银杏黄酮苷元减轻多柔比星心脏毒性的作用机制

目的探究银杏黄酮苷元(GA)减轻多柔比星(DOX)心脏毒性的潜在作用机制。方法将雄性ICR小鼠随机分为对照组(CON组)、模型组(DOX组)和GA+DOX组(GDOX组),每组12只。DOX组小鼠隔天尾静脉注射DOX药液3mg/kg,GDOX组小鼠每天灌胃GA混悬液100mg/kg+隔天尾静脉注射DOX药液3mg/kg,连续15d。给药结束后,检测各组小鼠血清中天冬氨酸转氨酶(AST)、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)水平。基于代谢组学方法,采用超高效液相色谱-四极杆静电场轨道阱串联质谱技术,在主成分分析(PCA)、正交偏最小二乘-判别分析(OPLS-DA)的基础上,以变量重要性投影值≥1、峰面积差异倍数>1且P<0.05为标准筛选差异代谢物(DEMs),并基于HMDB、PubChem等数据库进行生物学分析。结果与CON组比较,DOX组小鼠血清中AST、CK、CK-MB、LDH水平均显著升高(P<0.05);与DOX组比较,GDOX组小鼠血清中上述指标(CK-MB除外)水平均显著降低(P<0.05)。PCA、OPLS-DA结果均显示,CON组、DOX组、GDOX组小鼠心脏组织样品均能完全分离。经数据库匹配后,鉴定出37个共有DEMs,其中DOX组显著上调而GDOX组显著下调的DEMs有17个,DOX组显著下调而GDOX组显著上调的DEMs有8个;涉及通路包括不饱和脂肪酸的生物合成、花生四烯酸代谢、亚油酸代谢、牛磺酸和次牛磺酸代谢,关键代谢物包括二十二碳六烯酸、花生四烯酸、磷脂酰胆碱(16∶0/18∶3)和牛磺酸。结论GA可能通过作用于二十二碳六烯酸、花生四烯酸等关键代谢物来调节不饱和脂肪酸的生物合成、花生四烯酸代谢等代谢途径,进而减轻DOX的心脏毒性。

银杏叶提取物中黄酮苷酶法转化苷元的研究

银杏叶提取物中的黄酮类化合物主要以苷形式存在,本文采用酶法水解黄酮苷中的糖基使其转化为苷元,提高抗氧化活性。银杏黄酮苷经过复合酶预处理后,黄酮苷含量仅为0.23%,再用转化酶水解可获得高含量的苷元,产品银杏苷元黄酮含量达59.65%,其中槲皮素占总黄酮苷元的24.87%,山奈酚占30.18%,异鼠李素占4.60%。

不同生长季节银杏叶中总黄酮醇苷和总内酯的含量变化

目的比较不同生长季节银杏叶中总黄酮醇苷和总内酯的含量。方法采用HPLC法对样品中总黄酮醇苷和总内酯进行定量分析。结果5月份总黄酮醇苷含量最高,9月份后含量有所降低,12月份含量最低;总内酯含量以6月份为最高,8月份含量开始显著下降,12月份含量最低。结论不同季节银杏叶中总黄酮醇苷和总内酯含量差异较大,此结果为适时采收、合理开发利用银杏叶提供依据。

银杏黄酮苷与复方丹参片对冠心病心绞痛患者心电图、心功能、血液流变学的影响对比分析

目的:对比分析银杏黄酮苷与复方丹参片对冠心病心绞痛患者心电图、心功能、血液流变学的影响。方法:对我院在2015年1月至2016年12月期间新疆医科大学第六附属医院收治的冠心病心绞痛患者88例的临床治疗进行回顾性分析。采用随机抽样的方式将患者分成观察组与对照组,每组44例。对照组患者予以复方丹参片治疗,观察组患者予以银杏黄酮苷治疗,2组患者共治疗1个月,观察2组患者治疗前后心电图、心功能、血液流变学改善情况以及有无发生不良反应情况。结果:治疗后观察组患者一般症状改善总有效率、心绞痛疗效、心电图疗效均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗前2组患者心功能各指标比较差异无统计学意义(P>0.05),治疗后心功能各指标均有改善情况,但观察组患者改善情况明显优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗前2组患者全血低切黏度、全血高切黏度、血浆高切黏度、红细胞压积、红细胞聚集指数比较差异无统计学意义(P>0.05),治疗后2组患者全血低切黏度、全血高切黏度、血浆高切黏度、红细胞压积、红细胞聚集指数值均有改善,但观察组患者改善程度明显大于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);2组患者治疗期间未发生明显不适情况。结论:银杏黄酮苷治疗冠心病心绞痛的临床疗效明显优于复方丹参片,并且安全性高,更适合临床应用。

大孔树脂分离纯化银杏黄酮苷元的研究

以银杏提取物的酶水解液为实验材料,研究大孔吸附树脂分离纯化其中的银杏黄酮苷元的工艺。通过静态吸附-解吸和吸附动力学实验,从3种大孔吸附树脂中筛选出非极性YWD07a为最适合分离纯化银杏黄酮苷元的树脂。YWD07a树脂吸附分离银杏黄酮苷元的最佳工艺条件为:吸附:银杏黄酮苷元的浓度3.26 mg/mL,pH 5.0,流速2 BV/h;解吸:洗脱体积6BV,流速3.0 BV/h,乙醇浓度70%。在最优条件下得到的银杏黄酮苷元产品中银杏黄酮苷元含量由18.5%提高到80.5%,回收率为73.6%。

银杏黄酮苷治疗早产儿缺氧缺血性脑病

目的 观察银杏黄酮苷对治疗早产儿缺氧缺血性脑病（HIE）的疗效、安全性及心肌酶学的影响。方法 将符合诊断标准HIE患儿59例，随机分为治疗组30例，对照组29例。治疗组予常规治疗＋10％葡萄糖注射液30mL＋银杏黄酮苷6mg／kg静滴。1疗程／7d，用2～3个疗程。观察新生儿行为神经评分（NBNA）、脑CT及血清酶变化。结果 治疗组疗效、治疗后心肌酶及NBNA改善明显优于对照组。结论 银杏黄酮苷治疗早产儿HIE疗效好，无不良反应。

银杏黄酮苷元的平衡溶解度和表观油水分配系数的测定

目的测定银杏黄酮苷元中3种黄酮苷元的平衡溶解度和表观油水分配系数。方法采用饱和溶液法和摇瓶法,分别测定银杏黄酮苷元的平衡溶解度和表观油水分配系数,采用高效液相色谱法测定样品溶液的浓度。结果 25℃时,3种黄酮苷元的平衡溶解度均较小,其中槲皮素和山柰素在水中的平衡溶解度均为最大值,三者平衡溶解度分别为17.16,32.48和1.13μg.ml-1,槲皮素和山柰素的平衡溶解度受溶剂pH影响较大,而异鼠李素的平衡溶解度受溶剂pH影响较小;3种黄酮苷元在不同的pH溶剂中各自的Log P差别不大,pH对3种黄酮苷元的油水分配系数影响不显著,其中槲皮素和山柰素的油水分配系数均较大。结论银杏黄酮苷元为典型的疏水性药物。

银杏黄酮苷元对氧化型低密度脂蛋白诱导的人主动脉内皮细胞氧化损伤的影响

目的观察银杏黄酮苷元(Ginkgo flavone aglycone,GA)对氧化型低密度脂蛋白(oxidized low-den-sity lipoprotein,ox-LDL)诱导的人主动脉内皮细胞(human aortic endothelial cells,HAECs)氧化应激损伤的保护作用及其机制。方法体外培养HAECs,分为6组,即空白对照组、ox-LDL组、VitE组以及GA30、60、90mg/L组。除空白对照组外,其余5组均加入ox-LDL150mg/L复制氧化损伤模型;GA30、60、90mg/L组分别给予相应剂量GA干预;VitE组给予VitE200μmol/L干预。采用MTT法检测细胞存活率;CM-H2DCFDA荧光探针测定细胞内活性氧(ROS)含量;酶联免疫吸附法检测NADPH氧化酶含量;硫代巴比妥酸法检测丙二醛(MDA)水平;Griess reagent法测定一氧化氮(NO)含量;黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶(SOD)的含量。结果与空白对照组(100.00%)比较,ox-LDL组(70.68%)细胞存活率明显降低(P<0.05);VitE组、GA30mg/L组、GA60mg/L组细胞存活率分别为88.95%、83.25%、94.93%,均明显高于ox-LDL组(P<0.05),以60mg/L GA作用更强。与空白对照组比较,ox-LDL组细胞内ROS、MDA及NADPH氧化酶水平增加,NO含量及SOD活性降低,差异均有统计学意义(P<0.05);与ox-LDL组比较,GA30mg/L组、GA60mg/L组及VitE组细胞内ROS、MDA及NADPH氧化酶水平降低,NO含量及SOD活性增加,差异均有统计学意义(P<0.05),以60mg/L GA作用更强。结论 GA可明显抑制ox-LDL诱导的ROS合成,降低MDA水平,升高NO。其作用机制可能与SOD活性增加及NADPH氧化酶活性降低有关。

银杏黄酮苷元对小鼠脑缺血模型和鹌鹑动脉粥样硬化模型的影响

目的研究银杏黄酮苷元(GFA)抗脑缺血、动脉粥样硬化形成及降血脂的药理学活性。方法通过夹闭小鼠双侧颈总动脉复制脑缺血模型和高脂饲料饲喂鹌鹑复制动脉粥样硬化模型,检测GFA对小鼠喘息时间、脑组织含水量、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和一氧化氮(NO)含量变化以及鹌鹑动脉粥样硬化进程中脂斑块形成和血脂[总胆固醇(TC)、甘油三脂(TG)、高密度脂蛋白(HDL)和低密度脂蛋白(LDL)]水平变化的影响。结果 GFA可延长小鼠夹闭双侧颈总动脉后喘息时间,降低脑含水量,减少MDA和NO的生成,提高SOD的活力(P<0.05,P<0.01);并且200 mg·kg-1 GFA预防组和中剂量组可降低动脉粥样硬化脂斑块发生率(P<0.05,P<0.01),100 mg·kg-1 GFA组TC、LDL含量降低(P<0.05)。结论 GFA对脑缺血和动脉粥样硬化具有较好的防治作用,为GFA防治心脑血管疾病提供了实验数据。

银杏黄酮苷治疗血管性痴呆43例

目的 :观察银杏黄酮苷治疗血管性痴呆的疗效及安全性。方法 :治疗组 43例 ,给予银杏黄酮苷 70mg ,加入 0 .9%氯化钠溶液 3 0 0mL ,静脉滴注 ,qd ,15d为 1个疗程 ,然后口服银杏黄酮苷 80mg,tid ,连用 75d。对照组 43例 ,给予吡拉西坦注射液 0 .8g加入 0 .9%氯化钠注射液 3 0 0mL ,静脉滴注 ,qd ,15d为 1个疗程 ,然后口服吡拉西坦 0 .8g ,tid ,连服 75d。 3个月后两组再重复静脉用药 (同剂量 ,同疗程 ) ,两组疗程均为 6个月。结果 :治疗 3和 6个月后 ,治疗组MMSE评分明显优于对照组 (P <0 .0 1) ,社会功能活动量表 (FAQ)评分治疗 6个月后明显优于对照组 (P <0 .0 1)。结论 :银杏黄酮苷能持续改善血管性痴呆患者的认知及社会功能 ,能延缓痴呆的发展 。

HPLC测定银杏叶片中总黄酮醇苷和萜类内酯的含量

目的测定银杏叶片中总黄酮醇苷和银杏萜类内酯的含量。方法采用HPLC法,色谱柱为YMC-Pack ODS-A(150mm×6.0 mm含量,5μm);流动相分别为甲醇-0.4%磷酸溶液(55:45)、水-甲醇-四氢呋喃(75:25:12);流速1.0 m.lmin-1;检测波长360 nm;进样量10μl。结果槲皮素、山柰素和异鼠李素等3种黄酮苷元、白果内酯及银杏内酯A、B、C等4种银杏萜类内酯均能得到良好分离,标准曲线线性关系良好。结论所建方法准确、灵敏、稳定、可靠,可满足定量分析的需要。

银杏黄酮苷提取方法的研究

采用正丁醇萃取水溶液中银杏黄酮苷,研究萃取时间、萃取温度、萃取次数对萃取效果的影响,并对银杏黄酮苷的检测方法做了改进,获得最佳萃取条件为萃取时间5min,萃取温度60℃,萃取次数4次,在此条件下萃取物中黄酮苷的含量为57%,收率为77%。

银杏叶黄酮苷对副猪嗜血杆菌5型灭活疫苗免疫效力的影响研究

为探讨银杏叶黄酮苷提高仔猪免疫力的效果,本试验选用银杏叶黄酮苷与副猪嗜血杆菌本地分离株血清5型灭活疫苗混合,研制副猪嗜血杆菌银杏叶黄酮苷佐剂疫苗。分别以不同浓度首免15日龄仔猪,21日龄二免,二免后1周,对免疫仔猪用本地分离副猪嗜血杆菌血清5型强毒株进行攻毒,并于28、35、42日龄时采血检测仔猪血清中TFN-α含量,在28、35日龄时流式细胞仪检测外周血中CD4^+、CD8^+含量并计算CD4^+/CD8^+比值。结果表明,疫苗中加入1.4 mg/m L银杏叶黄酮苷,对5型强毒株的攻毒保护率为100%,对外周血CD4^+/CD8^+T淋巴细胞亚群的比例以及血清TFN-α的含量均有一定提高,说明银杏叶黄酮苷对副猪嗜血杆菌灭活疫苗具有明显的免疫促进作用。

银杏黄酮苷与复方丹参片治疗冠心病心绞痛疗效比较

目的 :比较银杏黄酮苷 (舒血宁片 )与复方丹参片治疗冠心病心绞痛的疗效。方法 :68例冠心病心绞痛患者随机分为 ,治疗组 3 8例 ,口服银杏黄酮苷 2片 ,tid ;对照组 3 0例 ,口服复方丹参片 3片 ,tid。两组疗程均为 4周 ,治疗前后观察临床症状、心电图、心功能、血液流变学、硝酸甘油用量及不良反应。结果 :治疗组在临床症状及心电图、心功能及血液流变学的改善、硝酸甘油停减率方面均优于对照组 (P <0 .0 5 ) ,无明显不良反应。结论 :银杏黄酮苷治疗心绞痛安全有效 ,优于复方丹参片。

银杏黄酮苷对实验性糖尿病大鼠肾脏保护作用的研究

目的:探讨银杏黄酮苷对糖尿病大鼠肾脏保护作用及其机制。方法:选择雄性SD大鼠24只,随机分为三 组,每组8只,即正常对照组(N组),糖尿病组(DM组),银杏黄酮苷治疗组(DG组)。DM、DG组腹腔注射链脲佐菌素 (STZ)制模成功后,DG组给予银杏黄酮苷灌胃,10周后观察各组血糖、血浆内皮素-1(ET-1)、24h尿白蛋白排泄率、肾 重等指标。用免疫组化方法观察肾脏基质金属蛋白酶-3(MMPs-3)、纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)的表达及肾脏 的病理形态学改变。结果:与DM相比,DG组ET-1、尿白蛋白排泄率降低(P<0.05,P<0.01),肾脏肥大指数DG明显 降低(P<0.05);肾组织PAI-1表达DG组低于DM组(P<0.01),MMPs-3DG组则高于N组及DM组(P<0.01)。结 论:STZ诱导的糖尿病大鼠存在纤溶系统功能紊乱、内皮细胞受损及与之平行的尿蛋白排泄率、ET-1的增加,PAI-1表达 增强、MMPs-3表达下调。应用银杏黄酮苷干预治疗,可以降低尿白蛋白排泄率、减少内皮素释放,使PAI-1的表达下 调,MMPs-3的表达上调,对糖尿病大鼠肾脏有部分保护作用。

HPLC法快速测定银杏叶中银杏总黄酮醇苷含量

目的建立银杏叶中特征性成分总黄酮醇苷的快速含量分析方法,比较不同的采集地总黄酮醇苷含量差异。方法采用Alltima C18色谱柱(5μm,4.6×150mm);流动相为甲醇-0.4%磷酸(50∶50);检测波长为360nm;流速为1.0mL/min;柱温为30℃。结果Q在0.06～0.60μg范围内线性关系良好(r=0.9998);K在0.06～0.06μg范围内线性关系良好(r=0.9998);I在0.04～0.40μg范围内线性关系良好(r=0.9999)。平均加样回收率为97.6%(n=6),RSD为1.22%,银杏总黄酮醇苷的含量为0.4857%～0.8869%。结论不同产地银杏叶中总黄酮醇苷含量差异较大,该方法准确、简便,重现性好,为银杏叶质量评价提供简便快捷的方法。

银杏黄酮苷元干预兔颈总动脉损伤后内膜增生及血凝素样氧化低密度脂蛋白受体1的表达

背景:银杏叶提取物中的黄酮苷元具有较强的抗氧化活性,课题组前期实验证实可抑制氧化低密度脂蛋白诱导内皮细胞表达血凝素样氧化低密度脂蛋白受体1。目的:进一步探讨银杏黄酮苷元对兔颈总动脉内皮损伤后内膜增生和血凝素样氧化低密度脂蛋白受体1表达的影响。方法:将雄性新西兰大白兔随机分为对照组、假手术组、模型组和治疗组。对照组予普通饲料,其余各组予高脂饮食,假手术组仅作颈外动脉结扎,模型组和治疗组均球囊损伤右颈总动脉,治疗组损伤后用银杏黄酮苷元灌胃。4周后检测各组血脂水平,观察各组右颈总动脉形态,用免疫组织化学法和RT-PCR检测血凝素样氧化低密度脂蛋白受体1蛋白和mRNA表达。结果与结论:模型组术后4周内膜增生明显,有粥样斑块形成,血凝素样氧化低密度脂蛋白受体1表达明显增加(P<0.05)。治疗组银杏黄酮苷元灌胃4周后内膜增生较轻,内膜面积,血凝素样氧化低密度脂蛋白受体1阳性细胞数和其基因表达水平均低于模型组(P<0.05),但血脂与模型组比较无差异。提示银杏黄酮苷元可减轻新生内膜增生及动脉粥样硬化病粥样斑块的形成,这种作用可能与抑制兔颈总动脉内皮损伤后血凝素样氧化低密度脂蛋白受体1的表达有关。

银杏黄酮苷调控CIRI大鼠神经营养素信号通路的抗感染免疫机制

目的借助网络药理学手段,预测银杏黄酮苷治疗缺血性中风的可能作用靶点,并进行GO分析和KEGG通路分析,选择富集显著性强、排名靠前的通路,通过动物实验的方式进行验证分析,阐述银杏黄酮苷通过调控脑缺血再灌注损伤(cerebral ischemia-reperfusion injury,CIRI)大鼠神经营养素信号通路发挥抗炎等脑保护作用的机制。方法选用SPF级SD大鼠75只,随机分为假手术组(15只)和造模组(60只)。然后采用线栓法复制CIRI模型并评价,再将造模组随机分为模型对照组、银杏黄酮苷组、阳性对照组,分别给予相应的干预因素进行干预,观察各组大鼠神经功能缺损评分;血清IL-1β、IL-6、TNF-α含量;缺血半暗带脑组织中NGF、BDNF及Pan-Trk、p-Trk、PI3K、Akt、p-Akt、IκB的表达水平。结果共获取227个银杏素可能作用的靶点,脑梗死的疾病靶点24450个;二者交集靶点81个。与假手术组比较,其余各组大鼠神经功能缺损评分、血清中IL-1β、IL-6、TNF-α含量及缺血半暗带脑组织中NF-κB、p-NF-κB的表达水平显著升高(P<0.01),而Pan-Trk、p-Trk、PI3K、Akt、p-Akt、IκB的表达水平显著降低(P<0.01);与模型对照组比较,2干预组大鼠神经功能缺损评分、血清中IL-1β、IL-6、TNF-α含量及缺血半暗带脑组织中NF-κB、p-NF-κB的表达水平显著降低(P<0.05),而Pan-Trk、p-Trk、PI3K、Akt、p-Akt、IκB的表达水平显著升高(P<0.01)。结论银杏黄酮苷的抗炎作用可能是通过活化神经营养素信号通路,进而激活PI3K/Akt信号通路,抑制NF-κB的表达和磷酸化水平而实现的。

胶束增敏荧光法测定银杏叶片剂中总黄酮醇苷

以槲皮素为对照品用荧光法测定药物银杏叶片制剂中总黄酮醇苷的含量。实验表明：Al（Ⅲ）与槲皮素作用可产生强的荧光,加入十二烷基硫酸钠（SDS）后,荧光强度进一步增强。槲皮素在0.068～6.76μg/ml范围内与其荧光强度呈良好的线性关系,其线性回归方程为Y=5.8658X＋5.3925,相关系数r=0.9936,检出限为0.036μg/ml。本方法用于银杏叶片制剂中总黄酮醇苷含量的测定,其回收率为99.2%～100.8%,结果较为理想。