银环蛇咬伤致急性呼吸衰竭的治疗及临床观察

目的分析银环蛇咬伤致急性呼吸衰竭的治疗及临床观察。方法对2020年1月至2022年12月在我院治疗的60例银环蛇咬伤致急性呼吸衰竭患者的临床资料进行分析,并总结治疗经验。结果60例银环蛇咬伤致急性呼吸衰竭患者均抢救成功,治疗期间未出现严重并发症。结论临床上积极抢救治疗与严密的病情观察对挽救银环蛇咬伤致急性呼吸衰竭患者的生命至关重要。

银环蛇咬伤53例临床分析

目的探讨综合救治银环蛇咬伤患者的效果。方法对我院救治的银环蛇咬伤患者53例的临床资料进行回顾性分析。结果通过及时给予抗银环蛇毒血清、机械通气及止痛等综合治疗,53例患者均治愈出院,治愈率100%。结论规范使用止痛药物、抗银环蛇毒血清、机械通气等综合治疗银环蛇咬伤患者的效果显著,治愈率高,并发症少,无死亡病例。

银环蛇粗毒若干有效组分对SWO细胞的作用

目的 测定银环蛇毒素组分是否抑制人神经胶质瘤细胞SWO的生长 ,以及确定抑制的原因是诱导凋亡或是杀伤。方法 用MTT和流式细胞术等方法探讨银环蛇粗毒及其有效组分对人神经胶质瘤细胞SWO的作用。结果 MTT试验结果显示 ,SWO细胞对银环蛇粗毒、第Ⅲ峰毒素、α 银环蛇毒素 (α BTX)的作用比较敏感 ,同时SWO细胞比 3T3细胞更敏感。SWO对其他组分的作用不敏感。 3种毒素作用于SWO细胞 ,流式细胞术检测未见凋亡峰。结论银环蛇粗毒、第Ⅲ峰毒素、α BTX对SWO细胞有杀伤作用 。

色变银环蛇与正常银环蛇的形态学及毒性比较研究

目的研究色变银环蛇与正常银环蛇的形态学差异。方法比较蛇外形、鳞片、毒腺、排毒量、毒性等情况。结果色变银环蛇与正常银环蛇的鳞片数目无异,但其毒腺大小、排毒量、毒性均有明显差异。结论可能由于蛇的生存环境发生了改变,故而出现了银环蛇的形态改变。

银环蛇咬伤致肌无力SD大鼠模型建立

目的模拟临床表现建立银环蛇咬伤致肌无力SD大鼠模型。方法检测所用银环蛇毒的毒力,采用不同剂量银环蛇干毒给予SD大鼠皮下注射,观察SD大鼠运动、呼吸等情况,确定本实验所需模型的银环蛇干毒最佳剂量。模型SD大鼠与对照组SD大鼠行重复神经电刺激检查,并于建模后3 h取SD大鼠膈肌、腓肠肌行HE染色,了解肌肉细胞情况。结果通过预实验,本实验所用银环蛇干毒的KM小鼠半数致死量为0.12 mg/kg,SD大鼠的半数致死量为0.08 mg/kg,实验所需模型的银环蛇干毒的最佳剂量3倍SD大鼠半数致死量0.24 mg/kg,该模型中毒表现与临床表现符合,低频重复神经电刺激检查有肌电衰减,并出现膈肌及腓肠肌细胞肿胀、核排列紊乱的病理改变。结论用3倍SD大鼠半数致死量的银环蛇毒,可成功建立银环蛇咬伤致肌无力的SD大鼠模型,可用于救治银环蛇咬伤早期肌无力的基础研究。

1例银环蛇咬伤、自主呼吸停止18h的急救与护理

１例银环蛇咬伤、自主呼吸停止１８ｈ的急救与护理广西都安县人民医院吴婉萍（都安５３０７００）我科于１９９６年８月２７日收治１例银环蛇咬伤致呼吸肌麻痹、自主呼吸停止１８ｈ的病人，经积极抢救与精心护理，病人痊愈出院，现将急救与护理总结如下：１病例介绍患者，...

银环蛇咬伤与多器官功能衰竭附──附15例分析

银环蛇咬伤与多器官功能衰竭附──附１５例分析湖南医科大学附属湘雅医院罗学宏多系统脏器功能衰竭综合征（ＭａｌｔｉｐｌｅＯｒｇａｎＦａｉｌｕｍＳｙｎｄｒｏｍｅ，ＭＳＯＦ）。是严重感染、创伤等应激状态下，机体现出两个以上的器官或系统，同时或相继陷于功能衰竭...

银环蛇奇异变形杆菌的分离鉴定与药敏试验

银环蛇(Bungarus multicinctus)是我国传统的动物药材之一,饲养过程若管理不当,容易发生一系列疾病,从而阻碍银环蛇养殖业的发展。对送检的发病银环蛇进行剖检,分离可疑病原菌,然后通过对获取菌株的16SrDNA进行扩增测序,并与GenBank中已有序列进行联配分析,最后构建系统发育树。结果表明,获取的2菌株均属于变形杆菌属,其中1株为奇异变形杆菌。这是首次从发病银环蛇心脏和肾脏中分离出奇异变形杆菌。药敏试验表明,这2株菌对头孢曲松钠、头孢吡肟、阿米卡星高度敏感,对阿莫西林、链霉素中度或低度敏感,对环丙沙星、诺氟沙星、氨苄西林呈耐药性。研究结果对银环蛇实际养殖中有一定的应用价值。

K-银环蛇毒素对小鼠被动学习和空间记忆的影响

以Ｋ－银环蛇毒素（Ｋ－ＢＧＴ，３．２５μｇ／ｋｇ）海马内注射可造成小鼠胆碱能神经Ｎ受体功能受损的学习记忆的障碍。水迷宫检测结果表明，Ｋ－ＢＧＴ组小鼠空间学习记忆明显下降，训练第４天，逃避潜伏期比第１天下降仅为１６．７％，而对照组逃避潜伏期比第１天下降达５８．３％。在第５天６轮共６０次训练中，对照组在规定时间内找到平台的百分数为８０．０％，而Ｋ－ＢＧＴ组仅为３３．３％。撤去平台后第１天，对照组穿越原平台所在部位的次数为（５．３±２．８）次，而Ｋ－ＢＧＴ仅为（１．９±１．２）次。此外搜寻平台方式构成方面也出现了明显变化。避暗测试结果表明，Ｋ－ＢＧＴ组比对照组潜伏期下降３８．３％，错误率比对照组增加了２．２５倍。卵磷脂４０ｍｇ／ｋｇ经胃灌服１４天对Ｋ－ＢＧＴ所致学习记快损伤具有一定的改善作用。

α-银环蛇毒素基因的克隆及其非融合型原核表达

根据文献报道α-银环蛇毒素的氨基酸序列推导出其DNA序列,设计并人工合成两两互补的14条寡核苷酸片段。经片段延伸、PCR、克隆,成功构建α-银环蛇毒素基因克隆质粒;质粒经XbaⅠ和EcoRⅠ双酶切回收后连接于表达载体pET28a(+)中,分别转化BL21(DE3)、BL21(DE3)Codon plus、BL21(DE3)plysS进行诱导表达,表达产物经Tris/tricine系统进行SDS-PAGE分析。结果表明:该基因已在大肠杆菌BL21(DE3)宿主菌中进行了非融合表达,其表达量占细菌总蛋白的11.98%,主要以包涵体形式存在;同时对表达条件进行了优化,其表达量可达16.28%。经Western blot分析,在大约8 kDa处出现明显的目的带,与预计蛋白分子量大小一致,说明表达产物与天然α-银环蛇毒素具有相似的免疫原性。表达产物纯化、复性后经动物毒性试验表明:表达的α-银环蛇毒素蛋白具有生物学活性,小鼠腹腔注射其LD50约为1.28μg/g。

银环蛇神经毒素的分子克隆和功能表达(英文)

抽提银环蛇毒腺总RNA ,通过反转录PCR技术扩增出其神经毒素cDNA ,克隆并测定了全序列。银环蛇神经毒素的cDNA编码 2 1个氨基酸的信号肽和 74个氨基酸的成熟蛋白。该信号肽非常类似于短链神经毒素、κ -神经毒素和心脏毒素的信号肽。而成熟蛋白的氨基酸序列与从台湾产银环蛇中通过蛋白测序鉴定的α -bungarotoxin的氨基酸序列完全一样。此外 ,还克隆到该神经毒素缺失前体cDNA。利用麦芽糖结合蛋白融合表达系统 ,该神经毒素在大肠杆菌中得到高效的可溶性表达。表达的融合蛋白通过亲和层析得到有效纯化 ,并且通过蛋白印迹验证表达和纯化的融合蛋白。经过Xa因子酶切融合蛋白得到的重组神经毒素具有小鼠体内毒性 ,约为天然银环蛇神经毒素毒性的 1/ 6。该神经毒素的克隆和有效的功能表达为今后通过定点突变来研究长链神经毒素的结构与功能关系奠定了基础。

银环蛇心脏毒素类似物cDNA的克隆

采用SMART技术和RT PCR方法,从同一个银环蛇毒腺中克隆到了5种尚未报道过的心脏毒素类似物全长cDNA序列(MNCTL1 a、MNCTL1 b、MNCTL1 c、MNCTL1 d和MNCTL2)。5种序列中,MNCTL1 b、MNCTL1 c、MNCTL1 d和MNCTL2的长度均为505bp,包括5′非翻译区32bp,3′非翻译区212bp和其余261bp组成的一个完整开放阅读框;MNCTL1 a由于3′非翻译区24bp的缺失,全长cDNA仅为481bp。所得序列编码区部分与已报道的银环蛇心脏毒素类似物(cardiotoxin likeprotein)编码区cDNA序列的同源性达95.8%以上。我们克隆到的序列编码85个氨基酸组成的心脏毒素类似物前体,包括20个氨基酸的信号肽和65个氨基酸的成熟肽,与已知的心脏毒素类似物氨基酸组成有很高的同源性。运用AntheportV4.5软件分析,发现编码的蛋白质与眼镜蛇毒中心脏毒素有相似的结构和性质,推测它们可能有类似心脏毒素的功能。本研究首次报道了从同一个体的银环蛇毒腺中克隆到多个心脏毒素类似物全长cDNA序列,提示银环蛇心脏毒素类似物基因在该种蛇基因组中有多个拷贝,并在毒腺细胞中同时转录。

银环蛇线粒体基因组全序列分析

根据GenBank公布的蛇类物种线粒体基因序列和已知的引物序列,总共设计和合成了9对引物.采用保真度较高的Ex-Taq酶,以总基因组DNA为模板进行PCR扩增,产物纯化后进行TA克隆和步移测序,拼接后获得了全长17144bp银环蛇线粒体基因组全序列.其共编码13种蛋白质、2种rRNA和22种tRNA.这些基因没有内含子,基因间排列紧密,仅有极少或完全没有核苷酸,甚至相互重叠.除了含有2个调控线粒体基因组复制和转录的控制区外,其余基因在长度和位置等方面与其它脊椎动物均具有较高的同源性.

重组α-银环蛇毒素P22-A31的原核表达及功能分析

α-银环蛇毒素在神经科学研究以及在临床和制药上有重要作用,为获得大量的α-银环蛇毒素,我们用已构建的pGEX-BgTX(P22-A31)质粒在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,并用谷胱甘肽Sepharose FF纯化GST-α-银环蛇毒素融合蛋白,再用凝血酶切掉融合标签谷胱苷肽转移酶(Glutathione S-transferase,GST),得到了较纯的重组α-银环蛇毒素同工毒素,得率约为1.225mg/L。用重组α-银环蛇毒素制备多克隆抗体,经ELISA和Western杂交鉴定后可知重组α-银环蛇毒素与天然α-银环蛇毒素的抗原性一致。小鼠毒性试验表明,重组α-银环蛇毒素同工毒素的半致死剂量LD50为1.598mg/kg,约为天然α-银环蛇毒素的1/5。小鼠化学法镇痛试验显示,重组α-银环蛇毒素有一定的镇痛药效,1/4LD50剂量的镇痛百分率为55.2%,1/8LD50剂量的镇痛百分率为20.5%,在外周镇痛作用中呈一定的量效关系。

α-银环毒素-转铁蛋白偶联物镇痛作用的研究

目的研究α-银环毒素 -转铁蛋白偶联物镇痛作用。方法应用生物素 -亲和素桥联作用 ,使α-银环毒素 (α-BGT)与转铁蛋白 ( transferrin)偶联 ,形成偶联物 ( Tf- α- BGT)。采用小鼠热板法测定 Tf- α- BGT的镇痛作用以及阿托品、甲基阿托品对其镇痛作用的影响。用荧光示踪实验观察其在中枢神经系统 ( CNS)中的结合位点。结果 Tf- α- BGT可通过血脑屏障产生中枢镇痛作用 ,阿托品能部分拮抗其镇痛作用 ,甲基阿托品对其镇痛作用的影响无显著差异。结论 Tf-α- BGT经受体转运透过血脑屏障产生中枢性镇痛作用 ,该镇痛作用可能与 Ach