银杏叶中黄酮和萜类内酯分离工艺条件优化

用闪式硅胶柱层析分离纯化银杏叶中有效成分黄酮醇苷和萜类内酯工艺条件的优选。用不同极性溶剂(乙醚、乙酸乙酯、丙酮、乙醇)对加样品后的闪式硅胶层析柱进行洗脱,收集洗脱液,采用高效液相色谱法分别测定每份洗脱液中黄酮醇苷和萜类内酯的含量,从而筛选出应用闪式硅胶柱层析时,最佳的洗脱液种类和用量为:萜类内酯用3倍床体积的乙酸乙酯洗脱,黄酮醇苷用4倍床体积的丙酮洗脱即得。

闪式硅胶柱层析法分离银杏黄酮和萜类内酯的工艺研究

目的研究银杏叶提取物中总黄酮醇苷和萜类内酯的分离纯化方法。方法采用闪式硅胶柱层析分离法,用不同极性的有机溶剂洗脱并跟踪检测,筛选出能有效分离银杏叶提取物中的银杏黄酮和萜类内酯的洗脱剂及用量。结果此方法可以很好地将银杏黄酮和萜类内酯分离,并且分离过程含量损失极小。结论此方法为银杏黄酮和萜类内酯的进一步单独纯化提供了一种新途径。

银杏萜内酯的分离、纯化和结构鉴定

目的 :研究银杏 (GinkgobilobaL .)叶中的萜内酯类成分。方法 :95 %乙醇提取 ,索氏提取分段 ,硅胶柱层析得到总内酯 ,再用制备型RP HPLC方法得到纯化合物 ,用IR、1HNMR、13 CNMR ,尤其是通过 2DNMR光谱技术确定化合物结构。结果 :分得 6个萜内酯类成分 ,分别为白果内酯 (Ⅰ )、银杏内酯A(Ⅱ )、银杏内酯B(Ⅲ )、银杏内酯C(Ⅳ )、银杏内酯J(Ⅴ )和银杏内酯K(Ⅵ )。结论 :其中化合物Ⅵ为新化合物 ,并通过 2DNMR光谱技术对所分得的银杏内酯类化合物的碳氢信号进行了确切归属。银杏内酯K在 10 -6～ 10 -5mol/L的终浓度下 ,可对 2× 10 -7mol/LPAF刺激的中性粒细胞β 葡萄糖酸苷酶的释放有明显的抑制作用。

银杏黄酮苷和萜类内酯含量的季节变化

以银杏 (GinkgobilobaL .) 2年生实生苗和大树为试材 ,分析根、茎和叶中银杏黄酮苷及萜类内酯含量的季节变化规律。银杏叶中萜类内酯含量从春季起逐渐增加 ,至夏末秋初达最高值 ,随后逐渐减少 ;根和茎中萜类内酯含量的季节变化与叶中相类似 ,但在冬季休眠期维持较高含量 ,进入春季伴随叶的萌发生长降低到全年的最低点。银杏茎中萜类内酯含量最低 ,相当于叶含量的 1/3和根含量的 1/2。叶中白果内酯含量在总萜类内酯中所占比例较高 ,而在根和茎中所占比例则较低。随着树龄增加 ,银杏叶萜类内酯含量下降 ,这可能与萜类内酯合成能力下降有关。银杏黄酮苷含量在春季幼叶中最高 ,夏季和秋季相对较低且变化不明显 ;长枝叶中槲皮素较多 ,而短枝叶中山柰黄素较多。

银杏叶中萜类内酯含量与生长季节及植株性别的相关性研究(简报)

目的：比较了白矾、白矾炮制中药及其水煎剂中的铝含量，以及在小鼠血、脑内的分布。方法：用铬天菁显色法测定了白矾、白矾炮制中药及其水煎剂中铝含量，用原子吸收分光光度法测血、脑铝含量。结果：白矾中的铝含量与白矾炮制中药及其水煎剂相比都是最高的；各药按照铝含量相同的剂量给药后，小鼠血、脑内的铝分布情况相似。结论：白矾、白矾炮制中药中的铝在小鼠血、脑中的分布与给铝量有关。

高温和干旱对银杏光合作用、叶片中黄酮苷和萜类内酯含量的影响

为了探讨高温和干旱的相互作用对银杏(Ginkgobiloba)生长及叶内次生代谢物的影响,设干旱、高温(夜间30℃)和干旱+高温3个处理,测定了2年生银杏幼苗的生长指标、光合特性、叶片水势、气孔导度以及叶内黄酮苷和萜类内酯的含量。与对照(未经干旱或高温处理)相比,高温引起银杏叶片最大净光合速率降低,气孔导度和光补偿点增加;干旱处理后,银杏最大净光合速率、气孔导度和叶片水势均降低,但光补偿点以及叶片黄酮苷和萜类内酯含量增加,表观量子产量变化不明显。高温和干旱共同作用下,银杏光补偿点和呼吸速率增高,光饱和点显著降低,根冠干重比无统计学上显著变化,但总干重降低。上述结果说明干旱和高温降低了银杏对光的适应范围,银杏光能利用效率变低,气孔导度下降,最大净光合速率降低,呼吸作用增强,抑制了生长;干旱引起黄酮苷和萜类内酯含量增加的幅度大于高温。

银杏叶提取物及制剂萜类内酯薄层色谱荧光扫描定量测定研究

建立了采用优化条件展开的薄层色谱进行热化学衍生荧光，原位薄层定量，同板同时测定银杏内酯Ａ，Ｂ，Ｃ及白果内酯，最低检出限分别为０．１２～０．３５μｇ。灵敏度分别为０．２５～０．５μｇ，较ＨＰＬＣ示差折光检测器提高约１０倍，分析时效比提高６倍以上，精密度同板ＲＳＤ２％～３％，异板ＲＳＤ２．３％～３．７％，回收率９５．３％～９８．８％。

闪式提取银杏叶中萜类内酯的工艺研究

目的研究用闪式提取器从银杏叶中提取银杏萜类内酯的工艺。方法用正交实验进行提取方法的研究,用高效液相色谱(HPLC)法测定银杏内酯的含量,流动相为甲醇-水(30∶70),流速为0.8 ml/min,用蒸发光散射检测器,柱温为30℃。结果闪式提取银杏叶萜类内酯的合适工艺为:植物粒径50目,提取时间5 min,乙醇浓度60%,液固比20∶1,此条件下萜类内酯提取率平均值可达1.712 mg/g。结论闪式提取是一种有效的提取银杏萜类内酯的方法。

微波辅助提取银杏叶萜类内酯的工艺研究

研究了微波辅助提取银杏叶萜类内酯的工艺。对辐射时间、微波功率、乙醇浓度和液固比进行单因素考察,根据考察结果进行正交实验设计,然后进行验证实验,并将该工艺条件与传统加热回流提取方式进行比较。结果表明,微波辅助提取银杏叶萜类内酯的较佳工艺为:辐射时间为8min,微波功率为500W,乙醇浓度为70%,液固比为20:1,此条件下萜类内酯提取率可达1.620mg·g-1。与传统加热回流提取相比,微波辅助提取得到的萜类内酯提取率高出31%,溶剂用量减少33%,提取时间大大缩短。该方法是一种较为理想的银杏叶萜类内酯提取方法。

光强与光质对银杏光合作用及黄酮苷与萜类内酯含量的影响

对 2年生银杏 (GinkgobilobaL .)苗进行遮荫和光膜处理 ,测定光合速率及碳水化合物、银杏黄酮苷与萜类内酯的含量。光合速率在自然光下测定时从大到小依次为 :黄膜 >蓝膜和红膜 >绿膜 >紫膜和白膜 ,在光膜下测定时为 :黄膜 >红膜 >蓝膜、紫膜和白膜 >绿膜。光强和光质对碳水化合物含量有显著影响。光质对萜类内酯的生物合成和积累有影响 ,紫膜处理的银杏萜类内酯含量最高 ,为 3 89mg/g,比白膜 (对照 )高 85 2 3% ,其次是绿膜 ,为2 80mg/g。覆膜和遮荫显著减少银杏黄酮苷含量 。

HPLC-ELSD法测定银杏叶软胶囊中萜类内酯的含量

目的测定银杏叶软胶囊中萜类内酯的含量。方法采用高效液相色谱法蒸发光散射检测器(HPLCELSD)测定银杏叶软胶囊中萜类内酯的含量。色谱条件为汉邦LichrosperC18柱,4.6mm×150mm;正丙醇四氢呋喃水(1∶15∶84)为流动相;蒸发光散射检测器检测参数漂移管温度115℃;氮气流速3.5L·min-1。结果该方法简便易行,银杏叶软胶囊中基质对萜类内酯的测定无干扰,线形关系良好;萜类内酯的重现性试验RSD为1.04;平均加样回收率为97.1。结论本方法可作为银杏叶软胶囊中萜类内酯成分质量控制的一种有效方法。

HPLC-ELSD法测定银杏叶中的4种萜类内酯含量

目的 :用高效液相色谱 -蒸发光散射检测法 (HPLC -ELSD)直接测定银杏叶中银杏萜类内酯A、B、C及白果内酯的含量。方法 :银杏叶 10 %甲醇提取液通过聚酰胺及硅胶小柱联用净化制成供试品溶液 ,经C1 8色谱柱 ,以甲醇 -水为流动相 ,梯度洗脱 ,以蒸发光检测器检测。结果 :银杏叶供试品溶液的预处理是获得准确测定结果的关键 ,多点校正 ,自然对数换算以弥补ELSD线性应答差的不足。结论 :测定不同产地、不同树龄、不同采收季节的银杏叶中萜类内酯含量 ,对从源头抓好原料质量有积极意义。

大孔吸附树脂法同时纯化银杏叶中黄酮苷和萜类内酯

目的探讨大孔吸附树脂同时纯化银杏叶黄酮苷和萜类内酯的工艺条件。方法对D101、X-5、S-8、D4020、HP-20、AB-8 6种大孔吸附树脂进行筛选,然后对最佳上样量、除杂洗脱条件、洗脱剂乙醇体积分数及洗脱剂用量等因素进行了优化。结果 D101型大孔树脂分离纯化效果最佳。优化工艺条件为:上样液生药质量与树脂质量比为1∶1,20%(体积分数)乙醇作为除杂溶剂,洗脱体积为5 BV,60%(体积分数)乙醇作为洗脱液,洗脱体积为4 BV。纯化物中黄酮苷和萜类内酯平均质量分数分别为24.93%和7.36%。结论 D101大孔吸附树脂对银杏叶黄酮苷和萜类内酯的综合吸附性能较好,适用于银杏叶提取物的分离纯化。

不同厂家银杏达莫注射液中萜类内酯测定

目的对3家企业生产的银杏达莫注射液中的萜类内酯进行定量测定,为进一步提高药品质量提供科学依据。方法药品经前处理后采用HPLC-ELSD法进行分析,采用色谱柱Welch C18(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相甲醇-异丙醇-水(9∶7.5∶83.5);体积流量1 mL/min;柱温35℃;检测器条件气体体积流量3.0 L/min;漂移管温度105℃。结果3家企业生产的银杏达莫注射液中均含有萜类内酯,所测样品中萜类内酯的质量浓度介于0.30～0.80 mg/mL之间。结论本方法专属性强、分析准确、稳定、重复性好,可用于银杏达莫注射液中萜类内酯的定量测定。

银杏叶与银杏叶提取物及其片剂中萜类内酯薄层色谱分析

目的研究银杏叶与银杏叶提取物及银杏叶片中萜类内酯薄层色谱鉴别。方法以银杏叶提取物、白果内酯、银杏内酯A、银杏内酯B及银杏内酯C为对象,研究温度对其薄层色谱的影响。结果温度无显著影响。结论该薄层色谱鉴别法可在室温下进行。

HPLC测定银杏叶片中总黄酮醇苷和萜类内酯的含量

目的测定银杏叶片中总黄酮醇苷和银杏萜类内酯的含量。方法采用HPLC法,色谱柱为YMC-Pack ODS-A(150mm×6.0 mm含量,5μm);流动相分别为甲醇-0.4%磷酸溶液(55:45)、水-甲醇-四氢呋喃(75:25:12);流速1.0 m.lmin-1;检测波长360 nm;进样量10μl。结果槲皮素、山柰素和异鼠李素等3种黄酮苷元、白果内酯及银杏内酯A、B、C等4种银杏萜类内酯均能得到良好分离,标准曲线线性关系良好。结论所建方法准确、灵敏、稳定、可靠,可满足定量分析的需要。

HPLC-ELSD法测定银杏叶分散片中萜类内酯的溶出度

目的:建立测定银杏叶分散片中萜类内酯的溶出度测定方法。方法:用HPLC-ELSD法测定溶出液中萜类内酯的含量,用Hypersil ODS C18柱(200 mm×4．6 mm,5μm),正丙醇-四氢呋喃-水(1:15:84)为流动相,流速1．0 ml·min-1,用ELSD检测,溶出度测定方法用《中国药典》2005年版二部附录XC第三法,以0．1 mol·L-1盐酸溶液为溶剂。结果:白果内酯、银杏内酯A、银杏内酯B及银杏内酯C的线性范围分别为0．92-3．66,0．51-2．04,0．52-2．08μg和0．45-1．78μg,平均回收率分别为100．1％(RSD 0．7％),97．7％(RSD为1．1％),97．6％(RSD为1．1％),101．0％(RSD0．9％)。3批样品溶出度(限度)分别为97％,96％和98％％。结论:该方法简便、重复性好,可作为银杏分散片中萜类内酯的溶出度的测定。

高效液相色谱法快速测定银杏叶提取物中的萜类内酯(英文)

建立了液 液萃取后高效液相色谱法 (HPLC)测定银杏叶提取物 (EGb)中萜类内酯含量的快速方法。EGb样品溶于体积分数为 30 %的乙醇溶液后用乙醚萃取 ,有机相浓缩后的残留物以HPLC分析 ,组分的分离采用C1 8柱 ,以甲醇 水 磷酸 (体积比为 2 5∶75∶0 .1 )为流动相 ,示差检测器检测。结果表明 ,样品净化程序较已报道的方法更简便 ,选择性强、快速 (少于 2 0min)。该方法回收率大于 99.0 %、相对标准偏差小于 2 .0 %、重现性好 ,可有效地用于银杏叶提取物的产品质量评价。

施肥与干旱胁迫对银杏生长及黄酮苷和萜类内酯含量的影响

对银杏实生苗接种VAM真菌,叶面喷施N、P肥及干旱胁迫处理,测定银杏生长及黄酮苷和萜类内酯含量的变化,试验结果表明:增施N、P肥能显著改善银杏植株N、P供应,增加银杏苗叶量和干重,显著提高银杏叶萜类内酯含量,而对银杏黄酮苷含量影响较小;干旱胁迫降低银杏叶水势和萜类内酯含量,对银杏黄酮苷含量没有影响,接种VAM真菌能减轻干旱胁迫的负影响,显著提高银杏萜类内酯含量。

超高效液相色谱串联四级杆/静电场轨道阱高分辨质谱同时测定含银杏叶提取物保健食品中的萜类内酯和黄酮醇类成分

目的运用超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱(ultra performance liquid chromatography-quadrupole/electrostatic field orbitrap high resolution mass spectrometry,UPLC-Q/OrbitrapHRMS),建立同时鉴别和定量测定含银杏叶提取物保健食品中的5种萜类内酯和3种黄酮醇类成分的分析方法。方法样品用80%甲醇水溶液提取,Acquity UPLC BEH C_(18)(50 mm×2.1 mm,1.7μm)色谱柱分离,以甲醇和0.1%甲酸溶液作为流动相进行梯度洗脱,电喷雾负离子模式离子化,全扫描模式检测。结果槲皮素、山奈酚、异鼠李素、银杏内酯B、银杏内酯C、银杏内酯K和白果内酯在25~400μg/L范围内线性关系良好(r≥0.995),银杏内酯A在50~800μg/L范围内线性关系良好(r≥0.995)。8种成分的检出限在2~50 ng/g,定量限在8~150 ng/g之间。8种成分在含银杏叶提取物保健食品中均有较好的回收率和稳定性。结论该方法简便快速、灵敏准确,适合于含银杏叶提取物保健食品中的萜类内酯和黄酮醇类成分的鉴别和定量测定。