链霉菌HUZ0001产morindolestatin摇瓶发酵条件优化

咔唑类生物碱(morindolestatin)源自链霉菌HUZ0001,其结构独特,具有优异的杀菌、抗氧化活性.为提高morindolestatin的产量,以链霉菌HUZ0001为试验菌株,采用单因素试验与正交设计实验相结合的方法,对培养基种类、发酵时间、接种量、装液量、发酵温度和转速等发酵条件进行优化.结果表明,优化的发酵培养基为:2.0%可溶性淀粉、1.0%棉籽饼粉、0.5%酵母抽提物、0.5%麦芽提取物、0.2%MgSO_(4)·7H_(2)O、0.2%NaCl、0.2%CaCO_(3).优化的发酵条件为:接种量4%、装液量200 mL/1000 mL、发酵时间6 d、发酵温度28℃、转速220 r/min.在此优化条件下,morindolestatin的产量为2.1799±0.0333 mg/L,比初始含量提高196%,表明发酵条件优化效果显著.

新磷氮霉素A生产菌Streptomyces auratus AGR0001的遗传操作研究

目的建立新磷氮霉素A产生菌金黄色链霉菌AGR0001(Streptomyces auratus AGR0001)的遗传操作体系,为阐明其生物合成的调控和后修饰机制,并通过遗传改造提高其产量和获得更多的新化合物奠定基础,同时可为其它链霉菌的遗传操作研究提供新的参考。方法筛选了S.auratus AGR0001生长、产孢的最佳培养基,检测了其对11种不同抗生素的敏感性,探索了将外源DNA导入该菌的最适方法。结果 ISP4和MS培养基分别是S.auratus AGR0001的最佳产孢和生长培养基;该菌对壮观霉素等7种抗生素敏感,对氨苄和羧苄西林具有抗性,对萘啶酮酸和阿伯拉霉素在低浓度有抗性,而在高浓度敏感;使用PEG介导的原生质体转化、电转菌丝体、接合转移等方法均能将外源DNA导入S.auratus AGR0001中。利用接合转移将携带透明颤菌血红蛋白基因vhb(Vitreoscilla hemoglobin)的自杀型质粒p SET152导入S.auratus AGR0001中并整合至其染色体上进行表达,提高了发酵液的抗真菌活性。结论建立了S.auratus AGR0001的遗传操作体系。