利福平的敏感率为0%。结论:临床上应用抗生素要有针对性,滥用或使用不当会给今后的治疗带来困难。

产金属β内酰胺酶铜绿假单胞菌的耐药性分析

目的 了解医院感染患者铜绿假单胞菌产金属β内酰胺酶情况,并对其耐药性进行分析。方法 用2 -巯基丙酸协同试验对两年中分离的2 38株铜绿假单胞菌进行产金属β内酰胺酶检测,用K -B法对13种抗生素进行敏感性测定。结果 共检出产金属β内酰胺酶菌71株,检出率2 9 8% ;药敏试验结果表明,产金属β内酰胺酶的铜绿假单胞菌耐药性增强,耐药谱扩大,全部为多重耐药菌。结论 细菌一旦获得产金属β内酰胺酶的能力,不但对几乎所有β内酰胺类抗生素,包括碳青霉烯类耐药,而且对β内酰胺酶抑制剂、氨基糖甙类、喹诺酮类,复方磺胺类等抗生素的敏感性下降。合理。

多重耐药铜绿假单胞菌Ⅰ类整合子基因盒的检测与耐药机制研究

目的通过检测I类整合子基因盒在多重耐药铜绿假单胞菌(PA)中的分布情况以及基因结构,研究其与细菌多重耐药的相关性。方法筛选出临床分离的多重耐药铜绿假单胞菌60株作为研究对象,利用聚合酶链反应(PCR)法检测其中的I类整合子,并进一步应用PCR法扩增I类整合子检测阳性株耐药基因盒,并应用测序对其所携带的耐药基因进行分析。结果Ⅰ类整合子在多重耐药铜绿假单胞菌中检出25株阳性株,检测阳性率为41.7%,经PCR进一步扩增所得I类整合子基因盒中发现5个730-2550bp大小的不同基因片段,主要包括氨基糖苷类抗生素抗性基因(包括aadA2、aadA2、aadB腺苷酰基转移酶、aac-6II乙酰基转移酶),编码PSE-1蛋白PSE-1基因,dfrA1二氢叶酸还原酶基因。结论 I类整合子在多重耐药铜绿假单胞茵中检出阳性率较高,并携带有多种耐药基因盒,提示铜绿假单胞茵多重耐药性与I类整合子密切相关。

临床分离的铜绿假单胞菌对β-内酰胺类抗菌药的耐药试验

目的:研究临床分离的铜绿假单胞菌对β-内酰胺类抗菌药的耐药情况,并探讨其耐药机制。方法:琼脂二倍稀释法测定不同β-内酰胺类抗菌药对铜绿假单胞菌的MIC值;水解Nitrocefin法定性初筛β-内酰胺酶。结果:耐药率以头孢他啶和美洛培南较低,分别为29.1%和30.9%,其他则均超过40%。55株铜绿假单胞菌共检测出21株产β-内酰胺酶,占所有分离出铜绿假单胞菌的38.2%。结论:铜绿假单胞菌耐药性的发生和发展速度远远超过人类研制开发新药的速度,可见合理使用抗菌药非常重要。

铜绿假单胞菌对光滑念珠菌的体外抑菌活性研究

目的观察铜绿假单胞菌抗菌物质对光滑念珠菌的体外抑菌活性。方法用交叉条带实验方法进行铜绿假单胞菌对52株光滑念珠菌的体外抑制活性的测定。结果铜绿假单胞菌抗菌物质对光滑念珠菌等体外抑菌活性良好,第2、4和6株铜绿假单胞菌对光滑念珠菌的抑制率均为90%以上,发现铜绿假单胞菌产生色素的菌株的抗真菌活性显著优于不产色素的菌株。铜绿假单胞菌抑制光滑念珠菌的生长,主要是铜绿假单胞菌产生的绿脓素(pyocyanin)。结论铜绿假单胞菌产生的抗菌物质对光滑念珠菌具有较强的抗真菌活性,说明铜绿假单胞菌具有广阔的开发前景。

耐亚胺培南铜绿假单胞菌产金属酶及耐药监测

目的了解耐亚胺培南铜绿假单胞菌(Imipenem resistant Pseudomonas aeruginosa,IRPA)在我院的感染现状、产金属酶情况及其对临床常用抗菌药物的耐药监测,以指导临床更有效地使用抗生素。方法用法国梅里埃公司的VITEK-32全自动细菌鉴定与药敏系统检测其耐药性。用双纸片协同法检测铜绿假单胞菌产金属酶。结果分离的136株铜绿假单胞菌中耐亚胺培南的菌株有85株(占62.5%),其中产金属酶的有22株(占16.2%);耐亚胺培南铜绿假单胞菌主要分布于重症监护病房(ICU)、干部病房、呼吸内科、脑外科;IRPA与亚胺培南敏感铜绿假单胞菌(Imipenem sus-ceptible Pseudomonas aeruginosa,ISPA)耐药性有明显差异。结论IRPA对抗菌药物的耐药率明显高于ISPA且呈多重耐药,产金属酶是铜绿假单胞菌耐亚胺培南的主要机制之一。加强监控和优化使用抗生素,控制IRPA在院内的流行。

院内下呼吸道感染铜绿假单胞菌的监测和耐药性分析

目的：监测宝鸡市中心医院院内下呼吸道感染铜绿假单胞菌的现状，并对其产生的耐药性进行分析。方法：对2007年7月～2007年12月间，在住院的患者痰液中分离到的86株病原菌进行分析，对感染的革兰阳性菌、革兰阴性菌和真菌比较其耐药性。结果：86株病原菌中革兰阳性菌33．7％，革兰阴性菌45．3％，真菌20．9％；其中铜绿假单胞菌占14．0％；铜绿假单胞菌药敏结果表明，其对氨苄西林、氨苄西林／舒巴坦、头孢呋辛等抗菌药物耐药。结论：院内下呼吸道感染铜绿假单胞菌的比例是相当大的，对临床常用抗菌药物的耐药形势是严峻的，应当引起足够重视，并找出对策。

铜绿假单胞菌产β内酰胺酶检测及耐药性分析

目的了解佛山地区铜绿假单胞菌临床分离产诱导型β内酰胺酶及其耐药性。方法采用美国DADE产MicroScan AUTOScan-4型微生物分析仪、NC21鉴定板和药敏板,对128株铜绿假单胞菌检测产诱导型β内酰胺酶,和对20种抗生素的敏感性,用符合NCCLS标准的VerSion22软件进行处理和分析。结果①铜绿假单胞菌对头孢他啶、哌拉西林/三唑巴坦、环丙沙星、阿米卡星、头孢吡肟、亚胺培南的敏感性高达62.6%～80.0%。妥布霉素、哌拉西林、庆大霉素次之,而其他头孢菌素敏感性低下。②128株铜绿假单胞菌产诱导型β内酰胺酶者115株(89.8%),在产诱导型β内酰胺酶菌株中,哌拉西林/三唑巴坦、头孢他啶、哌拉西林、安曲南诱导铜绿假单胞菌产诱导型β内酰胺酶的出现率为64.3%～86.1%。③产诱导型β内酰胺酶株对哌拉西林/三唑巴坦、阿米卡星、头孢吡肟、头孢他啶、环丙沙星、妥布霉素等抗生素的敏感性显著高于不产诱导型β内酰胺酶株,而氨苄西林/舒巴坦、复方新诺明的敏感性则完全相反(P<0.05)。结论本地区抗生素诱导铜绿假单胞菌产诱导型β内酰胺酶率较高,哌拉西林/三唑巴坦、头孢他啶、哌拉西林、安曲南是强诱导剂,对于产酶菌株可选择环丙沙星、阿米卡星或联合使用耐酶的抗生素。