血红素氧合酶-1抑制剂锌原卟啉Ⅸ对裸鼠胃癌腹膜转移的抑制作用

背景:前期研究证实血红素氧合酶-1(HO-1)是与人胃癌腹膜高转移细胞株GC9811-P具有亲和力的多肽序列PⅢ的天然配体,两者结合可能抑制胃癌的腹膜转移。目的:探讨HO-1抑制剂锌原卟啉Ⅸ(ZnPPⅨ)对裸鼠胃癌腹膜转移的抑制作用及其可能机制。方法:48只BALB/c裸鼠经GC9811-P胃癌组织块胃壁原位种植建立胃癌腹膜转移模型后随机分为3组,于术后1周起分别予ZnPPⅨ、钴原卟啉(CoPPⅨ,HO-1诱导剂)或铜原卟啉(CuPPⅨ,阴性对照)40μg隔日腹腔注射。术后第23d每组取6只裸鼠处死,测定腹膜转移结节数量、体积、质量和腹水量。其余裸鼠用于存活率实验,于出现明显生命衰竭体征时处死,以免疫组化方法检测腹膜转移瘤中CD31标记的肿瘤微血管密度(MVD),以酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血管内皮生长因子(VEGF)含量。结果:与CoPPⅨ组和CuPPⅨ组相比,ZnPPⅨ组荷瘤裸鼠腹膜转移结节数量、体积、质量和腹水量均显著减低(P<0.05),生存期延长(P<0.01),腹膜转移瘤MVD和VEGF含量降低(P<0.05)。结论:HO-1参与了胃癌腹膜转移的调控,其抑制剂ZnPPⅨ可能通过抑制肿瘤血管发生而抑制裸鼠胃癌腹膜转移。

锌原卟啉ZnPPⅨ对Bel/FU肝癌耐药细胞株p-糖蛋白及化疗敏感性的影响

目的:评估锌原卟啉(ZnPP)Ⅸ对Bel/FU肝癌耐药细胞株p-糖蛋白(p-glycoprotein,p-GP)的影响,探讨ZnPPⅨ作为化疗耐药逆转剂可能性及相关作用机制。方法:不同浓度的ZnPPⅨ作用于Bel/FU肝癌化疗耐药细胞株,MTT法检测细胞株对化疗药物的半数抑制浓度(IC50)、Western blot检测p-GP表达量、罗丹明潴留试验检测p-GP药物外排功能。结果:ZnPPⅨ作用于Bel/FU细胞诱导24 h后,化疗药物IC50值均显著降低,p-GP表达量明显降低(P均<0.01),p-GP药物外排功能减弱。结论:ZnPPⅨ可通过影响p-GP蛋白质水平的表达,减弱p-GP药物外排功能,使肝癌耐药细胞株的化疗敏感性降低;ZnPPⅨ可作为一种潜在的化疗耐药逆转剂。

无硝干腌肉制品中锌-原卟啉Ⅸ形成的研究进展

对无硝干腌肉制品中锌-原卟啉Ⅸ形成的研究进展进行了较为系统的阐述。锌-原卟啉Ⅸ是无硝干腌肉制品中的主要红色色素,研究结果表明其生成量与工艺条件密切相关,通过优化工艺参数可促进肉制品中锌-原卟啉Ⅸ,但其形成机制还尚待进一步阐明。

CO释放抑制剂ZnPP Ⅸ和NO释放抑制剂L-NAME对大鼠阴茎组织cGMP含量影响的研究

目的:探讨CO释放抑制剂锌卟啉Ⅸ(ZnPPⅨ)和NO释放抑制剂N-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME)对大鼠阴茎组织中cGMP含量的影响。方法:180～220g Wistar大鼠30只,随机均分为3组(正常对照组,ZnPPⅨ组,L-NAME组),ZnPPⅨ组给予ZnPPⅨ[45μmol/(kg.d)],L-NAME组给予L-NAME[50mg/(kg.d)],正常对照组给予生理盐水[1ml/(kg.d)]。用药7d后断头处死大鼠,取阴茎制成匀浆。测定匀浆液中NOS、NO、CO、cGMP含量。结果:与对照组比较,应用CO释放抑制剂ZnPPⅨ后,大鼠阴茎组织中CO、NOS、NO、cGMP含量有一定程度的下降(P<0.05);应用NO释放抑制剂L-NAME后,大鼠阴茎组织中CO、NOS、NO、cGMP含量也较对照组有一定程度的下降(P<0.05)。结论:ZnPPⅨ与L-NAME能够降低大鼠阴茎组织中CO与NO的浓度,同时cGMP的含量也降低。

AMN107联合血红素加氧酶-1抑制剂诱导慢性髓系白血病细胞凋亡

运用AMN107(尼洛替尼)联合血红素加氧酶-1(HO-1)抑制剂锌原卟啉Ⅸ(ZnPPⅨ)作用于慢性髓系白血病(CML)细胞株K562细胞,研究其对CML细胞增殖的影响并探讨其作用机制。采用MTT法和台盼蓝染色法检测AMN107(10μmol/L)及ZnPPⅨ(10μmol/L)单独或联合处理不同时间的细胞增殖率;半定量RT-PCR法和Westernblot法检测空白对照组、ZnPPⅨ(10μmol/L)组、AMN107(10μmol/L)组、AMN107(10μmol/L)联合ZnPPⅨ(10μmol/L)组48 h时细胞HO-1的表达;AnnexinⅤ/PI双染色法检测处理48 h时各组细胞凋亡情况。结果表明:联合用药对细胞的抑制作用最强,且呈时间依赖性;联合用药组HO-1的表达量最低;空白对照组、ZnPPⅨ(10μmol/L)组、AMN107(10μmol/L)组、AMN107(10μmol/L)联合ZnPPⅨ(10μmol/L)组48 h时细胞凋亡率分别为(11.38±0.02)%、(17.44±0.08)%、(39.81±0.07)%和(56.46±0.19)%。结论:第二代酪氨酸激酶抑制剂AMN107具有诱导CML细胞凋亡的作用;抑制HO-1表达能加强AMN107对CML细胞的杀伤作用,这为临床进一步提高CML的疗效提供实验依据。

干腌火腿肌肉红色色素的形成机理 条件和性质

腌制剂中添加硝酸盐或亚硝酸干腌火腿的特征性红色是由亚硝基肌红蛋白形成的。亚硝基肌红蛋白是由肌红蛋白与亚硝酸盐产生的一氧化氮发生反应而生成的。腌制剂中不添加硝酸盐或亚硝酸盐的干腌火腿的亮红色是锌-原卟啉Ⅸ形成的。这两种红色色素具有不同的性质。在整个加工过程中,腌制剂中不添加硝酸盐或亚硝酸盐的干腌火腿中锌-原卟啉Ⅸ的含量持续上升。腌制剂中添加亚硝酸盐会抑制锌-原卟啉Ⅸ的形成。

血红素加氧酶-1抑制剂在光动力治疗胰腺癌敏感性中的作用

目的 研究血红素加氧酶-1(HO-1)及其抑制剂锌原卟啉Ⅸ在光动力治疗(PDT)胰腺癌中的作用,从而为光动力治疗胰腺癌的敏感性提供依据。方法 CCK-8法检测PDT及锌原卟啉Ⅸ(ZnPPⅨ)对胰腺癌细胞株PANC-1增殖能力的影响;利用Western blot和Real-time PCR技术分别检测胰腺癌细胞中HO-1蛋白及其mRNA的表达情况;构建胰腺癌裸鼠皮下种植瘤模型,进一步观察PDT及ZnPPⅨ对胰腺癌成瘤能力的影响。结果 PDT联合ZnPPⅨ干预胰腺癌细胞能明显抑制胰腺癌细胞的增殖率(P <0.05);PDT胰腺癌细胞中HO-1 mRNA水平和蛋白表达水平均增加,而PDT联合ZnPPⅨ干预后的胰腺癌细胞HO-1表达明显降低(P <0.05);动物实验结果显示,PDT联合ZnPPⅨ干预可抑制胰腺癌皮下种植瘤的生长,肿瘤体积和质量明显降低。结论 血红素加氧酶-1抑制剂ZnPPⅨ可增强胰腺癌光动力治疗的敏感性,可能成为胰腺癌光动力治疗的潜在增敏剂。

ZnPP Ⅸ对肝癌耐药细胞株Bel/Fu表达HO-1、GST-π及化疗敏感性的影响

目的评估锌原卟啉(ZnPP)Ⅸ对肝癌耐药细胞株化疗药物敏感性及其表达血红素加氧酶-1(hemeoxygenase,HO-1)和谷胱甘肽-S-转移酶-π(glutathione-S-transferase-π,GST-π)的影响,探讨ZnPPⅨ作为化疗耐药逆转剂的可能性及相关作用机理。方法①ZnPPⅨ作用于肝癌耐药细胞株Bel/Fu后,应用MTT法检测阿霉素、丝裂霉素及5-氟尿嘧啶的半数抑制浓度(IC50)。②不同浓度ZnPPⅨ作用于Bel/Fu细胞后,应用RT-PCR法检测细胞HO-1及GST-πmRNA的表达量。结果 ZnPPⅨ作用于Bel/Fu细胞24 h后,各化疗药物的IC50均明显降低(P<0.05);HO-1 mRNA及GST-πmRNA的表达量显著降低(P<0.01),且均呈剂量依赖趋势(P<0.01)。结论 ZnPPⅨ通过抑制HO-1和GST-π的表达,使肝癌耐药细胞株的化疗敏感性增高。ZnPPⅨ可作为一种潜在的化疗耐药逆转剂。

高压氧预处理诱导血红素加氧酶-1减轻大鼠脑出血后脑水肿

目的研究血红素加氧酶-1（hemeoxygenase-1，HO-1）在高压氧预处理（hyperbaicoxygenpreconditioning，HBOP）减轻大鼠脑出血后脑水肿形成过程中的作用。方法本实验共选用54只雄性Spradgue-Dawley大鼠，体质量300～350g，分为两部分：第1部分，6只大鼠随机（随机数字法）分为两组（n=3），分别接受高压氧预处理（HBOP组）或假预处理（假预处理组）；预处理结束24h后处死，取基底节组织，采用Westernblot法检测HO一1蛋白含量。第2部分：48只SD大鼠随机（随机数字法）分为四组（n=12），各组大鼠在预处理前腹腔内置人含HO-1抑制剂锌原卟啉Ⅸ（zincprotoporphyrinIX，ZnPPIX）的缓泵（0．01mg／kg）（HBOP＋ZnPP组、假预处理＋ZnPP组）或含2mL二甲基亚砜（dimethylsulfoxide，DMSO）载体溶剂的缓释泵作为对照（HBOP＋DMSO组、假预处理＋DMSO组），随后接受高压氧预处理（HBOP组＋ZnPP组，HBOP＋DMSO组）或假预处理（假预处理＋ZnPP组，假预处理＋DMSO组）。预处理结束24h后，立体定向基底节内注射自体股动脉血100txL建立基底节脑出血模型，72h后处死，采用干湿质量法测定脑组织水含量。统计学分析采用Stata7．0软件进行成组设计资料的￡检验。结果HBOP组大鼠基底节组织内HO-1蛋白含量与假预处理相比差异具有统计学意义（P〈0．05）；HBOP＋DMSO组大鼠血肿同侧基底节组织水含量为（81．4±0．9）％，显著低于假预处理＋DMSO组（82．6±0．8）％（P〈0．05），但大鼠接受高压氧预处理同时腹腔内给予HO-1抑制剂ZnPPIX则抵消了HBOP减轻脑出血后脑水肿的效应[（82．8±0．9）％VS．（82．6±0．7）％（P〉0．05）]。结论高压氧预处理显著减轻大鼠脑出血后脑水肿，其作用机制与其上调HO-1蛋白的表达有关。