2例疑似中链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症新生儿及其父母外周血基因检测结果分析

目的分析2例疑似中链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症(MCADD)新生儿及其父母外周血基因突变检测结果.方法2例新生儿,采集足跟血采用串联质谱检测技术检测足跟血中链脂肪酸(氨基酸、有机酸和肉碱),进行遗传代谢病筛查.采集2例新生儿及其父母外周血进行高通量、Sanger测序,分析其基因突变情况.结果2例新生儿均存在足跟血中链脂肪酸异常,其中链酰基肉碱C6~C10均升高,其中辛酰肉碱C8升高尤为明显,外周血辛酰基肉碱水平分别为2.34、2.95μmol/L,C8/C10比值分别为8.67、7.02.患儿1存在ACADM基因11号外显子c.1040G>T位点纯合突变;患儿1父母均为ACADM基因11号外显子c.1040G>T杂合突变.患儿2存在ACADM基因5号内含子c.387+1 del G和7号外显子c.587G>A位点复合杂合突变;患儿2父亲可见ACADM基因7号外显子c.587G>A突变,未见5号内含子c.387+1 del G突变;患儿2母亲可见ACADM基因5号内含子c.387+1 del G突变,未见7号外显子c.587G>A突变.2例患儿均确诊MCADD.结论2例MCADD患儿存在足跟血中链脂肪酸异常,其中C6~C10升高,C8升高更明显,均确诊MCADD.2例MCADD患儿的发病与ACADM基因有关,并遗传自父母.

串联质谱技术在X-连锁肾上腺脑白质营养不良病筛查中的应用价值

目的建立串联质谱(MS/MS)检测极长链酰基肉碱(VLCAC)和溶血磷脂酰胆碱(LPC)的方法,初步探讨VLCAC和LPC对X-连锁肾上腺脑白质营养不良病(X-ALD)的诊断价值。方法选取被明确诊断为X-ALD的患儿10例和行遗传代谢性疾病筛查的正常新生儿3530名。收集所有对象的滤纸干血片样本,使用含稳定同位素内标[2H3-二十六碳酰基肉碱(2H3-C26)和2H4-二十六碳溶血磷脂酰胆碱(2H4-C26:0-LPC)]的溶剂萃取滤纸干血片样本中的VLCAC和LPC(非衍生化法),直接采用MS/MS检测二十碳酰基肉碱(C20)、二十二碳酰基肉碱(C22)、二十四碳酰基肉碱(C24)、二十六碳酰基肉碱(C26)、二十碳溶血磷脂酰胆碱(C20:0-LPC)、二十二碳溶血磷脂酰胆碱(C22:0-LPC)、二十四碳溶血磷脂酰胆碱(C24:0-LPC)和二十六碳溶血磷脂酰胆碱(C26:0-LPC)。对建立的MS/MS方法进行方法学评价(精密度、准确度、线性)。采用偏最小二乘法分析各项指标对疾病的贡献度。采用受试者工作特征(ROC)曲线评估各项指标诊断X-ALD的效能。结果低水平C26和C26:0-LPC的批内变异系数(CV)分别为4.16%和7.75%,批间CV分别为8.29%和9.17%;高水平C26和C26:0-LPC的批内CV分别为5.57%和8.68%,批间CV分别为7.45%和8.11%。准确度为93.25%~104.94%。C26和C26:0-LPC实测值与预测值之间的决定系数(r2)分别为0.996和0.994。除C20、C24:0-LPC/C20:0-LPC、C24:0-LPC/C22:0-LPC、C26:0-LPC/C20:0-LPC外,其他指标正常对照组与X-ALD组差异均有统计学意义(P<0.05)。C26、C26/C22比值和C26:0-LPC对疾病的贡献度最高(偏回归系数分别为0.1753、0.1300和0.0792)。ROC曲线分析结果显示,C26和C26/C22比值诊断X-ALD的敏感性均为100%,特异性均为100%,曲线下面积(AUC)均为1.0;C26:0-LPC诊断X-ALD的敏感性为100%,特异性为72.9%,AUC为0.972。结论非衍生化MS/MS检测VLCAC和LPC有较高的精密度和准确度,C26或可作为诊断X-ALD的生物标志物。

串联质谱法在过氧化物酶体病筛查中的应用

目的:探讨串联质谱法检测极长链酰基肉碱(VLCAC)和溶血磷脂酰胆碱(LPC)在过氧化物酶体病筛查中的价值。方法:选取2017年1月至2021年3月以发育迟缓等神经系统异常就诊于上海市儿童医院,根据临床症状、磁共振成像和基因检测结果明确诊断为X-连锁肾上腺脑白质营养不良(X-ALD)患儿14例和脑肝肾综合征(ZS)患儿4例。另选取同年龄段体检儿童200名为健康对照组。使用含稳定同位素内标的溶剂萃取所有对象干血斑标本中的VLCAC和LPC,直接采用串联质谱法检测二十碳酰基肉碱(C20)、二十二碳酰基肉碱(C22)、二十四碳酰基肉碱(C24)、二十六碳酰基肉碱(C26)、二十碳溶血磷脂酰胆碱(C20:0-LPC)、二十二碳溶血磷脂酰胆碱(C22:0-LPC)、二十四碳溶血磷脂酰胆碱(C24:0-LPC)和二十六碳溶血磷脂酰胆碱(C26:0-LPC)水平,并计算C24/C20、C24/C22、C26/C20、C26/C22、C24:0-LPC/C20:0-LPC、C24:0-LPC/C22:0-LPC、C26:0-LPC/C20:0-LPC、C26:0-LPC/C22:0-LPC比值。采用Kruskal-Wallis H检验和Mann-Whitney U检验比较各组间VLCAC和LPC各指标检测值及比值,采用偏最小二乘法和变量投影重要度权重评分分析各指标对判断疾病的贡献度。结果:除C24:0-LPC/C20:0-LPC外,所有指标和比值在各组间差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01);X-ALD组与健康对照组、ZS组与健康对照组间,各指标有不同程度的差异,但X-ALD组与ZS组间差异无统计学意义(P>0.05);偏最小二乘法分析显示X-ALD和ZS组与健康对照组能够完全分离,C26的变量投影重要度值最大。结论:串联质谱法检测VLCAC和LPC可作为过氧化物酶体病筛查的方法,其中C26或可作为诊断敏感指标。

希特林蛋白缺陷病的诊断及治疗进展

希特林蛋白缺陷病（Citrin deficiency,CD）是一种因位于染色体7q21.3上的SLC25A13基因突变,引起肝细胞线粒体内的希特林蛋白功能不足,机体代谢紊乱,最终导致复杂多样临床表现的常染色体隐性疾病。根据起病年龄及临床表现,目前主要分为两大类,

肺动脉高压患者脂肪酸代谢异常与右心室脂毒性的关系

肺动脉高压（pulmonary arterial hypertension,PAH）中右心衰竭的机制尚未完全阐明。在PAH动物实验模型中发现脂肪酸代谢异常,然而,还没有研究针对人类PAH的全身和心肌脂肪酸代谢情况进行分析。方法与结果：获取人类血液和右心室组织,应用无创成像检测PAH患者及对照人群脂肪酸代谢途径不同阶段的特点。与对照组比较,PAH患者循环游离脂肪酸和长链酰基肉碱水平升高;右心室长链脂肪酸增加,长链酰基肉碱显著减少。