铜缺乏乳牛脑脊液乙酰胆碱酯酶同工酶谱变化特征

选择铜缺乏症高发区具有明显摇摆症状的乳牛 6头 ,用PAGE电泳法分离脑脊液乙酰胆碱酯酶 (ACHE) ,经特异性酶化学染色后以双波长扫描法测定ACHE同工酶的活性 ,同时采集 6头健康乳牛的脑脊液样品作为对照。结果表明 ,90mL/L聚丙烯酰胺凝胶可将脑脊液胆碱酯酶分成 4条区带 ;发病组乳牛脑脊液ACHE同工酶ACHEⅡ、ACHEⅢ、ACHEⅣ活性显著高于对照组 (P <0 .0 5 ) ,其ACHEⅠ及ACHEⅢ /ACHEⅠ活性显著低于对照组 (P <0 .0 5 )。表明乳牛脑脊液ACHE同工酶活性的改变与体内铜缺乏有关 。

亚铁氰化铜法示乙酰胆碱酯酶方法的改进

目的 探讨周围神经乙酰胆碱酯酶及髓鞘同时染色。方法 将劳克坚牢蓝染髓鞘与亚铁氰化铜染乙酰胆碱酯酶两方法结合并给于改进。结果 乙酰胆碱酯酶活性处呈红棕色颗粒 ,髓鞘呈蓝色。结论 此方法简单易行 ,可用于周围神经纤维性质的鉴别及运动神经纤维再生的研究。

荧光铜纳米粒子检测乙酰胆碱酯酶活性

利用聚T单链DNA为模板合成的荧光铜纳米粒子作为荧光探针,设计了一种简单、快速、灵敏的荧光生物传感方法用于乙酰胆碱酯酶活性的检测。验证了实验可行,对反应时间、硫代乙酰胆碱的浓度进行了优化,在最优条件下对乙酰胆碱酯酶的灵敏度进行了检测,检测限为0.036U·L-1,并证明了本实验具有良好的选择性。最后,探索了抑制剂浓度与体系荧光强度的关系,并且对比了他克林和加兰他敏抑制剂的抑制效率。

铜缺乏奶牛神经递质酶的组化特征

为探讨钥缺乏对奶牛大脑、小脑及脊健乙酰胆碱醋酶（A CHEase）组化特征（分布特点氛及活性）的影响，本实验选择铜缺乏症高发区自然发病的奶犊牛6头，剖杀后采集大脑、小脑、脊髓作冰冻切片及酶组化染色，以6头同年生健康扔犊牛为对照。实验结果表明，发病奶牛大脑、小脑及脊髓中ACHEase计数值均显著低于对照组奶牛（P< 0．05）；除大脑外，铜缺乏奶牛奋健上小脑中ACHEase的扫描值也显著低于对照组（P< 0 ．05）；发病奶牛组织中ACHEase酶颖粒的分布也发生特征性的变化。结论：神经递质酶活性的改变是导致奶牛铜缺乏症病理过程的重要原因。

铜缺乏奶牛神经递质酶的组化特征

为探讨铜缺乏对奶牛大脑、小脑及脊髓乙酰胆碱酯酶(ACHEase)组化特征(分布特点及活性)的影响,本实验选择铜缺乏症高发区自然发病的奶犊牛6头,剖杀后采集大脑、小脑、脊髓作冰冻切片及酶组化染色,以6头同年生健康奶犊牛为对照。实验结果表明,发病奶牛大脑、小脑及脊髓中ACHEase 计数值均显著低于对照组奶牛(P<0.05);除大脑外,铜缺乏奶牛脊髓上小脑中ACHEase的扫描值也显著低于对照组(P<0.05);发病奶牛组织中 ACHEase 酶颗粒的分布也发生特征性的变化。结论:神经递质酶活性的改变是导致奶牛铜缺乏症病理过程的重要原因。

脑发育关键期低碘及甲状腺激素缺乏对中枢胆碱能神经元相关酶活性的影响

为研究脑发育关键期内低碘及甲状腺激素缺乏对中枢乙酰胆碱代谢酶活性的影响，对２０日龄大鼠的海马、大脑皮层、前脑基底和小脑胆碱乙酰胆碱转移酶（ＣＨＡＴ）、乙酰胆碱酯酶（ＡＣｈＥ）各亚类活性进行了测定。结果显示，低碘组和甲低组大鼠的海马、大脑皮层和前脑基底３个脑区两种酶总活性均明显低于对照水平。两个实验组的４个脑区的膜结合性ＡＣｈＥ／溶解性ＡＣｈＥ比值及“不可提取”部分乙酰胆碱酯酶活性及活性百分比均明显低于对照组；而溶解型ＡＣｈＥ活性及活性百分比高于对照组。提示，在脑发育关键期内，低碘和甲状腺激素缺乏可影响乙酰胆碱转移酶的成熟，并可干扰乙酰胆碱酯酶各分子类型之间的转化和成熟过程；

COLQ基因突变致先天性肌无力综合征1例

患者男,10岁,从1岁时开始出现波动性进展的运动后肢体无力,神经系统查体:双下肢近端肌力4级,双下肢平举小于5 s下落,单下肢平举小于10 s下落,髂腰肌肌力3级,肌张力减低。重复神经电刺激(repetitive nerve stimulation,RNS)示:低频刺激时波幅递减,四肢运动神经传导(motor conduction velocity,MCV)检查可见重复复合肌肉动作电位(repetitive compound muscle action potential,R-CMAP)。基因检测结果示COLQ基因存在c.393+1G>A和c.655G>A的杂合变异,经Sanger测序验证变异分别来自其父母,诊断为先天性肌无力综合征(congenital myasthenic syndrome,CMS)。予以沙丁胺醇治疗后,患者运动耐力较前增加。报告本例旨在增强临床医生对此疾病的认识,拓宽“肌无力”患者的诊断思路。c.655G>A错义变异既往无报告,可能是CMS的新致病位点。

丰富环境训练对低碘大鼠中枢胆碱能神经元的作用初探

对碘缺乏大鼠从生后２５天起给予丰富环境训练，然后在４０日龄时测定脑重量、蛋白质、脱氧核糖核酸（ＤＮＡ）、乙酰胆碱转移酶（ＣｈＡＴ）、乙酰胆碱酯酶（ＡＣｈＥ）各亚类。结果表明，丰富环境的后天训练对脑的基本构成、细胞数目无明显改善作用。但后天训练可促进大鼠海马、大脑皮层和小脑胆碱能神经元功能活动，尤其是突触部分得以一定程度地改善。

黄芪制剂对碘缺乏致甲状腺肿模型大鼠的氧化应激作用

目的:观察黄芪及发酵制剂对碘缺乏致甲状腺肿模型大鼠的氧化应激作用,以期选出药效最佳的黄芪制剂。方法:随机选择10只Wistar大鼠作为正常对照组,其余大鼠喂养碘缺乏饲料(碘含量约为20μg·kg^-1)90 d复制甲状腺肿大鼠模型,将成模大鼠随机分为模型对照组,黄芪提取液高剂量组、中剂量组、低剂量组(4.00 g·kg^-1、2.00 g·kg^-1、1.00 g·kg^-1),黄芪发酵提取液高剂量组、中剂量组、低剂量组(4.00 g·kg^-1、2.00 g·kg^-1、1.00 g·kg^-1),各组给予相应药物,连续给药36 d。于给药第30-35天使用Morris水迷宫检测大鼠空间学习记忆能力,末次给药后2 h比较各剂量组海马组织中乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase,AChE)活性和氨基酸(amino acid,AA)水平,血清和海马组织中与氧化应激有关的超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)、一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)活性和一氧化氮(nitric oxide,NO)水平。结果:与正常对照组比较,模型对照组大鼠训练逃避潜伏距离明显延长(P<0.01),游泳速度、目标象限停留时间和目标象限游泳距离与游泳总距离所占比均明显减少(P<0.01);海马组织内AChE活性明显降低(P<0.01),AA水平减少(P<0.05);血清和海马组织内SOD、GSH-Px活性明显降低(P<0.01),NOS活性和NO水平明显提高(P<0.01)。与模型对照组比较,两种黄芪制剂组大鼠训练逃避潜伏距离明显缩短(P<0.01或0.05),游泳速度、目标象限停留时间和目标象限游泳距离与游泳总距离所占比均不同程度地增加(P<0.01或0.05);海马组织内AChE活性明显提高(P<0.01或0.05),AA的水平增加(P<0.05);血清和海马组织内SOD、GSH-Px活性明显升高(P<0.01或0.05),NOS活性和NO水平明显降低(P<0.01或0.05),以4.00 g·kg^-1黄芪发酵组的作用最为显著。结论:黄芪发酵制剂可明显提高碘缺乏致甲状腺肿大鼠的学习记忆能力,其作用机制是通过调节脑组织内乙酰胆碱代谢以及氧化应激反应实现的。

电生理诊断先天性肌无力综合征2例报道

目的:观察先天性肌无力综合征(CMS)患者重复复合肌肉动作电位(R-CMAP)的特征,讨论其诊断意义。方法:采用低频和高频重复电刺激方法,记录肢体近端肌、远端肌和面肌的R-CMAP,观察其改变特点,并测量重复放电与主波的关系。结果:2例CMS中有特征性的R-CMAP以独立于主波和叠加于主波两种形式存在。独立的R-CMAP出现于肢体的近端肌和远端肌,与主波的时间间隔为9.2～13.4 ms;叠加的R-CMAP主要见于近端肌和面肌,与主波的潜伏期差为3.1～6.7 ms。两种R-CMAP在低频刺激时波幅均有明显的衰减。结论:R-CMAP是诊断CMS中胆碱酯酶缺乏症和慢通道综合征的重要依据。