高血压性脑出血患者长链非编码RNA锌指结构反义转录本1的表达与颅内动脉狭窄程度及预后的关系

目的 探讨高血压性脑出血(hypertensive intracerebral hemorrhage,HICH)患者长链非编码RNA(long non-coding RNA,LncRNA)锌指结构反义转录本1(zine finger antisense 1,ZFAS1)表达量与颅内动脉狭窄程度及复发性高血压性脑出血(recurrent hypertensive intracerebral hemorrhage,RHCH)的关系。方法 回顾性分析2014年2月至2020年2月河北省保定市第二中心医院收治的192例HICH患者的临床资料和随访资料,根据随访期间是否出现RHCH将研究对象分为RHCH组(出现RHCH,30例)和非RHCH组(未出现RHCH,162例)。比较分析两组患者的临床特征。采用Pearson相关系数法分析LncRNA ZFAS1表达量与颅内动脉狭窄程度的相关性。采用受试者工作特征曲线分析LncRNA ZFAS1表达量对RHCH的预测价值。采用多因素logistic回归方法分析RHCH的独立影响因素。结果 RHCH组患者的年龄、收缩压、血肿体积、颅内动脉狭窄程度、LncRNA ZFAS1表达量均显著大于或高于非RHCH组(P<0.05),格拉斯哥昏迷评分显著低于非RHCH组(P<0.05)。Pearson相关系数法分析结果显示,LncRNA ZFAS1表达量与颅内动脉狭窄程度呈显著正相关(r=0.615,P<0.001)。受试者工作特征曲线分析结果显示,LncRNA ZFAS1表达量预测RHCH的曲线下面积为0.881,敏感度为80.0%,特异度为82.0%。多因素logistic回归分析结果显示,年龄、收缩压、颅内动脉狭窄程度、格拉斯哥昏迷评分和LncRNA ZFAS1表达量是RHCH的独立影响因素(P<0.05)。结论 LncRNA ZFAS1表达量与颅内动脉狭窄程度和RHCH的发生相关,且对RHCH的发生具有一定预测价值。

LncRNA ZEB1-AS1和LncRNA SOX2OT在糖尿病肾病患者中的表达及与肾功能的相关性研究

目的探究长链非编码RNA锌指E盒结合同源盒蛋白1反义链1(LncRNA ZEB1-AS1)和长链非编码RNA性别决定相关基因簇2重叠转录本(LncRNA SOX2OT)在糖尿病肾病(DN)患者中的表达及与肾功能的相关性。方法选取于2021年11月—2023年12月在武汉大学人民医院肾内科收治的DN患者106例为DN组,并根据24 h尿蛋白定量(24 h Upro)水平分为正常蛋白尿亚组43例(<30 mg)、微量蛋白尿亚组39例(30~<300 mg)、大量蛋白尿亚组24例(≥300 mg),另选取同期医院单纯糖尿病患者106例作对照组,检测患者血清LncRNA ZEB1-AS1、LncRNA SOX2OT水平;Pearson法分析LncRNA ZEB1-AS1和LncRNA SOX2OT与肾功能指标的相关性;Logistic分析影响DN患者肾功能损伤的因素。结果DN组血清LncRNA ZEB1-AS1、LncRNA SOX2OT水平低于对照组(t=11.471、10.257,P均<0.001)。血清LncRNA ZEB1-AS1、LncRNA SOX2OT比较,正常尿蛋白亚组>微量尿蛋白亚组>大量尿蛋白亚组(F=58.720、117.722,P均<0.001),BUN、SCr、UA水平比较,正常尿蛋白亚组<微量尿蛋白亚组<大量尿蛋白亚组,差异均有统计学意义(F=122.493、595.589、53.178,P均<0.001);LncRNA ZEB1-AS1、LncRNA SOX2OT分别与BUN、SCr、UA呈负相关(r=-0.487、-0.498、-0.521,-0.527、-0.515、-0.534,P均<0.001);Logistic回归分析显示,糖尿病病程长及高BUN、SCr、UA水平是影响DN患者肾功能损伤的危险因素[OR(95%CI)=1.672(1.128~2.479)、2.839(1.534~5.253)、2.754(1.512~5.017)、2.693(1.464~4.954)],高LncRNA ZEB1-AS1、LncRNA SOX2OT是保护因素[OR(95%CI)=0.875(0.798~0.959)、0.898(0.832~0.969)]。结论血清LncRNA ZEB1-AS1、LncRNA SOX2OT水平与DN患者肾功能有关,可能是评估DN患者肾功能的潜在指标。

血清LncRNA-ZFAS1、miR-15a-5p相对表达量对癫痫持续状态患者预后不良的预测效能

目的观察癫痫持续状态(SE)患者血清LncRNA-ZFAS1、miR-15a-5p表达变化,分析血清LncRNA-ZFAS1、miR-15a-5p相对表达量对SE患者预后不良的预测效能。方法SE患者100例(SE组)、同期体检健康者68例(对照组),采用实时荧光定量聚合酶链式反应检测受检者血清LncRNA-ZFAS1、miR-15a-5p,通过starBase数据库预测LncRNA-ZFAS1与miR-15a-5p的结合位点。收集SE患者性别、年龄、病程、发作类型、基础疾病、院内并发症、脑组织异常、脑脊液异常、脑电图异常、伴发热、既往癫痫发作史≥2次、癫痫持续时间、机械通气、癫痫持续状态严重程度评分(STESS)、重症监护室时间、住院时间和治疗药物种类等一般资料,并根据格拉斯哥预后量表将SE患者分为不良预后组31例和良好预后组69例,比较不良预后组、良好预后组患者的一般资料及血清LncRNA-ZFAS1、miR-15a-5p相对表达量。以SE患者预后不良为因变量,以单因素分析中有统计学差异的变量为自变量,采用多因素Logistic回归分析法分析SE患者预后不良的危险因素。采用受试者工作特征曲线(ROC)分析血清LncRNA-ZFAS1、miR-15a-5p相对表达量及二者联合对SE患者预后不良的预测效能。结果SE组受检者血清LncRNA-ZFAS1相对表达量高于对照组,miR-15a-5p相对表达量低于对照组(P均<0.05)。SE患者血清LncRNA-ZFAS1、miR-15a-5p相对表达量呈负相关关系(r=-0.742,P<0.001)。LncRNA-ZFAS1与miR-15a-5p的3'非翻译端存在互补序列。不良预后组惊厥性、癫痫持续时间≥1 h、机械通气比例、STESS评分、血清LncRNA-ZFAS1相对表达量高于良好预后组,血清miR-15a-5p相对表达量低于良好预后组(P均<0.05)。惊厥性SE、癫痫持续时间≥1 h、机械通气、STESS评分增加和血清LncRNA-ZFAS1相对表达量升高为SE患者不良预后的独立危险因素,血清miR-15a-5p相对表达量升高为独立保护因素(P均<0.05)。血清LncRNA-ZFAS1预测SE患者不良预后的AUC为0.786,敏感度为67.74%、特异度为75.36%;血清miR-15a-5p预测SE患者不良预后的AUC为0.781,敏感度为90.32%、特异度为53.62%;血清LncRNA-ZFAS1联合miR-15a-5p预测SE患者不良预后的AUC为0.879,敏感度为87.10%、特异度为73.91%。结论SE患者血清LncRNA-ZFAS1高表达、miR-15a-5p低表达,呈负相关关系。血清LncRNA-ZFAS1相对表达量升高为SE患者不良预后的独立危险因素,血清miR-15a-5p相对表达量升高为独立保护因素。检测血清LncRNA-ZFAS1、miR-15a-5p可用于SE患者预后不良的预测,且二者联合预测效能更高。

BAZ1A在肝癌和子宫颈癌中的共同促癌机制分析

目的通过转录组测序,探讨毗邻锌指结构域的溴结构域蛋白1A(bromodomain adjacent to zinc finger domain 1A,BAZ1A)在肝癌和子宫颈癌中促癌机制的共同点。方法在肝癌和子宫颈癌转录组测序结果中使用“DESeq2”包进行筛选肝癌组差异表达基因(different expression genes,DEGs)和子宫颈癌组DEGs。肝癌组DEGs与子宫颈癌组DEGs取交集获得共有DEGs。通过基因本体论(gene ontology,GO)、京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)对以上3组DEGs相关的功能及通路进行分析。采用STRING数据库对上述3组DEGs进行蛋白质互作(protein-protein interaction,PPI)网络的富集分析,并使用Cytoscape软件筛选出各组DEGs中的核心基因。结果得到肝癌组DEGs为294个,子宫颈癌组DEGs为5662个,共有DEGs为170个。肝癌组DEGs、子宫颈癌组DEGs和共有DEGs都富集到的KEGG通路包括细胞外基质-受体相互作用通路、焦点黏附通路。肝癌组DEGs和子宫颈癌组DEGs都显著富集的GO条目包括细胞运动、生物黏附。PPI网络分析得到肝癌组核心基因为H4簇状组蛋白5(H4 clustered histone 5,H4C5)、H4簇状组蛋白14(H4 clustered histone 14,H4C14),子宫颈癌组核心基因分化簇44(cluster of differentiation,CD44)、激太原1(kininogen 1,KNG1)、圆盘大MAGUK支架蛋白4(discs large MAGUK scaffold protein 4,DLG4),共有组核心基因为H2A簇状组蛋白18(H2A clustered histone 18,H2AC18)。结论在肝癌和子宫颈癌中,BAZ1A都可以通过影响癌细胞运动、迁移的能力,发挥促癌作用。

骨肉瘤组织长链非编码RNA ZFAS1的表达及其临床意义

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)锌指结构反义转录本1(ZFAS1)在骨肉瘤患者癌组织中的表达及其对患者预后的影响。方法选取2009年6月—2015年6月商丘市中医院住院接受手术治疗的骨肉瘤患者101例,收集所有患者的癌组织和癌旁组织(距肿瘤边缘>5 cm),采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测ZFAS1表达。对所有患者随访5年,截止时间为2020年6月30日,记录患者生存时间。采用Kaplan-Meier生存曲线分析骨肉瘤患者的生存情况,采用Cox比例风险回归模型分析影响骨肉瘤患者预后的因素。结果癌组织ZFAS1相对表达量为2.74±0.23,显著高于癌旁组织(1.01±0.09)(t=71.876,P<0.001)。ZFAS1相对表达量在不同Enneking分期、KPS评分、分化程度和是否远隔转移的骨肉瘤患者之间差异均有统计学意义(P<0.05)。根据癌组织中ZFAS1相对表达量的均值将骨肉瘤患者分为高表达组(47例)和低表达组(54例)。Kaplan-Meier生存曲线分析结果显示,低表达组生存时间为(46.24±2.55)个月,5年生存率为61.11%,均高于高表达组[(26.09±2.76)个月和21.28%](Log-rankχ^(2)=22.059,P<0.001)。Cox比例风险回归分析结果显示,Enneking分期、分化程度、远隔转移和ZFAS1表达是影响患者预后的独立危险因素[风险比(HR)值分别为2.620、0.384、2.197、1.978,95%可信区间(CI)分别为1.203~5.706、0.186~0.791、1.131~4.270、1.034~3.784]。结论ZFAS1表达量与骨肉瘤患者恶性进展病理指标和预后相关,是影响患者预后的独立危险因素。

LncRNA-ZFAS1在稳定性心绞痛患者中的表达及临床意义

目的:观察长链非编码RNA-锌指结构反义转录本1(lncRNA-ZFAS1)在稳定性心绞痛患者中的表达及临床意义。方法:选取2019年6月至2021年6月长安医院108例稳定性心绞痛患者为实验组,同期体检健康者78例为对照组。采用定时定量聚合酶链反应法比较2组血清lncRNA-ZFAS1的水平,采用硝酸还原酶法及酶联免疫吸附试验法分别检测血清一氧化氮(NO)、内皮素1(ET-1)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平;采用受试者工作特征曲线(ROC曲线)评估lncRNA-ZFAS1对稳定性心绞痛的诊断价值。结果:与对照组相比,实验组患者血清lncRNA-ZFAS1表达明显上调(P<0.05),NO、SOD水平明显下调,ET-1、MDA水平升高(P<0.05);ROC曲线下面积(AUC)为0.788,敏感度为64.8%,特异度为85.9%。结论:lncRNA-ZFAS1在稳定性心绞痛患者中高表达,对诊断稳定性心绞痛具有一定价值。

敲低锌指E盒增强子结合蛋白1(ZEB1)抑制胃癌细胞的增殖、侵袭和迁移

目的通过RNA靶向干扰降低人胃癌BGC823细胞中锌指E盒增强子结合蛋白1(ZEB1)基因表达,观察ZEB1低表达对胃癌BGC823细胞的侵袭、迁移及增殖能力的影响,并检测相关基因lncRNA HOTAIR、上皮钙黏素(E-cadherin)表达情况。方法用载体构建针对人ZEB1基因表达的干扰质粒sh ZEB1,脂质体转染胃癌BGC823细胞后,经G418及有限稀释法筛选稳定转染细胞株。通过实时定量PCR和Western blot法检测BGC823细胞ZEB1 mRNA和蛋白水平,MTT法检测其增殖能力,TranswellTM小室侵袭试验检测转染细胞侵袭能力、划痕试验检测细胞迁移能力,实时定量PCR检测lncRNA HOTAIR、E-cadherinmRNA水平。结果成功构建干扰质粒sh ZEB1,敲低BGC823细胞ZEB1水平后,BGC823细胞的增殖、侵袭和迁移能力降低、lncRNA HOTAIR水平降低、而E-cadherin表达增高。结论靶向降低BGC823胃癌细胞ZEB1的水平,可降低lncRNA HOTAIR水平及细胞增殖、侵袭、迁移力。

GATA结合蛋白1的造血调控功能及其突变导致的红系/巨核系相关遗传病

GATA结合蛋白1(GATA1)是1个重要的造血谱系转录因子,在转录水平上特异性调控红系和巨核系细胞的增殖和分化,以此维持这2个系细胞的正常发育成熟。GATA1的功能结构由1个N端转录激活域(N-TAD)和2个锌指结构(NF与CF)构成。GATA1的蛋白序列在不同物种中高度保守,其改变将导致红系和巨核系相关基因转录失调,从而产生程度不一的临床表型。本文从GATA1的分子结构、在红系和巨核系细胞中的造血调控功能以及突变导致的遗传性红系/巨核系造血调控紊乱等方面予以综述。

lncRNA Zeb1-AS1调控JAK2/STAT3信号通路影响骨关节炎软骨细胞的增殖和凋亡

目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)E盒结合锌指蛋白1反义1(Zeb1-AS1)对骨关节炎软骨细胞的增殖和凋亡的影响,并探讨其机制是否与调控蛋白酪氨酸激酶2/信号转导和转录激活因子3(JAK2/STAT3)信号通路有关。方法:将骨关节炎软骨细胞分为si-NC组、si-Zeb1-AS1组、si-Zeb1-AS1+JAK2/STAT3信号通路抑制剂(AG490)组。运用细胞计数试剂盒、流式细胞术检测细胞活力和凋亡率。Western blotting分析B细胞淋巴瘤(Bcl-2)、Bcl相关X蛋白(Bax)、p-JAK2和p-STAT3表达水平。结果:与si-NC组比较,si-Zeb1-AS1组骨关节炎软骨细胞增殖(48、72 h)、Bcl-2、p-JAK2和p-STAT3蛋白表达明显升高(P<0.01),凋亡率、Bax蛋白表达明显降低(P<0.01)。与si-Zeb1-AS1组比较,si-Zeb1-AS1+AG490组骨关节炎软骨细胞增殖(48、72 h)、Bcl-2、p-JAK2和p-STAT3蛋白表达明显降低(P<0.01),凋亡率、Bax蛋白表达明显升高(P<0.01)。结论:干扰lncRNA Zeb1-AS1通过激活JAK2/STAT3信号通路能够促进骨关节炎软骨细胞增殖、抑制细胞凋亡。

LncRNA ZFAS1靶向miR-373导致肝癌细胞顺铂耐药的机制研究

目的探究长链非编码RNA(LncRNA)锌指结构反义转录本1(ZFAS1)靶向微小RNA(miR)-373导致肝癌细胞顺铂(DDP)耐药的机制。方法HepG2细胞设正常培养组、si-NC组、si-ZFAS1组,实时荧光定量PCR(qPCR)检测细胞中ZFAS1、miR-373表达水平。在si-NC组、si-ZFAS1组基础上分别添加0、50、100、200、300μmol/L DDP处理细胞12 h,CCK-8检测细胞增殖情况,Transwell检测细胞侵袭情况,蛋白免疫印迹检测细胞中基质金属蛋白酶(MMP)2、MMP9蛋白表达水平。双荧光素酶验证ZFAS1与miR-373的靶向关系。在si-ZFAS1组基础上添加inhibitor miR-373,检测细胞中MMP2、MMP9蛋白表达水平。结果si-ZFAS1组细胞中ZFAS1表达水平均低于正常培养组和si-NC组,miR-373表达水平均高于正常培养组和si-NC组(P<0.05)。si-NC组和si-ZFAS1组经不同浓度顺铂处理后细胞增殖率、侵袭数量、侵袭蛋白MMP2、MMP9表达水平基本呈降低趋势;si-ZFAS1组上述指标分别低于其对应浓度的si-NC组(P<0.05)。Starbase分析发现,miR-373与ZFAS1存在互补的结合位点并经双荧光素酶验证。si-ZFAS1+inhibitor miR-373组细胞MMP2、MMP9蛋白表达水平高于si-ZFAS1组和si-ZFAS1+inhibitor NC组(P<0.05)。结论ZFAS1可能降低肝癌细胞DDP耐药,其机制可能与调控miR-373有关。

长链非编码RNA ZFAS1在非小细胞肺癌患者组织中表达及作用

目的检测非小细胞肺癌(NSCLC)患者癌组织中锌指结构反义转录本1(zinc finger antisense 1,ZFAS1)表达水平,探讨ZFAS1在NSCLC进展中的生物学作用。方法实时荧光定量RT-PCR检测ZFAS1在NSCLC患者癌组织和癌旁组织中的表达水平。RNA干扰ZFAS1在A549细胞中表达,细胞计数和克隆形成实验检测细胞增殖情况,流式分析检测细胞周期和细胞凋亡,Transwell迁移和基质胶侵袭实验检测细胞迁移和侵袭能力,实时荧光定量RT-PCR检测Cyclin D1、Bcl2、N-cadherin、ZEB1、Slug和Twist基因表达水平变化。结果 ZFAS1在NSCLC患者癌组织中的平均表达水平[0.01(0.002,0.054)]较癌旁组织[0.002(0.001,0.012)]明显升高(Z=-2.638,P<0.01)。ZFAS1基因敲减后,A549细胞增殖能力明显减弱(P<0.01);A549细胞周期G1期比例升高,S期比例下降(P<0.01);A549细胞凋亡比例明显增加(P<0.01);A549细胞迁移和侵袭能力明显下降(P均<0.01);A549细胞中Cyclin D1、Bcl2、N-cadherin、ZEB1、Slug和Twist基因表达水平均降低(P均<0.05)。结论 ZFAS1在NSCLC患者癌组织中呈高表达。ZFAS1基因敲减诱导细胞周期阻滞、凋亡和抑制上皮-间质转变(EMT),减弱NSCLC细胞增殖、迁移和侵袭能力。

锌指结构转录因子1在结直肠癌组织的表达及其临床意义

目的探讨人结直肠癌中锌指结构转录因子1（ZEB1）的表达及临床意义。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应检测结直肠癌组织和癌旁组织中ZEB1基因表达。免疫组织化学方法检测84例结直肠癌和23例正常结直肠组织中ZEB1蛋白表达水平。结果ZEB1 mRNA在结直肠癌中表达水平（0．638±0．057）显著高于癌旁组织（0．183±0．052），差异有统计学意义（P〈0．05）。ZEB1蛋白在结直肠癌组织中阳性表达率（67．5％）明显高于癌旁组织（8．7％），差异有统计学意义（P〈0．05）。ZEB1表达与淋巴结转移和远处转移明显相关。结论ZEB1在结直肠癌中高表达，为独立的临床病理因素，并与疾病预后明显相关。

lncRNA ZFAS1通过miR-588/HMGA2轴促进肝癌HepG2细胞的增殖、侵袭和迁移

目的:探讨长链非编码RNA锌指结构反义转录本1(lncRNA ZFAS1)调控miR-588/高迁移率蛋白A2(HMGA2)轴对肝癌HepG2细胞增殖、侵袭、迁移的影响。方法:qPCR、WB法检测80例肝癌组织及对应癌旁组织(2018年1月至2019年12月在武汉第三医院首义院区手术切除标本)及人正常肝LO2细胞和肝癌HepG2、Huh7、HCCLM3细胞中ZFAS1、miR-588及HMGA2表达水平;采用Kaplan-Meier进行患者生存曲线分析。将HepG2细胞分为空白组、si-NC组、si-ZFAS1组、si-ZFAS1+inhibitor NC组、si-ZFAS1+miR-588 inhibitor组;qPCR检测各组HepG2细胞中ZFAS1、miR-588表达水平,WB法检测各组HepG2细胞中HMGA2蛋白表达;CCK-8法、Transwell和划痕实验分别检测各组HepG2细胞的增殖、侵袭和迁移能力;双荧光素酶报告基因实验分别验证ZFAS1和miR-588、miR-588和HMGA2的靶向关系。用HepG2细胞移植瘤裸鼠模型检测敲减ZFAS1或/和miR-588对移植瘤生长的影响。结果:在肝癌组织和肝癌细胞中,ZFAS1、HMGA2呈高表达,miR-588呈低表达(均P<0.05);ZFAS1低表达患者2年生存率高于高表达组(P<0.05);与空白组比较,si-ZFAS1组ZFAS1、HMGA2表达水平显著降低,miR-588表达水平显著升高(均P<0.05)。与si-ZFAS1组比较,si-ZFAS1+miR-588 inhibitor组中ZFAS1表达水平无显著变化(P>0.05),HMGA2表达水平显著升高、miR-588表达水平显著降低(P<0.05);敲减ZFAS1可抑制HepG2细胞的增殖、侵袭和迁移能力,并抑制裸鼠体内移植瘤的生长(均P<0.05);ZFAS1靶向miR-588并抑制后者的表达,miR-588靶向HMGA2并抑制后者的表达;同时抑制ZFAS1和miR-588表达可逆转敲减ZFAS1对HepG2细胞增殖、侵袭与迁移能力及体内移植瘤生长的抑制作用(均P<0.05)。结论:敲减ZFAS1可通过促进miR-588表达来下调HMGA2表达,进而抑制肝癌HepG2细胞的增殖、侵袭与迁移能力。

食管癌组织中PD-L1、Vim、Zeb1的表达与放疗敏感性的关系分析

目的研究食管癌(EC)癌组织中程序性死亡受体配体1(PD-L1)、波形蛋白(Vim)和锌指结构E-box结合蛋白1(Zeb1)表达水平与放疗敏感性的关系。方法选取2016年10月至2019年10月本院中晚期EC患者106例,行食管肿瘤胃镜活检并将标本进行免疫组化分析,然后采用三维适形调强放疗(IMRT)进行根治性放疗,根据放疗后4周时疗效将患者分为敏感组和耐受组,比较两组免疫组化分析结果并分析各指标与EC放疗敏感性的关系。结果106例EC患者放疗效果显示完全缓解(CR)37例,部分缓解(PR)34例,稳定(SD)23例,进展(PD)为12例,敏感组(CR+PR)癌组织程序性死亡受体配体1(PD-L1)、波形蛋白(Vim)、锌指结构E-box结合蛋白1(Zeb1)和信号传导和转录激活因子3(STAT3)阳性率均低于耐受组,差异有统计学意义(P<0.05);Logistic回归分析显示肿瘤最大径>1.5 cm、分化程度低以及PD-L1、Vim、Zeb1和STAT3阳性是EC放疗敏感性的独立危险因素,差异有统计学意义(P<0.05);Spearman秩相关分析显示,EC患者肿瘤组织PD-L1、Vim和Zeb1阳性率与STAT3均呈明显正相关性,差异有统计学意义(P<0.05)。结论EC肿瘤组织PD-L1、Vim和Zeb1蛋白在放疗耐受患者中阳性表达率更高,且其与放疗敏感相关蛋白STAT3表达水平具有明显正相关性,可作为评估EC放疗敏感性的参考指标。

肺癌组织中lncRNA ZFAS1和hsa-miR-372-3p的表达与患者恶性特征及预后的关系

目的探究肺癌组织中长链非编码RNA锌指结构反义转录本1(lncRNA ZFAS1)、hsa-miR-372-3p表达水平及与患者恶性特征及预后的关系。方法选取2015年3月至2016年10月在石家庄市人民医院诊治的82例肺癌患者。RT-qPCR检测肿瘤组织和癌旁组织ZFAS1和miR-372-3p的表达,分析ZFAS1、miR-372-3p水平与肺癌患者恶性特征的关系;Pearson分析肿瘤组织中ZFAS1和miR-372-3p的关系;用Kaplan-Meier分析ZFAS1、miR-372-3p水平与肺癌患者预后生存期的关系;COX回归分析对肺癌患者预后产生影响的因素。结果与癌旁组织相比,肿瘤组织中ZFAS1、miR-372-3p表达水平均显著升高(P<0.05)。肿瘤组织ZFAS1、miR-372-3p表达水平与TNM分期、浸润胸膜、是否发生淋巴结转移、肿瘤分化程度有关(P<0.05)。肿瘤组织中ZFAS1和miR-372-3p表达水平呈显著正相关(r=0.477,P<0.001)。ZFAS1和miR-372-3p高表达组患者5年内生存率均明显低于低表达组(P<0.05)。TNM分期、淋巴结转移、ZFAS1、miR-372-3p是肺癌患者发生不良预后的独立危险因素(P<0.05)。结论肿瘤组织中ZFAS1、miR-372-3p呈异常高表达,其高水平与肺癌患者恶性特征及预后不良有关,是肺癌患者预后不良的独立危险因素。

敲减FEZF1-AS1通过阻断JAK2/STAT3通路抑制食管鳞状细胞癌细胞的侵袭和迁移

目的探讨长链非编码RNA Fez家族锌指蛋白1反义核糖核酸1(FEZF1-AS1)与食管鳞状细胞癌(ESCC)细胞侵袭、迁移以及与Janus激酶2/信号转导子和转录激活子3(JAK2/STAT3)信号通路的关系。方法用实时定量PCR检测ESCC的癌组织和ESCC细胞系中FEZF1-AS1的表达;构建敲减FEZF1-AS1的慢病毒表达载体,敲减KYSE150、KYSE510细胞的FEZF1-AS1后,流式细胞术检测细胞周期的变化,集落形成实验检测细胞增殖能力,TranswellTM侵袭实验检测细胞侵袭能力,TranswellTM迁移和划痕实验检测细胞迁移能力,Western blot法检测JAK2和磷酸化的STAT3(p-STAT3)蛋白水平。结果在ESCC的癌组织FEZF1-AS1高表达;与正常食管鳞状上皮细胞相比,KYSE150、KYSE510细胞FEZF1-AS1表达高;敲减FEZF1-AS1表达后,ESCC癌细胞的细胞周期和增殖无明显变化,但明显抑制细胞的侵袭和迁移,且JAK2蛋白水平降低,p-STAT3蛋白水平增加。结论敲减FEZF1-AS1阻断JAK2/STAT3通路抑制ESCC细胞的侵袭和迁移。

lncRNA ZFAS1吸附miR-34b-5p抑制高糖诱导的肾小管上皮细胞损伤

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)锌指结构反义转录本(ZFAS)1、miR-34b-5p对高糖诱导的肾小管上皮细胞(HK-2)损伤的影响。方法将HK-2细胞分为对照组(Con,5.5 mmol/L葡萄糖)、高糖组(HG,25 mmol/L葡萄糖)、HG+pcDNA组、HG+pcDNA-ZFAS1组、HG+anti-miR-NC组、HG+anti-miR-34b-5p组、HG+pcDNA-ZFAS1+miR-NC组、HG+pcDNA-ZFAS1+miR-34b-5p组。试剂盒检测白细胞介素(IL)-6和肿瘤坏死因子(TNF)-α水平,流式细胞术检测细胞凋亡,实时定量PCR(RT-qPCR)检测ZFAS1和miR-34b-5p表达水平。双荧光素酶报告实验确定ZFAS1和miR-34b-5p的靶向关系。结果高糖诱导后HK-2细胞凋亡率、培养液中IL-6和TNF-α水平显著升高,ZFAS1表达显著降低,miR-34b-5p表达显著升高(P<0.05)。过表达ZFAS1后,高糖诱导的HK-2细胞培养液中IL-6和TNF-α水平显著降低,细胞凋亡率显著降低(P<0.05)。抑制miR-34b-5p表达后,高糖诱导的HK-2细胞培养液中IL-6和TNF-α水平显著降低,细胞凋亡率显著降低(P<0.05)。ZFAS1靶向负性调控miR-34b-5p表达。过表达miR-34b-5p能够降低ZFAS1过表达对高糖诱导的HK-2细胞损伤的影响(P<0.05)。结论lncRNA ZFAS1通过吸附miR-34b-5p可减轻高糖诱导的肾小管上皮细胞损伤。

MicroRNA-192、ZEB1对膀胱癌上皮-间质转化的影响

目的探讨micro RNA-192(mi R-192)和锌指结构转录因子1(ZEB1)在膀胱癌组织中的表达及其意义。方法选取96例择期行手术治疗的膀胱癌患者作为膀胱癌组,同期留取外伤性膀胱破裂患者正常膀胱黏膜组织41例作为对照组,采用荧光定量聚合酶链反应检测不同组织中mi R-192和ZEB1基因的表达,Western blot检测不同组织中ZEB1、E-cadherin及Vimentin蛋白的表达,分析其相关性。结果膀胱癌组织中mi R-192表达水平低于对照组(P<0.05),而ZEB1 m RNA表达水平高于对照组(P<0.05)。膀胱癌组织中mi R-192和ZEB1 m RNA表达水平与病理学分级、TNM分期、淋巴结转移与否有关(P<0.05)。Western blot检测结果显示,膀胱癌组织中ZEB1和Vimentin蛋白表达水平高于对照组(P<0.05),而E-cadherin蛋白表达水平低于对照组(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,膀胱癌组织中mi R-192与ZEB1、Vimentin蛋白表达水平呈负相关(r=-0.279和-0.318,均P=0.000),与E-cadherin蛋白表达水平呈正相关(r=0.376,P=0.000)。结论 mi R-192在膀胱癌组织中呈低表达,mi R-192可能通过负性调控ZEB1促进上皮-间质转化过程,从而加速膀胱癌的浸润和转移。

长链非编码RNA ZFAS1通过miR-193b-3p影响胶质瘤顺铂敏感性研究

目的 研究长链非编码RNA锌指结构反义转录本1(ZFAS1)在胶质瘤细胞中对顺铂敏感性的作用及其潜在机制。方法 通过实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)实验分析敲低ZFAS1对胶质瘤细胞顺铂敏感性,分为sh-NC组(转染sh-NC慢病毒质粒)、sh#1组(转染sh-ZFAS1-1慢病毒质粒)、sh#2组(转染sh-ZFAS1-2慢病毒质粒)。双荧光素酶实验验证ZFAS1与miR-193b-3p之间的相互作用,分为ZFAS1-WT+NC inhibitor组(转染ZFAS1野生型质粒和NC inhibitor)、ZFAS1-WT+miR-193b-3p inhibitor组(转染ZFAS1野生型质粒和miR-193b-3p inhibitor)、ZFAS1-Mut+NC inhibitor组(转染ZFAS1突变型质粒和NC inhibitor)、ZFAS1-Mut+miR-193b-3p inhibitor组(转染ZFAS1突变型质粒和miR-193b-3p inhibitor)。用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)和原位末端标记(TUNEL)实验分析ZFAS1/miR-193b-3p影响胶质瘤细胞对顺铂敏感性,分为空白对照组(0μg·mL^(-1)顺铂处理U251细胞)、0.5μg·mL^(-1)顺铂+sh-NC+NC inhibitor组(0.5μg·mL^(-1)顺铂处理共转染sh-NC慢病毒质粒和NC inhibitor的U251细胞)、0.5μg·mL^(-1)顺铂+sh#1+NC inhibitor组(0.5μg·mL^(-1)顺铂处理共转染sh-NC慢病毒质粒和NC inhibitor的U251细胞)和0.5μg·mL^(-1)顺铂+sh#1+miR-193b-3p inhibitor组(0.5μg·mL^(-1)顺铂处理共转染sh-ZFAS1-1慢病毒质粒和miR-193b-3p inhibitor的U251细胞)。结果 sh-NC组、sh#1组和sh#2组的ZFAS1的表达水平分别为1.00±0.17、0.48±0.06和0.68±0.08。ZFAS1-WT+NC inhibitor组、ZFAS1-WT+miR-193b-3p inhibitor组、ZFAS1-Mut+NC inhibitor组、ZFAS1-Mut+miR-193b-3p inhibitor组的荧光活性分别为1.00±0.10、1.45±0.11、1.02±0.09和0.97±0.13。空白对照组、0.5μg·mL^(-1)顺铂+sh-NC+NC inhibitor组、0.5μg·mL^(-1)顺铂+sh#1+NC inhibitor组、0.5μg·mL^(-1)顺铂+sh#1+miR-193b-3p inhibitor组的72 h增殖率分别为(100.00±14.13)%、(96.62±9.82)%、(60.56±6.08)%和(78.64±7.22)%;72 h凋亡率分别为(9.52±1.11)%、(10.12±1.34)%、(16.08±1.52)%和(12.22±1.19)%。空白对照组与0.5μg·mL^(-1)顺铂+sh-NC+NC inhibitor组比较,0.5μg·mL^(-1)顺铂+sh#1+NC inhibitor组与0.5μg·mL^(-1)顺铂+sh#1+miR-193b-3p inhibitor组比较,在统计学上差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 本研究揭示了ZFAS1在胶质瘤中对顺铂敏感性的重要作用,并阐明了其通过调控miR-193b-3p影响药物敏感性的机制。

微小RNA-192和锌指结构转录因子1在子宫内膜癌组织中的表达及意义

目的探讨微小RNA-192（miR-192）和锌指结构转录因子1（ZEBl）在子宫内膜癌组织中的表达及意义。方法选取子宫内膜癌组织59例、子宫肌瘤组织42例和正常子宫内膜组织42例，利用qRT—PCR检测miR-192及ZEBl在不同组织中的表达，Westernblot检测ZEBl蛋白在不同组织中的表达。结果子宫内膜癌患者组织中miR-192相对表达量（0．69±0．13）低于正常子宫内膜（1．03±0．21）和子宫肌瘤患者（0．98±0．17），差异均有统计学意义（t=10．983、8．572，均P〈0．05），子宫内膜癌患者组织中ZEBlmRNA相对表达量（0．47±0．08）和ZEB1蛋白表达量（1．13±0．24）均高于正常子宫内膜[（0．28±0．05）和（0．89±0．17）]和子宫肌瘤患者[（0．31±0．07）和（0．87±0．21）]，差异均有统计学意义（t=6．834、7．053，5．983、6．751，均P〈0．05）；miR-192和ZEBl在子宫内膜癌组织中表达均与FIGO分期和淋巴结转移有关（t=1．840、2．465，P〈0．05），Pearson相关分析显示，miR-192在子宫内膜癌组织中相对表达量与ZEBl相对表达量呈负相关（r=-0．402，P=0．002）。结论miR-192在子宫内膜癌患者组织中呈低表达，可能通过作用于ZEBl而参与子宫内膜癌浸润和转移过程。