链脲佐菌素诱发糖尿病大鼠模型视网膜形态学改变的观察

目的研究链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱发SD大鼠糖尿病的视网膜形态学改变,为STZ诱发的糖尿病大鼠作为糖尿病视网膜病变动物模型提供依据。方法20只成年SD大鼠随机分为2组,A组用STZ腹腔注射法诱发糖尿病,B组作为正常对照。用葡萄糖氧化酶法在建模后1d、2d、3d、1周、2周、3周、4周连续测定大鼠血糖,在建模当天及建模后1周、2周、3周、4周用电子天平连续测量大鼠体质量,判断糖尿病发生的有效性和稳定性。通过临床和实验方法(包括裂隙灯检查,直接、间接眼底镜检查,4周时行组织切片、视网膜血管铺片、透射电镜等方法)检查大鼠眼前后节的病理改变。结果A组大鼠血糖在注射STZ后1d达到(33.9±1.7)mmol·L-1,在4周时达到(41.6±4.5)mmol·L-1,而B组始终低于16.7mmol·L-1。从建模之后,A组大鼠的体质量与B组相比,增长缓慢,有显著统计学意义。临床检查,A组1只糖尿病大鼠在4周时发生了白内障,B组大鼠眼前后节没有明显改变。发病4周时,组织学检查显示,A组大鼠视网膜厚度要薄于B组,透射电镜显示A组大鼠视网膜各层结构有明显的病理改变包括膜盘间隙扩大、排列紊乱、内外核层细胞疏松等,血管铺片显示4周A组大鼠视网膜毛细血管周细胞数量减少。结论用STZ方法建立糖尿病模型是有效的,发病4周时糖尿病大鼠已经有较明显的视网膜形态学改变,能够作为糖尿病视网膜病变模型用于临床和科研。

开郁清胃颗粒对链脲佐菌素诱发糖尿病大鼠降糖机理的实验研究

目的 :探讨对STZ糖尿病大鼠模型降糖作用的机制。方法 :用血糖仪检测了开郁清胃颗粒对STZ糖尿病大鼠血糖的影响 ;用放免分析法测定了中药治疗后胰岛素、胰高血糖素、皮质醇、胃动素、胰岛素样生长因子 1(IGF 1)含量的变化 ;用左旋木糖试验测定了药物对小肠吸收功能的影响。结果 :开郁清胃颗粒能降低糖尿病模型大鼠的血糖、皮质醇水平 ;升高胃动素、胰岛素样生长因子 1水平 ;对体重、胰岛素、胰高血糖素和小肠吸收功能无明显影响。结论 :开郁清胃颗粒能降低糖尿病模型大鼠的血糖 ,其降糖机理不同于二甲双胍抑制葡萄糖在小肠的吸收 ;也不同于磺脲类增加胰岛的分泌功能 ;而是升高IGF 1和胃动素水平 ,降低皮质醇水平。

哈慈五行针对链脲佐菌素诱发糖尿病大鼠模型疗效的研究

根据生物电磁场激活酶活性促进胰岛素分泌的理论,应用哈慈五行针双极针法做大白鼠试验观察。实验检测:诱发糖尿病大白鼠的空腹血糖18.50,用哈慈五行针针灸后血糖平均降至5.88,尿糖(-);对照组血糖为18.22,没有下降。进一步对胰腺调节功能进行测定,胰脏钙调素及肝、肾糖原均获理想疗效。在光镜下观察到诱发糖尿病大白鼠萎缩的胰岛经哈慈五行针治疗明显增大,胰岛素分泌增加。

芪明颗粒对链脲佐菌素诱发糖尿病大鼠多焦视网膜电图的影响

目的探讨芪明颗粒对链脲佐菌素（Streptozotocin，STZ）诱发糖尿病大鼠多焦视网膜电图（Mutilfoeal—Electroretinogram，mfERO）的影响，评价中药芪明颗粒对糖尿病视网膜病变（DiabeticRetinopathy，DR）视功能的影响。方法采用链脲佐菌素（STz）腹腔注射的方法诱发SD大鼠高血糖模型，血糖升高3个月后，将大鼠分为模型组、芪明颗粒组、羟苯磺酸钙组以及正常组进行为期12周的干预治疗，治疗周期完成后，采用多焦视网膜电图（mfERG）技术检测STZ糖尿病大鼠的视功能的变化情况。结果与正常组比较，模型组N1波峰潜时延长，反应密度降低，P1波反应密度明显降低，羟苯磺酸钙组P1波反应密度降低，芪明颗粒组各波形均无明显变化；与模型组比较，芪明颗粒组P1波反应密度明显升高。结论芪明颗粒能提高STZ糖尿病大鼠N1波和P1波的反应密度，保护STZ糖尿病大鼠的视功能。

链脲佐菌素诱导糖尿病脑病大鼠模型的构建及评价

背景:目前研究较成熟的糖尿病脑病模型主要有链脲佐菌素诱导模型、高糖高脂饮食诱导模型和自发性动物模型。建立简便易行、周期短、安全有效的糖尿病脑病模型对其发病机制的深入探讨和治疗药物的筛选有重要的作用。目的:进一步验证链脲佐菌素诱导糖尿病脑病大鼠模型的方法并对其进行评价。方法:将20只SD大鼠随机分为对照组(n=10)和模型组(n=10),模型组大鼠左下腹腔一次性注射45 mg/kg链脲佐菌素建立糖尿病实验动物模型,对照组大鼠用等量的柠檬酸缓冲液代替注射。实验期间监测大鼠体质量、饮食量、饮水量和血糖,8周后检测葡萄糖耐量和氧化应激水平,并比较脑组织病理变化及凋亡蛋白的表达情况。结果与结论:①与对照组相比,模型组大鼠饮食量、饮水量、脑指数、血糖和血糖曲线下面积显著升高、体质量明显下降(P<0.01);②脑组织病理学显示,模型组大鼠存活神经细胞数量明显减少(P<0.01),神经细胞病理损伤明显高于对照组;③模型组大鼠较对照组血清超氧化物歧化酶、过氧化氢酶和谷胱甘肽活力均明显降低(P<0.01),氧化活性丙二醛的浓度明显升高(P<0.05);④脑组织中凋亡相关蛋白Bax和Caspase-3表达水平增加,Bcl-2表达水平降低(P<0.01);⑤结果说明,注射45 mg/kg链脲佐菌素8周后可以使糖尿病大鼠脑组织有明显的病理损伤,成功构建糖尿病脑病大鼠模型。

原儿茶醛对链脲佐菌素诱导小鼠糖尿病心肌病的改善作用

研究了原儿茶醛(Protocatechualdehyde,PCA)对糖尿病心肌病(Diabetic Cardiomyopathy,DCM)小鼠的心脏保护作用及其可能的分子机制。成功构建DCM小鼠模型后给予PCA干预治疗。记录小鼠心脏与体质量比值,测定心功能,检测心肌组织中促炎症因子、肌钙蛋白I、乳酸脱氢酶(Lactate Dehydrogenase,LDH)和肌酸激酶(Creatine Kinase,CK)的表达水平,并通过苏木精-伊红(Hematoxylin Eosin,HE)和马松染色观察了心肌组织的形态学变化。检测心肌组织和大鼠心肌细胞中核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(Nod Like Receptor Protein 3,NLRP3)等蛋白的表达,并评估了PCA对心肌细胞存活率的影响。结果显示,PCA干预DCM小鼠中心脏与体质量比值、射血分数和短轴缩短距分别增加为5.42 mg/g、54.91%和28.07%,血清中LDH、CK和肌钙蛋白I分别降低为538.51 U/L、885.93 U/L和221.87 pg/mL,同时降低了肿瘤坏死因子α,白细胞介素1β和白细胞介素6的水平(P<0.05)。同时,PCA也能有效抑制高糖引起的心肌细胞毒性和NLRP3炎症小体的激活。PCA具有保护DCM小鼠心肌的作用,抑制NLRP3炎症小体的激活可能是发挥心脏改善作用的途径。

链脲佐素和高脂饮食诱导糖尿病小鼠脾巨噬细胞极化的相关研究

目的探索不同条件下链脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)和高脂饮食诱导的糖尿病模型鼠血清中炎性的细胞因子、脾巨噬细胞极化表型的影响。方法选取C57BL/6J小鼠,设置对照组和实验组,对照组正常鼠粮饲养,实验组分为单纯高脂饲养组和高脂饲养联合STZ药物组,联合组给予STZ浓度为1.25、2.5和5 g/L。实验周期8周观察记录小鼠的状态、体重,测定血糖值;ELISA检测血清白细胞介素-1(Interleukin-1,IL-1)、IL-6和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α);流式细胞术检测脾巨噬细胞CD40、CD86和CD206的表达,检测活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平。结果与对照组相比,饮食诱导和饮食与STZ联合诱导小鼠血清IL-1、IL-6和TNF-ɑ的含量显著增高;CD40和CD86表达增加、CD206表达下降;ROS水平显著增加。结论糖尿病模型鼠的炎症性细胞因子水平升高;脾脏巨噬细胞活性氧水平增加并向M1极化。

链脲佐菌素诱导糖尿病肺纤维化小鼠模型的建立与评价

目的 探究链脲佐菌素(streptozotocin, STZ)诱导糖尿病肺纤维化(diabetic pulmonary fibrosis, DPF)小鼠模型的建立方法,为临床研究提供稳定的DPF动物模型。方法 将60只雄性C57BL/6小鼠随机分为3组:正常对照组(NG,n=20)、糖尿病肺纤维化1组(DPF1,n=20)、糖尿病肺纤维化2组(DPF2,n=20)。隔夜禁食不禁水后测定小鼠空腹血糖和体重,随后DPF1组一次性腹腔注射大剂量STZ(150 mg/kg),DPF2组连续5 d每天腹腔注射小剂量STZ(50 mg/kg),NG组腹腔注射等量无菌柠檬酸盐缓冲液。注射完毕后,每天观察小鼠的一般情况,每周测定小鼠体重和随机血糖(random blood glucose, RBG),正常喂养16周,每4周每组随机选取5只小鼠处死取材,行病理和分子生物学检测,评估小鼠肺纤维化的程度。结果 STZ诱导后,DPF1组和DPF2组均出现“多饮、多尿、多食、体重减轻(三多一少)”的典型糖尿病症状。DPF1组和DPF2组诱导后体重增加均显著低于NG组,并于第8周后缓慢减轻(P<0.05);DPF1组和DPF2组随机血糖分别于第1周和第2周后高于16.7 mmol/L,并于第9周后趋于稳定(P<0.05)。病理染色结果显示,与NG组相比,DPF1组和DPF2组4周时均未见到明显纤维化病变;8周时可于血管周围见少量纤维化病变;12周时可见明显纤维化病变,且主要累及血管周围;16周时可见更明显的纤维化病变,且已累及周围肺组织。分子生物学结果与其相似,与NG组相比,DPF1组和DPF2组4周和8周时小鼠纤维化标志物胶原蛋白3的表达水平未见明显变化;12周时胶原蛋白3的表达明显增加(P<0.05);16周时胶原蛋白3的表达较12周时增加更明显(P<0.05)。结论 单次大剂量(150 mg/kg)腹腔注射STZ和连续5次小剂量(50 mg/kg)腹腔注射STZ经16周饲养后均可诱导DPF模型,均是DPF的理想动物模型。

链脲佐菌素腹腔注射制作大鼠2型糖尿病模型的方式与剂量研究

目的:探讨链脲佐菌素腹腔注射建立大鼠2型糖尿病模型的最佳方式和剂量。方法:选择成年雄性SPF级SD大鼠,高糖高脂饲料喂养4周后,采用不同方式和剂量(一次性注射50mg/kg;首次注射30mg/kg,后补注射35mg/kg)腹腔注射链脲佐菌素以建立大鼠2型糖尿病模型,观察不同方式和剂量链脲佐菌素腹腔注射建立2型糖尿病模型的成功率及大鼠死亡率。结果:高糖高脂饲料喂养4周后行链脲佐菌素50mg/kg一次性腹腔注射,成模率高达93.75%,血糖值达24.70±5.67mmol/L,但死亡率达65.00%,迫使实验终止。而首次注射30mg/kg链脲佐菌素,1周后再次注射35mg/kg的方法,成模率可达92.11%,8周后死亡率仅6.58%。结论:高糖高脂饲料喂养4周后分次腹腔注射30~35mg/kg链脲佐菌素,是获得稳定的大鼠2型糖尿病模型且具备高成模率、低死亡率的方法。

链脲佐菌素对糖尿病小鼠生精功能和睾丸m6A甲基化酶表达的影响

目的探讨链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)对糖尿病小鼠生精功能和睾丸m6A甲基化酶表达的影响。方法20只8周龄雄性ICR小鼠,随机分为溶媒对照组和模型组,腹腔注射STZ诱导糖尿病动物模型。注射后第2、4、6、8周检测血糖及体重;第8周采用精子计数法检测小鼠精子数量,HE染色检测精子存活率及睾丸形态,称量睾丸、附睾的重量;Real-time PCR和Western blotting检测各组小鼠睾丸中m6A甲基化酶mRNA及蛋白表达。结果与对照组相比,模型组小鼠空腹血糖显著增高,体重降低(P<0.01);睾丸及附睾重量显著下降(P<0.01)、精子数量显著下降(P<0.05);睾丸形态结构破坏,生精小管萎缩,管腔直径变小,各级生精细胞排列紊乱,管腔内精子数量减少;睾丸m6A甲基化酶METTL3、FTO、YTHDF3 mRNA表达降低(P<0.05);METTL3、FTO蛋白质表达显著降低(P<0.05)。结论STZ诱导的糖尿病小鼠出现生精障碍,其生精障碍可能与睾丸内m6A甲基化酶METTL3以及FTO的表达异常有关。

链脲佐菌素诱发性糖尿病大鼠早期视网膜病变模型的建立

目的观察链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病(DM)大鼠早期视网膜的形态学改变,评价该方法作为早期糖尿病视网膜病变(DR)动物模型的可行性。方法 64只体质量(180±20)g的雄性SD大鼠随机均分为CON组、DM组(n=32),DM组按60mg/kg体质量腹腔注射1%STZ1次建立DM大鼠模型;CON组腹腔注射等量柠檬酸缓冲液作为对照。注射前DM组、CON组平均体质量、血糖水平差异均无统计学意义。DM成模后每周测量各组体质量、血糖等一般生理指标。成模后第10周,各组随机抽样对视网膜组织进行H-E染色、FITC-dextran灌注视网膜血管铺片及透射电镜超微结构观察。结果 STZ腹腔注射诱导DM成模率100%。STZ腹腔注射后,DM组体质量增加不明显,后期甚至有所减轻;CON组体质量逐步增长,10周时DM组体质量明显低于CON组[(169.9±26.9)gvs(439.2±23.5)g,P<0.001]。STZ腹腔注射72h后,DM组血糖明显高于CON组[(26.63±4.54)mmol/Lvs(6.37±0.49)mmol/L,P<0.001],至第10周DM组血糖均>16.7mmol/L,CON组保持在5.6～7.4mmol/L。H-E染色显示DM组大鼠视网膜毛细血管扩张,间质水肿;CON组视网膜未见明显异常。FITC-Dextran灌注视网膜显示DM组血管迂曲,管径不规则,未见毛细血管荧光渗漏、微血管瘤、视网膜无灌注区等;CON组血管管径均匀一致、分支自然流畅。透射电镜下DM组视网膜超微结构的改变主要有:毛细血管基底膜增厚,内皮细胞指状突起,线粒体肿胀、嵴脱落、空泡样变,周细胞线粒体肿胀、嵴脱落;内核层双极细胞线粒体肿胀、嵴脱落、空泡样变;感光细胞膜盘间隙增宽、数量减少;神经节细胞线粒体肿胀、嵴脱落、空泡样变。CON组视网膜超微结构未见明显异常改变。结论 STZ诱导的DM大鼠在病程10周时即已出现类似人类早期背景型糖尿病视网膜病变(BDR)的相关形态学改变,可作为早期DR的动物模型以用于相关研究,且该方法简单经济、用时较短、重复性好、成功率高。

芙蓉菊多糖对链脲佐菌素诱导的糖尿病小鼠作用研究

目的:探讨芙蓉菊多糖对链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病小鼠的治疗作用。方法:取50只ICR小鼠高脂饲料饲喂4周后,禁食12h,腹腔注射150mg·kg-1/bw STZ。72h后测量小鼠空腹血糖,血糖>16.7mmol/L表明造模成功。将造模成功的小鼠随机分为模型组,阳性对照组,芙蓉菊多糖低、中、高剂量组。阳性对照组按200mg·kg-1盐酸二甲双胍灌胃给药,芙蓉菊多糖低、中、高剂量组分别按50mg·kg-1、100mg·kg-1、200mg·kg-1灌胃给药,连续给药14d,模型组给予等体积的生理盐水。末次给药前禁食12h,给药1h后眼球取血,离心取血清待测。测定各组小鼠血糖含量和血清中甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的含量,观察胰腺组织形态学变化。结果:给药组小鼠的体质量无明显下降,胰岛细胞受损减少,空腹血糖值水平降低。与模型组相比,芙蓉菊多糖中、高剂量组均可降低小鼠TG、TC、LDL-C水平(P<0.05),升高HDL-C水平(P<0.05),芙蓉菊多糖高剂量组效果更为明显;芙蓉菊多糖中、高剂量组均可显著降低丙氨酸氨基转移酶(ALT)和门冬氨酸氨基转移酶(AST)含量(P<0.05),有效保护肝组织。结论:芙蓉菊多糖可以降低血糖,调节脂质代谢,保护胰腺和肝损伤,其对胰腺的保护作用与调节糖脂代谢有关。

链脲佐菌素诱发大鼠糖尿病时牙周组织中的酶组织化学改变

链脲佐菌素诱发的大鼠实验性糖尿病,观察糖尿病大鼠、正常对照组大鼠牙周组织细胞内的酶组织化学改变以及牙周组织学改变.结果表明糖尿病不引起牙周组织的炎症加剧、深层组织的破坏,但与正常对照组大鼠相比较,糖尿病大鼠牙周组织细胞中的一些与糖、脂和蛋白质代谢有关的酶类如:琥珀酸脱氢酶、苹果酸脱氢酶、谷氨酸脱氢酶、乳酸脱氢酶和α-甘油磷酸脱氢酶活性下降,反映局部牙周组织中糖的分解代谢、脂和蛋白质的合成代谢减弱,提示牙周组织中发生的这些代谢改变可能是糖尿病使牙周组织对局部致病因子敏感性提高的原因之一.

链脲佐菌素小鼠糖尿病胰岛结构改变的定量病理学测试及分析

目的:定量揭示链脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)诱发的小鼠糖尿病胰岛结构改变的特点,为分析胰岛功能改变补充定量病理学基础。方法:腹腔注射STZ,诱发Balb/c小鼠糖尿病;过量CO_(2)处死小鼠并取胰腺,常规病理制样、胰岛素免疫组化染色、图像测试及定量分析。结果:造模第8周,糖尿病组(DM组)小鼠血糖显著高于正常对照组(NC组)小鼠,DM组小鼠血糖均值为19.3 mmol/L;相比NC组小鼠,DM组小鼠胰岛数目、β细胞数目及面积显著减少(P<0.05),计算得出β细胞数量丧失约62.7%,胰岛β细胞面积丧失约27.0%,胰岛素阳性单位(PU值)表达减少约53.8%。DM组小鼠胰岛β细胞面积密度(A_(Aβ,PI))、面数密度(N_(Aβ,PI))、数量百分比(β_(Per))均显著降低(P<0.05),其中PU值、A_(Aβ,PI)、β_(Per)与血糖升高呈负相关,皮尔森相关系数(R值)分别为-0.653、-0.736和-0.899(显著性均<0.05);建立造模时间(t)与胰岛β细胞数量百分比改变的函数:β_(Per)(%)=79.68-9.74t+0.38t^(2)+0.06t^(3)-4.66×10^(-3)t^(4)+2.86×10^(-5)t^(5)+1.68×10^(-5)t^(6)。结论:通过定量病理学技术测量糖尿病小鼠模型胰岛和β细胞形态学改变的相关指标,能够帮助准确评估胰岛的损伤情况,并建立血糖变化和所测量数值的相关数学模型,用以预测血糖升高导致胰岛损伤的具体情况。

链脲佐菌素诱发豚鼠糖尿病模型的研制

为建立人类糖尿病的动物模型 ,将实验组豚鼠腹腔注射链脲佐菌素 ( STZ)枸橼酸缓冲液 2 0 0 mg/ kg,2 4h后每天定时皮下注射 2 U长效胰岛素 ,维持一定水平的血清胰岛素 ;对照组注射等量空白缓冲液。 6周后两组豚鼠空腹称重 ,并用眼眶后静脉丛穿刺法采血 5 ml/只 ,测定血糖及血清胰岛素含量。结果 :实验组豚鼠血糖明显提高 ,血清胰岛素明显减少。该模型对研究 I型糖尿病及其它相关疾病可能具有一定的价值。

链脲佐菌素诱发的大鼠糖尿病对垂体TSH细胞的影响

目的:观察实验性糖尿病对垂体TSH细胞的影响,探讨糖尿病垂体—甲状腺轴异常的发生机制。方法:采用链脲佐菌素(STZ)诱发大鼠糖尿病,应用PAP免疫细胞化学染色显示垂体促甲状腺激素细胞(TSH细胞)后,以形态计量学方法观察大鼠TSH细胞形态结构的变化。结果:糖尿病鼠TSH细胞的数密度、体密度均较对照组明显提高(P<0.05,P<0.01),而平均细胞直径明显降低(P<0.01),说明细胞数量增加,细胞直径变小。糖尿病鼠的强阳性TSH细胞百分率较对照组明显升高(P<0.05)。糖尿病加胰岛素组的上述指标均较糖尿病鼠有明显逆转,趋向正常组。结论:实验性糖尿病导致垂体TSH细胞发生明显的形态学改变,胰岛素治疗能逆转上述变化,提示糖尿病TSH细胞的变化与胰岛素缺乏密切相关。

链脲佐菌素诱发的大鼠糖尿病对甲状腺的影响

目的:观察链脲佐菌素(STZ)诱发的实验性糖尿病对大鼠甲状腺的影响。方法:20只大鼠随机分为对照组和糖尿病组,STZ一次性腹腔注射诱发大鼠糖尿病,应用放射免疫、免疫组织化学及形态计量学方法观察各组大鼠甲状腺形态及功能的变化。结果:与对照组大鼠相比,糖尿病组大鼠血清T3、T4含量,甲状腺滤泡面积,平均滤泡上皮高度及T3、T4免疫反应阳性滤泡数量显著降低或减少(P＜0．05,P＜0．01);胶体面积和胶体形状因子显著升高(P＜0．01)。结论:糖尿病时甲状腺激素合成与分泌障碍,甲状腺机能减退。