清解宣透肺卫方银花平感颗粒治疗上呼吸道感染邪郁肺卫证的安全性和有效性研究：一项随机双盲、阳性药物平行对照、多中心临床试验

目的 评价清解宣透肺卫方银花平感颗粒治疗上呼吸道感染邪郁肺卫证的安全性及有效性,探索最佳有效剂量.方法 采用随机双盲、阳性药平行对照、多中心临床试验方法,收集浙江中医药大学附属第一医院、江西中医药大学附属医院、天津中医药大学第二附属医院、浙江省立同德医院、福建省中医药研究院收治的270例感冒患者,最终符合方案集（PPS）人群242例纳入研究,其中高剂量组观察82例,低剂量组观察79例,对照组81例.高、低剂量观察组分别按每日3次、每次1袋和每日2次、每次1袋的方法给予银花平感颗粒（每袋5 g）;对照组给予银翘解毒颗粒（每袋5 g）每次1袋、每日3次;两组均连续口服1个疗程（3 d）后评价疗效.主要疗效评价指标包括上呼吸道感染中医证候总评分、主症总评分;次要疗效评价指标包括主症发热恶寒不同评分患者情况及发热恶寒症状消失情况;并观察临床综合疗效及中性粒细胞比例变化,评价其用药安全性.结果 在PPS人群中,对照组及高、低剂量观察组治疗后中医证候总评分（分）和主症总评分（分）均较治疗前明显降低,3 d时出现统计学差异（分别为4.4±3.9比15.5±4.6、3.7±3.2比15.0±4.3、3.0±2.7比15.2±3.9,2.8±2.6比9.7±2.7、2.3±2.1比9.5±2.5、2.0±1.9比9.6±2.4,均P〈0.01）.对照组及高、低剂量观察组治疗1 d后主症发热恶寒评分为6分的患者数均较治疗前明显减少（分别为7比32例、6比31例、4比28例）,治疗3 d后主症发热恶寒评分为0的患者数均较治疗前明显增加（65、73、77例比0例）,评分为3分的患者数均较治疗前明显减少（分别为16比47例、5比46例、5比52例）,对照组和高剂量观察组无评分为6分的患者,仅低剂量观察组出现1例评分为6分的患者,表明高、低剂量观察组和对照组均可缓解临床症状;且评分为0和3分患者数的变化以高、低剂量观察组较对照组更加明显（分别为73、77比65例,5、5比16例,均P〈0.05）,表明银花平感颗粒组解热作用优于银翘解毒颗粒.高、低剂量观察组发热恶寒症状消失率明显高于对照组〔93.9%（77/82）、92.4%（73/79）比80.2%（65/81）,均P〈0.05〕.高、低剂量观察组中医证候疗效愈显率和有效率均高于对照组〔分别为87.80%（72/82）、79.75%（63/79）比74.07%（60/81）和98.78%（81/82）、96.20%（76/79）比96.30%（78/81）〕;高、低剂量观察组上呼吸道感染症状疗效愈显率和有效率也均高于对照组〔分别为78.05%（64/82）、74.68%（59/79）比65.43%（78/81）和98.78%（81/82）、96.20%（76/79）比96.30%（78/81）〕,3组间疗效比较具有临床实际意义,但差异均无统计学意义（均P〉0.05）.高、低剂量观察组和对照组治疗后中性粒细胞比例均较治疗前明显降低（分别为0.61±0.08比0.63±0.08、0.62±0.08比0.64±0.08、0.61±0.09比0.64±0.09,均P〈0.05）.银花平感颗粒在方案规定的疗程、治疗剂量范围内安全性良好.结论 银花平感颗粒是治疗上呼吸道感染邪郁肺卫证安全有效的药物.

银花平感颗粒抗菌作用的实验研究

目的观察中药银花平感颗粒对金黄色葡萄球菌（金葡菌）的抗菌作用。方法采用小鼠腹腔注射金葡菌液致小鼠感染模型，连续给予银花平感颗粒2．0、1．0、0．5mg／kg组中药银花平感颗粒5000．0、2500．0、1250．0mg·kg^-1·d^-1共7d，以双黄连口服液和清热解毒口服液作为阳性对照药物；记录各组小鼠的死亡率；同时采用体外抗菌活力测定实验，观察银花平感颗粒的体外抗菌活力变化。结果银花平感颗粒对金葡菌感染大鼠具有明显的保护作用，且呈量效正相关关系[模型组大鼠死亡率为88．9％（16／18），双黄连口服液组为81．2％（13／16），清热解毒121服液组为43．8％（7／16），银花平感颗粒0．5、1．0、2．0mg／kg组死亡率为75．O％（12／16）、50．0％（8／16）、31．2％（5／16）]。体外抗菌活力测定表明，银花平感颗粒0．117mg／L即对大肠杆菌、肺炎球菌、肺炎克雷伯菌、乙型链球菌、痢疾杆菌、流感杆菌、金葡菌都具有显著的抗菌作用，其抗菌药物浓度明显低于其他中药和青霉素，抗菌谱也宽。结论银花平感颗粒对金葡菌感染小鼠具有明显体内保护作用；且银仡平感颗粒抗菌谱广，对临床上常见致病菌均有抑制作用。

银花平感颗粒镇咳作用的实验研究

目的:观察银花平感颗粒的镇咳作用。方法:分别采用氨水诱导小鼠咳嗽和枸橼酸诱导豚鼠咳嗽,考察银花平感颗粒大中小3个剂量组对豚鼠咳嗽的影响。结果:与生理盐水对照组相比,咳必清、蛇胆川贝液和银花平感颗粒各剂量组均能显著抑制氨水诱导小鼠咳嗽,银花平感颗粒各剂量组量效呈正相关,银花平感颗粒大剂量组作用显著优于中、小剂量组;咳必清、蛇胆川贝液和银花平感颗粒大中剂量组均显著抑制枸橼酸诱导豚鼠咳嗽,银花平感颗粒各剂量组量效呈正相关,银花平感颗粒大中剂量组作显著优于小剂量组的镇咳作用。结论:银花平感颗粒具有镇咳作用。

银花平感颗粒体内抗甲型H1N1流感病毒作用

为探讨银花平感颗粒(YHPG)体内抗甲型流感病毒A/PR/8/34(H1N1)作用及其对流感病毒感染小鼠免疫功能的影响,采用滴鼻感染ICR小鼠建立流感病毒肺炎模型,感染后第3天和第7天测定各组动物肺指数并观察肺组织病理变化;采用实时荧光定量RT-PCR和流式细胞技术,观察各组肺组织病毒载量以及外周血T细胞亚群(CD4+,CD8+,CD4+/CD8+)的变化。结果表明,YHPG(15,30 g·kg-1)剂量组在感染后第3天和第7天均能显著降低流感病毒感染小鼠肺指数和肺组织病毒载量,减轻肺组织病理变化,同时还可显著提高外周血CD4+T细胞水平和CD4+/CD8+比值,降低CD8+T细胞水平。说明YHPG可抑制流感病毒复制、减轻流感病毒感染小鼠肺部损伤以及调节流感病毒小鼠免疫功能下降,对甲型H1N1流感病毒感染小鼠有一定的治疗作用。

银花平感颗粒和三拗汤体内抗甲型流感病毒的免疫机制研究

为探讨银花平感颗粒和三拗汤体内对流感病毒肺炎小鼠免疫调节机制的影响及不同方剂配伍对流感病毒的药效异l司。米用滴鼻感染建立小鼠甲型流感病毒（H1N1）肺炎模型，随机分为正常对照组、病毒模型组、达菲组、银花平感颗粒组、三拗汤组，灌胃给予相应药物5d后，处死动物。酶联免疫吸附法（ELISA）检测流感病毒感染小鼠血清中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、臼细胞介素石（IL一6）和干扰素-γ（IFN-γ）的含量，荧光定量PCR法检测肺组织中T0u样受体3／7（TLR3／7）、髓样分化因子88（MyD88）、c-Jun氨基末端激酶（JNK）、丝裂原活化蛋白激酶（p38MAPK）、转录因子-KB（NF-KBp65）基因的表达，免疫组化法检On．0JNK，p38MAPK，NF．KBp65蛋白的表达。结果显示，银花平感颗粒和三拗汤均显著降低肺组织血清中TNF-α和IL-6水平及升高IFN-γ水平，显著下调流感病毒感染小鼠肺组织中TLR3／7，MyD88，JNK，p38MAPK，NF-KBp65基因的表达水平，显著降低肺组织中JNK，p38MAPK，NF-KBp65蛋白的表达水平，且银花平感颗粒对其调控效果优于三拗汤。结果表明，银花平感颗粒和三拗汤对流感病毒肺炎小鼠有一定的治疗作用，其抗流感病毒的作用机制可能是通过调节流感病毒感染小鼠的免疫功能和调控TLR3／7信号通路多个环节的基因和蛋白表达相互作用的结果，兼有清热解毒与宣肺解表疏邪之法的辛温与辛凉合用药银花平感颗粒比辛温单用药三拗汤配伍更全面，疗效更好。

银花平感颗粒的体外抗甲型H1N1流感病毒作用

目的探讨银花平感颗粒体外抗甲型A/PR8/34(H1N1)流感病毒的作用机制。方法采用MTT比色法测定药物对巨噬细胞的最大无毒浓度(TC_0),半数细胞毒性浓度(TC_(50))及药物不同给药方式的抗病毒有效率,采用Probit回归分析计算其对病毒感染的半数抑制浓度(IC_(50))及治疗指数(TI);流感病毒H1N1感染培养的RAW264.7细胞,用利巴韦林(62.5μg/ml),银花平感颗粒高(500μg/ml)、中(250μg/ml)、低(125μg/ml)各剂量进行干预,4、16、24 h后收集细胞,实时荧光定量PCR法观察各组细胞中Toll样受体7(TLR7)、髓样分化因子88(My D88)、核因子p65(NF-κB p65)、干扰素调节因子7(IRF7)的变化。结果银花平感颗粒在31.25~500μg/ml范围内可降低流感病毒复制,其中药物治疗组在给药24 h后,抗病毒有效率最高;与正常对照组同时间比较,模型对照组TLR7、My D88、IRF7、NF-κB p65 mRNA表达水平均显著升高,且16 h达最高峰,较本组4 h、24 h差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01);经药物干预后,银花平感颗粒高、中剂量组及利巴韦林组均显著下调流感病毒诱导4、16、24 h后的TLR7、My D88、IRF7和NF-κB p65 mRNA表达水平(P<0.05或P<0.01),尤以银花平感颗粒高剂量组对TLR7、My D88和NF-κB p65 mRNA表达水平的下调作用较利巴韦林组更为显著(P<0.05)。结论银花平感颗粒体外可明显抑制流感病毒复制,主要是通过治疗给药而发挥抗病毒作用,其抗病毒效果可能与其抑制TLR7/My D88/IRF7信号通路及NF-κB p65的激活有关,且高剂量对流感的治疗效果优于利巴韦林。

银花平感颗粒和三拗汤体内体外结合对甲型流感病毒的影响

目的通过银花平感颗粒和三拗汤两方药体内外对甲型H1N1流感病毒影响的实验研究,探讨不同方剂配伍对流感病毒的抑制作用。方法体内实验:采用滴鼻感染建立小鼠流感病毒肺炎模型,按体重分层随机分为正常对照组、病毒模型组、达菲组[21. 63 mg/(kg·d)]、银花平感颗粒组[12 g/(kg·d)]和三拗汤组[9 g/(kg·d)],灌胃给予相应药物,每天1次,连续5天。灌胃结束后,摘取肺、脾及胸腺组织,分别称重,计算各组小鼠肺指数、肺组织抑制率及免疫脏器指数;采用实时荧光定量PCR法检测各组小鼠肺组织病毒载量表达,苏木精-伊红(HE)染色法检测各组小鼠肺组织的病理改变。体外实验:将银花平感颗粒和三拗汤两方药作用于感染甲型H1N1流感病毒的犬肾细胞(MDCK),采用MTT法检测两方药对甲型H1N1流感病毒的抗病毒有效率及显微镜观察其引起的细胞病变效应(CPE)。结果体内实验中,与正常对照组比较,病毒模型组小鼠肺指数升高,脾指数、胸腺指数均降低,多处肺实变,炎症细胞浸润,肺组织内病毒载量高表达(P <0. 01),与病毒模型组比较,银花平感颗粒和三拗汤均降低流感病毒感染小鼠肺指数(P <0. 01),升高脾指数、胸腺指数(P <0. 05,P <0. 01),并明显减轻流感病毒肺炎小鼠肺组织病理变化,降低肺组织病毒载量(P <0. 05,P <0. 01);体外实验中,银花平感颗粒和三拗汤可以明显抑制流感病毒引起的CPE,对病毒感染也有明显的保护作用。结论银花平感颗粒和三拗汤两方药在体内外均有良好的病毒抑制作用,其抗病毒作用可能与抑制流感病毒复制、保护免疫器官、减轻肺部炎症损伤及抑制病毒引起的CPE有关,且在体内外对流感病毒的抑制方面,银花平感颗粒比三拗汤配伍更全面,疗效更好。

清解宣透肺卫方药治疗外感热病邪郁肺卫证安全性和有效性的随机双盲、阳性药平行对照、多中心临床研究

目的:评价清解宣透肺卫方——银花平感颗粒治疗外感热病邪郁肺卫证的安全性及有效性。方法:采用随机分组、双盲单模拟、阳性药平行对照、多中心临床试验的设计方法;按临床试验3∶1随机分配至试验组与阳性药对照组,实际共入组病例416例,415例受试者进入FAS人群(试验组312例,阳性药对照组103例),409例受试者进入PPS人群(试验组307例,阳性药对照组102例)。试验组给予银花平感颗粒,对照组给予银翘解毒颗粒,疗程均为3d。结果:两组患者在基线病情等指标均具有可比性;服药依从性良好。在PPS人群中,试验组、对照组中医证候疗效愈显率分别为84.69%、72.55%;中医主要症状疗效愈显率分别为80.78%,70.59%,其差异均有统计学意义(P<0.05)。中医证候总评分和主症总评分在用药第3天,两组组内比较,差异有统计学意义(P<0.01)。试验组体温起效时间和体温解热时间显著优于阳性药对照组(P<0.01)。治疗3d后两组患者发热恶寒、头身疼痛、鼻塞流涕、咯痰、口渴等中医症状消失情况组间比较,差异有统计学意义(P<0.05);除舌质外,两组间其余差异无统计学意义。白细胞计数与分类、呼吸道病毒检测结果显示,该类疾病多属于病毒性感染疾病。结论:清解宣透肺卫方药银花平感颗料治疗外感热病邪郁肺卫证患者可显著提高疗效,具有显著解热、镇痛、止咳化痰等作用。