链霉素抗性筛选法在选育博来霉素A2组分高产菌株中的应用

应用链霉素抗性筛选法提高博来霉素产生菌Streptomycin verticillus SIPI 7011产博来霉素A2组分的产量,将经紫外线诱变处理过的博来霉素产生菌孢子涂布在含有链霉素最小抑制浓度(180μg/ml)的培养基平板上,获得了151株链霉素抗性突变株。其中博来霉素A2产量高于出发菌株的有19株,产量阳性效率达到12.6%,并获得一株产抗生素能力为出发菌株约1.25倍的突变株。

链霉素抗性筛选井冈霉素高产菌株的研究

对井冈霉素产生菌吸水链霉菌井冈变种SJ-6(Streptomyce shygroscopicusvar. Jingganggensis Yen)进行UV和亚硝酸复合诱变,在含有菌株孢子最小抑制浓度的链霉素培养基平板上,采用链霉素抗性筛选法获得大量的链霉素抗性突变株,筛选到突变株UN-80,在摇瓶发酵条件下,井冈霉素化学效价达15 943μg/ml,比出发菌株SJ-6提高了84.4%。该菌株连续培养5代,其化学效价基本稳定,具有较好的遗传稳定性。

链霉素抗性突变理性筛选新霉素高产菌株

采用化学诱变剂NTG结合链霉素抗性筛选法获得新霉素高产菌株。出发菌株费氏链霉菌(Streptomyces fradiae)FS1109的孢子悬液经不同剂量的化学诱变剂NTG处理后,涂布在含链霉素最小抑制浓度(3μg/m L)的培养基平板上培养,获得大量的链霉素抗性突变株。经影印法初筛和摇瓶发酵复筛,正突变率高于负突变率,获得一株遗传性状稳定的Streptomyces fradiae Str 63菌株,其新霉素生物活性单位比出发菌株提高了50%以上,且C组分较出发菌株的低。

梧宁霉素产生菌链霉素抗性基因突变株的筛选初报

采用紫外线、亚硝酸、亚硝酸与紫外线复合处理对菌株的孢子进行诱变 ,在含有链霉素最小抑制浓度(4μg/mL)的高氏平板筛选 ,分别得到 114株、110株、12 4株链霉素抗性突变株 ,其中梧宁霉素效价高于出发菌株的分别为 9株、9株、18株 ,正突变率分别达到 7.89%、8.18%、14 .5 2 % ,其中突变株HU 74的效价比出发菌株提高了 12 %。

链霉素抗性突变理性筛选链霉素高产菌株

以灰色链霉菌(Streptomyces griseus)CICC11002为出发菌株,采用紫外诱变并结合链霉素抗性筛选法育种,以期获得高产菌株。灰色链霉菌孢子悬液经90%紫外致死剂量诱变后,在含有链霉素最小抑制浓度(0.8μg/m L)的培养基平板上,分离得到105株链霉素抗性突变菌。其中链霉素产量高于出发菌株的有19株,正突变率高达18.1%,同时获得了产链霉素能力约为出发菌株2倍的突变株SM-55。

链霉素抗性突变——纳他霉素高产菌株的选育研究

应用链霉素抗性筛选法 ,将经过紫外线诱变处理的纳他霉素生产菌———褐黄孢链霉菌 (Streptomycesgilvosporeus)ATCC1 332 6的孢子涂布在含有链霉素最小抑制浓度 (0 6μg mL)的培养基平板上 ,获得了 1 2 2株链霉素抗性突变株。其中纳他霉素产量高于出发菌株的有1 3株 ,产量阳性效率达到 1 0 6 % ,同时获得了产抗生素能力为出发菌株 1 46倍的突变株SG 56。

链霉素抗性突变—万古霉素高产菌株的选育研究

以东方拟无枝酸菌(Amycolatopsisorientalis)AO-4为出发菌株,经紫外线(15w,253.7nm,距离30cm)诱变处理,筛选链霉素抗性突变株(链霉素浓度1000μg/ml),从中获得万古霉素高产变株AmycolatopsisorientalisAO-29,其发酵效价较出发菌株提高170%。传代实验表明该变株的高产性能遗传特性较稳定。

紫外诱变结合链霉素抗性选育小诺霉素高产菌株

以自然筛选的小诺霉素产生菌XDBJ-CF为诱变选育的出发菌株,经最适照射剂量60 s的紫外诱变后,在含20μg/mL链霉素的高氏平板上培养,获得链霉素抗性突变株。突变株摇瓶初筛试验显示,高产突变株的数量大于低产突变株。从正突变株中挑选相对发酵单位130%以上的16株高产突变株进行摇瓶复筛,获得2株小诺霉素高产突变株XDBJ-CF-09-24、XDBJ-CF-09-90,其小诺霉素产量分别比出发菌株提高37.8%和46.3%,C2b组分分别较出发菌株提高10%和20%。

键霉素降解菌的篩選及其降解性的初步测定

從生産链霉素工廠附近的土壤中篩選出十種具有链霉素抗性的菌株，然後進一步筛選出三株具有链霉素降解活性的菌株。鏈霉素濃度的测定采用紫外可見分光光度法：利用鏈霉素的特有性質——参芽酚反應。鏈霉素在碱性溶液中，鏈霉糖經重排使環擴大形成参芽酚，参芽酚舆硫酸鐵铵溶液形成紫红色配位化合物，此配位化合物在528nm處存在最大吸收。结果表明這三種菌株降解鏈霉素的能力都很高，最大降解濃度爲1200μg/mL，并且這三種菌體的生長不受鏈霉素的影響。

氮离子注入选育阿维拉霉素高产菌株的研究

以提高产绿链霉菌(Streptomyces viridochromogenes)SV-1产阿维拉霉素(Avilamycin)产量为目的,采用低能氮离子注入技术,辅之以链霉素抗性筛选法进行诱变选育研究。结果表明,“马鞍”区域即注入剂量范围在3×10^(15)～5×10^(15)ions/cm^2诱变效果最佳,菌株的抗药性突变与产量突变密切相关,链霉素抗性筛选法具有可行性。在摇瓶条件下,最终获得稳定性良好,阿维拉霉素产量达到83．5mg/L,较出发菌株提高195%的突变株SVT-45。实验表明,离子注入技术是一种有潜力的微生物诱变育种新方法。

氮离子注入玫瑰孢链霉菌选育达托霉素高产菌株的研究

通过离子注入技术对达托霉素产生菌玫瑰孢链霉菌(Streptomyces roseosporus)进行诱变选育,使用N^+作为离子源,初步探讨N^+注入对达托霉素生产菌所产生的生物学效应。通过链霉素抗性筛选法获得多株遗传稳定性较好的高产突变株,其中突变株N3-36发酵单位比出发菌株提高了26%。

纳他霉素高产菌株的诱变选育

以褐黄孢链霉菌(ATCC13326)为出发菌株,紫外诱变后,结合链霉素抗性筛选法选育纳他霉素高产菌株。原始菌株活化后,测定其最小链霉素抑制质量浓度为8μg/mL。采用90%的紫外致死剂量,照射108mL-1ATCC13326孢子悬液,诱变后涂布于8μg/mL链霉素选择培养基上,筛选链霉素抗性突变株。通过形态指标初步选择5株突变株进行发酵性能测定,种子培养26 h,摇瓶发酵96 h,用紫外分光光度计在303 nm下测定其吸光值,计算纳他霉素发酵产量。结果表明原始菌株纳他霉素发酵产量为1.229 g/L,诱变获得的两株高产突变株纳他霉素发酵产量分别为1.552和1.776 g/L,分别高出原始菌株26.3%、44.5%。

杀虫抗生素高产菌株的选育

在链霉素对杀虫抗生素菌株GX-29孢子的致死浓度测定基础上,采用紫外和微波诱变相结合的方法对菌株孢子进行诱变处理,诱变处理的孢子涂布在含链霉素最小抑制浓度(18.2μg/ml)的高氏平板上,获得了大量的链霉素抗性基因(sty)突变株。进一步通过摇瓶复筛,获得高产突变株L8,其摇瓶发酵的杀虫活性为出发菌株1.94倍。该菌株经多次传代,遗传性状较稳定。