猪链球菌7型的分离鉴定及药敏试验

某猪群暴发类似猪链球菌病,为确诊和防制该病,通过将病料接种到血液营养琼脂培养基和TSA培养基分离细菌,对分离菌株进行生化鉴定和PCR鉴定,并接种小白鼠进行动物试验和药敏试验。结果表明,分离的细菌为猪链球菌7型,对小白鼠具有致病性,且对恩诺沙星和头孢唑啉高度敏感。该结果对临床防制猪链球菌病具有参考意义。

正常屠宰猪致病性猪链球菌7型的鉴定和特性研究

从江苏某地正常屠宰猪扁桃体分离到1株细菌,命名为HA100111。该细菌呈链球菌的特征形态,药敏试验表明该菌株对多种抗生素有耐药性。经PCR及序列分析,确定该分离菌株为猪链球菌7型,其毒力因子基因型为gdh+/m rp-/epf-/sly-/orf2+/fbps+。动物致病性试验表明,该菌对ICR小鼠和新西兰兔有较强的致病性,对ICR小鼠半数致死量为2.67×107CFU,但是对仔猪无明显致病作用。得出结论,在正常猪扁桃体中可携带致病性的猪链球菌7型。

猪圆环病毒2型与链球菌7型协同感染研究

2016年10月,在山东省发现猪圆环病毒2型(PCV-2)和链球菌7型协同感染病例。猪场小猪40日龄发病,持续至100日龄时死亡率高达30%,病猪表现为精神沉郁、发热、四肢无力和呼吸困难,最后衰竭死亡。采用血液学检测,病理组织学观察,细菌、病毒分离鉴定和动物回归试验验证。结果表明,血液中大量红细胞变形,淋巴细胞、中性粒细胞数量增多;分离的细菌为短链状排列的革兰阳性球菌,直径1μm^2μm;16SrRNA PCR测序结果显示为链球菌7型;病毒PCR结果显示为PCV2阳性,猪瘟病毒、猪伪狂犬病病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪细小病毒均为阴性;遗传进化分析表明PCV-2检测株与PCV-Y16同源性最高,为99.7%。随后,PK-15细胞连续传代显示PCV-2在PK-15细胞中增殖。动物回归试验中,临床数据统计结果、剖检病变以及组织病理学观察证实两种病原具有协同致病性。根据猪群临床症状、剖检病变、组织学病变、病原检测结果以及动物回归试验,最终确诊该猪群发生PCV-2与链球菌7型的混合感染,并呈现致病上的协同作用。

一例猪链球菌7型的诊断及其药敏试验

采集某猪场发病的猪病料,进行细菌分离,通过培养、纯化、染色镜检、PCR鉴定确诊为猪链球菌7型,经过药敏试验后,该分离株对恩诺沙星、红霉素高度敏感。

猪链球菌7型CD1小鼠动物病理模型的建立及评价

目的为研究猪链球菌7型对CD1小鼠的致病性,探究CD1小鼠作为猪链球菌7型动物感染模型的可行性。方法采用猪链球菌7型广东分离株以腹腔接种方式感染CD1小鼠,通过临床症状观察、LD_(50)测定、剖检病理观察、肝脑组织切片观察、细菌鉴定及组织脏器细菌载量检测,建立CD1小鼠动物病理模型。结果感染后的CD1小鼠发病情况呈现良好的规律性和重复性,发病CD1小鼠在临床症状、剖检病理变化、组织损伤与以往研究猪链球菌2型、9型感染小鼠实验结果基本一致,同时也与猪自然发病相似。感染小鼠血液、心、肝、脾、肺、肾和脑组织均能分离到活细菌,回收细菌与原细菌一致,组织脏器细菌载量检测表明心脏细菌载量最高,其次依次是肝、肾、脾、肺、血液,脑中细菌载量最低。结论本实验猪链球菌7型菌株可导致CD1小鼠败血症和脑部炎症,导致组织损伤而发病死亡,因此CD1小鼠对实验菌株敏感,可作为猪链球菌7型的感染动物模型。

7型猪链球菌的分离鉴定及特性

通过生化鉴定和PCR方法从湖北省部分地区高热症猪病料中分离鉴定了17株7型猪链球菌,并对所分离菌株进行药敏、毒力基因分布及致病性等生物学特性的研究。结果表明,生化鉴定显示所分离菌株为猪链球菌2型,但经PCR鉴定为7型,测序结果经分析与已发表的7型序列同源性为100%。17株7型分离株毒力基因分布情况为:0.0%为mrp+,11.8%为epf+,17.6%为sly+orf2+,29.4%fbps+,100.0%gdh+。通过对28种药物的敏感试验发现各分离株耐药性差别很大,但对阿莫西林和复方阿莫西林较为敏感(88.2%),对红霉素最为敏感(100.0%)。动物试验表明,编号为HB6、HB8、HB9的分离株致病性较强。通过对病猪和感染小鼠进行病理切片观察,各器官充血出血最为明显。总之,在以高致病性蓝耳病病毒为主要病原的高热症诊断和治疗中,同样需要考虑混合或继发感染7型猪链球菌致病的可能。

一株高致病性7型猪链球菌的分离鉴定

为了对山东省滨州市某规模化养猪场发病猪进行确诊,对关节肿大并出现死亡的断奶前后仔猪进行剖检和病原菌的分离鉴定,分离得到1株革兰氏阳性链球菌,对分离菌株进行特性培养、显微镜观察及分子生物学鉴定等工作,并开展了耐药性检测、动物回归试验和小鼠致病性试验。结果表明:分离菌株为7型猪链球菌,对多种药物具有抗性;致病性试验结果表明该菌株对猪具有高致病性,导致部分猪只出现神经症状,对昆明系、BALB/c小鼠无致病性,对CD1小鼠具有一定的致病性。