银屑平丸联合阿维A胶囊对银屑病样小鼠模型的疗效及IL-17、IL-23的影响

目的:探讨银屑平丸联合阿维A胶囊对银屑病样小鼠模型的疗效及血清炎性因子的影响。方法:将40只BALB/c小鼠(SPF级,雌雄各半)按照完全随机原则分为空白对照组、模型组、阿维A胶囊组、银屑平丸组、阿维A胶囊+银屑平丸组(中西结合组)5组,每组8只。空白对照组小鼠每日用白凡士林涂抹背部暴露皮肤,其他各组小鼠则用5%咪喹莫特乳膏涂抹背部暴露皮肤,每日1次,连续涂抹8日。抹药同时给各组小鼠通过灌胃针进行灌胃干预,连续用药8日。实验过程中每天对每组小鼠背部皮损变化进行拍照存档。末次用药24h后,观察每组小鼠皮损变化并予以皮损面积及严重程度指数(PASI)评分,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测各组小鼠血清IL-17、IL-23的表达水平,后续剪取银屑病小鼠皮损组织予切片、HE染色以观察病理组织变化。结果:与空白对照组比较,模型组、阿维A胶囊组、银屑平丸组、中西结合组小鼠背部皮损的PASI评分均显著升高(P<0.05);与模型对照组相比,阿维A胶囊组、银屑平丸组、中西结合组小鼠背部皮损的PASI评分均显著降低(P<0.05),其中中西结合组疗效最佳(P<0.05);HE染色结果亦证实中西结合组的缓解程度最佳(P<0.05);ELISA结果显示,阿维A胶囊组、银屑平丸组、中西结合组小鼠血清IL-17、IL-23水平均显著降低,其中中西结合组效果最佳(P<0.05)。结论:银屑平丸联合阿维A胶囊可明显改善PS小鼠模型的皮损状况,均较单独使用银屑平丸或阿维A胶囊疗效更佳,其作用机制可能与抑制PS小鼠模型血清IL-17、IL-23的表达水平相关。

退银汤对银屑病样小鼠模型NE、trappin-2、P-cad表达水平的影响

目的:观察退银汤对咪喹莫特诱导的银屑病样小鼠模型中皮损组织和血清中性粒细胞蛋白酶(NE)、trappin-2、胎盘型钙黏蛋白(P-cad)等蛋白表达水平的干预作用,探讨退银汤治疗银屑病的作用机制。方法:使用5%咪喹莫特乳膏外涂小鼠背部脱毛区,制备银屑病样小鼠模型;72只小鼠随机分为正常对照组,模型对照组,退银汤低、中、高剂量组,消银颗粒组,每组12只,按照既定实验药量给各用药组灌胃给药,qd,连续14 d,正常对照组和模型对照组给予等容量的生理盐水;采用双抗体酶联免疫吸附法检测模型小鼠皮损组织及血清中NE、trappin-2、P-cad的含量。结果:模型组小鼠皮损组织及血清中NE、trappin-2、P-cad的含量均明显高于正常对照组(P<0.01);退银汤各剂量组能明显降低模型小鼠NE、trappin-2、P-cad的表达水平,与模型对照组比较均有显著性差异(P<0.05,P<0.01);退银汤中、大剂量组降低更为明显,与小剂量组比较均有显著性差异(P<0.05,P<0.01),并呈现良好的量效依赖关系;退银汤大剂量组皮损组织中的上述蛋白水平已接近正常对照组(P>0.05)。结论:退银汤能显著降低咪喹莫特诱导的银屑病样小鼠模型NE、trappin-2、P-cad等蛋白的表达水平,通过降低上述蛋白的表达水平来发挥调节免疫应答功能,可能是退银汤治疗银屑病的作用机理之一。

商陆皂苷甲降低银屑病模型小鼠Th17细胞相关细胞因子的表达

目的观察商陆皂苷甲(EsA)对银屑病小鼠17型辅助T(Th17)细胞相关细胞因子表达的影响。方法将48只雌性BALB/c小鼠随机分为空白对照组、模型组、退银汤组[66.60 g/(kg·d)]、 EsA低剂量组[5 mg/(kg·d)],EsA中剂量组[10 mg/(kg·d)],EsA高剂量组[20 mg/(kg·d)],每组8只。采用咪喹莫特乳膏诱导小鼠银屑病模型,以皮损面积和严重程度指数(PASI)评分为标准,观察银屑病样小鼠皮损的变化情况;HE染色观察皮损组织形态学变化,ELISA检测小鼠血清Th17细胞相关细胞因子白细胞介素17(IL-17)、IL-22、 IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的水平。结果与模型组相比,退银汤组、 EsA各组PASI评分降低,退银汤组与EsA高剂量组降低较明显;各用药组对银屑病样小鼠背部皮肤组织病理变化减轻;与空白对照组相比,模型组小鼠Th17细胞相关细胞因子水平显著升高,各用药组细胞因子水平明显低于模型组,其中EsA高剂量组IL-6含量接近于空白对照组。结论 EsA可能通过降低Th17细胞相关细胞因子的表达改善银屑病样小鼠皮损状况。

组织常驻记忆性T细胞与咪喹莫特诱导的银屑病样小鼠复发模型

目的探讨在咪喹莫特(IMQ)诱导的银屑病样小鼠模型中再次诱导是否可以模拟复发表型及组织常驻记忆性T细胞(TRM)的变化。方法将20只C57BL/6小鼠编号后随机等分为两组,每组10只。所有小鼠背部剃毛后,一组小鼠涂抹62.5 mg凡士林(vaseline),另一组小鼠涂抹62.5 mg的5%咪喹莫特乳膏,连续6 d。第6天处死每组小鼠中的5只小鼠(Vaseline组和IMQ组),第36天时两组剩余小鼠背部皮肤均再次涂62.5 mg咪喹莫特(Vaseline-IMQ组和IMQ-IMQ组),连续6 d后处死小鼠。每日记录小鼠背部皮损严重程度指数(PASI),取背部皮肤进行HE染色。取脾脏及皮肤获取单细胞悬液,进行流式细胞检测。结果在第6天处死时,IMQ组银屑病样皮损典型,PASI评分最高为(9.50±0.58)。在第42天处死时,再次诱导的IMQ-IMQ组PASI评分为(10.75±0.50),比单次诱导的IMQ组(P=0.03)和Vaseline-IMQ组(8.25±1.50,P<0.0001)PASI评分高,且比单次诱导的银屑病样皮损出现更快且更重。IMQ-IMQ组病理切片表皮厚度为(85.68±32.83)μm,比IMQ组(59.34±19.33)μm和Vaseline-IMQ组(52.04±11.94)μm更厚,差异均有统计学意义(P<0.0001)。IMQ-IMQ组脾脏Th17细胞比例增高为(5.17±1.94)%,高于IMQ组(3.36±0.58)%(P=0.18)和Vaseline-IMQ组(1.87±1.69)%(P=0.006)。IMQ-IMQ组小鼠背部皮肤的CD8^(+)CD103^(+)T_(RM)比例为(5.29±2.25)%,显著高于IMQ组(0.63±0.18)%(P=0.0001)和Vaseline-IMQ组(1.12±0.61)%(P=0.0004)。结论咪喹莫特诱导的银屑病样小鼠模型在间隔1个月后再次诱导,银屑病样皮损更重、反应更快、表皮增厚更多,且存在更多的Th17细胞和CD8^(+)CD103^(+)T_(RM),有可能作为银屑病研究中的小鼠复发模型。

人脐带间充质干细胞对咪喹莫特诱导的银屑病样皮炎小鼠模型的治疗作用

目的研究人脐带间充质干细胞(MSC)对咪喹莫特诱导的银屑病样皮炎小鼠模型的治疗作用及机制。方法将18只C57BL/6小鼠按随机数字表等分为凡士林组、模型组和治疗组,每组6只。小鼠背部剃毛后,模型组和治疗组小鼠背部涂抹5%咪喹莫特乳膏62.5 mg每天1次,连续6 d,凡士林组小鼠涂抹等量的凡士林软膏;治疗组小鼠在第1、4天予尾静脉注射1.5×10^(6)个MSC。根据银屑病面积和严重程度指数(PASI),每日评估小鼠背部皮损严重程度。末次涂药24 h后(第7天)取血并处死小鼠,取背部皮肤行HE染色,切取脾脏并获取单细胞悬液,流式细胞仪检测脾脏中Th1、Th17细胞亚群。酶联免疫吸附试验检测血清中细胞因子白细胞介素(IL)-17A及肿瘤坏死因子(TNF)-α水平。多组间比较采用单因素方差分析,两两多重比较采用Tukey检验,PASI评分随时间变化的数据采用重复测量的方差分析。结果第7天,模型组小鼠背部出现明显的鳞屑性红斑,皮肤厚度为(78.73±23.11)μm,凡士林组为(13.28±4.57)μm,两组比较,q=19.25,P<0.001,模型组炎性细胞浸润数亦显著增加(q=7.21,P<0.001)。治疗组小鼠PASI评分、表皮厚度、炎性细胞浸润数均显著低于模型组(均P<0.001)。治疗组小鼠脾脏Th17细胞亚群比例、血清TNF-α水平显著低于模型组(P<0.05)。治疗组与模型组之间脾脏重量、脾指数、脾脏细胞计数、Th1细胞亚群比例及血清IL-17A水平差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论人脐带MSC可减轻咪喹莫特诱导的银屑病样皮炎小鼠模型皮肤炎症,机制可能与抑制Th17细胞及TNF-α的生成有关。

抗人白介素-8鼠单抗乳膏经皮吸收治疗银屑病的研究

目的:研究抗人白细胞介素-8鼠单抗(MMA-8)乳膏的皮肤渗透性及其对银屑病样模型小鼠的治疗效果。方法:采用体外扩散池法和皮肤组织切片检测MMA-8乳膏的皮肤渗透性,并通过荧光显微成像技术进行验证。使用外涂咪喹莫特建立银屑病样小鼠模型,并评价了MMA-8乳膏治疗银屑病的药理活性。结果:体外经皮渗透实验表明,小鼠皮肤组织中MMA-8的24 h累积渗透量(Q24 h)达(110.88±24.93)ng·cm^(-2),显著高于大鼠组[(10.07±6.35)ng·cm^(-2)]和裸鼠组[(9.18±4.70)ng·cm^(-2)](P<0.01)。人体正常皮肤涂抹给药组的Q24 h分别为(11.69±3.18)ng·cm^(-2)(全皮)和(91.30±34.65)ng·cm^(-2)(去角质层皮肤),搓揉给药组分别为(46.92±23.44)ng·cm^(-2)(全皮)和(82.46±5.39)ng·cm^(-2)(去角质层皮肤)。皮肤组织切片显示MMA-8在皮肤中含量最高的位置为0~90μm(小鼠皮肤)和0~600μm(人体皮肤)。荧光显微成像结果显示药物在全皮中主要滞留在角质层,而在去角质层皮肤中到达真皮。药效学实验表明,与模型组相比,MMA-8组小鼠银屑病皮损严重程度指数评分、银屑病病理评分以及皮肤中的MIP-2含量均显著降低(P<0.01)。结论:MMA-8乳膏在全皮中主要通过毛囊经皮渗透,角质层对渗透有明显的阻碍作用。MMA-8在皮肤中滞留部位主要为表皮层和真皮层上层。MMA-8乳膏可降低银屑病样皮损处的MIP-2含量,改善小鼠皮损状态,从而起到治疗银屑病的作用。