肺癌病理应用支气管冲洗细胞块免疫组化链霉菌亲生物素蛋白-过氧化物酶连接法染色的诊断效果及检出率评价

目的探讨肺癌病理应用支气管冲洗细胞块免疫组化链霉菌亲生物素蛋白-过氧化物酶连接法(SP)染色的诊断效果及检出率。方法选取2017年2月至2021年12月广东省开平市中心医院收治的70例经支气管冲洗液检查阳性患者作为研究对象。采用液基薄层细胞学(TCT)技术制备细胞块,分别采用免疫组化SP法、苏木精伊红染色(HE)进行常规细胞学检查,比较两种检测方法诊断效能及不同肺癌类型免疫组化SP法检查后不同抗体阳性表达率比较。结果免疫组化SP法对恶性肿瘤诊断的灵敏度为96.15%、准确度为95.71%,均高于HE染色的69.23%、70.00%(P<0.05),特异度为94.44%,高于HE染色的72.22%,但差异无统计学意义。免疫组化SP法对肺癌病理类型总检出率高于HE染色,差异有统计学意义(P<0.05)。免疫组化SP法对肌上皮(p63)、细胞角蛋白5/6抗体(CK5/6)、细胞角蛋白7(CK7);甲状腺转录因子-1(TTF-1)、突触素(Syn)、人表皮生长因子受体-5(CD56),增殖细胞的核抗原(Ki67),天冬氨酸蛋白酶(Napsin-A)表达阳性率均高于HE染色,差异统计学意义(P<0.05)。不同类型肺癌患者p63、CK5/6、CK7、TTF-1、Syn、CD56、Ki67、Napsin-A阳性表达率比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论支气管冲洗液细胞块免疫组化SP法染色对肺癌有较高的诊断价值,对不同类型肺癌有较高的检出率及鉴别率,具有重要的临床意义。

生物素-链霉亲和素-过氧化物酶法快速诊断呼吸道合胞病毒感染

目的：建立检测下呼吸道感染婴幼儿粘膜细胞呼吸道合胞病毒（RSV）抗原的方法。方法：以生物素标记兔抗RSV抗体，鼻咽部粘膜细胞涂片与该抗体作用后加链霉亲和素-过氧化物酶反应，二氨基联苯胺显色，显微镜下观察结果。结果：RSV抗原总阳性率为41．6％，临床典型和可疑病例抗原检出率分别为47．9％和44．9％，临床不典型者阳性率12．5％（X2=7．9，P＜0．05）。阳性标本中细胞着成棕色，易与阴性标本相区别。结论：本法简便、快速，具有一定敏感性和特异性，适合于基层推广应用。

用标记链亲和素生物素过氧化物酶法检测BVD/MD

瑞士学者B.Thür等应用标记链亲和素生物素过氧化物酶法(a labelled streptavidin biotin peroxidase method)对具有腹泻症状的284头牛进行牛病毒性腹泻/粘膜病(BVD/MD)病毒检测,检出65头为阳性。该免疫组织学方法适用于检测未予固定组织的冰冻切片中的BVDV。

吸水链霉菌LP-93菌丝体中洋橄榄叶素衍生物的分离与结构鉴定

目的分离纯化吸水链霉菌LP-93菌丝体中的抗菌活性成分。方法利用硅胶柱色谱、高效液相色谱等方法对菌株LP-93菌丝体中的化学成分进行分离纯化,根据核磁共振、质谱、紫外光谱等波谱学方法鉴定化合物结构。采用微量二倍稀释法评价化合物的抗菌活性。结果从LP-93菌丝体中分离鉴定了1个洋橄榄叶素衍生物,其结构为11,11’-O-二甲基-14’-去乙基-14’-甲基-洋橄榄叶素。该化合物对结核分枝杆菌具有抑制活性,MIC值为0.48μg/ml。结论11,11’-O-二甲基-14’-去乙基-14’-甲基-洋橄榄叶素为吸水链霉菌LP-93抗菌活性成分之一。

抗苗勒氏管激素的生物素-链霉亲和素-辣根过氧化物酶酶促化学发光免疫分析方法的建立

目的:抗苗勒氏管激素(AMH)在评价卵巢储备功能方面具有更高的准确性,将其用于青春期、生育期女性的生育指导时具有很好的临床价值。目前对于AMH的检测,临床上常采用的是酶联免疫分析法,但存在灵敏度低、检测范围窄等缺点,而影响AMH实际水平的测定,使得对病情的预估不准确对疾病的治疗产生影响。因此,建立一种低成本、高敏感度的检测AMH水平的方法尤为重要。方法:利用生物素-亲和素放大系统,将一组抗AMH的第一抗体包被微孔板,同时用生物素标记第二抗体,与第一抗体-抗原复合物结合之后,再与生物素-链霉亲和素-辣根过氧化物酶结合物结合,加入发光底物,建立AMH酶促化学发光免疫分析方法,同时对这一体系的线性、灵敏度、特异度、稳定性、回收率等参数进行检测,并与常规ELISA法进行相比检测AMH浓度。结果:线性检测范围为(0.42～50.00)U/ml,该体系稳定性好,灵敏度0.42U/ml,批内差异小于10.0%,批间差异小于10.0%,与常规ELISA对比差异有统计学意义。结论:AMH的生物素-链霉亲和素-辣根过氧化物酶酶促化学发光免疫分析易于操作、灵敏度高、价格低廉,适用于临床检测。

上皮特异性抗原和CD44蛋白在原发性结直肠癌组织中的表达及临床意义

目的分析免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶(SP)法测定原发性结直肠癌组织中上皮特异性抗原(ESA)和CD_(44)蛋白表达的关系及临床病理意义。方法选择2012年1月至2014年1月来中国医科大学附属盛京医院检查并确诊的结直肠癌患者52例(结直肠癌组),选择同期来院检查的正常结直肠黏膜组织患者20例(正常黏膜组)及伴不典型增生的结直肠腺瘤20例(不典型增生组),采用免疫组织化学SP法检测对三组ESA和CD_(44)蛋白表达水平。结果在年龄>50岁、肿瘤直径>3 cm、浸润深度至浆膜及Dukes分期C+D期的ESA阳性表达率高于年龄≤50岁、肿瘤直径≤3 cm、浸润深度累及肌层、Dukes分期A+B者,差异有统计学意义(P<0.05)。有淋巴结转移、Dukes分期C+D期CD_(44)蛋白表达高于无淋巴结转移和Dukes分期A+B者(P<0.05)。结论 ESA、CD_(44)蛋白表达影响结直肠癌的发生发展,与浸润转移密切相关,在结直肠癌组织检测中同步检测ESA、CD_(44)的蛋白表达,并分析其相关性,有助于结直肠癌的病理判断,在临床中具有一定的临床价值。

非小细胞肺癌凋亡指数与Bax表达的临床病理意义

目的：探讨非小细胞肺癌组织凋亡指数（AI）与Bax表达的临床病理意义。方法：应用免疫组织化学链霉菌抗生物素-过氧化物酶（S-P）法检测46例非小细胞肺癌切除标本以及23例癌旁正常肺组织的Bax表达情况，同时应用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP原位切口末端标记（TuNEL）法检测非小细胞肺癌及癌旁正常肺组织AI的大小，并比较不同年龄、不同病理类型、临床分期、不同级别、淋巴结有无转移患者Bax的表达和AI的大小。结果：肺鳞癌与肺腺癌组织中Bax的阳性表达率分别为52．38％、64．00％，低于癌旁肺组织（91．30％）（P〈0．05），不同临床病理特征患者Bax的表达差异无统计学意义（P〉0．05）。肺鳞癌、肺腺癌的AI为（5．67±3．11）％与（6．58±3．58）％，均低于癌旁正常肺组织（14．07±5．16）％（P〈0．05），Ⅲ～Ⅳ期患者AI高于Ⅰ～Ⅱ期患者（P〈0．05），而其它临床病理特征患者AI差异无统计学意义（P〉O．05）。Bax阳性表达的患者AI为（6．93±2．90）％，高于Bax阴性表达的患者（5．04±3．76）％，但差异无统计学意义（P〉0．05）。结论：非小细胞肺癌患者中Bax表达下调、缺失以及AI的下降可能在肿瘤的发生、发展中起一定的作用。

热休克蛋白-70在人类糖尿病性白内障晶状体上皮细胞中的表达及意义

目的 :探讨热休克蛋白 70在人类糖性白内障晶状体上皮细胞中的表达及意义。方法 :采用链霉菌抗生物素蛋白碱性磷酸酶 (streptavidin alkalinephosphatase ,S P)免疫组化技术检测热休克蛋白 70 (heatshockprotin 70 ,HSP 70 )在人类糖性白内障 (2 5例 )和正常晶状体 (7例 )上皮细胞中的表达情况。结果 :热休克蛋白 70在人类糖性白内障晶状体上皮中全部为阳性表达 ,而在正常晶状体上皮细胞中全部为阴性表达 ,二者差异有显著性 (χ2 =2 6 .4 2 ,P <0 .0 1)。结论 :热休克蛋白 70在人类糖尿病性白内障发生、发展中起重要作用。

山羊黄体弥散性神经内分泌细胞的分布

为了探查山羊卵巢黄体中是否存在弥散性神经内分泌细胞，采用免疫组化链霉素抗生物素蛋白一过氧化物酶法对12～18月龄妊娠奶山羊卵巢中弥散性神经内分泌细胞标志物的分布进行了研究。结果显示：黄体组织中各区均含有催产素、神经元特异性烯醇化酶、S-100蛋白、突触素和5-羟色胺样免疫反应阳性细胞。这些细胞散在或成团分布，多呈圆形、卵圆形和三角形，一些细胞具有明显的突起。阳性细胞数由多至少顺序为：催产素、突触素、S-100蛋白、神经元特异性烯醇化酶、5-羟色胺。鉴于神经元特异性烯醇化酶、S-100蛋白、突触素和5-羟色胺是弥散性神经内分泌系统广谱的、共同的细胞标记物，结果提示山羊卵巢黄体中存在弥散性神经内分泌细胞。

P34^(cdc2)、Cyclin B1在大肠癌中的表达及意义

目的:研究p34cdc2、细胞周期素B1(cyclin B1)在大肠癌组织中的表达,并探讨其与大肠癌发生、发展的关系. 方法:应用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶法检测p34cdc2、cyclin B1在64例大肠腺癌组织及10例正常对照大肠组织中的表达情况. 结果:64例大肠癌组织中p34cdc2、cvclin B1表达阳性率分别为68.75%和82.81%,定位于细胞质中,呈棕黄色或棕褐色.10例正常对照大肠组织中p34cdc2、cvclin B1部分为弱阳性及中度阳性表达.病例组与对照组比较差异均有显著性(P<0.05).cyclin B1与p34cdc2的表达呈正相关,相关系数为0.586. p34cdc3和cyclin B1在大肠癌组织中的表达在有淋巴结和远隔器官转移组与没有淋巴结和远隔器官转移组间其差异有显著性(P<0.05);而在根据患者年龄、性别、肿瘤的原发部位、分化程度等进行分组的组间其表达的差异没有显著性. 在大肠癌组织中PCNA阳性细胞呈弥漫分布,呈明显异质性,阳性率为73.44%.在正常大肠组织中见PCNA阴性或少量阳性表达.经统计学分析在大肠癌组织中PCNA的表达与p34cdc2和cyclin B1均没有相关性. 结论:p34cdc2、cyclin B1在大肠癌中呈过表达,可作为反映大肠癌淋巴结转移和远隔器官转移的指标之一.

KiSS-1蛋白metastin及基质金属蛋白酶-9在子宫内膜癌组织中的表达及意义

目的检测KiSS-1及基质金属蛋白酶(MMP-9)在子宫内膜癌组织中的表达,探讨其临床意义及两者相关性。方法采用链霉菌抗生物素蛋白-过氧化酶连接(SP)法检测50例子宫内膜癌,13例子宫内膜上皮性瘤样病变(EIN)及18例正常子宫内膜组织中KiSS-1及MMP-9的表达情况和其与各种临床病理参数的关系,同时分析两者表达的相关性。结果KiSS-1蛋白metastin在子宫内膜癌组中的表达率(48.0%)明显低于EIN组(92.3%)及正常内膜组(83.3%),并且其在子宫内膜癌组中的表达率与临床分期、组织学分级、肌层浸润深度及淋巴结转移密切相关(P均<0.05)。MMP-9在子宫内膜癌组(58%)和EIN组(76.9%)中的表达明显高于正常内膜组(27.8%),其在子宫内膜癌组中的表达率也与临床分期、肌层浸润深度密切相关(P均<0.05)。KiSS-1蛋白metastin与MMP-9在子宫内膜癌中的表达存在明显负相关(P<0.05)。结论KiSS-1蛋白metastin的表达缺失和MMP-9的表达可能与子宫内膜癌的浸润、转移有关。

Survivin蛋白在肺鳞癌中的表达及临床意义

目的探讨Survivin蛋白在肺鳞癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系。方法用链霉菌生物素蛋白 过氧化物酶免疫组织化学法 (SP法 ) ,检测 4 2例手术切除的肺鳞癌组织及其 30例正常肺组织中Survivin蛋白的表达。结果 5 9 0 9%的肺鳞癌组织有Survivin蛋白表达 ,30例正常肺组织中无Survivin蛋白表达 (P <0 0 0 1)。Survivin蛋白与肺鳞癌组织病理分级、TNM分期、淋巴结转移预后正相关与性别、年龄、吸烟史无明显相关性 (P均 >0 0 5 )。结论Survivin蛋白在肺鳞癌组织发生发展中起抑制癌细胞凋亡的重要作用 ,从而Survivin基因有望成为基因治疗的新靶点。

一种新的免疫组化染色方法——SP技术应用与体会

SP方法全称为链菌素亲生物素——过氧化酶连接法(Streptavidin Peroxidase Con-jugated Method).该方法首先由美国Zymed公司于1986年建立和报道,而国内应用则是近几年的事。我室于1994年底开始应用此法,经半年多的实践取得了较满意的效果,现介绍如下:

免疫组织化学在乳腺癌鉴别诊断中的临床意义

目的探讨免疫组织化学法在乳腺癌鉴别诊断中的临床意义。方法对江油市人民医院病理科2006年1月至2013年9月收治的852例浸润性乳腺癌组织标本进行链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法检测。比较不同年龄(≤50岁359例、>50岁493例),不同肿瘤最大直径(T)(T≤2 cm 395例、2 cm<T≤5 cm 401例、T>5 cm 56例),不同临床分期(Ⅰ期251例、Ⅱ期346例、Ⅲ期158例、Ⅳ期97例)的孕激素受体(PR)、雌激素受体(ER)、C-erb B-2、血管内皮生长因子(VEGF)、p53和Ki-67的阳性率。结果PR阳性率在低年龄组(58.77%)、肿瘤T≤2 cm(60.00%)、临床分期早较高且差异均有统计学意义(P<0.05);肿瘤T≤2 cm,ER阳性率(68.35%)显著高于其他肿瘤大小组(P<0.01),不同年龄、临床分期的阳性率差异无统计学意义(P>0.05),C-erb B-2在肿瘤大小、临床分期的阳性率差异均有统计学意义(P<0.05);VEGF、p53和Ki-67在不同年龄组、肿瘤体积组、临床分期的阳性率差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论免疫组织化学指标中PR、ER、C-erb B-2在乳腺癌鉴别诊断中具有重要指导意义,可用于临床上鉴别诊断乳腺癌。

湿生扁蕾酮对UC肠纤维化大鼠肠上皮细胞间质转化的影响

目的探讨湿生扁蕾酮对溃疡性结肠炎(UC)肠纤维化大鼠肠上皮细胞间质转化的影响。方法通过2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)诱导大鼠溃疡性结肠炎肠纤维化模型,利用湿生扁蕾酮干预溃疡性结肠炎肠纤维化模型大鼠,采用链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶(S-P)法检测上皮表型标记蛋白E-钙黏蛋白(E-cadherin)和间质表型标记蛋白α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达情况,采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测E-钙黏蛋白、α-平滑肌肌动蛋白mRNA的表达情况。结果与模型组相比,湿生扁蕾酮显著增加溃疡性结肠炎肠纤维化大鼠肠上皮细胞E-钙黏蛋白的表达,抑制α-平滑肌肌动蛋白的表达。结论湿生扁蕾酮可通过抑制结肠上皮细胞间质转化作用,明显改善2,4,6-三硝基苯磺酸诱导的大鼠溃疡性结肠炎肠纤维化。

IRMA及SP免疫组化染色检测在结肠癌诊断中的意义

目的探讨固相免疫放射分析法(IRMA)及链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶(SP)免疫组化染色检测在结肠癌诊断中的意义。方法选取在我院手术切除的结肠良性肿瘤患者78例(结肠良性肿瘤组),78例结肠癌患者(结肠癌组),采用IRMA及SP免疫组化染色检测生长抑制因子2(ING2)与基质金属蛋白酶-13(MMP-13)表达水平,判断诊断价值。结果结肠癌组的ING2与MMP-13 IRMA阳性率高于结肠良性肿瘤组(P<0.05);结肠癌组的ING2与MMP-13 SP阳性率高于结肠良性肿瘤组(P<0.05);在156例患者中,IRMA诊断为结肠癌71例,结肠良性肿瘤85例;SP诊断为结肠癌77例,结肠良性肿瘤79例。IRMA诊断结肠癌的敏感性与特异性为89.7%、98.7%,SP诊断的敏感性与特异性为98.7%、100.0%,SP诊断的敏感性高于IRMA(P<0.05)。结论ING2与MMP-13在结肠癌患者IRMA及SP免疫组化染色诊断中都呈现高表达状况,IRMA及SP诊断结直肠癌都有很高的特异性,但是SP诊断的敏感性更好。

子痫前期患者胎盘合体滋养细胞中Fas抗原及其配体、胎盘生长因子表达的研究

目的 探讨Fas抗原(Fas)及其配体(FasL)、胎盘生长因子(PlGF)在子痫前期患者胎盘合体滋养细胞中的表达变化及其意义。方法 采用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白过氧化物酶(SP)连接法检测24例正常晚期妊娠妇女(正常晚孕组)、24例轻度子痫前期产妇(轻度子痫前期组)及24例重度子痫前期产妇(重度子痫前期组)胎盘组织中Fas、FasL及PlGF表达水平。结果Fas、FasL及PlGF主要表达于胎盘合体滋养细胞胞质及胞膜中。FasL、PlGF在轻度子痫前期组(63±4、81±6)及重度子痫前期组(42±6、65±6)胎盘中的表达均低于正常晚孕组(73±9、88±8),分别与正常晚孕组比较,差异均有统计学意义(P<0. 01)。Fas在轻度子痫前期组(51±4)及重度子痫前期组(67±6)胎盘中的表达均高于正常晚孕组(43±6),分别与正常晚孕组比较,差异均有统计学意义(P<0. 01)。结论 Fas、FasL及PlGF在子痫前期胎盘合体滋养细胞中表达失衡,可能与子痫前期的发病及发展有关。

血清硅元素水平对矽肺早期诊断意义的探讨

目的探讨血清硅元素水平对矽肺早期诊断的意义。方法采用电感耦合等离子体质谱仪(ICP-MS)检测矽肺模型大鼠血清中硅元素含量,同时采用免疫组织化学-链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法观察转化生长因子-β1、肿瘤坏死因子-α在大鼠矽肺模型肺组织的表达。结果与对照组比较,大鼠染尘后血清硅元素水平在染尘第一天即见增高,峰值在16 h;其后的7 d、14 d、21 d和28 d,其含量水平亦显著高于对照组,差异有统计学意义。大鼠染尘后肺组织TGF-β1表达与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05),表达高峰是染尘后的第7天;TNF-α表达也显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论矽肺模型大鼠血清硅元素水平在染尘早期即见明显升高,且早于TGF-β1、TNF-α的表达,提示此一指标在矽肺的早期诊断中具有一定的价值和意义。

细胞角蛋白、CA_(125)对子宫内膜癌淋巴结微转移的诊断价值

目的 研究细胞角蛋白 (cytokeratin ,CK)、CA12 5对子宫内膜癌淋巴结微转移的诊断价值 ,及其作为子宫内膜癌复发危险因素的临床意义。方法 采用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白 过氧化物酶连接 (SP)法检测 5 0例子宫内膜癌患者的原发灶组织 5 0份和淋巴结 2 98枚中CK、CA12 5的表达情况 ,采用多元回归分析法对影响子宫内膜癌复发的危险因素进行分析。结果 (1)CK、CA12 5在子宫内膜癌组织中的阳性表达率分别为 10 0 % (5 0 / 5 0 )和 78% (39/ 5 0 )。 (2 )HE染色检查有转移的淋巴结中 ,CK和CA12 5均呈强阳性表达的阳性表达率均为 10 0 % (16 / 16 )。HE染色检查无转移的淋巴结中 ,CK、CA12 5的阳性表达率分别为 15 % (4 3/ 2 82 )和 12 % (35 / 2 82 ) ,且均为弱阳性表达。 (3)Ⅰ、Ⅱ期子宫内膜癌患者淋巴结中 ,CK阳性与CK阴性表达者的复发率分别为 38%、0 ,两者比较 ,差异有显著性 (P <0 0 5 ) ;CA12 5阳性与CA12 5阴性表达者的复发率分别为 39%、4 % ,两者比较 ,差异也有显著性 (P <0 0 5 )。 (4 )多元回归分析结果显示 ,淋巴结中CK表达是影响Ⅰ、Ⅱ期子宫内膜癌复发的独立危险因素 ,而淋巴结中CA12 5表达和肌层浸润深度均为影响Ⅰ、Ⅱ期子宫内膜癌复发的相关因素。