锌指蛋白-2对鼻咽癌CNE2细胞放射敏感性及顺铂敏感性的影响

目的研究锌指蛋白-2(Zinc finger protein 2,Zic2)对鼻咽癌CNE2细胞放射敏感性及顺铂敏感性的影响。方法将Zic2 siRNA转染至CNE2细胞中,CCK-8实验检测细胞转染后增殖变化,采用克隆形成实验、CCK-8等实验分析Zic2对细胞放射敏感性及顺铂敏感性的作用。使用大剂量X射线反复照射CNE2,挑选存活亚克隆细胞继续培养至稳定生长,命名为CNE2-R,应用CCK-8实验及克隆形成实验分析亲本CNE2与CNE2-R细胞系的放射敏感性,Western blot分析CNE2-R及亲本CNE2的Zic2表达水平。结果抑制Zic2的表达后CNE2的增殖速度下降(P<0.01);抑制Zic2表达可降低CNE2细胞的克隆形成能力及存活率,放射增敏比(SER)为1.483。抑制Zic2表达可提高顺铂作用细胞抑制率(P<0.05)。放射存活亚克隆CNE2-R具有放射抵抗性,Western blot实验证明CNE2-R的Zic2的表达高于亲本CNE2细胞。结论抑制Zic2表达可提高鼻咽癌CNE2细胞的放射敏感性及顺铂敏感性,Zic2在鼻咽癌放射抵抗性细胞中高表达,Zic2可能是鼻咽癌治疗中的一个潜在靶标。

lncRNASOX2-OT调节miR-215-5p/ZEB2轴抑制人前列腺癌细胞系增殖和上皮间质转化研究

目的探讨长非编码RNA SRY盒转录因子2重叠转录本(lncRNA SOX2-OT)调节miR-215-5p/E盒结合锌指蛋白2(ZEB2)轴对前列腺癌细胞增殖和上皮间质转化(EMT)的影响。方法将PC-3细胞分为对照组、si-SOX2-OT组、si-NC组、si-SOX2-OT+anti-miR-215-5p组,实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测细胞中SOX2-OT、miR-215-5p与ZEB2表达。细胞计数试剂盒-8(CCK-8)及5-乙炔基-2′脱氧尿嘧啶核苷(EdU)染色法检测PC-3细胞增殖;流式细胞术检测PC-3细胞凋亡率;Transwell检测PC-3细胞迁移、侵袭;qRT-PCR检测PC-3细胞miR-215-5p、ZEB2 mRNA、凋亡蛋白与EMT标志蛋白转录表达;Western blot检测PC-3细胞ZEB2、凋亡蛋白与EMT标志蛋白表达;双荧光素酶报告基因实验验证PC-3细胞中SOX2-OT对miR-215-5p及miR-215-5p对ZEB2的靶向调节作用。结果与人前列腺上皮细胞相比,人前列腺癌组织源细胞和人前列腺癌细胞株PC-3、DU 145、22RV1中SOX2-OT、ZEB2 mRNA表达升高,miR-215-5p表达降低(P<0.05)。与对照组相比,si-SOX2-OT组细胞活力、EdU阳性率、迁移细胞数、侵袭细胞数、细胞ZEB2、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)及Vimentin mRNA和蛋白表达均降低,细胞凋亡率、miR-215-5p及Bcl-2相关X基因(Bax)、E-cadherin mRNA和蛋白表达均升高(P<0.05)。下调miR-215-5p表达可减弱敲低SOX2-OT对PC-3细胞的影响。结论敲低SOX2-OT可通过促进miR-215-5p表达而下调ZEB2的表达,从而抑制前列腺癌细胞增殖、迁移、侵袭和EMT,并诱导细胞凋亡。