锌指抗病毒蛋白在肠道病毒71型感染小鼠中的表达及其意义

目的探索锌指抗病毒蛋白(ZAP)在肠道病毒71型(EV71)感染小鼠中的表达水平及其调节作用,为EV71抗病毒治疗提供数据基础。方法首将C57BL/6小鼠随机分为4组,分别为空白对照组(Control组)、感染组(EV71组)、感染+ZAP质粒组(ZAP组)、感染+空质粒组(Mock组)。后3组腹腔注射EV71建立感染小鼠模型,ZAP组小鼠通过眼眶后静脉丛注射质粒构建ZAP过表达小鼠模型。采用苏木精-伊红(HE)染色、蛋白质印迹法和实时荧光定量聚合酶链反应(Q-PCR)等方法,检测小鼠不同组织病毒载量、各组织病变情况、ZAP和VP1表达水平。结果EV71感染后小鼠组织中,ZAP的表达显著增加;EV71感染后,ZAP过表达小鼠病理损伤减轻,组织中病毒载量降低,与野生型小鼠相比表现出更轻的症状。结论ZAP在抗EV71感染的免疫过程中扮演重要角色,提示ZAP过表达可以提高小鼠对EV71病毒的敏感性,并提高对病毒性炎症反应的抵抗力。这一发现为ZAP在病毒诱导的炎症性疾病中的作用提供了新的思路。

锌指抗病毒蛋白抑制HEV体内复制

目的探究锌指抗病毒蛋白(zinc finger antiviral protein,ZAP)对戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus,HEV)体内复制的影响。方法通过构建ZAP真核表达载体,注射BALB/c小鼠后接种HEV,研究HEV体内复制情况。以18T-ZAP为模板,逆转录-聚合酶链式反应(Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction,RT-PCR)扩增ZAP基因序列,并克隆至真核表达载体pcDNA3.1上。BALB/c小鼠尾静脉注射不同浓度pcDNA3.1-ZAP,随后接种HEV。实时荧光定量PCR(Quantitative Real-Time PCR,RT-qPCR)和免疫组化检测ZAP对HEV复制的影响。结果经双酶切和测序鉴定真核表达质粒pcDNA3.1-ZAP构建成功;将注射ZAP的小鼠接种HEV,发现HEV复制被显著抑制。结论本研究表明ZAP能抑制HEV体内复制,为HEV的防治提供基础。

锌指抗病毒蛋白ZAP对病毒的作用

锌指抗病毒蛋白（zinc finger antiviral protein，ZAP）是一种具有抗病毒活性的宿主细胞限制因子．ZAP能通过介导病毒mRNA的降解以及抑制翻译，从而抑制病毒的复制。ZAP能够抑制鼠白血病病毒、人类免疫缺陷病毒、埃博拉病毒、马尔堡病毒、辛德比斯病毒、乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒的复制。本文主要就ZAP的抗病毒作用作一综述。

锌指抗病毒蛋白基因真核表达质粒的构建及其在HepG2细胞中的表达

目的构建锌指抗病毒蛋白(zinc finger antiviral protein,ZAP)基因真核表达质粒,并在人肝癌细胞系HepG2细胞中表达。方法化学合成含第4个CCCH锌指基序的ZAP基因片段,经PCR扩增后,插入pcDNA3.1(+)载体,并在ZAP下游插入报告基因EGFP,构建重组表达质粒pcDNA3.1(+)-ZAP/EGFP。在脂质体Genfectin介导下将重组表达质粒转染HepG2细胞,转染后24 h,荧光显微镜观察EGFP的表达;转染后48 h,RT-PCR法检测转染细胞中ZAP基因和内参GAPDH基因mRNA的转录。结果重组表达质粒pcDNA3.1(+)-ZAP/EGFP经双酶切和测序证实构建正确;转染后24 h,pcDNA3.1(+)-ZAP/EGFP质粒转染的HepG2细胞在荧光显微镜蓝色激发光下可见胞质内有较强的黄绿色荧光;转染后48 h,pcDNA3.1(+)-ZAP/EGFP质粒转染的HepG2细胞可扩增出288 bp的ZAP基因条带和100 bp的内参GAPDH基因条带。结论成功构建了含第4个CCCH锌指基序的ZAP基因真核表达质粒,并在HepG2细胞中获得表达,为下一步深入研究ZAP对肝炎病毒是否具有抗病毒作用以及利用ZAP作为抗病毒治疗的一种新手段奠定了基础。

PR65A调控抗病毒蛋白ZAP的活性(英文)

锌指结构抗病毒蛋白(ZAP)能够特异性地识别病毒RNA并促进其特异性降解,从而抑制病毒的复制.ZAP不能独立地发挥抗病毒的功能,需要招募细胞内很多因子,包括外切酶复合体(exosome)、RNA解旋酶p72等.通过蛋白质组学分析方法,我们找到了与ZAP可能存在相互作用的一些蛋白质并证实蛋白磷酸酶2调节亚基A的α亚型(PR65A)与ZAP之间存在着直接的相互作用.细胞内PR65A的表达水平,降低削弱ZAP的活性,表明PR65A是ZAP发挥最佳抗病毒活性所必需的.这丰富了我们对ZAP抗病毒作用机理的认识,同时也为更好地利用其抗病毒活性提供了重要的指导.

柯萨奇B3病毒性心肌炎的免疫抗炎症研究

病毒性心肌炎(viral myocarditis,VMC)属感染性心肌疾病,可由多种病毒诱导,其中以柯萨奇B组3型病毒(Coxsackie virus B3,CVB3)最为常见。由CVB3引起的VMC典型表现为心肌细胞炎症反应所导致的心肌损伤和坏死,并最终发展为慢性炎症或扩张性心肌病,在人类有很高的发病率和致死率。目前,柯萨奇B3病毒性心肌炎抗炎症治疗措施仍不完善,且相关免疫抗炎症治疗机理未完全阐明,因此探索其免疫抗炎症治疗机理和作用可能成为治疗柯萨奇B3病毒性心肌炎的重要靶点。现主要从Wnt11基因、巨噬细胞、半乳糖凝集素3、锌指抗病毒蛋白、蜂毒素和丙戊酸6个免疫抗炎症相关方面,对柯萨奇B3病毒性心肌炎的最新免疫抗炎症研究予以综述。