利用AFLP-银染法筛选与抗甘蓝黑腐病性状连锁的分子标记

利用ＡＦＬＰ－银染法在一对花椰菜抗、感黑腐病的近等基因系中筛选到四个与抗黑腐病性状、一个与感黑腐病性状连锁的ＤＮＡ 分子标记．对其中一个４００ｂｐ 的抗病标记进行Ｓｏｕｔｈｅｒｎ 杂交检测，结果表明该标记在抗病品系中存在明显的杂交信号，而在感病品系中无杂交信号．该标记测序后，通过Ｇｅｎｂａｎｋ 进行同源性检测，发现其与拟南芥菜ＢＡＣ克隆Ｆ７Ｎ２２ 部分序列有７５％ 的同源性．该ＢＡＣ克隆位于拟南芥菜５ 号染色体的黑腐病抗性基因（ｒｘｃ２）附近．这意味着该标记可能与甘蓝黑腐病抗性基因紧密连锁．

银染法观察葡萄球菌生物被膜

[目的]探讨银染法观察葡萄球菌生物被膜方法的可靠性。[方法]建立细菌生物被膜,分别用银染法和扫描电镜进行观察。[结果]银染后普通光学显微镜观察和扫描电镜观察生物被膜的结果完全相符。[结论]用银染法观察细菌生物被膜的变化方便、可靠。

畜禽微卫星多态性的银染法显色

为了确定一种安全、有效而快速的显示畜禽微卫星多态性的染色方法，以广东地方鸡种及优质黄羽肉鸡品系种鸡基因组ＤＮＡ为材料，用５对微卫星引物进行ＰＣＲ扩增，并将扩增产物置于变性聚丙烯酰胺凝胶中电泳分离，通过对比溴化乙锭染色和银染法显色确定理想显色法，结果认为银染法是一种可行、安全的理想方法。

淋巴管和血管同时显示的银染法

目前广泛采用的将色素注入组织间隙内显示器官内淋巴管的方法,难免使色素进入毛细血管和组织间隙,此间隙有可能是淋巴前通路(组织管)。因此,充盈色素的组织间隙和毛细淋巴管都呈不规则外观,无法确切鉴别。前苏联学者仅用其研究器官外的淋巴流向。我们学习掌握和应用了同时显示淋巴管和血管的银染法。具体步骤如下:1.取材 材料为死后不久的新鲜尸体或动物,用流水冲洗 空腔器官表面的粘液和污物,制成0.5 ×2cm大小的组织块。空腔器官亦可分为三部分:粘膜和粘膜下组织、肌织膜及外膜。动物标本置入、12％福尔马林固定7～10天,人的标本则固定14～20天。2.

检测卡氏肺孢子虫的快速银染法

卡氏肺孢子虫（Ｐｎｅｕｍｏｃｙｓｔｉｓｃａｒｉｎｉ，ＰＣ）可引起免疫机能低下病人严重的肺炎，如不及时诊断和治疗，其病死率极高。目前，国内仍以检出病原体为卡氏肺孢子虫肺炎的主要诊断依据。而传统的病原染色法有的检出率较低，有的操作过程较繁杂且费时。本文介...

细菌鞭毛银染法的改进

目的通过改进发明一种新的细菌鞭毛银染色方法。方法本方法通过载玻片的准备、菌种活化、染液制备,菌液制备孵育、制片、染色等环节步骤完成。结果改进后的牛肉膏蛋白胨培养基新配方,营养更丰富,硬度更适宜,镜检结果,鞭毛多,粗壮、着色更容易且均匀。菌液改为恒温水槽孵育,能让菌体鞭毛更活跃,鞭毛更舒展。涂片菌膜清晰便于少量A液覆盖操作,B液染色升温时容易掌握火源高度。结论这种鞭毛染色方法操作简单,易学易掌握,鞭毛着色率高,还有延长A、B液的有效使用时间。此鞭毛染色值得推广使用。

TRAP—PCR ELISA及银染法检测肺刷落细胞中端粒酶活性

以非同位素法检测肺刷落细胞中端粒酶活性及在肺癌中的诊断价值。方法采用端粒酶重复放大程序ＴＲＡＰ（ＴｅｌｏｍｅｒａｓｅＲｅｐｅａｔＡｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎＰｒｏｔｏｃｏｌ）ＰＣＲＥＬＩＳＡ法及聚丙烯酸胺凝胶电泳一银染法，对８０例支气管肺刷落细胞样本进行定性及定量端粒酶活性检测。结果肺癌患者患侧端粒酶定性检测阳性率为８８．６％，其对侧部位为２２．７％，肺炎阳性率为１１．８％。定量法检测肺癌病人的端粒酶活性水平（中位ＯＤ值：０．０８９）明显高于其对侧肺部（中位ＯＤ值：０．０２８）及肺炎组（中位ＯＤ值：０．０１４）。另外病理发现不典型增生者６例中有５例端粒酶阳性。结论应用该方法对肺刷落细胞中端粒酶活性的测定可以作为肺部恶性肿瘤诊断有效而敏感的手段之一。

非变性聚丙烯酰氨凝胶电泳及银染法临床应用探讨

目的:建立一种省时简便和灵敏可靠的检测筛查基因点突变的方法,即PCR-SSCP(PCR-Singlestrandconformationpolymorphism)银染分析技术。方法:应用改进的PCR-SSCP银染分析技术,检测妊娠期胆内胆汁淤积症患者外周血基因组DNA中MDR3基因外显子14的点突变情况。结果:非变性聚丙烯酰氨凝胶电泳在有冷水循环装置控制下,结果稳定可靠,受环境温度影响小;但银染时,需根据室温调整染色时间及显影液的配制,当室温高于25℃时,碳酸钠需预冷,有利于控制背景色,得到更为满意的结果。结论:利用非变性聚丙烯酰氨凝胶电泳及银染法筛查目的基因的点突情况,具有省时简便和灵敏可靠的特点,且重复性好,避免了盲目测序及资金浪费。

银染法观察铜绿假单胞菌生物被膜变化初探

目的探讨银染法观察细菌生物被膜在药物作用前后变化的可靠性。方法建立细菌生物被膜,分别用银染法和扫描电镜进行观察生物被膜的变化。结果银染后普通光学显微镜观察和扫描电镜观察对生物被膜变化的观察结果完全相符。结论用银染法观察细菌生物膜的变化便捷、可靠。

彗星试验银染法的优化及验证

在彗星试验中寻找一种最佳染色效果的银染法 ,拟取代溴化乙啶 (EB)染色。对选出的银染法从固定、染色、显色、脱色、染色温度等各个方面进行多次试验 ,达到最佳染色效果后 ,将优化的银染法用于检测两类化合物 -重铬酸钾 (K2 Cr2 O7)和 1,2—二氯乙烷 (1,2—dichloroethane,DCE)对两种类型细胞—小鼠脾细胞、人外周血淋巴细胞的DNA损伤作用 ,并与EB染色比较灵敏度。结果显示优化后的银染法是在彗星试验中成功建立的非荧光染色法 ,该法染色清晰、持久、背景颜色浅、染色对比度好、染色效果满意 ,方法操作简便、价廉 ;该法可检测出化合物对细胞的DNA损伤作用 ,与EB染色有相同阳性检出阈 ,可染出EB染色无法染上的DNA小片段。

银染法鉴定铜绿假单胞菌生物膜

目的:观察银染法鉴定铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)生物膜的效果。方法:体外平板法制备PA生物膜模型,用银染法及扫描电镜进行观察鉴定。结果:银染后普通光学显微镜和扫描电镜对生物膜观察结果相符。结论:可以用银染法观察细菌生物膜,方法简单、可靠。

用银染法鉴定革胡子鲶胚胎的倍性

解剖出革胡子鲶的单倍体、二倍体、三倍体和四倍体胚胎,用50％AgNO_3染色后,通过计数胚胎间期细胞的核仁平均最大数量的百分率,就可确定其个体的倍性。

银染法在猪脾可提取性核抗原的小核RNA分析中的应用

可提取性核抗原(extractable nuclear antigens,ENA)是哺乳动物细胞核的生理盐水抽提物,它包括Sm、RNP、La(SS-B)和Ro(SS-A)等四种主要抗原成分。它们是由核内核糖核酸和蛋白质组成的复合物(snRNPs),其核糖核酸组分属于核内小RNA类,称为snRNAs。近几年来,小核RNA的研究愈来愈受到广泛重视。但是,由于含量极少,给分析带来困难。

蛋白质分析中SDS─PAGE银染法与考马斯亮蓝染色法敏感性的比较

蛋白质分析中ＳＤＳ─ＰＡＧＥ银染法与考马斯亮蓝染色法敏感性的比较高崧，刘秀梵，张如宽（江苏农学院动物医学系，扬州２２５００９）ＳＤＳ一ＰＡＧＥ技术，是蛋白质分析最常用的手段之一。ＳＤＳ─ＰＡＧＥ分离后的条带，通常采用考马斯亮蓝进行染色。８０年代产生了...

快速银染法检测短串联重复序列

目的 介绍一种灵敏、简便的方法检测短串联重复序列（ＳＴＲ）。方法 采用ＰＣＲ技术扩增ＳＴＲ，扩增产物经ＰＡＧＥ后银染。结果 银染后的产物清晰，易于判断相差２ｂｐ 的核酸基因型。结论 ＰＣＲ技术结合银染法提高检测的灵敏度。

银染法观察大肠杆菌生物被膜变化初探

目的探讨银染法下利用普通光学显微镜观察大肠杆菌生物被膜在药物作用前后的变化。方法采用腹膜透析液-腹膜透析管系统建立大肠杆菌生物被膜,分别用扫描电镜和银染法染色后应用普通光学显微镜来观察细菌生物被膜在药物作用前后的变化情况。结果使用银染法后用普通光镜观察大肠杆菌生物被膜变化的情况与用扫描电镜观察的结果一致。结论银染法下利用普通光学显微镜可以更为便捷地观察大肠杆菌生物膜的变化情况,且实验结果稳定、可靠。

改良银染法在病理诊断中的应用

银染法作为传统的特殊染色方法仍然是显示病原体、组织及细胞内特殊结构的简便而可靠的方法之一,其原理是利用生物组织成分对银离子还原性质的不同,显示组织及其中微生物的形态。我们通过应用改良银染法对组织进行染色,取得良好效果,总结如下。

银染法与产物杂交法检测端粒扩增产物比较

目的 :选择简便、灵敏地检测端粒酶活性的方法。方法 :以HL 6 0细胞与慢性粒细胞白血病单个核细胞为检测对象 ,在端粒重复序列扩增技术 (telomericrepeatamplificationprotocol,TRAP)基础上 ,采用同步扩增产物杂交法和产物银染法检测其端粒酶活性。结果与结论 :产物杂交法操作简便 ,比产物银染法有更高的灵敏度 ,还可用于半定量。