银杏叶标准提取物EGb 761联合尿激酶对急性脑梗死早期静脉溶栓治疗的效果

目的评价银杏叶标准提取物EGb761联合尿激酶对急性脑梗死早期静脉溶栓治疗的效果及安全性。方法64例急性脑梗死患者随机分成对照组和观察组。对照组发病6h以内给予尿激酶100万u+生理盐水100mL静脉快速滴注,0.5h之内滴完。观察组:发病6h以内给予EGb76187.5mg+50g/L葡萄糖注射液100mL静脉滴注,次日重复给予EGb761一次,其他用药同对照组。评价治疗前和治疗后2,6,24h,2,4周的神经功能缺损评分和随访6个月后的日常生活活动能力。结果治疗后6,24h,2,4周时,神经功能缺损评分观察组较对照组改善,差异均有显著性(P<0.01);治疗后4周末观察组的基本痊愈率为35.3%,与对照组的13.3%比较差异有显著性(P<0.01);随访6个月观察组ADL1,2占67.6%,ADL4,5占11.8%,与对照组的46.6%及33.3%比较差异有显著性(P<0.01);两组病死率分为5.8%及10%,差异无显著性(P>0.05)。结论EGb761能增强尿激酶对早期脑梗死溶栓治疗效果,减少再闭塞,致残率低,相对安全。

银杏叶标准提取物对H_2O_2诱导PC12细胞凋亡的保护作用

目的:探讨银杏叶标准提取物EGB761对过氧化氢(H2O2)诱导大鼠肾上腺髓质嗜铬瘤细胞(PC12细胞)凋亡的保护作用及可能的机制。方法:PC12细胞常规培养生长至对数期,进行如下分组试验:正常对照组(NS),H2O2组(H2O2,200μmol/LH2O2),低剂量EGB761组(GL,10μg/mlEGB761+H2O2),中剂量EGB761组(GM,20μg/mlEGB761+H2O2),高剂量EGB761组(GH,50μg/mlEGB761+H2O2)。用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法测定PC12细胞活力;流式细胞仪测定PC12细胞凋亡率;分光光度计测定过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、总超氧化物岐化酶(T-SOD)活力和抗氧化能力(T-AOC)以及丙二醛(MDA)含量;Western blot法测定胞浆内Bcl-2、Bax以及Caspase-3的表达。结果:与正常对照组比较,H2O2组的PC12细胞的活力明显降低,细胞凋亡率显著增加(P<0.05)。与H2O2组比较,EGB761低、中、高组的PC12细胞活力显著增强,且呈剂量依赖关系(P<0.05);GM组和GH组CAT,GSH-Px,T-SOD和活性和T-AOC均显著提高(P<0.05),MDA含量显著下降(P<0.05),GL组T-SOD活力和T-AOC水平升高以及MDA含量下降(P<0.05),而CAT和GSH-Px活力无显著变化(P<0.05)。与H2O2组比较,EGB761低、中、高组PC12细胞的Bcl-2的表达量增加,Bax的表达量下降,Bcl-2/Bax的比值显著增加(P<0.05),Caspase-3的表达显著降低(P<0.05)。结论:H2O2可诱导PC12细胞凋亡,EGB761能显著抑制H2O2诱导PC12细胞凋亡并对细胞有保护作用;EGB761有较强的抗氧化能力,通过其抗氧化作用改善H2O2诱导的氧化应激状态,并能显著提高Bcl-2/Bax的比值,抑制Caspase-3的活化,发挥保护作用。

银杏叶提取物对大鼠肠缺血/再灌注后肠黏膜的保护作用及机制

目的研究银杏叶提取物(EGb761)预先给药对大鼠肠缺血/再灌注(I/R)后肠黏膜的保护效应,并观察氧自由基、bcl-2蛋白表达,探讨其作用机制。方法32只SD大鼠随机分为4组(n=8):对照组、损伤组、EGb1组、EGb 2组。监测平均动脉压(MAP),实验结束后取回肠末端组织行光镜检查,并进行肠黏膜组织Chiu’s评分,称量肠干重、湿重并计算肠含水率;检测肠黏膜组织SOD活性、MDA含量的变化,免疫组化检测bcl-2蛋白表达。结果EGb预先给药能显著升高肠I/R后的MAP,明显减轻肠黏膜组织病理损害。损伤组Chiu’s评分、肠含水率及MDA含量均显著高于对照组(P<0.01),SOD活性显著低于对照组(P<0.01),EGb能剂量依赖性地显著改善上述指标(P<0.05)。损伤组bcl-2蛋白表达显著低于对照组(P<0.01),EGb761可使bcl-2蛋白表达显著高于损伤组及对照组(P<0.01)。结论EGb761预先给药对肠I/R后肠黏膜具有保护作用,可能与其清除氧自由基、诱导bcl-2的高表达有关。

银杏叶的综合利用研究

为找出银杏叶综合利用的新工艺 ,在制备银杏叶标准提取物的同时 ,以生产过程中产生的废弃物为原料提取 β 胡萝卜素和叶绿素铜钠盐。结果 3种产品的平均得率分别为 :银杏叶标准提取物 2 .48%、β 胡萝卜素 1.0 3%、叶绿素铜钠盐0 .5 3%。该工艺简便易行 ,对降低生产成本、实现银杏叶综合利用有重要意义。

银杏制剂对一侧迷路切除后前庭内侧核超微结构影响

目的 观察豚鼠一侧迷路切除 (unilaterallabyrinthectomy,UL)后前庭功能的恢复情况 ,前庭内侧核超微结构的变化及银杏叶标准提取物 (standard extract of Gink-go biloba,EGb)金纳多对其的影响 .方法 切除豚鼠左侧迷路 ,采用自然恢复和 EGb给药两种处理 ,对比旋转后眼震与前庭内侧核超微结构变化的差别 .结果 银杏叶标准提取物能明显促进一侧迷路切除后旋转后眼震的恢复 .在超微结构方面 ,术后 1 wk,迷路切除 (UL)组与迷路切除 +金纳多 (UL+EGb)组差别不明显 ;术后 90 d,UL组可见末梢突触增多 ,突触小泡密集 ,但神经元的突触结构未见增多 ;UL+EGb组可见末梢与神经元突触结构均增多 ,突触小泡也明显增多 .结论 银杏叶标准提取物能够促进前庭动态症状的恢复 ,恢复的发生可能与前庭核区突触结构的增多。

含量测定和指纹图谱结合LC-MS技术整体评价银杏叶片的质量

建立银杏叶片合理质量控制的方法，评价市售不同厂家银杏叶片的质量。收集市售银杏叶片，采用HPLC对其进行总黄酮醇苷和萜类内酯含量测定，根据2010年版《中国药典》一部方法进行测定，2批银杏叶片总黄酮醇苷含量不合格，3批银杏叶片萜类内酯含量不合格；建立HPLC指纹图谱检测方法对其进行检测，不同厂家生产的16批银杏叶片HPLC指纹图谱标记出31个共有峰，与生成的对照指纹图谱相似度为0．763～0．989；采用LC-MS对指纹图谱色谱峰进行指认，鉴定出31个黄酮类成分。以总黄酮醇苷含量、萜类内酯含量和指纹图谱结合LC-MS技术整体评价银杏叶片的质量，为银杏叶片质量研究提供一些研究思路。

EGb761促进臂丛根性撕脱伤运动神经元功能修复的多靶点机制

【目的】研究银杏叶标准提取物(EGb761)保护创伤脊髓运动神经元的细胞机制。【方法】成年Sprague-Dawley雄性大鼠行臂丛神经根撕脱术后,随机分为:撕脱组(生理盐水治疗)和EGb761组[EGb761100mg/(kg·d)治疗]。各组动物分别存活5d,2、4、6周后处死。硝酸还原酶法检测大鼠脊髓组织NO含量和cNOS酶活力,取C7节段切片行胆碱乙酰转化酶(ChAT)、神经元型一氧化氮合酶(nNOS)免疫组化、NADPH-d酶组化和中性红活细胞染色。【结果】EGb761组与撕脱组相比:不仅降低脊髓组织NO含量(μmol/g)(2周组0.24vs0.36、4周组0.22vs0.30、6周组0.19vs0.23;P均<0.05),也降低脊髓组织cNOS酶活力(U/mg)(5d组0.047vs0.057、2周组0.13vs0.20、4周组0.065vs0.14、6周组0.061vs0.083;P均<0.05)。EGb761恢复部分损伤运动神经元的ChAT活性、EGb761降低nNOS蛋白的异位表达,NADPH表达率(%)(2周组26.0vs40.7、4周组21.7vs36.9、6周组18.2vs26.7、8周组12.6vs20.9;P均<0.05);EGb761提高损伤运动神经元的生存率(%)(5d组92.2vs87.1、2周组77.1vs71.3、4周组56.8vs49.8、6周组48.0vs43.4、8周组31.3vs22.0;P均<0.05)。【结论】EGb761可能通过多靶点干扰损伤运动神经元的基因表达、蛋白酶活性以及代谢进程,减少臂丛撕脱伤诱导的运动神经元死亡。