肝癌组织中miR-1470 PATZ1表达水平与患者5年内预后的关系

目的:探讨肝癌组织中微小RNA-1470(miR-1470)、POZ结构域和AT结合基序锌指蛋白1(PATZ1)表达水平与患者5年内预后的关系。方法:选取2015年9月至2018年8月在邯郸市中心医院接受根治术治疗的肝癌患者135例,术中留取肝癌组织及相应癌旁正常组织(距肿瘤边缘2cm以上的正常肝脏组织)。采用免疫组织化学法检测PATZ1蛋白表达;采用实时荧光定量PCR法检测miR-1470、PATZ1 mRNA表达;术后进行5年的随访,统计5年总生存率。比较肝癌组织和癌旁正常组织中miR-1470、PATZ1 mRNA和蛋白表达情况;分析肝癌组织中miR-1470、PATZ1 mRNA表达与临床病理参数的关系,二者表达的相关性及与预后的关系,影响预后的危险因素;双荧光素酶报告基因实验验证miR-1470与PATZ1的靶向关系。结果:肝癌组织PATZ1蛋白阳性表达率明显低于癌旁正常组织(P<0.05)。与癌旁正常组织比较,肝癌组织中miR-1470表达水平明显升高,PATZ1 mRNA表达水平明显降低(P<0.05)。肝癌组织中miR-1470、PATZ1 mRNA低表达、高表达患者在血清甲胎蛋白(AFP)水平、中国肝癌分期方案(CNLC)分期及有无脉管癌栓方面,差异均有统计学意义(P<0.05)。肝癌组织中miR-1470与PATZ1 mRNA表达呈负相关(P<0.05)。miR-1470低表达患者、PATZ1 mRNA高表达患者5年总生存率分别明显高于miR-1470高表达患者、PATZ1 mRNA低表达患者(P<0.05)。CNLC分期Ⅲ期、脉管癌栓、miR-1470高表达及PATZ1 mRNA低表达是影响肝癌患者预后不良的独立危险因素(P<0.05)。miR-1470可负向调控PATZ1表达。结论:肝癌组织中miR-1470表达上调,PATZ1表达下调,两者呈负相关,均可作为评估肝癌患者预后的生物标记物,且miR-1470可负向调控PATZ1表达。

人类转录因子样新基因TFL76的初步研究

运用基于基因组数据库特定基因同源基因的克隆策略得到人类新基因TFL76 ,它编码 12个C2 H2 型锌指基序 .其cDNA序列长 2 2 6 8bp,预测的编码蛋白含 6 77个氨基酸 ,分子量 (Mr)为 76× 10 3 .生物信息学分析表明 ,TFL76的N末端含有多种蛋白激酶的磷酸化位点和核定位信号 ,具有转录因子的特征 .染色体定位为 19q13.4 ,此位点存在很多与癌症相关的基因 .对 9.5d和 10 .5d的鼠胚进行全胚原位杂交 ,结果表明 ,此基因在前肢芽和后肢芽表达较高 .图 5表 1参

PATZ1通过介导p53/Caspase通路调控宫颈癌细胞凋亡和侵袭过程

目的研究AT结合基序锌指蛋白1(PATZ1)通过介导p53/Caspase通路调控宫颈癌细胞凋亡及侵袭过程的机制。方法选取唐都医院宫颈癌研究治疗中心提供的人正常宫颈上皮细胞及宫颈癌HeLa、SiHa、Caski、ME-180细胞系进行分析。检测其中PATZ1的mRNA表达水平;通过慢病毒包装质粒转染Hela、ME-180构建稳定过表达PATZ1和稳定敲低表达PATZ1的细胞系,分析不同表达水平PATZ1对p53信号途径调控细胞凋亡及侵袭相关分子的表达的影响,并通过Co-IP和GST-pull down实验验证PATZ1与p53蛋白之间的关系。结果宫颈癌HeLa、SiHa、Caski、ME-180细胞系中PATZ1的mRNA表达水平均显著高于正常宫颈上皮细胞,差异具有统计学意义(P<0.05);过表达PATZ1的HeLa和ME-180细胞的细胞凋亡率、Caspase-3表达水平均显著降低,细胞活力、侵袭率、EMMPRIN、MMP-2、MMP-9的表达水平显著升高,低表达PATZ1的HeLa和ME-180细胞的细胞凋亡率、Caspase-3表达水平均显著升高,细胞活力、侵袭率、EMMPRIN、MMP-2、MMP-9的表达水平显著降低,差异具有统计学意义(P<0.05);Co-IP和GST-pull down实验表明PATZ1和p53具有相同的复合体,且p53蛋白C末端中的四聚化结构图(aa323-356)和调节结构域(363-393)是主要负责与PATZ1相互作用的区域。结论PATZ1可能通过抑制p53转录活性,影响p53下游靶基因表达,从而抑制宫颈癌细胞凋亡促进侵袭、迁移进程。